散发性结直肠癌患者血清LncRNA GACAT3 miR-485-5p表达及其临床意义

目的探讨散发性结直肠癌患者血清长链非编码RNA GACAT3(LncRNA GACAT3)、微小RNA-485-5p(miR-485-5p)的表达及其临床意义。方法对62例散发性结直肠癌患者(研究组)、53名健康志愿者(对照组)采用实时荧光定量聚合酶链反应检测GACAT3、miR-485-5p的表达;采用LncBase网站对GACAT3与miR-485-5p的结合进行预测,并采用Pearson相关分析法分析GACAT3与miR-485-5p的相关性;根据GACAT3与miR-485-5p相对表达量平均值将研究组患者分为GACAT3高表达组(29例)、GACAT3低表达组(33例)和miR-485-5p高表达组(30例)、miR-485-5p低表达组(32例),分析不同临床特征患者GACAT3、miR-485-5p表达情况;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清GACAT3、miR-485-5p对散发性结直肠癌的诊断价值;采用Kaplan-Meier曲线分析散发性结直肠癌患者5 a生存情况。结果研究组血清GACAT3相对表达量高于对照组,血清miR-485-5p相对表达量低于对照组(P<0.01)。散发性结直肠癌患者GACAT3与miR-485-5p存在互补结合的核苷酸位点,GACAT3与miR-485-5p呈显著负相关(r=-0.306,P<0.05)。肿瘤不同分化程度、淋巴结转移情况、TNM分期患者血清GACAT3、miR-485-5p表达情况比较,差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。ROC曲线显示,血清GACAT3与miR-485-5p联合诊断散发性结直肠癌的曲线下面积为0.918,95%CI为0.865~0.970,诊断敏感度为0.806,诊断特异度为0.887。GACAT3低表达组平均生存期高于高表达组,miR-485-5p低表达组平均生存期低于高表达组。结论散发性结直肠癌患者血清GACAT3表达上调,miR-485-5p表达下调,二者呈负相关,并可能作为散发性结直肠癌诊断及评估患者预后的重要指标。

lncRNA GACAT3通过调控miR-497/YAP1轴对胶质瘤放疗敏感性的影响及机制研究

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)胃癌相关转录本3(GACAT3)在胶质瘤细胞放射敏感性中的作用及机制。方法实时反转录PCR(RT-qPCR)实验检测lncRNA GACAT3、miR-497在人星形胶质细胞NHA和胶质瘤细胞U251中的表达。将NC-siRNA、GACAT3-siRNA转染至U251细胞中,使用X射线照射处理细胞,克隆形成实验检测U251细胞存活分数,流式细胞术检测U251细胞凋亡,蛋白质印迹法实验检测U251细胞中胱天蛋白酶3(Caspase-3)蛋白的表达。通过生物信息学软件和双荧光素酶报告基因实验预测和验证lncRNA GACAT3与miR-497以及miR-497与Yes相关蛋白1(YAP1)的靶向关系。将NC mimic、miR-497 mimic、GACAT3-siRNA与NC抑制剂、GACAT3-siRNA与miR-497抑制剂共转染至U251细胞中,通过克隆形成实验、流式细胞术、蛋白质印迹法实验检测过表达miR-497以及lncRNA GACAT3通过调控miR-497对U251细胞放射敏感性的影响。结果与NHA细胞相比,lncRNA GACAT3在U251细胞中的表达明显升高,miR-497在U251细胞中的表达明显降低(P<0.05)。敲低GACAT3后,照射后的U251细胞存活分数明显降低,细胞凋亡率和Caspase-3蛋白的表达均明显升高(P<0.05)。lncRNA GACAT3靶向并负调控miR-497的表达。过表达miR-497可显著降低照射后的U251细胞存活分数,升高细胞凋亡率和Caspase-3蛋白的表达。抑制miR-497可显著逆转lncRNA GACAT3敲低对U251细胞放射敏感性的促进作用。miR-497靶向并负调控YAP1的表达。结论敲低lncRNA GACAT3可通过调控miR-497/YAP1轴增强胶质瘤细胞的放射敏感性。