lncRNA MIR4435-2HG靶向miR-376a-3p调控胆管癌细胞生物学行为的机制研究

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)MIR4435-2HG(MIR4435-2HG)对胆管癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及其对微小RNA-376a-3p(miR-376a-3p)的调控作用。方法 qRT-PCR法检测人肝内胆管上皮细胞HIBEpic与人胆管癌细胞RBE中MIR4435-2HG、miR-376a-3p的表达。将si-NC、si-MIR4435-2HG、miR-NC、miR-376a-3p mimics、si-MIR4435-2HG联合anti-miR-NC、si-MIR4435-2HG联合anti-miR-376a-3p分别转染至RBE细胞,作为si-NC组、si-MIR4435-2HG组、miR-NC组、miR-376a-3p组、si-MIR4435-2HG+anti-miR-NC组、si-MIR4435-2HG+anti-miR-376a-3p组;采用MTT法、Transwell小室法及流式细胞仪分别检测细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡情况;双荧光素酶报告基因实验验证MIR4435-2HG与miR-376a-3p的靶向关系。Western blot检测相关蛋白表达。结果 RBE细胞中MIR4435-2HG表达量升高(P<0.05),miR-376a-3p表达量降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-MIR4435-2HG组MIR4435-2HG表达、细胞活力及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-376a-3p组细胞活力及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),miR-376a-3p表达、细胞凋亡率升高(P<0.05)。MIR4435-2HG可靶向调控miR-376a-3p;与si-MIR4435-2HG+anti-miR-NC组比较,si-MIR4435-2HG+anti-miR-376a-3p组细胞活力及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平升高(P<0.05),迁移及侵袭细胞数增多(P<0.05),miR-376a-3p表达、细胞凋亡率降低(P<0.05)。结论 敲低MIR4435-2HG可通过靶向调控miR-376a-3p进而抑制RBE细胞增殖、迁移、侵袭,并诱导其凋亡。

LncRNA MIR4435-2HG在HCT-116细胞株的顺铂耐药中的作用机制

目的探讨LncRNA MIR4435-2HG在HCT-116R细胞株的顺铂耐药中的作用机制。方法通过结肠癌细胞株HCT-116,建立顺铂耐药细胞株HCT-116R,进行细胞增殖试验,细胞株分别与加或不加25μm顺铂在McCoy's 5A培养基中培养24 h,通过RNA分离和实时荧光定量PCR分析,并测定Caspase-3活性。结果顺铂耐药细胞株HCT-116R中LncRNA MIR4435-2HG水平显著增加,在耐药细胞株HCT-116R中敲除MIR4435-2HG基因可显著恢复对顺铂的敏感性,抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。此外,mRNA水平中作为氧化应激途径的关键分子Nrf2和HO-1,被靶向MIR4435-2HG中的siRNA抑制,通过Nrf2/HO-1途径显示,MIR4435-2HG介导了顺铂耐药性。结论LncRNA MIR4435-2HG是可以驱动HCT-116的顺铂耐药性的主要因素。

lncRNA MIR4435-2HG通过靶向miR-873-5p调控小儿神经母细胞瘤细胞生物学功能

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)MIR4435-2HG通过靶向调控miR-873-5p影响小儿神经母细胞瘤细胞生物学功能的作用。方法:RT-qPCR检测神经母细胞瘤组织和细胞中lncRNA MIR4435-2HG和miR-873-5p表达。在神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中转染si-MIR4435-2HG,MTT和流式细胞术检测细胞增殖与凋亡,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测细胞核相关抗原Ki-67(Ki-67)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、活化的多聚ADP-核糖聚合酶(Cleaved PARP)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达,生物学信息预测与双荧光素酶报告实验验证MIR4435-2HG和miR-873-5p的靶向关系。在SK-N-SH细胞中转染miR-873-5p,观察其在细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭中的作用。si-MIR4435-2HG和anti-miR-873-5p共转染干扰miR-873-5p对沉默MIR4435-2HG诱导的SK-N-SH细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。结果:神经母细胞瘤组织和细胞中MIR4435-2HG表达明显上升,miR-873-5p表达显著下降(P<0.05)。沉默MIR4435-2HG可明显降低SK-N-SH细胞存活率、迁移数、侵袭数、Ki-67、CDK2、MMP-2和MMP-9蛋白表达,显著提高细胞凋亡率、Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白水平(P<0.05)。MIR4435-2HG靶向调控miR-873-5p表达。转染miR-873-5p可抑制SK-N-SH细胞增殖、迁移、侵袭、Ki-67、CDK2、MMP-2、MMP-9蛋白表达并诱导细胞凋亡,上调Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白表达。干扰miR-873-5p可部分逆转沉默MIR4435-2HG对SK-N-SH细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。结论:lncRNA MIR4435-2HG通过靶向miR-873-5p调控神经母细胞瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭。

lncRNA MIR4435-2HG的表达水平及甲基化状态与脑胶质瘤病理分级的关系

目的探讨长链非编码RNA MIR4435-2HG的表达水平及甲基化状态与脑胶质瘤病理分级的关系。方法选取2019年1~12月手术切除的脑胶质瘤组织110例和颅脑损伤内减压术中切除正常脑组织20例(对照组)。采用实时荧光定量PCR和甲基化特异性PCR检测组织和血清MIR4435-2HG水平及甲基化状态。结果110例胶质瘤中,低级别胶质瘤(WHO分级Ⅰ~Ⅱ级)65例,高级别胶质瘤(WHO分级Ⅲ~Ⅳ级)55例;IDH1突变46例。脑胶质瘤组织和病人血清MIR4435-2HG表达水平均明显高于对照组(P<0.05),而甲基化率明显低于对照组(P<0.05)。低级别胶质瘤组织和病人血清MIR4435-2HG水平明显低于高级别胶质瘤(P<0.05),而甲基化率明显高于高级别胶质瘤(P<0.05)。IDH1突变型胶质瘤组织和病人血清MIR4435-2HG水平明显低于IDH1野生型(P<0.05),而甲基化率明显高于IDH1野生型(P<0.05)。MIR4435-2HG甲基化组胶质瘤组织和血清MIR4435-2HG水平明显低于非甲基化组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清MIR4435-2HG水平鉴别脑胶质瘤级别的曲线下面积为0.752(95%置信区间0.701~0.804),最佳截断值为1.98,灵敏度和特异度分别为65.0%和91.5%。结论脑胶质瘤,尤其是高级别胶质瘤,血清MIR4435-2HG表达水平普遍升高,检测血清MIR4435-2HG水平有助于鉴别诊断脑胶质瘤级别。MIR4435-2HG转录受其基因甲基化水平的调控,并且与IDH1突变有关。

