m6A修饰的LncRNA SLC7A11-AS1调控YAP1参与口腔鳞癌细胞侵袭迁移

目的探讨N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)修饰的LncRNA SLC7A11-AS1调控YAP1参与口腔鳞癌(OSCC)细胞侵袭与迁移的作用机制。方法生物信息学工具预测METTL3/LncRNA SLC7A11-AS1/YAP1轴的作用关系,并借助RNA pull-down实验与RIP实验进行验证。检测细胞中m6A、METTL3、LncRNA SLC7A11-AS1、YAP1的表达水平。将细胞分为si-NC、si-SLC7A11-AS1、si-SLC7A11-AS1+pcDNA、si-SLC7A11-AS1+pcDNAYAP1组。借助划痕愈合实验与Transwell实验评估细胞迁移与侵袭能力。结果 OSCC细胞中LncRNA SLC7A11-AS1表达上调(P<0.05);敲减LncRNA SLC7A11-AS1抑制了OSCC细胞的迁移与侵袭(均P<0.05);LncRNA SLC7A11-AS1正向调控YAP1,过表达YAP1部分抵消si-LncRNA SLC7A11-AS1对细胞迁移与侵袭的作用(均P<0.05);m6A相关蛋白METTL3可促进LncRNA SLC7A11-AS1在OSCC中的表达。结论 m6A修饰的LncRNA SLC7A11-AS1在OSCC中过表达,并且通过上调YAP1促进OSCC细胞的迁移与侵袭。

lncRNA SLC9A3-AS1在肝细胞癌中的临床意义及生物学功能分析

目的探讨lncRNA SLC9A3-AS1在肝细胞癌(HCC)中的表达意义和其参与HCC发生发展的潜在作用机制。方法收集37例HCC组织及其配对癌旁组织,以及HCC细胞RNA,利用qRT-PCR检测lncRNA SLC9A3-AS1在组织和细胞中的表达水平,并分析其与患者临床病理特征的关系。绘制lncRNA SLC9A3-AS1的受试者工作特征(ROC)曲线,分析其对HCC的诊断效能。通过生物信息学方法筛选与lncRNA SLC9A3-AS1结合的RNA结合蛋白,并绘制韦恩图,分析lncRNA SLC9A3-AS1与结合蛋白表达的相关性,以及蛋白表达与HCC病理分期和患者生存预后的关系。结果lncRNA SLC9A3-AS1在HCC组织和细胞中表达下调,其表达水平与患者血清甲胎蛋白(AFP)水平明显相关(P<0.05)。lncRNA SLC9A3-AS1的ROC曲线下面积(AUC)为0.849(95%CI:0.796~0.886)。韦恩图显示5个与lncRNA SLC9A3-AS1潜在结合的蛋白:hnRNPA1、YTHDC1、RBM4、NONO和RBMx,其表达与lncRNA SLC9A3-AS1表达呈明显正相关(P<0.05)。随着HCC分期的进展,不同分期的RNA结合蛋白表达量差异有统计学意义(P<0.05);RBM4、NONO和RBMx低表达患者总体生存期明显长于高表达患者(P<0.05)。结论lncRNA SLC9A3-AS1在HCC中下调,有望作为HCC诊断的生物标志物,并且可能通过与RNA结合蛋白互作调控HCC进展。

