LncRNA LINC00958通过靶向miR-490-3p促进甲状腺乳头状癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的:研究LncRNA LINC00958对甲状腺乳头状癌细胞的影响及其作用机制。方法:TPC-1和K-1细胞分别分成Control、shRNA-NC、shRNA-LINC00958-1、shRNA-NC+inhibitor-NC、shRNA-LINC00958-1+inhibitor-NC和shRNA-LINC00958-1+miR-490-3p inhibitor组。TPC-1和K-1细胞移植的荷瘤鼠分别分为shRNA-NC、shRNA-LINC00958-1、shRNA-NC+inhibitor-NC、shRNA-LINC00958-1+inhibitor-NC和shRNA-LINC00958-1+miR-490-3p inhibitor组。用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LINC00958和miR-490-3p的表达水平;CCK-8检测细胞活力;Western blot检测蛋白表达水平;细胞划痕实验检测细胞迁移水平,Transwell小室检测细胞侵袭水平,克隆形成实验检测细胞增殖水平;双荧光素酶报告实验检测LINC00958和miR-490-3p的靶向关系。测定肿瘤质量及体积。结果:相比于正常组织,LINC00958在甲状腺癌组织中高表达;相比于Nthy-ori 3-1细胞,LINC00958在TPC-1和K-1细胞中高表达,miR-490-3p低表达。LINC00958沉默后,甲状腺乳头状癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著降低。干扰miR-490-3p表达逆转LINC00958沉默对甲状腺乳头状癌细胞的增殖、迁移和侵袭效果,破坏LINC00958沉默对肿瘤生长的抑制效果。结论:抑制LINC00958表达可抑制TPC-1和K-1细胞增殖、迁移和侵袭能力,其机制与靶向miR-490-3p表达有关。

lncRNA LINC00958对小细胞肺癌细胞阿帕替尼耐药性的影响

研究lncRNA LINC00958对小细胞肺癌细胞的阿帕替尼(AP)耐药性的影响及其作用机制。采用逐步增加阿帕替尼浓度法建立小细胞肺癌阿帕替尼耐药细胞株H446/AP,分别用2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L的阿帕替尼处理H446、H446/AP细胞,并检测阿帕替尼对其增殖抑制率的影响。然后将H446/AP细胞分为AP+si-NC组(转染LINC00958干扰载体阴性对照+5μmol/L阿帕替尼)、AP+si-LINC00958组(转染LINC00958干扰载体+5μmol/L阿帕替尼)、AP+miR-NC组(转染miR-490-3p模拟物阴性对照+5μmol/L阿帕替尼)、AP+miR-490-3p组(转染miR-490-3p模拟物+5μmol/L阿帕替尼)、AP+si-LINC00958+anti-miR-NC组(共转染LINC00958干扰载体和miR-490-3p抑制载体阴性对照+5μmol/L阿帕替尼)、AP+si-LINC00958+anti-miR-490-3p组(共转染LINC00958干扰载体和miR-490-3p抑制载体+5μmol/L阿帕替尼)。用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LINC00958和miR-490-3p的表达水平;CCK-8检测细胞增殖抑制率;Western blot检测蛋白表达水平;细胞划痕实验检测细胞划痕愈合率;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告实验检测LINC00958和miR-490-3p的靶向关系。结果显示,耐药和非耐药小细胞肺癌组织中LINC00958高表达,miR-490-3p低表达(P<0.05);相较于H446细胞,H446/AP细胞中LINC00958表达水平显著升高,miR-490-3p表达水平显著降低(P<0.05)。不同浓度阿帕替尼处理后,H446/AP相较于H446细胞增殖抑制率显著降低,半数抑制浓度(IC50)显著升高(P<0.05)。抑制LINC00958表达联合阿帕替尼和miR-490-3p过表达联合阿帕替尼,H446/AP细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9表达水平显著降低,H446/AP细胞中p21表达水平显著升高,H446/AP细胞抑制率显著升高,划痕愈合率降低,H446/AP细胞迁移和侵袭数量显著降低(P<0.05)。LINC00958靶向调控miR-490-3p,干扰miR-490-3p表达逆转了抑制LINC00958表达对H446/AP细胞阿帕替尼耐药性的抑制作用。因此,抑制LINC00958表达联合阿帕替尼可抑制H446/AP细胞增殖、迁移和侵袭,降低小细胞肺癌对阿帕替尼的耐药性,其机制可能与miR-490-3p表达有关。