LncRNA MIR100HG调控miR-142-5p/SOX5轴对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭能力的影响

目的:研究长链非编码RNA mir-100-let-7a-2-mir-125b-1簇宿主基因(long non-coding RNA mir-100-let-7a-2-mir-125b-1 cluster host gene,LncRNA MIR100HG)调控miR-142-5p/SRY相关的高迁移率族盒蛋白5(SRY-related high mobility group box 5,SOX5)轴对口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞增殖、侵袭能力的影响。方法:采用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测体外培养的人口腔上皮细胞和人OSCC细胞CAL27、SAS、SCC-25中LncRNA MIR100HG、miR-142-5p与SOX5表达。体外培养CAL27细胞,随机分为对照组、LncRNA MIR100HG敲低组(转染LncRNA MIR100HG siRNA质粒)、miR-142-5p mimics组(转染miR-142-5p mimics)、共转染阴性对照组(转染空载质粒和miR-142-5p阴性对照)、LncRNA MIR100HG敲低+miR-142-5p inhibitor组(转染LncRNA MIR100HG siRNA质粒和miR-142-5p inhibitor),分组转染后,采用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测各组细胞LncRNA MIR100HG、miR-142-5p及SOX5表达;采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法、5-乙炔基-2’-脱氧尿苷染色及集落形成实验检测各组细胞增殖;采用Transwell侵袭实验检测各组CAL27细胞侵袭;采用免疫印迹检测各组CAL27细胞上皮间质转化相关蛋白表达。将各组细胞接种在裸鼠背部右侧腋窝附近皮下构建OSCC移植瘤模型,饲养3周后检测各组移植瘤裸鼠肿瘤体积及重量。采用双荧光素酶报告实验检测CAL27细胞LncRNA MIR100HG对miR-142-5p、miR-142-5p对SOX5的靶向调控。结果:与人口腔上皮细胞相比,CAL27、SAS、SCC-25中LncRNA MIR100HG、SOX5蛋白与mRNA表达升高,miR-142-5p表达降低。与对照组相比,LncRNA MIR100HG敲低组、miR-142-5p mimics组细胞SOX5蛋白与mRNA表达、细胞活力、增殖率、集落形成比例、移植瘤裸鼠肿瘤体积及重量、侵袭数、N-cadherin蛋白表达降低,miR-142-5p表达、E-cadherin蛋白表达升高。下调miR-142-5p可减弱LncRNA MIR100HG敲低对CAL27细胞各指标的作用。CAL27细胞中LncRNA MIR100HG靶向下调miR-142-5p、miR-142-5p靶向下调SOX5。结论:敲低LncRNA MIR100HG可通过调控miR-142-5p/SOX5轴而抑制OSCC细胞增殖、上皮间质转化及侵袭,并可延缓其体内肿瘤生长。

外泌体lncRNA-MIR100HG/miR-100表达变化与胃癌临床病理特征、无疾病进展生存率的相关性

目的:探究胃癌患者血清外泌体长链非编码RNA-MIR100HG(lncRNA-MIR100HG)及微小核糖核酸-100(miR-100)表达情况,并分析其与患者临床病理特征和无疾病进展生存率之间的相关性。方法:收集60例胃癌患者和60例良性疾病患者,提取外泌体,检测lncRNA-MIR100HG/miR-100的表达情况并进行组间比较。采用Pearson相关分析lncRNA-MIR100HG与miR-100表达水平的相关性,应用单因素卡方检验分析与胃癌患者临床病理特征相关性,采用Kaplan-Meier生存分析lncRNA-MIR100HG/miR-100表达情况与无疾病进展生存率。结果:(1)胃癌组患者血清lncRNA-MIR100HG显著高于,miR-100相对表达水平显著低于胃良性疾病组(P<0.05);(2)Pearson相关分析结果显示血清lncRNA-MIR100HG和miR-100存在显著负相关关系(r=-0.483,P<0.05);(3)单因素卡方检验分析结果显示:胃癌患者血清lncRNA-MIR100HG相对表达水平与肿瘤大小、分化程度、肿瘤浸润深度、临床分期、淋巴结转移和远处转移相关,血清miR-100相对表达水平与肿瘤大小、分化程度、临床分期和淋巴结转移相关(P<0.05);(4)血清lncRNA-MIR100HG、miR-100低水平表达胃癌患者PFS显著长于高水平患者(χ^(2)=37.371,P<0.05),miR-100高水平表达胃癌患者PFS显著长于低水平患者(χ^(2)=28.631,P<0.05)。结论:胃癌患者血清外泌体lncRNA-MIR100HG/miR-100表达水平与肿瘤大小、肿瘤浸润深度、临床分期等病理特征相关,lncRNA-MIR100HG高表达与miR-100低表达可能提示胃癌患者预后越差。