LncRNA miR143HG调控肺鳞癌H520细胞生物学行为的机制研究

背景与目的肺鳞癌(lung squamous cell carcinoma,LUSC)具有高发病率和高致死率,并且其临床预后较差。然而,目前对于LUSC尚无有效的靶向治疗方案。LncRNA miR143HG作为一种长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA),已被证实在多种肿瘤的发生发展中发挥着重要作用。然而lncRNA miR143HG在LUSC细胞中所扮演的生物学角色尚不清楚。因此,本研究旨在探讨lncRNA miR143HG调控LUSC H520细胞生物学行为的作用机制。方法基于肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库,对lncRNA miR143HG进行泛癌分析和差异表达分析。使用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线和timeROC曲线评估lncRNA miR143HG对LUSC诊断和预后的预测效果。确定各通路对于lncRNA miR143HG的富集程度。利用实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测BEAS-2B和H520细胞中lncRNA miR143HG以及miR-155的表达。将H520细胞随机分为空白对照组(不做任何处理)、阴性对照组(转染lncRNA-negative control,即lncRNANC)、lncRNA miR143HG组(转染lncRNA miR143HG)和lncRNA miR143HG+miR-155组(共转染lncRNA miR143HG和miR-155)。采用CCK-8法检测细胞增殖能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;qRT-PCR和蛋白免疫印迹实验检测Wnt/β-Catenin通路相关基因和蛋白的表达情况。结果泛癌分析和差异分析结果共同显示,除肾透明细胞癌外,其他癌组织中lncRNA miR143HG的表达均高于健康组织,且在LUSC中的差异具有统计学意义。ROC曲线和timeROC曲线的评估结果提示lncRNA miR143HG对于LUSC的诊断及预后的预测具有重要意义。富集于lncRNA miR143HG高表达的通路主要包括黏着斑、血管平滑肌收缩和钙信号通路等;而富集在lncRNA miR143HG低表达的通路主要包括氧化磷酸化、细胞周期、基础转录因子等。qRT-PCR结果显示,与BEAS-2B细胞相比,lncRNA miR143HG在H520细胞中低表达,而miR-155在H520细胞中高表达(P<0.05)。与阴性对照组比较,lncRNA miR143HG组细胞中lncRNA miR143HG基因、Wnt的基因和蛋白以及β-Catenin的基因和蛋白表达水平显著增加,而miR-155基因表达显著降低,且细胞增殖能力、细胞迁移能力和细胞侵袭能力也明显降低,但细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。另外,与lncRNA miR143HG组比较,过表达miR-155能够逆转lncRNA miR143HG介导的生物学行为,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论LncRNA miR143HG对于H520细胞的生物学行为具有重要意义。LncRNA miR143HG通过下调miR-155表达抑制H520细胞的增殖、迁移和侵袭能力并促进H520细胞的凋亡,其分子机制可能与Wnt/β-Catenin通路相关。