LncRNA HULC在乳头状甲状腺癌组织中的表达及意义

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)在乳头状甲状腺癌组织中的表达及意义。方法选取90例乳头状甲状腺癌(PTC)患者作为研究对象,手术过程中采集PTC组织和距肿瘤边缘2 cm以上的癌旁组织,通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HULC相对表达量。将不同序列转染TPC-1细胞,依据转染序列分为Si-HULC组、Si-Con组、空白组,分别对三组的HULC表达量、细胞增殖活性和侵袭能力进行检测。结果PTC组织的HULC相对表达量明显高于癌旁组织(P<0.05)。肿瘤直径≤2 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移的PTC癌组织HULC相对表达量明显高于肿瘤直径>2 cm、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期和无淋巴结转移者(P<0.05)。与Si-HULC组比较,Si-Con组和空白组24、48、72、96 h的A值明显更高(P<0.05)。与Si-HULC组比较,Si-Con组和空白组HULC相对表达量明显更高,侵袭细胞数量明显更多(P<0.05)。结论HULC在PTC组织中相对表达量较高,且与肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移存在密切关联,只有尽早调节HULC,才能有效降低TOC-1细胞的增殖活性和侵袭能力。

LncRNA HULC在结直肠癌组织中的表达及临床意义(附50例)

目的:研究长链非编码RNA(LncRNA)HULC在结直肠癌(CRC)组织和癌旁组织中的表达,及其与CRC患者临床特征的相关性,评价其作为CRC诊断标志物的可能性。方法:收集2018-01-01至2020-01-31于我院行CRC根治术且经病理确诊的50例原发性CRC患者癌及癌旁正常组织(距癌周≥5 cm)。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分析50对相匹配的CRC组织和癌旁组织中HULC的表达。通过配对t检验分析CRC组织和癌旁组织之间的差异性。进行单因素ANOVA方法分析LncRNA HULC的表达与患者临床病理特征的关系,通过建立ROC曲线以评估LncRNA HULC用于CRC诊断的价值。结果:HULC在CRC组织中的ΔCT值(6.59±2.26)较癌旁组织中ΔCT值(9.04±2.60)低,说明HULC在癌组织中的真正表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001)。癌组织中HULC的表达与CRC的分化程度(P=0.014)、淋巴结转移(P=0.007)、TNM分期(P=0.027)相关,差异有统计学意义。HULC在CRC组织及癌旁组织中表达的ROC曲线下面积为0.762,P<0.001,差异有统计学意义。结论:HULC在结直肠癌组织中呈过表达,且癌组织中HULC的表达与CRC的分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,对CRC的诊断可能有一定的参考价值。

LncRNA HULC降低PTEN甲基化及组蛋白乙酰化促进人胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭

目的:探讨长链非编码RNA肝癌高表达转录本(long non-coding RNA highly up-regulated in liver cancer,LncRNA HULC)降低PTEN启动子甲基化以及组蛋白乙酰化促进胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭的作用。方法:稳转HULC的胶质母细胞瘤细胞株U251,分为LncRNA HULC过表达组(HULC组)及空白对照组(vec组)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组HULC、PTEN表达水平。亚硫酸氢盐处理后测序(Bisulfite Sequencing PCR,BSP)检测PTEN启动子甲基化水平。蛋白免疫印迹(Western Blotting,WB)检测PTEN、组蛋白H3/H4、乙酰化组蛋白H3/H4表达水平。细胞增殖实验、平板克隆形成实验、划痕-愈合实验和Transwell实验分别检测各组细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果:与vec组相比,HULC组PTEN启动子甲基化水平及组蛋白乙酰化水平较低(P<0.05),细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著增高(P<0.05)。结论:LncRNA HULC降低PTEN启动子甲基化和组蛋白乙酰化水平,促进胶质母细胞瘤细胞的增殖和侵袭。