LncRNA SLC16A1-AS1靶向调控miR-182对乳腺癌BT549细胞增殖能力的影响

目的探讨LncRNA SLC16A1-AS1对miR-182的靶向调控作用及对乳腺癌BT549细胞增殖能力的影响。方法使用GEPIA2工具分析TCGA数据库中LncRNA SLC16A1-AS1在三阴型乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)中的差异性表达,应用Kaplan-MeieRPlotter数据库进行生存分析。利用RegRNA2和miRanda数据库预测LncRNA SLC16A1-AS1的潜在靶标miRNAs。用qRT-PCR检测LncRNA SLC16A1-AS1在TNBC组织及细胞系(BT549、BT20、MDA-MB-231及MDA-MB-468)中的表达。利用双荧光素酶活性测定及RNA免疫沉淀实验验证LncRNA SLC16A1-AS1与miR-182的结合力。用CCK-8及集落形成实验检测不同处理组BT549细胞增殖能力的变化。结果生物信息学分析结果显示,TNBC组织中LncRNA SLC16A1-AS1的表达水平显著低于正常组织(P<0.001),与预后良好相关(P<0.001),LncRNA SLC16A1-AS1与miR-182之间存在结合位点。LncRNA SLC16A1-AS1在63例TNBC组织中的表达水平显著低于瘤旁组织(7.94%vs 63.49%,P<0.001),在TNBC细胞系中的表达水平亦显著低于正常乳腺上皮细胞系(P<0.01)。在BT549细胞中过表达miR-182可显著降低LncRNA SLC16A1-AS1-WT载体的荧光酶素活性,RNA免疫沉淀实验显示,AGO2同时富集LncRNA SLC16A1-AS1及miR-182(P<0.01)。与对照组相比,过表达LncRNA SLC16A1-AS1显著降低BT549细胞的增殖活性并减少集落形成数量,共表达LncRNA SLC16A1-AS1与miR-182可恢复BT549细胞的增殖能力(P<0.01)。结论LncRNA SLC16A1-AS1在TNBC中低表达,且通过靶向调控miR-182在体外抑制TNBC细胞的增殖能力,LncRNA SLC16A1-AS1/miR-182轴有望成为TNBC治疗的潜在靶点。

SLC7A11-AS1调控miR-429对口腔鳞癌细胞CAL-27细胞增殖、凋亡及迁移的影响

目的探讨SLC7A11-AS1对口腔鳞癌细胞CAL-27细胞增殖、凋亡及迁移的影响及分子机制.方法收集29例口腔鳞癌患者癌组织及癌旁组织;CAL-27细胞分为si-NC组、si-SLC7A11-AS1组、水SLC7A11-AS1+anti-miR-NC组、si-SLC7A11-AS1+anti-miR429组。实时荧光定暈PCR(RT-qPCR)检测SLC7A11-AS1和miR-429表达水平;平板克隆实验检测克隆形成细胞数;流式细胞术检测细胞凋亡率;Transwell检测细胞迁移数;蛋内质印迹(Western hlot)法检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证SLC7A11-AS1和miR-429的靶向关系.结果与癌旁组织相比,口腔鳞癌组织中SLC7A11-AS1表达水平升高,miR-429表达水平降低(P<0.05)。抑制SLC7A11-AS1表达后,CAL-27细胞克隆形成数减少,细胞凋亡率升高,迁移细胞数减少,Bax表达水平升高,Bcl-2表达水平降低(P<0.05)。同时抑制SLC7A11-AS1和miR-429表达后,CAL-27细胞克隆形成数增加,细胞凋亡率降低,迁移细胞数增加,Bax表达水平降低,Bcl-2表达水平升高(P<0.05).结论抑制SLC7A11-AS1表达可通过上调miR-429抑制口腔鳞癌细胞CAL-27增殖及迁移,且促进CAL-27细胞凋亡.

老年喉鳞状细胞癌中PAC-1、CD62P、SLC7A11表达及临床意义

目的 分析老年喉鳞状细胞癌患者血小板表面血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa纤维蛋白原受体(PAC-1)、血小板P-选择素(CD62P)、SLC7A11的表达水平及临床意义。方法 收集我院2016年1月至2021年1月收治的老年喉鳞状细胞癌患者87例(喉癌组),另选取本院同期收治声带息肉患者87例(对照组)。收集患者血液及病理检查标本,采用流式细胞术通过单抗免疫荧光标记测定特异性荧光抗体结合血小板阳性率,进行PAC-1、CD62P检测,免疫组化SP法检测SLC7A11表达。分析PAC-1、CD62P、SLC7A11表达与患者预后的关系。结果 喉癌组中PAC-1、CD62P阳性表达率高于对照组,SLC7A11高表达率(28.74%)低于对照组(62.07%),差异具有统计学意义(P<0.05)。87例患者中预后良好69例,预后不良18例,预后不良组中PAC-1、CD62P阳性表达率高于预后良好组,SLC7A11高表达率(94.44%)高于预后良好组(53.62%),差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良者临床分期、颈部淋巴结转移占比明显高于对照组(P<0.05),两组在年龄、性别、分化程度上比较无差异(P>0.05)。以临床分期、颈部淋巴结转移、PAC-1、CD62P、SLC7A11作为自变量,进行多因素Cox回归分析结果显示:临床分期、颈部淋巴结转移、PAC-1、CD62P、SLC7A11是影响患者预后的独立因素(P<0.001)。结论 PAC-1、CD62P、SLC7A11在老年喉鳞状细胞癌患者中均呈高表达,且与患者预后情况密切相关,或可作为患者预后评估的参考指标。