LncRNA MIR4435-2HG、miR-125b-5p表达在非小细胞肺癌抗PD-1疗效和预后评估中的价值

目的分析长链非编码RNA MIR4435-2宿主基因(LncRNA MIR4435-2HG)、微小RNA-125b-5p(miR-125b-5p)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者抗程序性死亡受体1(PD-1)疗效和预后评估中的价值。方法本研究为队列研究。采用目的抽样法纳入2022年2月至2023年2月延安市人民医院确诊的96例NSCLC患者作为NSCLC患者组, 以及同期的健康体检人群96名为健康对照组。将96例NSCLC患者根据接受抗PD-1治疗6周后的疗效分为有效组(54例)和无效组(42例), 根据1年预后分为生存组(32例)和死亡组(64例)。采用starbase网站预测LncRNA MIR4435-2HG与miR-125b-5p的靶向关系。比较NSCLC患者组与健康对照组的血清LncRNA MIR4435-2HG、miR-125b-5p水平。比较有效组与无效组患者血清LncRNA MIR4435-2HG、miR-125b-5p水平和PD-L1表达情况。采用Spearman法分析治疗无效NSCLC患者血清LncRNA MIR4435-2HG、miR-125b-5p与PD-L1表达的相关性。分析NSCLC患者血清LncRNA MIR4435-2HG、miR-125b-5p与临床特征(性别、年龄、病理类型、肿瘤长径、TNM分期、分化程度和淋巴结转移)的关系。比较生存组和死亡组患者的血清LncRNA MIR4435-2HG、miR-125b-5p水平。采用单因素和多因素Cox回归分析NSCLC患者预后影响因素。采用受试者操作特征曲线分析血清LncRNA MIR4435-2HG、miR-125b-5p对预后的预测价值。结果 NSCLC患者组中男58例, 女38例;年龄(60.42±10.75)岁, 年龄范围32~76岁。健康对照组中男54名, 女42名;年龄(60.81±10.13)岁, 年龄范围30~78岁。starbase网站预测结果显示, LncRNA MIR4435-2HG与miR-125b-5p存在靶向调节关系。NSCLC患者组血清LncRNA MIR4435-2HG水平高于健康对照组[(1.62±0.40)比(1.01±0.22), t=13.09], miR-125b-5p低于健康对照组[(0.65±0.17)比(1.02±0.23), t=12.68], 差异均有统计学意义(均P<0.001)。无效组血清LncRNA MIR4435-2HG水平和PD-L1阳性比例均高于有效组[(1.94±0.51)比(1.37±0.32), t=6.70;24例(57.14%)比3例(5.56%), χ^(2)=31.10], miR-125b-5p水平低于有效组[(0.52±0.14)比(0.75±0.18), t=6.83], 差异均有统计学意义(均P<0.001)。治疗无效NSCLC患者血清LncRNA MIR4435-2HG与PD-L1呈正相关, miR-125b-5p与PD-L1呈负相关(r值分别为0.542、-0.519, 均P<0.001)。不同性别、年龄、病理类型、肿瘤长径的NSCLC患者血清LncRNA MIR4435-2HG、miR-125b-5p水平比较, 差异均无统计学意义(均P>0.05)。不同TNM分期、分化程度和淋巴结转移的NSCLC患者血清LncRNA MIR4435-2HG、miR-125b-5p水平比较, 差异均有统计学意义(均P<0.05), 其中TNM分期Ⅳ期、低分化、有淋巴结转移的患者血清LncRNA MIR4435-2HG水平更高, miR-125b-5p水平更低。死亡组血清LncRNA MIR4435-2HG水平高于生存组[(1.88±0.49)比(1.10±0.32), t=8.17], miR-125b-5p水平低于生存组[(0.55±0.15)比(0.85±0.17), t=8.83], 差异均有统计学意义(均P<0.001)。多因素Cox回归分析结果显示, 较高的LncRNA MIR4435-2HG水平是NSCLC患者死亡的独立危险因素, 较高的miR-125b-5p水平是NSCLC患者死亡的独立保护因素(均P<0.05)。LncRNA MIR4435-2HG、miR-125b-5p单独及联合预测NSCLC患者死亡的曲线下面积(AUC)分别为0.859(95%CI:0.780~0.938)、0.865(95%CI:0.787~0.942)、0.934(95%CI:0.882~0.986), 其中联合AUC高于LncRNA MIR4435-2HG、miR-125b-5p单独预测AUC(Z值分别为2.21、2.02, P<0.05)。LncRNA MIR4435-2HG的最佳截断值为1.39, miR-125b-5p的最佳截断值为0.74, 二者单独及联合预测的敏感度分别为82.85%、81.38%、84.42%, 特异度分别为81.24%、75.63%、90.65%。结论 LncRNA MIR4435-2HG、miR-125b-5p可能是抗PD-1治疗NSCLC患者疗效和预后的潜在生物学标志物。