lncRNA HULC在膀胱癌组织中的表达及其对5637细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)HULC在膀胱癌组织中的表达及其与患者临床病理特征的关系,以及沉默HULC对膀胱癌5637细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。方法:选取2014年6月至2017年12月郑州人民医院手术切除的102例膀胱癌患者的癌及癌旁组织标本,以及人膀胱癌细胞株5637和人正常膀胱上皮细胞株SV-HUC-1,用qPCR法检测膀胱癌组织及细胞中HULC的表达,并分析HULC表达与膀胱癌患者临床病理特征的相关性,通过Kaplan-Meier生存曲线评估HULC对预后的影响。利用siRNA干扰技术将si-HULC、si-NC质粒转染进5637细胞中,分别采用CCK-8法、流式细胞术、划痕愈合实验及Transwell小室法检测沉默HULC对5637细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。结果:膀胱癌组织中HULC的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01),HULC表达水平与患者肿瘤分级、肿瘤分期及淋巴结转移相关联(均P<0.05),HULC高表达患者的OS与PFS明显低于低表达者(均P<0.05)。5637细胞中HULC的表达水平明显高于SV-HUC-1细胞(P<0.01),沉默HULC后的5637细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低(均P<0.01)、细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。结论:lncRNA HULC在膀胱癌组织及5637细胞中均高表达,沉默HULC表达可抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力并促进凋亡。

LncRNA HULC通过miR-372/CXCR4轴来调控肝癌细胞的增殖、凋亡与上皮-间质转化

目的探讨LncRNA HULC通过miR-372/CXCR4轴在肝癌细胞增殖、凋亡与上皮-间质转化(EMT)中的作用。方法在线生物信息学TargetScan数据库预测靶基因;细胞转染建立基因过表达和沉默细胞模型;qRTPCR和Western blot检测基因和蛋白质表达;CCK-8分析用于细胞活力检测;细胞集落形成实验用于分析细胞增殖能力;Annexin V-FITC/PI分析用于细胞凋亡检测;免疫组织化学染色检测蛋白的阳性表达。结果在肝癌组织和肝癌细胞中,HULC和CXCR4表达上调,miR-372表达下调;TargetScan数据库分析和双荧光素酶分析揭示了miR-372与HULC或CXCR4之间的靶向关系;CCK-8分析显示HULC和CXCR4提高细胞活力,miR-372抑制细胞活力;细胞集落形成实验表明,HULC和CXCR4促进细胞增殖,miR-372抑制细胞增殖;细胞流式术结果表明,HULC和CXCR4抑制细胞凋亡,miR-372促进细胞凋亡;Western blot结果表明,HULC和CXCR4抑制E-cadherin表达,促进Vimentin表达,而miR-372促进E-cadherin表达,抑制Vimentin表达。结论HULC抑制miR-372的表达,从而促进CXCR4的表达,因此促进了肝癌细胞的增殖、抑制其凋亡并促进EMT进程。

lncRNA HULC促进胶质母细胞瘤细胞血管生成拟态及上皮间质转化

目的探讨长链非编码RNA肝癌高表达转录本(lncRNA HULC)对人脑胶质母细胞瘤细胞株SHG44血管生成拟态(VM)和上皮间质转化(EMT)的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证lncRNA HULC过表达组(HULC组)及空白载体组(vec组)的lncRNA HULC水平。VM实验检测HULC组及vec组SHG44细胞的小管形成能力。qRT-PCR检测HULC组及vec组EMT相关基因E-cadherin、N-cadherin和MMP-2的转录水平。蛋白免疫印迹实验(Western blotting)检测HULC组及vec组EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin和MMP-2的表达水平。结果HULC组lncRNA HULC水平显著高于vec组(P=0.013)。vec组和HULC组的成管节点数分别为(430.7±81.84)、(841.7±26.56)(P=0.028),说明过表达lncRNA HULC后,SHG44细胞生成拟态血管的能力增强。HULC组EMT相关基因E-cadherin的mRNA转录水平显著低于vec组(P=0.001),N-cadherin的mRNA转录水平显著高于vec组(P=0.006),MMP-2的mRNA转录水平显著高于vec组(P=0.0008),表明HULC组EMT趋势更明显。HULC组EMT相关蛋白E-cadherin的表达水平显著低于vec组(P<0.001),N-cadherin蛋白表达水平显著高于vec组(P=0.009),MMP-2蛋白表达水平显著高于vec组(P=0.0056),表明HULC组EMT趋势更明显。结论lncRNA HULC可促进胶质母细胞瘤细胞株的VM和EMT。

