LncRNA HIF1A-AS2通过抑制miR-138-5p促进滋养层细胞的侵袭和上皮间充质转化

目的研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)缺氧诱导因子-1α-反义链2(hypoxia-inducible factor 1 alpha antisense RNA 2,HIF1A-AS2)对滋养层细胞侵袭和上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用和机制。方法比较20个子痫前期(preeclampsia,PE)胎盘(PE组)和20个正常胎盘(对照组)组织中HIF1A-AS2及其预测的靶基因miR-138-5p的表达水平。选用人绒毛膜滋养层细胞系HTR-8/Svneo,在转染HIF1A-AS2过表达质粒、miR-138-5p拟似物和抑制物及各自阴性对照的HTR-8/SVneo细胞中,通过CCK-8检测细胞增殖、Transwell实验检测侵袭、Western blot检测细胞EMT标记分子和转录因子表达来研究HIF1A-AS2和miR-138-5p对滋养层细胞的作用和机制。通过荧光素酶基因报告实验验证HIF1A-AS2和miR-138-5p的结合关系。结果 PE胎盘中HIF1A-AS2显著降低(P<0.05),而miR-138-5p的表达显著增高(P<0.05)。过表达HIF1A-AS2能够抑制miR-138-5p的表达(P<0.05),促进HTR-8/SVneo细胞的侵袭能力(P<0.05),上调EMT标记分子Vimentin和N-cadherin以及EMT转录因子Twist1的表达水平(P<0.05)。此外,miR-138-5p抑制物与过表达HIF1A-AS2对HTR-8/SVneo细胞的作用相同,而miR-138-5p拟似物能够减弱过表达HIF1A-AS2对该细胞的作用。另外,HIF1A-AS2和miR-138-5p在HTR-8/Svneo细胞中可以直接结合。结论 LncRNA HIF1A-AS2能够促进滋养层细胞的侵袭和上皮间充质转化,其作用可能通过抑制miR-138-5p水平来实现。

LncRNA HIF1A-AS1在增生性糖尿病视网膜病变中的表达及诊断价值

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)缺氧诱导因子-1α-反义链1(HIF1A-AS1)在增生性糖尿病视网膜病变(PDR)患者血清中的表达情况及诊断价值。方法:选取2019-07/2021-07本院收治的糖尿病视网膜病变(DR)患者160例,根据病变程度分为PDR组(80例)和非增生性糖尿病视网膜病变(NPDR)组(80例),同时选取本院100例健康体检者为对照组。检测并比较所有研究对象血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清中LncRNA HIF1A-AS1表达水平;通过Logistic回归分析影响PDR发生的危险因素;利用受试者工作特征曲线(ROC)分析LncRNA HIF1A-AS1水平诊断PDR的临床价值。结果:PDR组患者血清中LncRNA HIF1A-AS1表达水平明显高于NPDR组和对照组,NPDR组高于对照组(P<0.05);PDR组、NPDR组患者糖尿病病程、HbA1c、TC、TG、LDL-C、FBG水平显著高于对照组,PDR组HDL-C水平显著低于对照组(P<0.05);LncRNA HIF1A-AS1水平与糖尿病病程、HbA1c、TC、TG、LDL-C、FBG呈正相关(P<0.05),与HDL-C呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,LncRNA HIF1A-AS1、病程、FBG、HbA1c、TC、TG、LDL-C均是PDR发生的危险因素(P<0.05)。ROC结果显示,LncRNA HIF1A-AS1水平预测PDR发生的曲线下面积(AUC)为0.766(95%CI:0.692~0.829),对应的敏感度为66.25%,特异度为78.75%。结论:PDR患者血清中LncRNA HIF1A-AS1水平上调,是PDR发生的危险因素,且可作为预测PDR发生的潜在血清学指标。

尿液外泌体长链非编码RNA MALAT1和HIF1A-AS2对膀胱癌诊断的价值

目的 检测膀胱癌患者尿液外泌体中人肺腺癌转移相关转录因子1 (MALAT-1)和缺氧诱导因子1α反义RNA2(HIF1A-AS2)的表达水平,分析其与患者临床病理参数的关系,探讨其在膀胱癌诊断中的临床应用价值。方法 收集2019年1月至2020年12月于西安医学院第一附属医院就诊的膀胱癌、膀胱良性疾病患者及健康人各40例尿液样本,采用ELISA法检测各组尿液外泌体中MALAT1和HIF1A-AS2的表达水平。进一步分析其与膀胱癌患者临床病理参数的相关性;绘制ROC曲线并分析MALAT1和HIF1A-AS2对膀胱癌的诊断价值。结果 膀胱癌组中MALAT1和HIF1A-AS2的表达水平显著高于膀胱良性疾病和健康人对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);MALAT1和HIF1A-AS2的表达水平与膀胱癌患者的病理分级和分期的差异无统计学意义(P>0.05),而与肿瘤的大小密切相关(P<0.05);尿液外泌体中MALAT1诊断膀胱癌的曲线下面积(AUC^(ROC))为0.748,敏感性为75.0%,特异性为66.25%;HIF1A-AS2诊断膀胱癌的AUC^(ROC)为0.757,敏感性为75.0%,特异性为68.75%;MALAT1和HIF1A-AS2联合检测诊断膀胱癌的AUC^(ROC)为0.820,敏感性为85.0%,特异性为81.25%,均高于两项指标的单独诊断价值。结论 尿液外泌体中高表达的MALAT1和HIF1A-AS2可作为膀胱癌诊断的潜在生物学标志物。