LncRNA MIR4435-2HG靶向TGF-β1对NSCLC细胞的影响

[目的]探讨长链非编码RNA MIR4435-2HG(LncRNA MIR4435-2HG)靶向上调转化生长因子-β1(TGF-β1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移、增殖的作用及其初步机制。[方法]检测NSCLC癌组织及其癌旁组织、NSCLC细胞株及正常人支气管上皮细胞(HBE)中MIR4435-2HG和TGF-β1表达。将pcDNA-MIR4435-2HG和pcDNA质粒转染至A549细胞,CCK-8法、Transwell法检测细胞增殖、迁移能力。Western Blot法检测细胞TGF-β1表达。免疫共沉淀验证MIR4435-2HG与TGF-β1靶向作用。[结果]NSCLC组织MIR4435-2HG(1.89±0.52 vs 0.76±0.48)和TGF-β1相对表达量(1.43±0.22 vs 0.37±0.18)均高于癌旁组织(P<0.05);与HBE细胞比较,NSCLC细胞株MIR4435-2HG相对表达量升高(P<0.05),且其中A549细胞高于H226细胞(P<0.05);与阴性对照组比较,MIR4435-2HG过表达组细胞MIR4435-2HG(4.72±0.43 vs 3.38±0.46)及TGF-β1(0.82±0.13 vs 1.07±0.24)相对表达量、细胞48 h OD值(0.43±0.03 vs 0.52±0.04)及迁移数量[(89.63±18.28)个vs(169.89±20.34)个]均增加(P<0.05),而与对照组比较,TGF-β1组细胞MIR4435-2HG表达未见显著变化(P>0.05)。[结论] NSCLC组织中MIR4435-2HG呈高表达,LncRNA MIR4435-2HG可能通过靶向上调TGF-β1促进NSCLC细胞迁移和增殖。

异甘草素通过lncRNA MIR22HG/miR-24-3p/FASLG轴抑制肺鳞癌转移的机制研究

目的 肺鳞癌(Lung squamous cell carcinoma,LUSC)是全世界范围内高频率发生的恶性肿瘤。最近的研究表明,异甘草素(Isoliquiritigenin,ISL)在肿瘤增殖和转移中发挥抗肿瘤活性。因此,研究旨在探讨ISL在抗LUSC转移中的作用机制。方法 利用梯度浓度ISL处理LUSC细胞,探究ISL在LUSC细胞增殖、迁移和侵袭中的抗癌特性。随后,利用生物信息学手段探寻了长链非编码RNA(Long non-coding RNAs, lncRNA)MIR22HG/miR-24-3p/Fas配体基因(Fas ligand Gene,FASLG)之间可能的互作关系。实时荧光定量PCR(Quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测LUSC细胞中lncRNA MIR22HG、miR-24-3p、FASLG的表达,细胞计数盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)、克隆形成、划痕愈合和Transwell实验分别检测细胞活力、增殖、迁移和侵袭。蛋白质免疫印迹法(Western blot, WB)检测上皮间充质转换(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)和转移相关蛋白的表达。RNA免疫沉淀(RNA Binding Protein Immunoprecipitation, RIP)实验和双萤光素酶实验验证lncRNA MIR22HG与miR-24-3p、miR-24-3p与FASLG的结合关系。结果 ISL可以显著抑制LUSC细胞增殖、迁移和侵袭。生信分析及临床样本分析发现lncRNA MIR22HG在LUSC中低表达,ISL可以促进lncRNA MIR22HG的表达,抑制LUSC细胞的恶性行为。此外,lncRNA MIR22HG可以海绵吸附miR-24-3p进而调节FASLG的表达。miR-24-3p在LUSC中上调表达,FASLG在LUSC中下调表达。过表达FASLG可以逆转miR-24-3p过表达对LUSC增殖、转移以及EMT进程的促进作用。结论 这些结果表明,ISL通过lncRNA MIR22HG/miR-24-3p/FASLG轴抑制肺鳞癌转移,表明ISL有潜力作为治疗LUSC的新型药物。

MIR4435-2HG对胰腺癌预后和免疫浸润的评估价值

目的:探讨长链非编码RNA MIR4435-2HG在胰腺癌预后以及免疫浸润中的评估价值。方法:胰腺癌患者的基因表达谱及临床资料从TCGA数据库和GTEx数据库中获得。比较胰腺癌和正常胰腺组织中MIR4435-2HG的表达水平,使用Wilcoxon秩和检验。MIR4435-2HG表达与免疫细胞的相关性使用Spearman相关性分析,MIR4435-2HG高表达和低表达免疫浸润水平的差异使用Wilcoxon rank-sum检验。通过生存分析及Cox回归分析确定MIR4435-2HG的预后价值,并构建列线图预测胰腺癌总生存率。结果:MIR4435-2HG在胰腺癌中高表达,MIR4435-2HG高表达患者总体生存率和无病生存率劣于低表达患者(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示N分期、病理分期、组织学分期、放射治疗、TSPAN6和Clorf112表达水平是胰腺癌患者总体生存率的独立影响因素(P<0.05)。MIR4435-2HG高表达与自然杀伤细胞、巨噬细胞、树突状细胞和Th1细胞的免疫浸润水平呈正相关。结论:MIR4435-2HG可能是一种新的胰腺癌预后生物标志物。

LncRNA MIR4435-2HG调控miR-138-5p/HMGA1轴对胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移的影响