SLC7A11-AS1调控miR-429对口腔鳞癌细胞CAL-27细胞的影响

分析口腔鳞癌患者通过 SLC7A11-AS1 对 miR-429 实施调控对 CAL-27 细胞迁移、凋亡、增殖的影响。 方法:分析对象为 2016.1~2019.12 期间在我院实施治疗的口腔鳞癌患者 29 例,对其癌旁组织和癌细胞进行收集,以 CAl-27 细胞为依据分成 4 组,si-SLC7A11-AS1 组、si-NC 组、anti-miR-429+si-SLC7A11-ASz1 组、anti-miR-NC+si-SLC7A11-AS1 组,了解 SLC7A11-AS1 对 miR-429 实施调控对 CAL-27 细胞迁移、凋亡、增殖的影响。 结果:对比癌旁组织,癌组织 miR-429 水平明显降低,SLC7A11 -AS1 水平明显较高,P<0.05;对 SLC7A11-AS1 进行抑制后,迁移细胞明显减少,细胞凋亡率明显提升,P<0.05;对 miR-429 和SLC7A11-AS1 进行抑制后,迁移细胞明显增加,细胞凋亡率明显降低,P<0.05。 结论:对于口腔鳞癌患者,对SLC7A11-AS1 进行抑制,通过 miR-429 的上调,可对 CAL-27 迁移、增殖进行抑制,同时对细胞凋亡可发挥促进作用。

LncRNA DDX11-AS1通过靶向miR-497-5p调控胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的机制研究

背景:LncRNA在胃癌中表达上调或下调,其在胃癌发生、发展中的作用机制尚未完全阐明。目的:探讨LncRNA DDX11-AS1通过靶向miR-497-5p表达来调控胃癌细胞增殖、迁移、凋亡的机制。方法:采用qRT-PCR检测胃癌组织和细胞株中DDX11-AS1和miR-497-5p的表达,Pearson法分析胃癌组织中DDX11-AS1与miR-497-5p的相关性。将胃癌HGC-27细胞随机分为NC组、si-con组、si-DDX11-AS1组、miR-con组、miR-497-5p组、si-DDX11-AS1+anti-miR-con组、si-DDX11-AS1+anti-miR-497-5p组。MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;双萤光素酶报告系统验证DDX11-AS1与miR-497-5p的靶向调节关系;蛋白质印迹法检测cyclin D1、cleaved caspase-3、MMP-2、MMP-9蛋白表达。结果:胃癌组织和细胞株中DDX11-AS1表达显著升高(P<0.05),而miR-497-5p表达显著降低(P<0.05),DDX11-AS1与miR-497-5p呈负相关(r=-0.754,P<0.05)。干扰DDX11-AS1表达或上调miR-497-5p表达可显著抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05),诱导细胞凋亡(P<0.05),cyclin D1、MMP-2、MMP-9表达显著降低(P<0.05),cleaved caspase-3表达显著升高(P<0.05)。双萤光素酶报告实验证明DDX11-AS1可负向调控miR-497-5p的表达和活性。抑制miR-497-5p表达可逆转干扰DDX11-AS1表达对胃癌细胞生物学行为的影响。结论:干扰LncRNA DDX11-AS1表达能通过靶向结合并上调miR-497-5p的表达而抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡。

长链非编码RNA SLC7A11-AS1在胃癌组织中表达及临床意义

目的探讨长链非编码RNA SLC7A11-AS1在人胃癌中的表达及临床意义。方法收集2016年1月~2018年6月手术治疗78例胃癌患者胃癌组织标本。采用实时荧光定量聚合酶链反应法(RT-qPCR)检测3株胃癌细胞系和1株正常胃粘膜细胞细胞系SLC7A11-AS1的表达水平。结果胃癌组织中SLC7A11-AS1的相对表达量低于癌旁组织;SLC7A11-AS1表达量与大体分型、TNM分期相关;多因素Logistic回归分析,胃癌侵袭与T分期、N分期、SLC7A11-AS1表达水平相关;低表达SLC7A11-AS1组患者OS为(21.78±3.16)个月低于高表达SLC7A11-AS1组患者平均OS为(34.23±3.48)个月;SLC7A11-AS1组织表达水平对胃癌诊断的特异性为82.10%,敏感性为53.80%(AUC=0.69,P=0.042)。结论SLC7A11-AS1可能作为抑癌基因参与胃癌的发生、发展,特别是参与胃癌的侵袭、迁移过程,低表达SLC7A11-AS1可作为不良预后指标,为胃癌诊断、预后判断提供重要参考依据。