lncRNA HULC对肝癌细胞miRNA差异表达谱及ceRNA调控网络的影响

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)对肝癌细胞微小RNA(miRNA)差异表达谱及竞争内源性RNA(ceRNA)调控网络的影响。方法选取人肝癌细胞系BEL-7402,瞬时转染HULC siRNA以降低lncRNA HULC的表达。通过高通量测序选取表达具有差异的miRNA,并通过实时荧光定量PCR进行验证。基于参考基因组,预测新miRNA。通过基因富集分析及ceRNA调控网络,研究这些基因的潜在功能。结果经敲低lncRNA HULC表达后,通过高通量测序挑选出了9个表达差异显著的miRNA。5个miRNA表达下调,4个miRNA表达上调。通过miRDeep2打分,挑选出了15个分值较高的新miRNA。基因富集分析结果显示,表达下调的miRNA的靶基因的分子功能与丝氨酸tRNA连接酶活性、蛋白激酶活性、阳离子通道活性、钙转运ATP酶活性等有关;表达上调的miRNA的靶基因与硒代半胱氨酸裂解酶活性、过氧化物酶体机制靶向信号1结合、过氧化物酶体靶向序列结合、蛋白质N-末端结合、肿瘤坏死因子受体超家族结合等有关。miRNA-靶基因互作网络、显著富集功能-功能互作网络揭示靶基因与miRNA的关联性以及功能间的相关性。结论在肝癌细胞系BEL-7402中lncRNA HULC具有调节多个表达差异的miRNA的作用,通过ceRNA调控网络模式,影响肝癌的发生、发展。

灰树花多糖通过LncRNA HULC/miR-186-5p轴调控胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:分析灰树花多糖(Grifola frondose polysaccharide,GFP)对胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法:将对数期GBC-SD细胞随机分组:对照组、GFP组(0.5、1、2µg/mL GFP)、shNC组、shHULC组、miR-NC组、miR-186-5p mimics组、GFP+pcDNA组、GFP+pcDNA-HULC组。CCK-8法检测细胞抑制率;Transwell小室法检测GBC-SD细胞迁移和侵袭;Western Blot印迹检测Cyclin D1、P21、MMP-2、MM-9蛋白水平;qRT-PCR检测LncRNA HULC和miR-186-5p的水平;Starbase在线软件预测HULC与miR-186-5p的结合位点,双荧光素酶报告实验检测LncRNA HULC和miR-186-5p的靶向关系。裸鼠移植瘤实验检测GFP对GBC-SD细胞移植瘤体内生长的影响。结果:0.25~8µg/mL GFP对胆囊癌GBC-SD细胞具有一定的抑制作用;与对照组比较,0.5、1、2µg/mL的GFP(极)显著(P<0.05,P<0.01)抑制GBC-SD细胞迁移和侵袭,(极)显著降低Cyclin D1、MMP-2和MM-9水平(P<0.05,P<0.01),(极)显著(P<0.05,P<0.01)增加P21水平,极显著(P<0.01)下调LncRNA HULC,上调miR-186-5p的表达(P<0.05,P<0.01);Starbase在线软件预测HULC与miR-186-5p存在结合位点,与miR-NC组比较,miR-186-5p mimics组HULC-WT的荧光素酶活性极显著降低(P<0.01),而HULC-MUT荧光素酶活性无统计学差异(P>0.05);与shNC组比较,shHULC组HULC相对表达水平极显著(P<0.01)降低,miR-186-5p相对表达水平极显著(P<0.01)增加,细胞存活率、迁移数目、侵袭数目极显著(P<0.01)降低,Cylin D1、MMP-2和MM-9水平极显著下调(P<0.01);与GFP+pcDNA组比较,GFP+pcDN-HULC组抑制率显著降低(P<0.05),迁移数目、侵袭数目极显著增加(P<0.01),Cylin D1、MMP-2和MM-9水平显著上调(P<0.05);与GFP+pcDNA给药组比较,GFP+pcDN-HULC给药组瘤体体积、质量极显著增加(P<0.01),miR-186-5p水平极显著下调(P<0.01)。结论:GFP可抑制胆囊癌细胞的增殖、侵袭和迁移,其机制与调控LncRNA HULC/miR-186-5p有关。