目的探讨LncRNA MIR4435-2HG对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及作用机制。方法培养正常人胃黏膜上皮细胞GES-1和胃癌细胞系AGS、SGC7901、BGC823和BGC803,AGS细胞分为对照组(正常培养细胞)、si-con组(转染乱序无意义阴性序列)、si-MIR4435-2HG组(转染MIR4435-2HG小干扰RNA)、miR-con组(转染模拟物对照序列)、miR-138-5p组(转染miR-138-5p模拟物)、si-HMGA1组(转染HMGA1小干扰RNA)、si-MIR4435-2HG+pcDNA组(共转染MIR4435-2HG小干扰RNA与空载体)和si-MIR4435-2HG+pcDNA-HMGA1组(共转染MIR4435-2HG小干扰RNA与HMGA1过表达载体)。qRT-PCR检测细胞中MIR4435-2HG和高迁移率族蛋白A1(HMGA1)mRNA表达,Western blot检测细胞中HMGA1蛋白表达。双荧光素酶实验验证AGS细胞中MIR4435-2HG与miR-138-5p以及miR-138-5p与HMGA1之间关系。MTT检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测Ki67、CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达。裸鼠分为对照组(接种正常培养的AGS细胞)、sh-MIR4435-2HG组(接种转染携带MIR4435-2HG基因短发夹RNA慢病毒的AGS细胞)和sh-con组(接种转染携带无关序列片段shRNA慢病毒的AGS细胞),接种21 d后测量肿瘤重量,观察MIR4435-2HG对裸鼠移植瘤生长的影响。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验。结果与GES-1细胞比较,胃癌细胞AGS、SGC7901、BGC823、BGC803中MIR4435-2HG表达水平升高,HMGA1 mRNA和蛋白表达水平升高(P均<0.05),选择AGS细胞进行后续实验。MIR4435-2HG靶向负调控miR-138-5p表达,miR-138-5p靶向负调控HMGA1表达。与si-con组比较,si-MIR4435-2HG组AGS细胞48 h OD值(1.13±0.12比0.86±0.09)、迁移数量[(179.23±18.01)个比(60.15±6.05)个]、侵袭数量[(81.26±8.16)个比(25.64±2.59)个]、Ki67、CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达水平均降低(P均<0.05)。与miR-con组比较,miR-138-5p组AGS细胞48 h OD值(1.28±0.13比0.85±0.09)、迁移数量[(178.26±17.59)个比(69.35±6.34)个]、侵袭数量[(81.02±8.06)个比(36.76±2.49)个]、Ki67、CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达水平均降低(P均<0.05)。与si-con组比较,si-HMGA1组AGS细胞48 h OD值(1.28±0.13比0.83±0.09)、迁移数量[(175.62±17.59)个比(63.26±6.34)个]、侵袭数量[(80.16±8.06)个比(24.56±2.49)个]、Ki67蛋白表达水平(0.84±0.09比0.30±0.03),CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达水平均降低(P均<0.05)。与si-MIR4435-2HG+pcDNA组比较,si-MIR4435-2HG+pcDNA-HMGA1组AGS细胞48 h OD值(0.80±0.09比1.01±0.11)、迁移数量[(60.45±5.79)个比(119.25±12.46)个]、侵袭数量[(23.46±2.34)个比(59.46±6.29)个]、Ki67、CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达水平均升高(P均<0.05)。与sh-con组比较,sh-MIR4435-2HG组裸鼠体内移植瘤重量[(0.40±0.03)g比(0.13±0.03)g]降低(P<0.05)。结论MIR4435-2HG在胃癌细胞系中高表达,沉默MIR4435-2HG表达可能通过调控miR-138-5p/HMGA1轴抑制胃癌细胞体外增殖、迁移和侵袭,并抑制体内肿瘤生长。

LncRNA MIR22HG通过海绵吸附miR-22-5p对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖、凋亡和炎性反应的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)MIR22HG对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)增殖、凋亡和炎性反应的影响及其分子机制。方法收集在本院接受治疗的37例RA患者及30例关节创伤患者的滑膜组织样本,采用qRT-PCR检测滑膜组织中MIR22HG和miR-22-5p表达水平。体外分离、培养和鉴定人RA-FLSs,将MIR22HG siRNA干扰质粒(si-MIR22HG)及其阴性对照质粒(si-NC)和miR-22-5p inhibitor及其阴性对照(inhibitor-NC)分别或同时转染至RA-FLSs中,qRT-PCR检测细胞中MIR22HG和miR-22-5p表达水平;CCK-8检测各组细胞增殖活性;Annexin Ⅴ-FITC/PI检测各组细胞凋亡率;ELISA检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6水平;Western blot检测各组细胞中Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证MIR22HG与miR-22-5p之间的靶向关系。结果与关节创伤患者比较,RA患者滑膜组织中MIR22HG表达水平升高(P<0.05),而miR-22-5p表达水平降低(P<0.05)。干扰MIR22HG可抑制RA-FLSs增殖活性,降低细胞上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6水平及细胞中Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05),提高细胞凋亡率、miR-22-5p及Bax、Cleaved casepase-3等蛋白表达水平(P<0.05)。然而,抑制miR-22-5p表达可逆转MIR22HG基因沉默对RA-FLSs增殖、凋亡和炎症的影响(P<0.05)。双荧光素酶报告实验显示,miR-22-5p是MIR22HG潜在的下游靶miRNA。结论MIR22HG在RA患者关节滑膜组织中高表达,其可能通过靶向下调miR-22-5p表达促进RA-FLSs增殖及炎性反应,并抑制细胞凋亡。

长链非编码RNA MIR4435-2HG靶向微小RNA-1-3p调控信号通路磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B对胰腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的机制研究