沙蟾毒精通过Nrf2-HO-1/SLC7A11途径诱导人胃癌SGC-7901细胞铁死亡

目的 探讨沙蟾毒精(ArBu)诱导人胃癌SGC-7901细胞发生铁死亡的机制。方法 采用CCK-8法检测不同浓度ArBu对SGC-7901细胞存活率的影响,显微镜和透射电镜分别观察细胞及线粒体形态变化。将SGC-7901细胞分为对照组,ArBu低、中、高浓度组(0.2、0.4、0.8μmol·L^(-1))以及ArBu(0.4μmol·L^(-1))联合Ferrostatin-1(Fer-1,5μmol·L^(-1))组干预24 h,用试剂盒检测还原性谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总Fe和脂质活性氧(ROS)的水平。Western blot分别检测Nrf2、HO-1、SLC7A11、FTH1、GPX4的蛋白表达情况。结果 ArBu处理细胞24 h和48 h后,细胞存活率明显下降,且呈浓度依赖性。与对照组相比,ArBu处理细胞24 h后,细胞和线粒体皱缩死亡,线粒体嵴消失,GSH和SOD水平明显下降,MDA、总Fe和ROS水平明显上升。与ArBu中浓度组处理细胞24 h相比,联合Fer-1处理后,明显逆转了GSH、SOD、MDA、总Fe和脂质ROS水平,细胞形态与对照组无明显差异,线粒体并未皱缩变小。此外,ArBu明显降低Nrf2、HO-1、SLC7A11、FTH1、GPX4的蛋白表达水平。结论 ArBu能诱导人胃癌SGC-7901细胞铁死亡,其机制可能是通过Nrf2-HO-1/SLC7A11途径。

MiR-27b-3p通过下调lncRNA ST7-AS1水平调控非小细胞肺癌细胞的增殖、凋亡和侵袭

目的探究微小RNA-27b-3p(miR-27b-3p)通过调控长链非编码RNA ST7-AS1(lncRNA ST7-AS1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法通过qRT-PCR分析miR-27b和lncRNA ST7-AS1在人正常肺上皮BEAS-2B细胞和人NSCLC细胞系(A549、H358、H1299及NCL-H2073)中的表达情况。通过生物信息学和双荧光素酶报告基因检测分析miR-27b-3p与lncRNA ST7-AS1的靶向关系。将A549细胞分为5组:Control组、NC组、miR-27b-3p组、miR-27b-3p+VC组及miR-27b-3p+lncRNA ST7-AS1组。QRT-PCR检测miR-27b-3p和lncRNA ST7-AS1表达;MTT法检测细胞增殖活力;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;Transwell检测细胞侵袭能力。结果MiR-27b-3p在人NSCLC细胞系中表达低于人正常肺上皮细胞BEAS-2B,且在A549细胞中的表达最低(P<0.05);lncRNA ST7-AS1在人NSCLC细胞系表达水平高于BEAS-2B细胞,且在A549细胞中的表达最高(P<0.05)。生物信息学分析显示,lncRNA ST7-AS1和miR-27b-3p存在靶向结合位点;双荧光素酶报告基因检测结果显示,lncRNA ST7-AS1与miR-27b-3p存在靶向调控关系。qRT-PCR结果显示,与NC组比较,miR-27b-3p组A549细胞中miR-27b-3p水平升高,lncRNA ST7-AS1水平降低(P<0.05);与miR-27b-3p+VC组比较,miR-27b-3p+lncRNA ST7-AS1组A549细胞中miR-27b-3p水平降低,lncRNA ST7-AS1水平升高(P<0.05)。MTT、Annexin V-FITC/PI双染及Transwell结果显示,与NC组比较,miR-27b-3p组A549细胞增殖活力降低,凋亡率增高,侵袭细胞数量减少(P<0.05);与miR-27b-3p+VC组比较,miR-27b-3p+lncRNA ST7-AS1组A549细胞增殖活力增高,凋亡率降低,侵袭细胞数量增多(P<0.05)。结论miR-27b-3p通过下调lncRNA ST7-AS1水平抑制NSCLC细胞增殖和侵袭,并诱导细胞凋亡,抑制NSCLC的恶性进展。