lncRNA HULC在弥漫性大B细胞淋巴瘤患者中表达及其临床意义

目的探讨lncRNA HULC在弥漫性大B细胞淋巴瘤患者中的表达情况,及其与临床病理特征、预后的关系。方法 154例弥漫性大B细胞淋巴瘤患者(淋巴瘤组),取其淋巴瘤组织;32例淋巴结反应性增生患者(对照组),取其淋巴结反应性增生组织。采用实时荧光定量PCR法检测2组组织中lncRNA HULC相对表达量。以lncRNA HULC相对表达量中位数(2.09)将淋巴瘤组患者分为低表达组(lncRNA HULC相对表达量<2.09)和高表达组(lncRNA HULC相对表达量≥2.09),分析lncRNA HULC相对表达量与临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,分析弥漫性大B细胞淋巴瘤患者lncRNA HULC表达水平对临床预后的影响;采用Cox比例风险回归模型分析弥漫性大B细胞淋巴瘤患者预后不良的危险因素。结果淋巴瘤组组织中lncRNA HULC相对表达量(4.17±0.02)明显高于对照组(1.04±0.03)(P<0.05);高表达组肿瘤直径>5cm(61.04%)、有B症状(64.94%)、淋巴瘤国际预后指数3～5(64.94%)、化疗不敏感(64.94%)、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期(64.94%)比率高于低表达组(48.05%、40.26%、45.45%、49.35%、51.95%)(P<0.05),高表达组患者总体存活率(33.77%)和总生存时间[(481±35)d]低于低表达组[58.44%、(913±51)d)](P<0.05);lncRNA HULC高表达为弥漫性大B细胞淋巴瘤患者预后不良的独立危险因素(HR=3.298,95%CI:1.531～5.515,P=0.006)。结论 lncRNA HULC高表达与弥漫性大B细胞淋巴瘤预后不良相关;lncRNAHULC可作为预测弥漫性大B细胞淋巴瘤患者预后的潜在生物标志物。

实时荧光定量PCR检测HULC lncRNA方法的建立及初步应用

目的:建立实时荧光定量PCR检测长链非编码RNAHULC的方法,探讨其在作为肝癌标志的应用价值。方法:根据Genebank中的HULC lncRNA(AY914050.1)全序列,设计HULC基因的特异引物,构建HULC基因的T克隆载体,命名为pMD18-T-HULC;以pMD18-T-HULC为实时荧光定量PCR检测HULC的标准品,建立实时荧光定量PCR检测HULC的方法并进行方法学评价。应用此方法检测8种肿瘤细胞株、肝癌组织、其它癌及癌旁组织中HULC lncRNA的表达。结果:HULC实时荧光定量PCR检测方法学的最低检测限为1.8×103拷贝/L,线性范围为1.8×103拷贝/L至4.6×109拷贝/L;该法的批内变异系数(CV)<2.0%,批间CV<8.0%。其在肝癌组织和肝癌细胞株起始表达量为(7.6±3.1)×105拷贝/L至(5.6±3.2)×106拷贝/L,明显高于其它癌和癌旁组织HULC lncRNA表达量(<1.8×103拷贝/L)。新发现膀胱癌细胞株T24中表达量高〔(6.7±2.4)×105拷贝/L〕,但在膀胱癌组织中表达低(<1.8×103拷贝/L)。结论:成功建立了实时荧光定量PCR检测HULC lncRNA的方法,HULC lncRNA可望作为肝癌的标志。

lncRNA-HULC在肝细胞癌中的作用

长链非编码RNA(lncRNA)在许多类型的癌症中均过表达,它们能够促进肿瘤的发生。lncRNA-肝癌高表达转录本(lncRNA-HULC)通过尚未完全了解的机制促进肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)。HCC仍是目前世界上最主要的公共健康威胁之一,HULC在HCC组织中过表达,这与HCC患者的不良预后密切相关。本文通过就潜在的分子机制及HULC作为生物标志物和治疗靶标的潜力作一概述,以期能够探索靶向HULC的最佳方法,同时阐明靶向该lncRNA的最佳策略。

卵巢癌中lncRNA HULC与miR-372的相互作用及对p62表达的影响

目的探讨卵巢癌中lncRNA HULC与miR-372的相互作用以及二者对p62表达的影响。方法分别在卵巢癌细胞系A2780、OVCAR3中过表达lncRNA HULC、过表达miR-372,通过RT-qPCR检测lncRNA HULC、miR-372、p62 mRNA的表达水平,Western blot检测p62蛋白表达水平,并分析三者之间的相互关系。结果卵巢癌细胞系过表达lncRNA HULC后,RT-qPCR检测到miR-372表达水平下调;而过表达miR-372,lncRNA HULC表达水平下调。过表达miR-372后,p62 mRNA和蛋白表达水平下调,而过表达lncRNA HULC后,p62mRNA和蛋白表达水平上调。结论卵巢癌中lncRNA HULC与miR-372表达具有相互抑制的关系,二者共同调控p62表达。

