LncRNA SNHG8在胎盘植入的表达及其对滋养细胞侵袭及迁移的影响

目的 探讨lncRNA SNHG8在胎盘植入(placenta accreta,PA)中的表达及对滋养细胞侵袭迁移的影响。方法 采用q RT-PCR检测PA组及对照组各30例胎盘组织中lncRNA SNHG8的表达,同时与30例PA患者产前超声评分做相关性分析。采用Transwell和划痕实验检测干扰lncRNA SNHG8后对人绒毛膜滋养层细胞(HTR8/SVneo cells)侵袭和迁移的影响,同时,Western blot检测MMP-2和MMP-9的表达情况;StarBase软件预测lncRNA SNHG8下游靶点,并在两组胎盘组织中检测其表达;双荧光素酶报告实验检测lncRNA SNHG8与miR-542-3p的靶向关系。结果 与对照组比较,lncRNA SNHG8在胎盘植入组胎盘组织中表达上调(P <0.05),并与产前超声评分呈正相关。干扰lncRNA SNHG8后抑制了滋养细胞的侵袭迁移(P <0.05),MMP-2及MMP-9蛋白表达也明显下降(P <0.05)。生物学预测miR-542-3p存在与lncRNA SNHG8的结合位点,miR-542-3p在PA胎盘组织中表达下调(P <0.05),双荧光素酶报告实验证实lncRNA SNHG8能靶向调控miR-542-3p。共转染si-SNHG8与miR-542-3p inhibitor后,与si-SNHG8+inhibitor-NC相比,滋养细胞侵袭迁移能力增强(P <0.05)。结论 lncRNA SNHG8在PA胎盘组织中高表达并与其严重程度相关,lncRNA SNHG8通过调节miR-542-3p水平促进滋养细胞侵袭迁移行为学功能,提示lncRNA SNHG8在PA滋养细胞的侵袭迁移中发挥重要作用,有望成为临床诊断生物标记物和治疗靶点。

lncRNA SNHG8抑制颌骨骨髓间充质干细胞成骨分化功能

目的:研究lncRNA SNHG8对颌骨骨髓间充质干细胞(JBMMSCs)成骨分化的影响。方法:通过慢病毒转染敲除或过表达JBMMSCs中lncRNA SNHG8,实时荧光定量PCR检测基因表达,碱性磷酸酶(ALP)活性测定、茜素红染色、钙离子定量以及Western blot检测JBMMSCs的体外成骨分化能力,活性氧(ROS)染色检测ROS含量;lncRNA SNHG8敲低后的JBMMSCs与HA/TCP材料混合并植入裸鼠皮下,苏木素-伊红(HE)染色、Masson染色、免疫荧光染色检测JBMMSCs的体内成骨分化能力。结果:体外JBMMSCs中lncRNA SNHG8敲低后的ALP活性及体外矿化能力增强(P<0.01),骨涎蛋白(BSP)蛋白表达条带增强,lncRNA SNHG8过表达后ALP活性及体外矿化能力减弱(P<0.01),BSP蛋白表达条带减弱;敲除lncRNA SNHG8可上调MAPK通路中磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK),过表达SNHG8可抑制p-JNK表达;敲除lncRNA SNHG8可增强胞内ROS染色,过表达lncRNA SNHG8可抑制胞内ROS染色。lncRNA SNHG8敲除后的体内新骨形成增加(P<0.01),BSP、骨钙素(OCN)蛋白表达条带增强。结论:lncRNA SNHG8可通过JNK信号通路抑制JBMMSCs体内外成骨分化功能。

LncRNA SNHG8靶向调控miR-152对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡的影响机制

目的探讨LncRNA SNHG8靶向调控miR-152对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法以子宫内膜上皮细胞(EEC)为对照,qRT-PCR检测人子宫内膜癌细胞株AN3CA、HEC-1A、HEC-1B和Ishikawa中SNHG8 mRNA表达。参照Lipofectamine 2000试剂盒说明,将si-SNHG8、si-NC、anti-control及si-SNHG8+anti-miR-152转染AN3CA细胞,MTT法检测转染24h^96h细胞活力,流式细胞术检测转染48h的细胞凋亡率,Western blotting检测AKT、p-AKT、PCNA和cleaved-caspase3蛋白表达。结果SNHG8在4个子宫内膜癌细胞的mRNA表达水平均明显高于在EEC细胞表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。选择表达最高的AN3CA细胞为研究对象。与si-NC组比较,si-SNHG8组细胞活力明显降低,凋亡率升高,p-AKT和PCNA表达明显降低,cleaved-caspase3表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05),与si-SNHG8+anti-control组比较,si-SNHG8+anti-miR-152组细胞活力明显升高,凋亡率降低,p-AKT和PCNA表达明显升高,cleaved-caspase3表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论LncRNA可SNHG8靶向调控miR-152抑制子宫内膜癌AN3CA细胞活力,诱导细胞凋亡,机制可能与调节AKT、PCNA和cleaved-caspase3表达有关。

LncRNA SNHG8通过抑制miR-494-3p表达减轻脑缺血再灌注损伤

目的探究LncRNASNHG8调控miR-494-3p表达减轻脑缺血再灌注损伤的发生机制。方法构建小鼠脑缺血再灌注损伤模型,通过TTC染色检测梗死面积,ELISA检测脑组织中炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量,RT-qPCR检测脑组织中LncRNASNHG8和miR-494-3p的表达。构建过表达LncRNASNHG8的OGD/R模型小胶质细胞,细胞分为OGD/R+oe-NC组或OGD/R+oe-SNHG8组,并通过ELISA和流式细胞术检测细胞的炎症反应和凋亡情况。双荧光素酶实验验证LncRNA SNHG8和miR-494-3p的靶向关系。在oe-SNHG8的OGD/R模型小胶质细胞中进一步过表达miR-494-3p,细胞分为OGD/R+oe-SNHG8+mimicNC组或OGD/R+oe-SNHG8+miR-494-3pmimic组,检测细胞炎症反应和凋亡的变化。结果小鼠脑缺血再灌注损伤模型中,脑组织出现明显的梗死区,炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的含量明显增加(P<0.001),lncRNASNHG8低表达(P<0.01),而miR-494-3p高表达(P<0.01)。过表达LncRNASNHG8明显抑制OGD/R模型小胶质细胞的炎症反应和凋亡(P<0.01)。过表达LncRNASNHG8能抑制miR-494-3p的表达(P<0.01)。在oe-SNHG8的OGD/R模型小胶质细胞中进一步过表达miR-494-3p,部分促进细胞的炎症反应和凋亡(P<0.05)。结论LncRNASNHG8通过抑制miR-494-3p表达,抑制炎症反应和细胞凋亡,从而改善脑缺血再灌注损伤。