长链非编码RNA SLC7A11-AS1对顺铂耐药人肺癌细胞耐药性的影响

在人肺癌H460及H460/DDP细胞中,通过干扰长链非编码RNA SLC7A11-AS1来探究其对细胞耐药的影响.通过大数据库分析SLC7A11-AS1与肺癌患者生存期的关系,利用实时定量PCR检测SLC7A11-AS1在人肺癌细胞H460和顺铂耐药细胞株H460/DDP中的表达.在H460/DDP细胞中瞬时转染SLC7A11-AS1的干扰片段,MTT法检测H460/DDP对顺铂药物敏感性的变化.结果表明,SLC7A11-AS1表达量高的肺癌患者生存期明显短于SLC7A11-AS1表达量低的肺癌患者(P<0.05);SLC7A11-AS1的表达在H460/DDP细胞中明显上调(P<0.05);干扰SLC7A11-AS1表达后,H460/DDP细胞对顺铂的化疗敏感性明显提高.因此,SLC7A11-AS1与肺癌的不良预后相关并影响肺癌的化疗耐药.

LncRNA ZEB2-AS1通过miR-27b/FZD7轴调控乳腺癌细胞增殖､侵袭和上皮间质转化的研究

目的探讨LncRNA ZEB2-AS1对乳腺癌细胞增殖､侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响及其机制。方法选取2019年5月至2020年4月新疆维吾尔自治区人民医院确诊为乳腺癌的46例患者的乳腺癌组织和癌旁正常组织标本,以及人乳腺癌细胞(MCF-7细胞)和人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A细胞)作为研究对象。利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LncRNA ZEB2-AS1､miR-27b和FZD7在乳腺癌细胞和组织中的表达,并检测下调LncRNA ZEB2-AS1对MCF-7细胞增殖､侵袭和EMT的影响。利用miRcode预测LncRNA ZEB2-AS1的靶基因。将miR-27b inhibitor和inhibitor NC转染至MCF-7细胞,检测MCF-7细胞的增殖､侵袭和EMT能力,并分析上调LncRNA ZEB2-AS1通过miR-27b对MCF-7细胞增殖､侵袭和EMT的影响。利用TargetScan预测miR-27b的靶基因。检测下调FZD7的表达对MCF-7细胞增殖､侵袭和EMT的影响。结果和MCF-10A细胞相比,MCF-7细胞中LncRNA ZEB2-AS1和FZD7的表达上调(P<0.01),miR-27b的表达下调(P<0.01)。ZEB2-AS1和FZD7干扰组MCF-7细胞增殖､侵袭和EMT能力明显低于阴性对照组;LncRNA ZEB2-AS1与miR-27b､miR-27b与FZD7具有靶向和负调控关系;miR-27b下调组MCF-7细胞增殖､侵袭和EMT能力明显升高;上调LncRNA ZEB2-AS1通过miR-27b促进MCF-7细胞增殖､侵袭､EMT和FZD7的表达。结论LncRNA ZEB2-AS1在乳腺癌细胞中表达上调,且通过miR-27b/FZD7轴促进MCF-7细胞增殖､侵袭和EMT。

干扰LncRNA MLK7-AS1对宫颈癌顺铂耐药细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨干扰LncRNA MLK7-AS1对宫颈癌顺铂耐药细胞增殖、凋亡的影响及其可能作用机制。方法采用低浓度加量持续诱导法建立宫颈癌顺铂耐药细胞SiHa/cDDP,qRT-PCR法检测宫颈癌细胞中MLK7-AS1、miR-143表达量;si-NC、si-MLK7-AS1、si-MLK7-AS1+NC、si-MLK7-AS1+miR-143 inhibitor分别转染入SiHa/cDDP细胞,加含顺铂的培养液(4μg/mL)培养48h。MTT实验与平板克隆形成实验检测增殖能力;流式细胞术检测凋亡率;双荧光素酶报告实验检测MLK7-AS1与miR-143的靶向关系。结果与ECT1/E6E7细胞比较,SiHa细胞、SiHa/cDDP细胞中MLK7-AS1表达水平升高(P<0.05),miR-143表达水平降低(P<0.05)。与SiHa细胞比较,SiHa/cDDP细胞中MLK7-AS1表达水平升高(P<0.05),miR-143表达水平降低(P<0.05)。与转染si-NC比较,转染si-MLK7-AS1可明显提高miR-143表达水平、凋亡率(P<0.05),降低细胞存活率(P<0.05),减少克隆形成数(P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实MLK7-AS1能靶向调控miR-143。共转染si-MLK7-AS1与miR-143 inhibitor可明显提高细胞存活率(P<0.05),增强克隆形成能力(P<0.05),降低凋亡率(P<0.05)。结论干扰MLK7-AS1表达可通过上调miR-143而抑制宫颈癌顺铂耐药细胞增殖及诱导细胞凋亡进而增强细胞对顺铂的敏感性。