长链非编码RNA HULC对胶质母细胞瘤原位移植瘤模型肿瘤生长的促进作用

[目的]初步探讨LncRNAHULC对胶质母细胞瘤U87细胞株体内体外生长的作用机制。[方法]实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测胶质母细胞瘤U87细胞HULC过表达组(H ULC-over)及其对照组(V EC)和沉默表达组(H ULC-siRNA)及其对照组(N C)中HULC表达水平。CCK8增殖实验和克隆形成实验检测U87细胞增殖能力。流式细胞学技术检测U87细胞凋亡能力。小鼠异种原位移植模型按照注射U87细胞对应分为HULC-over组(n=10)和VEC组(n=10)及HULC-siRNA组(n=10)和NC组(n=10),观察各组小鼠生存期。免疫组化检测Ki67的表达。[结果]HULC-over组较VEC组HULC表达量显著升高,HULC-siRNA组较NC组HULC表达量显著降低(均P<0.01)。CCK8增殖实验显示HULC-over组较VEC组细胞增殖率显著升高;HULC-siRNA组较NC组细胞增殖率显著降低(第2、3、4天,均P<0.01)。细胞克隆实验显示VEC组和HULC-over组克隆形成率分别为(34.47±1.56)%和(95.4±2.74)%;NC组和HULC-siRNA组克隆形成率分别为(23.83±0.92)%和(10.23±0.61)%,过表达HULC克隆形成率升高,沉默表达HULC克隆形成率降低(均P<0.01)。细胞凋亡实验显示VEC组和HULC-over组早期凋亡率分别为(3.55±0.56)%和(0.09±0.01)%;NC组和HULC-siRNA组早期凋亡率分别为(2.89±0.67)%和(7.13±0.14)%,过表达HULC细胞早期凋亡率降低,沉默表达HULC细胞早期凋亡率升高(P<0.01)。小鼠生存期数据表明HULC-over组比VEC组存活时间更短,而HULC-siRNA组比NC组存活时间更长(P<0.05)。与VEC组相比,Ki67蛋白在HULC-over组中表达上调;与NC组相比,Ki67蛋白在HULC-siRNA组中表达下调(均P<0.05)。[结论]LncRNAHULC对胶质母细胞瘤U87细胞体内体外生长具有促进作用。

长链非编码RNA HULC在胃癌患者血清表达及临床意义

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)HULC在胃癌血清中的表达水平及临床意义。方法选择2012年1月至2014年12月江苏大学附属医院90例未予手术治疗和放化疗治疗的胃癌患者作为胃癌组,另选择90例健康志愿者作为对照组。提取两组人血清总RNA,应用实时PCR方法检测胃癌组和对照组LncRNA HULC在血清中的表达水平,分析表达差异及LncRNA HULC在胃癌组血清中表达水平与临床病理特征之间的关系。结果胃癌组患者血清中LncRNA HULC的表达明显高于对照组,同时LncRNA HULC的受试者工作特征曲线显示,血清中LncRNA HULC对胃癌诊断具有良好敏感性和特异性(曲线下面积0.81)。进一步分析发现,LncRNA HULC在胃癌血清中表达与肿瘤患者的性别、年龄、肿瘤分化程度、肿瘤直径大小、有无淋巴结转移及CEA表达不相关,差异无统计学意义(P>0.05);而与TNM分期、远处转移相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论检测血清中LncRNA HULC有望协助胃癌的诊断。

长链非编码RNA HULC在肿瘤中作用的研究进展

近年来随着分子生物学研究的迅猛发展,长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)越来越受到高度重视,它在肿瘤发生、发展、治疗和预后等方面所发挥的作用也逐渐被深入认知.肝癌高表达转录本(highly up-reglated in liver cancer, HULC)是lncRNA的一种,最先在肝癌中被发现,近年研究揭示它与其他许多癌症,例如胃癌、结肠直肠癌、骨肉瘤和弥漫性大B细胞淋巴瘤等,也密切相关.本文主要对HULC在几种不同肿瘤组织中的表达情况及其作用机制的研究进展做一综述.

