LncRNA PURPL调节miR-342-3p/PIK3R1轴对肝癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:探究长链非编码RNA(PURPL)调节微小RNA-342-3p(miR-342-3p)/磷脂酰肌醇-3激酶调节亚基1(PIK3R1)轴对肝癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:细胞实验:将si-NC、si-PURPL、si-PURPL+inhibitor NC、si-PURPL+miR-342-3p inhibitor分别转染至肝癌细胞Huh-7细胞并命名为si-NC组、si-PURPL组、si-PURPL+inhibitor NC组、si-PURPL+miR-342-3p inhibitor组,未做任何处理的Huh-7细胞记为NC组。双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA PURPL、miR-342-3p、PIK3R1的关系;qRT-PCR检测人正常肝细胞系L02和人肝癌细胞系Huh-7中LncRNA PURPL、miR-342-3p表达;Western blot检测L02细胞、Huh-7细胞PIK3R1蛋白水平;MTT法检测Huh-7细胞增殖情况;流式细胞术检测Huh-7细胞凋亡率;Transwell检测Huh-7细胞侵袭数量;划痕试验测定Huh-7细胞迁移。体内实验:构建裸鼠异种移植模型,分组同细胞实验,检测肿瘤体积和肿瘤重量。结果:细胞实验结果显示:与si-NC组相比,si-PURPL组Huh-7细胞OD490值、划痕愈合率、侵袭细胞数量、LncRNA PURPL、PIK3R1水平显著下降(P<0.05),Huh-7细胞凋亡率、miR-342-3p相对表达量显著升高(P<0.05),而抑制miR-342-3p表达减弱了沉默LncRNA PURPL抑制Huh-7细胞增殖、迁移、侵袭和促进凋亡的效果;LncRNA PURPL负向调控miR-342-3p/PIK3R1轴。体内结果显示:si-PURPL组裸鼠肿瘤体积和质量较si-NC组下降(P<0.05);抑制miR-342-3p表达减弱了沉默LncRNA PURPL对体内肿瘤生长的抑制作用。结论:沉默LncRNA PURPL可抑制Huh-7细胞的恶性生物学行为,其机制可能与调控miR-342-3p/PIK3R1轴有关。

长链非编码RNA-PURPL对肝细胞癌增殖和凋亡的影响及其机制

目的探讨长链非编码RNA-PURPL对肝癌细胞的调控。方法采用siRNA干扰肝癌细胞系中lnc RNA-PURPL的表达,分别用细胞计数法检测siRNA干扰后的细胞增殖情况、用流式细胞术检测siRNA干扰后的细胞凋亡率、Western blot法检测与凋亡相关的一些蛋白探究作用机制、ELISA法检测干扰后细胞分泌的指标蛋白的变化情况,并进行统计学分析。结果显示在lnc RNA-PURPL受到下调的细胞分组中,细胞增殖受到抑制(抑制率50%~80%)、凋亡率明显增加(10%~20%),影响了凋亡通路相关蛋白,且细胞分泌的DCP、AFP-L3、AFP也明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 lnc RNA-PURPL可能和实体瘤大小有关联,且可作为肝癌分子标志物作为诊断依据之一,其通过PI3K/Akt通过调节细胞凋亡的机制揭示了其在肝癌发生发展中的重要性。