LncRNA IGFBP7-AS1对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及机制

目的探讨LncRNA胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)7-AS1对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法qRT-PCR检测正常星形胶质细胞HA1800、脑胶质瘤细胞系U251、A172、U87中IGFBP7-AS1表达水平。转染IGFBP7-AS1的si-RNA(si-IGFBP7-AS1组)、si-RNA阴性对照(si-con组)、共转染si-IGFBP7-AS1与IGFBP7过表达载体(si-IGFBP7-AS1+pcDNA-IGFBP7组)、si-IGFBP7-AS1与空载体(si-IGFBP7-AS1+pcDNA-control组)至U87细胞,qRT-PCR检测IGFBP7-AS1、Western印迹检测IGFBP7蛋白水平验证转染效果,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平。结果与HA1800细胞比较,脑胶质瘤细胞系U251、A172、U87中IGFBP7-AS1表达显著升高(P<0.05)。与si-con组比较,si-IGFBP7-AS1组U251细胞A值、迁移和侵袭数显著降低(P<0.05),U251细胞凋亡率和Bax蛋白表达显著升高(P<0.05),Bcl-2和IGFBP7蛋白表达显著降低(P<0.05)。与si-IGFBP7-AS1+pcDNA-control组比较,si-IGFBP7-AS1+pcDNA-IGFBP7组U251细胞A值、迁移和侵袭数显著升高(P<0.05),细胞凋亡率和Bax蛋白表达显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论敲减IGFBP7-AS1可抑制胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导其凋亡,作用机制可能与下调IGFBP7表达有关。

lncRNA ABHD11-AS1通过调控STAT1/STAT3表达促进非小细胞肺癌细胞增殖与迁移

目的:探讨lncRNA ABHD11-AS1在非小细胞肺癌中的生物学功能和作用机制。方法:选取2016年7月至2018年12月在广东医科大学附属医院行非小细胞肺癌手术的248例患者,采用χ~2检验分析lncRNA ABHD11-AS1的表达与患者年龄、性别、临床病理分期、病理类型及吸烟状态的关系;采用Kaplan-Meier法分析ABHD11-AS1对非小细胞肺癌患者的预后意义;应用qRTPCR方法检测ABHD11-AS1在非小细胞肺癌组织和细胞系中的表达;通过体外功能测定评估敲低ABHD11-AS1对细胞增殖和转移的影响;通过Western blot实验探讨ABHD11-AS1在非小细胞肺癌中致癌作用的分子机制。结果:lncRNA ABHD11-AS1高表达组较低表达组吸烟患者较少(P=0.02),分期更晚(P<0.01);ABHD11-AS1高表达预示非小细胞肺癌患者预后不良;ABHD11-AS1在非小细胞肺癌组织和癌细胞株中高表达;敲低ABHD11-AS1的表达可抑制体外细胞增殖和迁移;敲低ABHD11-AS1表达抑制STAT1和STAT3癌蛋白的表达。结论:ABHD11-AS1可能通过促进STAT1和STAT3癌蛋白的表达,从而增加非小细胞肺癌细胞的增殖、集落形成以及迁移和侵袭能力。