长链非编码RNA HULC沉默表达对人脑胶质母细胞瘤细胞SHG44增殖和凋亡的影响

【目的】探讨长链非编码RNA肝癌高表达转录本(LncRNA HULC)沉默表达对人脑胶质母细胞瘤细胞株SHG44增殖和凋亡的影响。【方法】实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证HULC沉默表达组(HULC-siRNA)及其阴性对照组(NC组)HULC的表达水平。CCK8增殖实验和平板克隆形成实验检测瘤细胞的增殖能力。细胞周期和细胞凋亡实验检测瘤细胞的周期分布及凋亡能力。【结果】qRT-PCR证实HULC-siRNA组较NC组的HULC表达量显著降低(P=0.003)。CCK8增殖实验显示HULC-siRNA组较NC组细胞增殖率显著降低(第2天P=0.003;第3天P=0.005;第4天P=0.009)。平板克隆形成实验显示NC组和HULC-siRNA组的克隆形成率分别为(34.11±1.24)%,(14.44±0.87)%,沉默表达HULC后细胞克隆形成率显著降低(P<0.001)。细胞周期实验显示NC组和HULC-siRNA组的细胞数分别为G1期(36.89±4.09、51.74±0.68),S期(46.95±2.49、36.89±2.13),沉默表达HULC后细胞周期明显被阻滞在G1/S期(G1期P=0.023,S期P=0.038)。细胞凋亡实验显示NC组和HULC-siRNA组的早期凋亡率分别为(2.57±0.22)%,(7.063±0.71)%,沉默表达HULC后细胞早期凋亡率显著增加(P=0.004)。【结论】LncRNA HULC沉默表达后可抑制胶质母细胞瘤细胞的增殖,促进其凋亡。

血清lncRNA HULC、lncRNA HOTAIR水平与前列腺癌肿瘤血管生成及根治术后短期预后的关联性探讨

目的:探讨血清长链非编码RNA(lncRNA)HULC、lncRNA HOTAIR水平与前列腺癌肿瘤血管生成及根治术后短期预后的关联性。方法:选取本院2019年5月至2021年1月接受的98例前列腺癌患者作为实验组,并选取同期97例良性前列腺增生患者作为对照组,比较两组患者的血清lncRNA HULC、lncRNA HOTAIR水平及临床资料[年龄、基础病史、前列腺体积、微血管密度(MVD)等];对比实验组患者不同病理特征的血清lncRNA HULC、lncRNA HOTAIR水平;对实验组患者展开为期1年的随访,并按照随访结果将患者分为肿瘤无进展组(70例)和进展组(28例),对比两组患者的临床资料,采用多元logistic回归分析前列腺癌患者根治术后短期进展的独立危险影响因素。结果:实验组的血清lncRNA HULC和lncRNA HOTAIR水平均高于对照组(均P<0.05);TNM分期Ⅱ~Ⅲ期、中高分化程度、存在淋巴结转移以及高微血管密度(MVD)患者的血清lncRNA HULC、lncRNA HOTAIR水平均高于TNM分期Ⅰ期、低分化程度、不存在淋巴结转移以及低MVD患者(均P<0.05);与肿瘤无进展组患者相比,肿瘤进展组患者的TNM分期Ⅱ~Ⅲ期、中高分化程度、存在淋巴结转移、高MVD占比及血清lncRNA HULC、lncRNA HOTAIR水平更高(均P<0.05);TNM分期、分化程度、淋巴结转移、MVD、血清lncRNA HULC和lncRNA HOTAIR水平均是引起前列腺癌患者根治术后短期进展的独立危险因素(均P<0.05)。结论:lncRNA HULC、lncRNA HOTAIR与前列腺癌肿瘤血管生成相关,同时是影响患者根治术后短期预后的独立危险因素。