目的探讨长链非编码RNA MIR4435-2HG(LncRNA MIR4435-2HG)通过调控微小RNA-1-3p(miR-1-3p)的表达对胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能作用机制。方法体外培养正常胰腺细胞系hTERT-HPNE与胰腺癌细胞系PANC-1、SW1990、PaTu8988、BxPC-3,将胰腺癌PaTu8988细胞按照随机数字表法分为si-MIR4435-2HG组(转染MIR4435-2HG siRNA)、si-con组(转染siRNA Control)、miR-1-3p组(转染miR-1-3p mimics)、miR-con组(转染miR-1-3p阴性对照)、si-MIR4435-2HG+an⁃ti-miR-1-3p组(共转染MIR4435-2HG siRNA与miR-1-3p抑制剂)、si-MIR4435-2HG+anti-miR-con组(共转染MIR4435-2HG siR⁃NA与miR-1-3p抑制剂的阴性对照),同时将未经任何处理的细胞作为NC组。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRTPCR)检测细胞中MIR4435-2HG与miR-1-3p的表达;双荧光素酶报告基因检测MIR4435-2HG与miR-1-3p的相互作用。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)分析敲低MIR4435-2HG及上调miR-1-3p表达对胰腺癌细胞增殖的影响;Transwell迁移及侵袭实验检测MIR4435-2HG及上调miR-1-3p表达对胰腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响。蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)及磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关蛋白的表达。结果MIR4435-2HG在胰腺癌细胞中的表达水平明显高于正常胰腺细胞;MIR4435-2HG可特异性结合miR-1-3p并调控其表达活性;敲低MIR4435-2HG与上调miR-1-3p表达后,可抑制胰腺癌PaTu8988细胞增殖,明显减弱细胞迁移及侵袭能力[其中NC组、miR-con组、si-MIR4435-2HG组增殖活性分别为48 h:(1.21±0.10)、(1.18±0.12)、(0.86±0.09),细胞迁移数量分别为(90.56±9.16)、(88.56±8.91)、(26.49±2.10),细胞侵袭数量分别为(160.79±16.12)、(155.09±15.49)、(69.23±7.10),均P<0.05],下调PaTu8988细胞中cyclin D1、MMP2、MMP9、p-Akt、PI3Kp110α、PI3Kp110β的表达;抑制miR-1-3p表达可促进胰腺癌PaTu8988细胞增殖、迁移及侵袭。结论敲低LncRNA MIR4435-2HG可通过靶向调控miR-1-3p表达并抑制PI3K/Akt信号通路活化而降低细胞增殖、迁移及侵袭相关蛋白表达,进而减弱胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。

LncRNA MIR22HG调节miR-132-3p/TLR2轴对急性心肌梗死小鼠心肌细胞凋亡和心室重构的影响

目的:探讨长链非编码RNA miR-22宿主基因(lncRNA MIR22HG)调节miR-132-3p/Toll样受体2(TLR2)轴对急性心肌梗死(AMI)小鼠心肌细胞凋亡和心室重构的影响。方法:取C57BL/6J小鼠随机分为sham组、AMI组、AMI+sh-NC组、AMI+shMIR22HG组、AMI+sh-MIR22HG+antagomir-NC组、AMI+sh-MIR22HG+antagomir-132-3p组,每组10只,除去sham组外,其它组都进行冠状动脉左前降支结扎,sham组只开胸不结扎冠状动脉,其中AMI+sh-NC组、AMI+sh-MIR22HG组、AMI+shMIR22HG+antagomir-NC组、AMI+sh-MIR22HG+antagomir-132-3p组小鼠分别相对应的对尾静脉注射sh-NC、sh-MIR22HG、sh-MIR22HG+antagomir-NC、sh-MIR22HG+antagomir-132-3p。超声心动图评估小鼠心室重构和心脏功能;HE染色和Masson染色观察心肌组织病理学变化及纤维化;RT-qPCR检测心肌组织MIR22HG、miR-132-3p表达;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;Western blotting检测心肌组织B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、激活型半胱氨酸蛋白酶-3(cleved caspase-3)/半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)、collagenⅢ和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;双荧光素酶报告基因实验分别验证MIR22HG和miR-132-3p、miR-132-3p和TLR2的关系。结果:与sham组比较,AMI组小鼠心功能显著降低,心肌组织损伤、心肌纤维化加重,心肌细胞凋亡率、MIR22HG、TLR2、cleved caspase-3/caspase-3、collagenⅠ、collagenⅢ和α-SMA蛋白表达水平显著升高,miR-132-3p和Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与AMI+sh-NC组比较,AMI+sh-MIR22HG组小鼠心功能改善,心肌组织损伤、心肌纤维化减轻,心肌细胞凋亡率、MIR22HG、TLR2、cleved caspase-3/caspase-3、collagenⅠ、collagenⅢ和α-SMA蛋白表达水平显著降低,miR-132-3p和Bcl-2蛋白表达上升(P<0.05);下调miR-132-3p减弱了敲减MIR22HG对心肌组织的保护作用;双荧光素酶报告基因实验结果显示,MIR22HG靶向调控miR-132-3p表达,miR-132-3p靶向负调控TLR2表达。结论:抑制MIR22HG表达可通过调节miR-132-3p/TLR2轴抑制AMI小鼠心肌细胞凋亡,改善小鼠心室重构。

FOXD2-AS1、MIR4435-1HG和HOXC-AS2联合诊断胃癌的临床价值及机制研究

目的:筛选胃癌中差异性表达的长链非编码RNA(lncRNA),探讨代表性lncRNA在胃癌诊断中的潜在价值及相关机制。方法:从TCGA数据库中筛选在胃癌中差异性表达的lncRNA,通过GSE179252和GSE184336数据集以及qRT-PCR检测胃癌患者血清中lncRNA的表达水平对结果进行验证。绘制ROC曲线评价代表性lncRNA单独及联合检测的诊断效能。分析HOXC-AS2与胃癌患者临床病理参数的相关性。利用在线数据库对HOXC-AS2进行下游靶基因预测以及PPI蛋白互作分析,构建HOXC-AS2-miRNA-mRNA调控网络。结果:从TCGA数据库中筛选出3个在胃癌中差异性表达的lncRNA。TCGA-STAD、GSE179252和GSE184336数据集中FOXD2-AS1、MIR4435-1HG和HOXC-AS2联合检测胃癌的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.994、0.958和0.921。血清中检测结果发现与胃良性疾病患者相比,FOXD2-AS1、MIR4435-1HG和HOXC-AS2在胃癌患者血清中表达升高(P<0.001),三者联合检测诊断胃癌的AUC为0.843,灵敏度和特异度分别为80%和86%。HOXC-AS2与胃癌肿瘤分级有相关性(P<0.05)。HOXC-AS2可与下游mRNA竞争miR-9-5p等miRNA结合位点,调控DLX6与HOXC蛋白家族之间的相互作用。结论:FOXD2-AS1、MIR4435-1HG和HOXC-AS2的联合检测可用作胃癌的诊断标志物,HOXC-AS2可作为ceRNA促进胃癌进展。

