LncRNA SNHG7靶向调节miR-146a-5p对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和细胞凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因7(lncRNA SNHG7)对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其分子机制。方法:培养人正常胃黏膜上皮细胞GES-1和胃癌细胞NCI-N87、Hs-746T、NCI-SNU-16;将si-NC、si-SNHG7分别转染至NCI-N87细胞中,记为si-NC组、si-SNHG7组;将si-SNHG7分别与anti-miR-NC、anti-miR-146a-5p分别共转染至NCI-N87细胞中,记为si-SNHG7+anti-miR-NC组、si-SNHG7+anti-miR-146a-5p组。实时荧光定量PCR(qPCR)检测SNHG7和miR-146a-5p的表达水平;MTT检测细胞活力;Transwell检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blotting)法检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测SNHG7和miR-146a-5p的靶向关系。结果:与人正常胃黏膜上皮细胞GES-1相比,胃癌细胞NCI-N87、Hs-746T、NCI-SNU-16中LncRNA SNHG7表达水平升高,miR-146a-5p表达水平降低(P<0.05);SNHG7高表达的患者生存率低。与si-NC组相比,si-SNHG7组胃癌细胞NCI-N87中SNHG7表达水平降低,细胞活力降低,细胞迁移、侵袭数降低,细胞凋亡率升高,E-cadherin蛋白表达水平升高,N-cadherin蛋白、Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.05)。SNHG7靶向调控miR-146a-5p,抑制miR-146a-5p表达逆转了抑制SNHG7表达对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的抑制和对凋亡的促进作用。结论:抑制SNHG7表达可能通过上调miR-146a-5p表达抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡。

LncRNA SNHG7通过调控β-catenin蛋白影响乳腺癌细胞的增值、迁移和侵袭

目的探讨长链非编码RNA SNHG7 (LncRNA SNHG7)在乳腺癌细胞系中的功能及其机制。方法 RT-qPCR检测LncRNA SNHG7在乳腺癌组织和乳腺癌细胞系的表达水平,核浆分离实验检测LncRNA SNHG7在乳腺癌细胞系MDA-MB-231中的定位。在MDA-MB-231细胞系中,siRNA沉默LncRNA SNHG7后,利用MTS和平板克隆形成实验研究LncRNA SNHG7对细胞增殖的影响;利用划痕和transwell实验研究LncRNA SNHG7对细胞侵袭迁移的影响。通过Western blot(WB)实验研究LncRNA SNHG7在乳腺癌细胞系中可能参与的分子机制。结果 qPCR结果显示,与癌旁组织相比,LncRNA SNHG7在乳腺癌组织中高表达(P<0.05);与乳腺正常上皮MCF-10A相比,LncRNA SNHG7在乳腺癌细胞系中高表达。siRNA沉默LncRNA SNHG7后,细胞增殖能力和平板克隆形成能力被抑制(P<0.05),划痕实验显示细胞的愈合能力降低(P<0.05),trans well实验显示细胞的迁移和侵袭能力均被抑制(P<0.05)。WB结果显示β-catenin、 C-Myc和CyclinD1蛋白的表达下调,磷酸化的β-catenin(p-β-catenin)蛋白降解增加。结论 LncRNA SNHG7在乳腺癌组织和乳腺癌细胞系中高表达。沉默LncRNA SNHG7后,细胞的增殖和侵袭迁移能力均降低。WB结果表明LncRNA SN HG7调控乳腺癌细胞的增殖和侵袭迁移可能与β-catenin蛋白的表达下调和p-β-catenin蛋白降解增加有关。

lncRNA SNHG7对胶质瘤细胞侵袭、迁移的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因7(SNHG7)与胶质瘤生存预后的关系,及其对胶质瘤细胞侵袭和迁移的影响。方法 选取2015年6月至2016年3月手术切除的胶质瘤组织80例(术后随访截止2020年4月)和50例颅脑损伤颅内减压术中切取的非肿瘤脑组织为对照,用RT-PCR法检测lncRNA SNHG7的表达水平。体外培养胶质瘤U87细胞,转染不同质粒敲低lncRNA SNHG7表达,用Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力;双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA SNHG7对miR-4516的调控作用。结果 胶质瘤组织lncRNA SNHG7表达量明显高于对照组(P<0.05);多因素Cox回归分析显示,lncRNA SNHG7高表达是胶质瘤病人不良生存预后的独立影响因素(P<0.05);生存曲线分析显示,高表达组胶质瘤病人中位总生存期较低表达组明显缩短(P<0.05)。敲低lncRNA SNHG7表达,明显抑制U87细胞侵袭和迁移力(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实lncRNA SNHG7靶向上调miR-4516表达,上调miR-4516可逆转敲低lncRNA SNHG7表达对胶质瘤U87细胞侵袭和迁移能力的作用(P<0.05)。结论 胶质瘤组织lncRNA SNHG7呈高表达,与病人不良生存预后有关。lncRNA SNHG7通过靶向调控上调miR-4516表达促进胶质瘤细胞的侵袭和迁移。

沉默LncRNA SNHG7通过调控miR-181b-5p的表达减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤

目的探讨沉默长链非编码RNA SNHG7(LncRNA SNHG7)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及其对miR-181b-5p的靶向调控作用。方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞,将其随机分为对照组、H/R组、H/R+si-NC组、H/R+si-SNHG7组、H/R+si-SNHG7+anti-miR-NC组和H/R+si-SNHG7+anti-miR-181b-5p组。检测乳酸脱氢酶、丙二醛的含量与超氧化物歧化酶的活性;用流式细胞术检测细胞凋亡率;用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SNHG7、miR-181b-5p的表达量;用双荧光素酶报告实验验证SNHG7、miR-181b-5p的靶向关系;蛋白免疫印迹法检测Bax和Bcl-2蛋白的表达量。结果与对照组相比,H/R组心肌细胞中SNHG7的表达显著升高(P<0.05),miR-181b-5p的表达水平显著降低(P<0.05),乳酸脱氢酶、丙二醛的含量显著升高(P<0.05),超氧化物歧化酶的活性显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),Bax蛋白水平显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05);与H/R组、H/R+si-NC组相比,H/R+si-SNHG7组乳酸脱氢酶、丙二醛的含量显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶的活性显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),Bax蛋白水平显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实SNHG7可靶向结合miR-181b-5p;干扰miR-181b-5p的表达可减弱沉默SNHG7对H/R诱导的心肌细胞氧化应激及细胞凋亡的作用。结论沉默SNHG7可能通过上调miR-181b-5p的表达抑制H/R诱导的心肌细胞氧化应激及细胞凋亡,从而对心肌细胞发挥保护作用。