长链非编码RNA肝癌高表达转录本通过微小RNA-134-5p促进宫颈癌细胞恶性生物学行为的机制研究

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)通过抑制微小RNA-134-5p促进宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移,促进凋亡的作用及其作用机制。方法2019年10月至2020年5月,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测体外培养的人正常宫颈上皮细胞和宫颈癌细胞中HULC的表达情况,在宫颈癌C-33A细胞中转染特异性HULC siRNA,qRT-PCR检测转染效果,细胞计数试剂盒(CCK-8)法分析C-33A细胞增殖情况,采用流式细胞术分析C-33A细胞凋亡情况,Transwell实验分析C-33A细胞侵袭和迁移能力,双荧光素酶报告基因实验检测HULC与miR-134-5p的相互作用。在抑制HULC表达的C-33A细胞中转染miR-134-5p抑制剂,以同样的方法检测对细胞增殖、侵袭和迁移的影响。结果HULC在宫颈癌细胞(HeLa、Cas‐ki、SiHa、C-33A)中的表达水平为(1.95±0.24、2.26±0.21、1.77±0.19、3.49±0.40),显著高于正常宫颈上皮细胞1.00±0.11,HULC在C-33A细胞中的表达量最高(P<0.05)。转染特异性HULC siRNA能够抑制C-33A细胞中HULC的表达(0.94±0.08比0.18±0.02)。抑制HULC表达后,C-33A细胞OD值降低(0.59±0.08比0.38±0.05),凋亡率明显升高[(3.01±0.34)%比(18.54±2.16)%],侵袭[112.54±13.86比46.28±10.16]和迁移(158.65±18.66比78.18±10.80)能力减弱。HULC能够与miR-134-5p特异性结合,负向调控miR-134-5p的表达。抑制miR-134-5p的表达能够逆转抑制HULC导致的C-33A细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的抑制作用。结论HULC通过抑制miR-134-5p的表达促进宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移,并诱导细胞凋亡。

LncRNA-HEIH和LncRNA-HULC与乙型肝炎相关性肝病的相关性

目的探究LncRNA-HEIH和LncRNA-HULC与乙型肝炎(简称乙肝)相关性肝病的相关性。方法选取本院2017年6月-2018年6月诊断及治疗的慢性乙肝患者51例、乙肝肝硬化患者39例、乙肝相关性肝癌31例,分别纳入肝炎组、肝硬化组及肝癌组,并选同时期同年龄段健康体检者50例作为健康对照组,比较4组外周血中LncRNA-HEIH和LncRNA-HULC水平,使用ROC曲线评估其预测肝硬化和肝癌的诊断效能。结果肝炎组与健康对照组LncRNA-HEIH和LncRNA-HULC水平差异无统计学意义(P>0.05),肝硬化组LncRNA-HEIH和LncRNA-HULC显著高于健康对照组(P<0.05),肝癌组LncRNA-HEIH和LncRNA-HULC显著高于肝硬化组(P<0.05)。ROC曲线显示单独诊断肝硬化的AUC面积分别为0.784、0.794,联合诊断的AUC面积为0.899;单独诊断肝硬化的AUC面积分别为0.814、0.836,2组联合诊断的AUC面积为0.937,联合诊断效能显著优于单独诊断(P<0.05),且能显著提高诊断敏感度(P<0.05)。结论 LncRNA-HEIH和LncRNA-HULC在乙肝相关肝硬化及肝癌中具有重要意义,两者联合可有效预测HBV相关肝硬化和肝癌的发生。

长链非编码RNA HULC对肺癌细胞增殖及自噬的调控

目的探讨长链非编码RNA HULC对非小细胞肺癌增殖及其与自噬的关系。方法采用实时定量PCR检测48例肺癌组织以及相应正常肺组织中HULC的表达水平,并检测HULC在肺癌细胞系及正常肺细胞系中的表达情况。通过pcDNA3.1-HULC转染肺癌细胞系A549、95D过表达HULC;采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖改变情况;Western blot、免疫荧光检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、LC3斑点数目变化情况以及自噬相关蛋白Atg7的表达变化。结果HULC在肺癌组织中的表达高于正常肺组织,差异有统计学意义(P<0.05);过表达HULC能促进肺癌细胞增殖,且过表达HULC促进肺癌细胞中LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化和Atg7的表达增加(P<0.05);免疫荧光可见过表达HULC后LC3荧光斑点明显增多。结论肺癌组织中HULC的表达高于正常肺组织,HULC促进肺癌细胞增殖与提高肺癌细胞自噬水平,且与自噬相关蛋白ATG7相关。