LncRNA MIR4435-1HG对胃癌细胞生物学特性的影响

目的研究长链非编码RNA MIR4435-1HG(LncRNA MIR4435-1HG)对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响以及作用机制。方法荧光定量PCR(qPCR)检测LncRNA MIR4435-1HG在多种胃癌细胞系(MGC-803、MKN45、AGS、GES-1)中的表达量。AGS细胞分为对照组、siRNA-NC组、siRNA-MIR4435-1HG组。对照组细胞常规培养,siRNA-NC组、siRNA-MIR4435-1HG组分别在AGS细胞中转染siRNA NC和siRNA MIR4435-1HG质粒。CCK-8检测各组细胞的增殖能力,划痕实验和Transwell检测细胞迁移、侵袭能力,流式细胞术检测细胞的凋亡率。在线数据库DIANA-LncBase v2、双荧光素酶报告基因预测和验证LncRNA MIR4435-1HG与微小RNA-150-5p(miR-150-5p)的靶向关系。结果LncRNA MIR4435-1HG在胃癌细胞系中表达量上调(P<0.05),其中在AGS细胞中表达量相对较高。与对照组相比,siRNA-MIR4435-1HG组AGS细胞中LncRNA MIR4435-1HG的表达量明显降低(P<0.05)。下调LncRNA MIR4435-1HG抑制AGS细胞增殖(P<0.05),阻碍其侵袭、迁移(P<0.05),诱导其凋亡(P<0.05)。miR-150-5p是LncRNA MIR4435-1HG下游靶基因。结论LncRNA MIR4435-1HG在多种胃癌细胞系中表达量上调;下调LncRNA MIR4435-1HG可能通过靶向miR-150-5p抑制AGS细胞增殖、侵袭、迁移,诱导凋亡。

MIR4435-2HG、miR-128-3p在膀胱尿路上皮癌中的表达及其相关性

目的探讨长链非编码RNA MIR4435-2HG与miR-128-3p在膀胱尿路上皮癌中的表达意义及相关性。方法采用实时荧光定量PCR检测87例膀胱尿路上皮癌组织及癌旁正常组织MIR4435-2HG和miR-128-3p的表达,将患者分别分为MIR4435-2HG高表达组(44例)、MIR4435-2HG低表达组(43例)或miR-128-3p高表达组(39例)、miR-128-3p低表达组(48例);比较两组间病理资料和预后生存差异;分析MIR4435-2HG和miR-128-3p表达的相关性。结果膀胱尿路上皮癌组织中MIR4435-2HG表达水平明显高于癌旁组织,而miR-128-3p表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05),且MIR4435-2HG和miR-128-3p表达呈负相关(r=-0.544,P<0.05)。MIR4435-2HG低表达和高表达组在病理分级、临床分期和淋巴结转移方面有统计学差异(P<0.05),而miR-128-3p低表达和高表达组各资料均无统计学差异(P>0.05);MIR4435-2HG高表达患者生存率低于MIR4435-2HG低表达组,而miR-128-3p高表达患者总生存率高于miR-128-3p低表达组(P<0.05)。MIR4435-2HG高表达和miR-128-3p低表达是影响膀胱尿路上皮癌患者预后的独立危险因素。结论膀胱尿路上皮癌组织MIR4435-2HG表达上调,miR-128-3p表达下调,两者均是患者预后不良的危险因素。

LncRNA MIR4697HG通过靶向miR-193a-3p调控HMGA2表达促进胶质瘤的发生发展

目的研究长链非编码RNA(LncRNA)MIR4697HG是否通过靶向微小RNA-193a-3p(miR-193a-3p)并调控HMGA2表达影响胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(qPCR)和Western印迹检测正常星形胶质细胞HA、胶质瘤细胞U-251MG中LncRNA MIR4697HG、miR-193a-3p、HMGA2 mRNA和HMGA2蛋白表达。生物信息学预测和双荧光素酶活性检测分析MIR4697HG与miR-193a-3p、miR-193a-3p与HMGA2的靶向关系。在U-251MG细胞中转染si-MIR4697HG或miR-193a-3p,观察其对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达。共转染si-MIR4697HG与anti-miR-193a-3p,或共转染si-MIR4697HG与pcDNA-HMGA2,观察其在U-251MG细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。结果与HA细胞比较,胶质瘤细胞U-251MG中LncRNA MIR4697HG、HMGA2 mRNA和HMGA2蛋白表达量明显升高(P<0.05),而miR-193a-3p表达量明显降低(P<0.05)。LncRNA MIR4697HG靶向调控miR-193a-3p表达,miR-193a-3p靶向调控HMGA2表达。低表达LncRNA MIR4697HG明显降低U-251MG细胞中HMGA2、CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达量、细胞存活率、细胞迁移数量、细胞侵袭数量(P<0.05),提高miR-193a-3p表达量(P<0.05)。高表达miR-193a-3p明显减少HMGA2、CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达量、细胞存活率、细胞迁移数量和细胞侵袭数量(P<0.05)。敲减miR-193a-3p可部分逆转MIR4697HG低表达对U-251MG细胞增殖、迁移、侵袭、HMGA2、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达的制作用。高表达HMGA2可部分逆转MIR4697HG低表达对U-251MG细胞增殖、迁移、侵袭、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达的抑制作用。结论LncRNA MIR4697HG通过靶向miR-193a-3p调控HMGA2表达促进胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。