lncRNAs ABHD11-AS1靶向miR-133a上调EGFR表达促进卵巢癌细胞增殖

目的研究lncRNAs ABHD11-AS1在卵巢癌细胞和输卵管上皮细胞中的表达,探究其对卵巢癌细胞增殖的影响和作用机制。方法Real-time PCR检测细胞中lncRNAs ABHD11-AS1和miR-133a的表达,双荧光素酶实验明确二者之间的调控作用;用NC siRNA、ABHD11-AS1 siRNA以及NC mimic、miR-133a mimic和NC inhibitor、miR-133a inhibitor分别转染细胞,CCK-8检测细胞增殖;Real-time PCR以及Western Blot实验检测细胞中EGFR的表达。结果结果表明,lncRNAs ABHD11-AS1在TOV-112D和CaVO3卵巢癌细胞系中的表达水平明显高于TEC细胞,且下调lncRNAs ABHD11-AS1可明显抑制卵巢癌细胞的增殖;ABHD11-AS1与miR-133a的表达呈负相关。双荧光素酶结果显示,转染miR-133a mimic和野生型ABHD11-AS1片段的细胞中荧光素酶的活性显著降低;与输卵管上皮细胞相比,miR-133a在卵巢癌细胞系的表达水平更低。转染miR-133a mimic会显著上调上述两种细胞中miR-133a的表达同时还抑制其增殖和EGFR表达。此外,下调miR-133a可明显促进卵巢癌细胞的增殖以及增加EGFR表达。与此相反,下调lncRNAs ABHD11-AS1明显降低EGFR表达。结论lncRNAs ABHD11-AS1通过调控miR-133a,上调其下游靶基因EGFR的表达从而促进卵巢癌的发生发展。

膀胱癌组织中LncRNA DDX11-AS1与LAMB3表达及临床意义

目的研究膀胱癌组织中长链非编码RNA(LncRNA)DDX11-AS1及层黏连蛋白亚基B3(LAMB3)的表达,探讨其临床意义。方法回顾性分析我院2015年2月—2016年2月收治的84例膀胱癌患者的临床资料。检测所有患者的癌组织和癌旁组织中LncRNA DDX11-AS1、LAMB3 mRNA及LAMB3蛋白表达情况。分析癌组织中LncRNA DDX11-AS1与LAMB3表达的相关性及LncRNA DDX11-AS1和LAMB3表达与临床病理特点的关系。分析癌组织中不同LncRNA DDX11-AS1、LAMB3表达与患者生存预后的差异。结果与癌旁组织相比,膀胱癌组织中LncRNA DDX11-AS1及LAMB3的相对表达量明显增高(P<0.05)。与癌旁组织相比,膀胱癌组织中LAMB3表达阳性率明显增高(P<0.05)。癌组织中LncRNA DDX11-AS1与LAMB3表达呈显著正相关(r=0.564,P<0.01)。癌组织中LncRNA DDX11-AS1和LAMB3的表达与膀胱癌的肿瘤TNM分期及是否合并淋巴结转移相关(P<0.05)。LncRNA DDX11-AS1、LAMB3高表达的膀胱癌患者5年总体生存率显著低于低表达者(P<0.05)。结论膀胱癌组织中LncRNA DDX11-AS1及LAMB3表达表达上调,癌组织中两者的高表达可能参与了促进膀胱癌的发生发展,有望成为判断预后的新肿瘤标志物。

下调lncRNA OIP5-AS1可通过miR-217/USP7轴抑制肝癌细胞EMT及侵袭迁移

目的探究lncRNA OIP5-AS1/miR-217/USP7分子轴对肝癌细胞EMT和侵袭迁移的调控作用。方法选取正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞系(MHCC97H,Hep3B,HepG2和HCCLM3),实时荧光定量PCR法检测正常肝细胞和肝癌细胞系中lncRNA OIP5-AS1的表达水平,Transwell实验检测肝癌细胞在下调lncRNA OIP5-AS1的表达后其侵袭和迁移能力的变化,蛋白质印迹实验检测上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-cadherin,N-cadherin和Vimentin的表达情况。通过生物信息学方法和双荧光素酶报告基因实验预测并验证lncRNA OIP5-AS1、miR-217和USP7的靶向关系,蛋白质印迹和Transwell实验检测LncRNA OIP5-AS1/miR-217/USP7分子轴对肝癌细胞EMT和侵袭迁移能力的影响。结果lncRNA OIP5-AS1在肝癌细胞系中均明显高表达(P<0.05或P<0.01)。下调肝癌细胞中lncRNA OIP5-AS1的表达可明显抑制肝癌细胞EMT及侵袭迁移(P<0.05);lncRNA OIP5-AS1靶向结合miR-217,且USP7是miR-217的靶基因(P<0.05);进一步研究证实,IncRNA OIP5-AS1通过miR-217上调USP7的表达水平,从而促进肝癌细胞的EMT和侵袭迁移(P<0.05或P<0.01)。结论IncRNA OIP5-AS1通过靶向miR-217/USP7分子轴促进肝癌细胞的EMT和侵袭迁移。

