LncRNA uc.48^(+)通过激活P2X7R/NF-κB通路促进骨关节炎软骨组织的炎症

目的:研究LncRNA uc.48^(+)对骨关节炎(OA)软骨组织炎症的调节作用并探讨机制。方法:关节腔注射碘乙酸钠(MIA)诱导SD大鼠OA模型,记录注射后21d内膝关节注射侧的机械痛阈值(MWT)和热缩足潜伏期(PWTL),用OS染色观察21d关节软骨组织病理变化,实时定量PCR(qRT-PCR)检测软骨LncRNA uc.48^(+)和P2X7R的水平。使用质粒pcDNA3.1构建LncRNA uc.48^(+)的过表达载体(pc-LncRNA uc.48^(+))以及空载体(pc-null)。大鼠分为sham组(n=10)和MIA组(n=50),其中MIA组中随机选40只,并随机分为pc-null组、pc-LncRNAuc.48^(+)组、pc-LncRNA uc.48^(+)+核苷酸P2X受体7(P2X7R)通道拮抗剂(AZD9056)组、pc-LncRNA uc.48^(+)+核因子κB(NF-κB)抑制剂(Helenalin)组(n=10)。Western blot检测以上各组中P2X7R、P65、磷酸化P65(p-P65)、基质金属蛋白酶(MMP)-13、P物质(SP)的水平。ELISA检测软骨组织前列腺素(PG)E2、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β。体外软骨细胞转染pc-LncRNA uc.48^(+)或pc-null 24h检测P2X7R、P65、p-P65表达。结果:与造模前比,MIA注射1~21d大鼠MWT和PWTL降低,关节PGE2、TNF-α、IL-1β都升高(均P<0.05);MIA组1~-21d LncRNA uc.48^(+)持续上调,同时P2X7R mRNA也上调(均P<0.05)。MIA的大鼠中,pc-LncRNAuc.48^(+)组的PGE2、TNF-α、IL-1β、P2X7R、P65、p-P65水平都高于pc-null组(均P<0.05),而pc-LncRNA uc.48^(+)+AZD9056组的PGE2、TNF-α、IL-1β、P65、p-P65、MMP-13、SP水平都低于pc-LncRNAuc.48^(+)组(均P<0.05);另外,pc-LncRNA uc.48^(+)+Helenalin组的PGE2、TNF-α、IL-1β、MMP-13、SP水平都低于pc-LncRNAuc.48^(+)组(均P<0.05);然而,pc-LncRNA uc.48^(+)+Helenalin组的P2X7R水平和pc-LncRNAuc.48^(+)组无差异(P>0.05)。结论:LncRNA uc.48^(+)通过激活P2X7R/NF-κB信号通路通路促进骨关节炎软骨组织的炎症。