LncRNA MIR205HG靶向miR-299-3p调控肺癌细胞增殖、凋亡的机制研究

目的 探讨长链非编码RNA MIR205HG(LncRNA MIR205HG)与微小RNA-299-3p(miR-299-3p)的相互关系及其影响肺癌细胞增殖、凋亡的分子机制。方法 检测肺癌组织和细胞中MIR205HG、miR-299-3p的表达。H1299细胞分为si-MIR205HG组、si-NC组、miR-299-3p组、miR-NC组、si-MIR205HG+anti-miR-299-3p组、si-MIR205HG+anti-miR-NC组。MIR205HG与miR-299-3p的相互作用;检测增殖、凋亡及蛋白表达。结果 肺癌组织和细胞系中MIR205HG表达水平升高(P<0.05),miR-299-3p表达水平降低(P<0.05)。MIR205HG能与miR-299-3p特异性结合,可调控miR-299-3p的表达。干扰MIR205HG表达或miR-299-3p过表达后可降低肺癌细胞增殖能力,促进细胞凋亡,且CyclinD1、p21表达降低,Bcl-2、Bax表达增高(P<0.05)。抑制miR-299-3p可逆转干扰MIR205HG表达对肺癌细胞增殖及凋亡的作用。结论 干扰MIR205HG表达可抑制肺癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,其作用机制与负向调控miR-299-3p有关。

LncRNA MIR100HG调控miR-142-5p/SOX5轴对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭能力的影响

目的:研究长链非编码RNA mir-100-let-7a-2-mir-125b-1簇宿主基因(long non-coding RNA mir-100-let-7a-2-mir-125b-1 cluster host gene,LncRNA MIR100HG)调控miR-142-5p/SRY相关的高迁移率族盒蛋白5(SRY-related high mobility group box 5,SOX5)轴对口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞增殖、侵袭能力的影响。方法:采用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测体外培养的人口腔上皮细胞和人OSCC细胞CAL27、SAS、SCC-25中LncRNA MIR100HG、miR-142-5p与SOX5表达。体外培养CAL27细胞,随机分为对照组、LncRNA MIR100HG敲低组(转染LncRNA MIR100HG siRNA质粒)、miR-142-5p mimics组(转染miR-142-5p mimics)、共转染阴性对照组(转染空载质粒和miR-142-5p阴性对照)、LncRNA MIR100HG敲低+miR-142-5p inhibitor组(转染LncRNA MIR100HG siRNA质粒和miR-142-5p inhibitor),分组转染后,采用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测各组细胞LncRNA MIR100HG、miR-142-5p及SOX5表达;采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法、5-乙炔基-2’-脱氧尿苷染色及集落形成实验检测各组细胞增殖;采用Transwell侵袭实验检测各组CAL27细胞侵袭;采用免疫印迹检测各组CAL27细胞上皮间质转化相关蛋白表达。将各组细胞接种在裸鼠背部右侧腋窝附近皮下构建OSCC移植瘤模型,饲养3周后检测各组移植瘤裸鼠肿瘤体积及重量。采用双荧光素酶报告实验检测CAL27细胞LncRNA MIR100HG对miR-142-5p、miR-142-5p对SOX5的靶向调控。结果:与人口腔上皮细胞相比,CAL27、SAS、SCC-25中LncRNA MIR100HG、SOX5蛋白与mRNA表达升高,miR-142-5p表达降低。与对照组相比,LncRNA MIR100HG敲低组、miR-142-5p mimics组细胞SOX5蛋白与mRNA表达、细胞活力、增殖率、集落形成比例、移植瘤裸鼠肿瘤体积及重量、侵袭数、N-cadherin蛋白表达降低,miR-142-5p表达、E-cadherin蛋白表达升高。下调miR-142-5p可减弱LncRNA MIR100HG敲低对CAL27细胞各指标的作用。CAL27细胞中LncRNA MIR100HG靶向下调miR-142-5p、miR-142-5p靶向下调SOX5。结论:敲低LncRNA MIR100HG可通过调控miR-142-5p/SOX5轴而抑制OSCC细胞增殖、上皮间质转化及侵袭,并可延缓其体内肿瘤生长。