食管鳞癌组织ERCC1及SLC7A11的表达水平对新辅助化疗疗效的影响

目的:观察ERCC1、SLC7A11在食管鳞癌组织中的表达水平,探讨其与食管鳞癌患者新辅助化疗疗效的相关性。方法:采用免疫组化(SP)法检测92例食管鳞癌组织(实验组)和36例食管正常黏膜组织(对照组)中ERCC1和SLC7A11的表达量,并分析其与食管鳞癌患者临床病理特征的关系。结果:食管鳞癌组ERCC1、SLC7A11表达阳性率高于对照组,有统计学差异(P<0.01)。ERCC1高表达与食管鳞癌的临床分期、分化程度及有无淋巴结转移有关(P<0.05),与性别、年龄无关(P>0.05)。SLC7A11高表达与食管鳞癌的临床分期、有无淋巴结转移、及分化程度有关(P<0.05),与性别、年龄无关(P>0.05)。Pearson相关分析显示,ERCC1表达水平与SLC7A11表达水平呈正相关。Kaplan-Meier分析显示ERCC1(+)/SLC7A11(+)高表达的食管鳞癌患者治疗后3年复发率高于阴性表达患者,差异有统计学意义(P<0.05),3年总生存率均低于阴性表达患者(P<0.05)。81例接受新辅助化疗患者中,敏感组59例,耐药组22例,ERCC1在敏感组高表达,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);SLC7A11在敏感组高表达,两组中表达差异显著(P<0.05)。结论:ERCC1(+)/SLC7A11(+)高表达的食管鳞癌患者预后较差。因此,ERCC1、SLC7A11有可能作为食管鳞癌患者术前新辅助化疗的预后评估指标。

基于NR3C1/p53/SLC7A11通路探讨龙牙楤木总皂苷及其成分楤木皂苷A对缺氧/复氧诱导的心肌细胞铁死亡的影响

目的基于NR3C1/p53/SLC7A11通路观察龙牙楤木总皂苷(As)及其成分楤木皂苷A(As A)对缺氧/复氧(H/R)诱导的AC16心肌细胞铁死亡的影响。方法通过缺氧24 h/复氧12 h建立AC16细胞H/R损伤模型,采用细胞转染法调控NR3C1表达,将细胞分为正常组、H/R组、As组(As+H/R)、As A组(As A+H/R)、过表达空载体组(过表达空载体+H/R)、NR3C1过表达组(NR3C1过表达+H/R)、沉默对照组(si-NC+As+H/R)和NR3C1沉默组(si-NR3C1+As+H/R),分别进行相应干预,荧光探针检测活性氧(ROS)水平,ELISA检测丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,Western blot检测NR3C1、p53和SLC7A11蛋白表达,免疫荧光染色检测NR3C1和p53蛋白表达。结果与正常组比较,H/R组AC16细胞ROS和MDA水平明显升高,GSH水平明显降低(P<0.05),NR3C1和SLC7A11蛋白表达明显降低,p53蛋白表达明显升高(P<0.05);与H/R组比较,As组、As A组和NR3C1过表达组AC16细胞ROS和MDA水平明显降低,GSH水平明显升高(P<0.05),NR3C1和SLC7A11蛋白表达明显升高,p53蛋白表达明显降低(P<0.05);与过表达空载体组比较,As组和NR3C1过表达组AC16细胞ROS和MDA水平明显降低,GSH水平明显升高(P<0.05),NR3C1和SLC7A11蛋白表达明显升高,p53蛋白表达明显降低(P<0.05);与As组及沉默对照组比较,NR3C1沉默组AC16细胞ROS、MDA水平明显升高,GSH水平明显降低(P<0.05),NR3C1和SLC7A11蛋白表达明显降低,p53蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论As及As A可能通过上调NR3C1、SLC7A11蛋白表达,下调p53蛋白表达,抑制H/R诱导的AC16心肌细胞铁死亡。