LncRNA MIR503HG通过调控miR-224-5pCHSY1表达对结肠癌细胞放射敏感性的影响

目的探讨长链非编码RNA微小RNA-503宿主基因(LncRNA MIR503HG)通过调控miRNA-224-5p硫酸软骨素合酶1 (miR-224-5pCHSY1 )的表达对结肠癌细胞放射敏感性的影响。方法选取2019年3月至2022年1月火箭军特色医学中心收治的48例结肠癌患者为组织样本获取对象, 进行回顾性分析, 其中男性28例、女性20例, 年龄(57.43±5.28)岁。根据放疗后的病灶情况将患者分为放射抵抗组(23例)和放射敏感组(25例)。采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测2组患者结肠癌组织及各细胞株(CCD841、COLO320、SW480、RKO、HCT116)中LncRNA MIR503HG、miR-224-5pCHSY1的表达情况;构建放射抵抗的结肠癌细胞株HCT116R, 将HCT116R细胞株分为过表达LncRNA MIR503HG(MIR503HG)组及其阴性对照组(mimiC-NC)、miR-224-5pCHSY1抑制组(anti-miR-224-5p)及其阴性对照组(anti-miR-NC)、过表达LncRNA MIR503HG+过表达miR-224-5pCHSY1组(MIR503HG+miR-224-5p)、过表达LncRNA MIR503HG+阴性对照组(MIR503HG+miR-NC);通过双荧光素酶报告验证LncRNA MIR503HG与miR-224-5pCHSY1的靶向作用;检测各组细胞的存活分数(SF)和凋亡率。两组间数据的比较使用t检验。结果与放射敏感组相比, 放射抵抗组结肠癌组织中LncRNA MIR503HG的相对表达量明显降低(1.40±0.36对0.72±0.17), miR-224-5pCHSY1的相对表达量明显升高(1.06±0.25对1.54±0.27 ), 且差异均有统计学意义(t=8.247、6.529, 均P<0.05)。CCD841、COLO320、SW480、RKO、HCT116及HCT116R各细胞株LncRNA MIR503HG的相对表达量分别为2.38±0.06、1.03±0.05、0.87±0.03、0.86±0.02、0.77±0.04、0.54±0.09, miR-224-5pCHSY1的相对表达量分别为0.38±0.06、0.56±0.01、0.59±0.02、0.59±0.05、0.63±0.04、0.82± 0.06, 与正常细胞株CCD841相比, 结肠癌细胞株COLO320、SW480、RKO、HCT116的LncRNA MIR503HG相对表达量均明显降低(t=2.061、1.665、4.058、6.201, 均P<0.05), miR-224-5pCHSY1的相对表达量均明显增加(t=1.238、1.930、2.037、1.742, 均P<0.05 )。与HCT116细胞株相比, HCT116R的LncRNA MIR503HG相对表达量明显降低[(0.77±0.04)对(0.54±0.09)], miR-224-5pCHSY1的相对表达量明显增加[(0.63±0.04)对(0.82±0.06)], 差异均有统计学意义(t=1.267、2.370, 均P<0.05 )。在照射剂量分别为4、6、8 Gy时, MIR503HG组的HCT116R细胞SF明显低于mimic-NC组[(7.25±1.11)%对(11.34±2.65)%、(2.85±0.58)%对(6.08±1.10)%、(0.58±0.05 )%对(3.08±0.84)%], 且差异均有统计学意义(t=1.064、1.937、2.650, 均P<0.05 )。过表达LncRNA MIR503HG后, MIR503HG组HCT116R的放射增敏比(SER)为1.399。mimic-NC组、MIR503HG组、mimic-NC+4 Gy组、MIR503HG+4 Gy组的细胞凋亡率分别为(8.10± 0.23)%、(18.44±1.57)%、(17.33±2.35)%、(29.83±1.89)%, 与mimic-NC组相比, MIR503HG组、mimic-NC+4 Gy组HCT116R细胞的凋亡率均明显升高, 且差异均有统计学意义(t=2.003、1.475, 均P<0.05 )。与anti-miR-NC组相比, anti-miR-224-5p组MIR503HG-Wt的荧光素酶活性明显增加(1.02±0.20对1.60±0.25 ), 且差异有统计学意义(t=5.366, P<0.05);miR-224-5pCHSY1与LncRNA MIR503HG结合位点突变后, 与anti-miR-NC组相比, anti-miR-224-5p组MIR503HG-Mut的活性无明显变化(0.97±0.25对1.00±0.22), 2组间的差异无统计学意义(t=0.291, P> 0.05 )。与mimic-NC组相比, MIR503HG组miR-224-5pCHSY1的表达水平明显降低(1.97±0.13对1.12±0.12), 差异有统计学意义(t=3.915, P<0.05)。与anti-miR-NC组相比, anti-miR-224-5p组中miR-224-5pCHSY1的表达水平明显降低(1.99±0.19对0.92±0.18 ), 差异有统计学意义(t=2.664 , P<0.05 )。在照射剂量分别为4、6、8 Gy时, anti-miR-224-5p组HCT116R细胞的SF均明显低于anti-miR-NC组[(0.59±0.08 )%对(0.79±0.12)%、(0.39±0.06 )%对(0.67±0.07)%、(0.19±0.04 )%对(0.52±0.04)%], 且差异均有统计学意义(t=1.281、2.034、2.911, 均P<0.05)。抑制表达miR-224-5pCHSY1后, anti-miR-224-5p组HCT116R细胞的SER为1.403。anti-miR-NC组、anti-miR-224-5p组、anti-miR-NC+4 Gy组、anti-miR-224-5p+4 Gy组的细胞凋亡率分别为(5.08±0.78)%、(14.48±1.21)%、(13.89±1.36)%、(23.64±1.03)%, 与anti-miR-NC组相比, anti-miR-224-5p组与anti-miR-NC+4 Gy组的细胞凋亡率均明显增加, 且差异有统计学意义(t= 2.067、1.934, 均P<0.05 );与anti-miR-NC+4 Gy组相比, anti-miR-224-5p+4 Gy组的细胞凋亡率明显增加, 差异均有统计学意义(t=4.026 , P<0.05 )。照射剂量为4 Gy时, mimic-NC组、MIR503HG组、MIR503HG+miR-NC组、MIR503HG+miR-224-5p组的SF分别为(0.82±0.17)%、(0.53±0.12)%、(0.54±0.11)%、(0.78±0.15)%, 照射剂量为6 Gy时, 分别为(0.66±0.13)%、(0.38±0.09)%、(0.35±0.08)%、(0.57±0.10)%, 照射剂量为8 Gy时, 分别为(0.49±0.10)%、(0.15±0.06)%、(0.13±0.05)%、(0.43±0.11)%, 与mimic-NC组相比, 照射剂量≥4 Gy时, MIR503HG组HCT116R细胞的SF明显降低(t=1.609、1.533、1.927, 均P<0.05 ), MIR503HG+ miR-NC组HCT116R细胞的SF明显降低(t=1.294、1.490、1.825, 均P<0.05 );与MIR503HG+ miR-NC组相比, 照射剂量≥4 Gy时, MIR503HG+miR-224-5p组HCT116R细胞的SF明显增加, 且差异均有统计学意义(t=1.573、1.204、1.937, 均P<0.05 ), 过表达miR-224-5pCHSY1后, MIR503HG+miR-224-5p组HCT116R细胞的SER为0.825, 相比MIR503HG组明显降低。mimic-NC组、MIR503HG组、MIR503HG+miR-NC组、MIR503HG+miR-224-5p组的细胞凋亡率分别为(11.61±2.10)%、(24.97±0.91)%、(24.81±1.27)%、(16.15±1.10)%, 与mimic-NC组比较, MIR503HG组和MIR503HG+miR-NC组HCT116R的细胞凋亡率明显增高, 且差异有统计学意义(t=2.304、2.159, 均P<0.05 );与MIR503HG+miR-NC组比较, MIR503HG+miR-224-5p组HCT116R的细胞凋亡率明显降低, 且差异有统计学意义(t=2.067, P<0.05)。结论过表达LncRNA MIR503HG可通过抑制miR-224-5pCHSY1表达增加结肠癌细胞的放射敏感性。