牛LncRNA-133a对骨骼肌卫星细胞增殖分化的影响

【目的】探讨长链非编码RNA LncRNA-133a对牛骨骼肌卫星细胞增殖分化过程的影响。【方法】利用测序样品3、6、9月龄胎牛及24月龄成年和牛骨骼肌肌肉组织,qRT-PCR法检测LncRNA-133a的组织时序表达谱。构建牛骨骼肌卫星细胞的体外成肌诱导分化模型,模拟牛骨骼肌的生长发育过程,qRT-PCR法检测LncRNA-133a和肌细胞分化标记因子MyoG、MHC的细胞时序表达谱。利用过表达LncRNA-133载体(pCDNA3.1-EGFP-LncRNA-133a)或LncRNA-133a抑制物(si-LncRNA 133a)转染牛骨骼肌卫星细胞,qRT-PCR法检测转染效率以及各转染处理组LncRNA-133a、MyoD、MyoG及MHC基因mRNA的表达水平,Western blotting检测MHC基因的蛋白表达水平;同时,通过EdU细胞增殖检测、免疫荧光蛋白染色技术检测牛骨骼肌卫星细胞增殖阶段的细胞增殖量和分化阶段的肌管融合程度。【结果】组织表达谱分析发现LncRNA-133a在3月龄胎牛肌肉组织中表达量最高,6月龄胎牛肌肉组织中次之,9月龄胎牛及成年牛肌肉组织中表达量最低,时序表达呈下降趋势;利用成功构建的牛骨骼肌卫星细胞体外诱导分化模型,进行LncRNA-133a、MyoG、MHC的细胞时序表达谱分析,结果发现在牛骨骼肌卫星细胞分化过程中(D0-D3),肌分化标记因子MyoG、MHC的表达水平逐渐升高,LncRNA-133a的表达在分化阶段呈上升趋势,且分化48 h时(D2)表达量最高;成功构建的过表达LncRNA-133a或抑制LncRNA-133a的牛骨骼肌卫星细胞模型,在增殖期(D0):与对照组相比,过表达LncRNA-133a处理组EdU增殖染色检测得到EdU阳性细胞数显著增加(P<0.01),而LncRNA-133a抑制处理组EdU阳性细胞数显著减少(P<0.01);在分化48 h时(D2):与对照组相比,LncRNA-133a过表达处理组肌细胞分化标记因子MyoD、MyoG及MHC的mRNA表达水平显著升高(P<0.05),Western blotting检测MHC蛋白表达量显著增加(P<0.01),且MHC蛋白的免疫荧光蛋白染色检测观察到融合肌管的体积占比更大;而LncRNA-133a抑制处理组MyoD、MyoG及MHC的mRNA表达水平均降低,其中MyoG显著降低(P<0.05), MHC蛋白表达量显著减少(P<0.01),同时MHC蛋白融合肌管的体积占比也降低。【结论】研究证实LncRNA-133a具有促进牛骨骼肌卫星细胞增殖及分化的作用,为进一步挖掘LncRNA-133a调节牛骨骼肌卫星细胞增殖分化调控网络机制奠定了基础。

六倍体小黑麦新品系T-133引种鉴定及特性分析

小黑麦是小麦和黑麦属间人工杂交形成的新物种,与小麦和黑麦相比,小黑麦的生物产量及蛋白质、赖氨酸含量高,适口性更好,可作为优质禾本科牧草,以促进饲草多元化发展。为了丰富甘肃省饲草种类,给农牧交错区提供高产稳产、耐盐碱、抗寒旱、抗病虫的小黑麦新品种,2013年从CIMMYT引进了六倍体小黑麦新品系T-133,并经2014—2020年连续水旱鉴定、品比试验、生产试验进行引种鉴定。在2020年甘肃省不同生态区生产试验中,平均折合籽粒产量7814.94 kg/hm^(2),比对照品种宁春4号增产17.45%;平均生物学产量22.39 t/hm^(2),比对照品种石大1号增产12.92%。该品系为粮草兼用型,春性,生育期100~109 d,株高115~120 cm,穗长10.0~10.5 cm,可育小穗数21~24个,穗粒数45~50粒,千粒重47~56 g。富含铁、锌等微量元素,品质优良,抗病性强。适宜在甘肃河西、中部及生态区域相似的青海、宁夏等高寒旱区种植。

芪黄疽愈方对ASO大鼠血液流变学和血脂指标及miR-133a、TNF-α表达的影响

目的探讨芪黄疽愈方改善肢体动脉硬化闭塞症(ASO)大鼠血液流变学和血脂指标及miR-133a、TNF-α表达的影响。方法雄性SD大鼠96只饲养1 w,随机选择18只作为空白组,剩余78只采用高脂饮食喂饲联合隐动脉内膜损伤的方法建立大鼠ASO模型,造模成功后随机分为模型组18只,西药组、芪黄疽愈方(中药高、中、低浓度组)各15只,分别给予生理盐水(1 ml/100 g大鼠)、西洛他唑片灌胃治疗(18 mg/kg,1次/d)、芪黄疽愈方相应浓度中药灌胃(1.0、0.5、0.1 ml/100 g体质量),观察一般情况并检测血脂、血流变、miR-133a、炎症细胞因子指标,并进行病理分析。结果空白组毛色光泽,饮食、饮水量正常;与中药组比较,模型组精神萎靡,饮食、饮水量相对减少。中药组随着用药剂量的增加,大鼠恢复正常越显著。空白组内皮细胞层完整,平滑肌层以平滑肌细胞和弹力纤维为主;模型组纤维母细胞大量代替内皮细胞,内膜增厚、部分管腔闭塞,空泡细胞、脂质沉积。中药各浓度组纤维母细胞大量代替内皮细胞,内膜增厚、部分管腔闭塞,空泡细胞、脂质沉积随着中药浓度增加而减少。西药组纤维母细胞大量代替内皮细胞,内膜增厚、部分管腔闭塞,有少量空泡细胞、脂质沉积较少。治疗后,与空白组比较,模型组血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、红细胞聚集指数、低切指数、高切指数显著升高,HDL显著降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,高浓度组血清TC、TG、红细胞聚集指数、低切指数、高切指数显著下降(P<0.05,P<0.01)。治疗后模型组TNF-α含量、miR-133a、TNF-αmRNA及蛋白表达水平明显高于空白组(P<0.05,P<0.01),中药高浓度组以上指标显著低于模型组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,miR-133a与血脂指标(TC、TG、LDL-C),血流变学指标(红细胞聚集指数、低切指数、高切指数及动脉脂肪沉积量)呈正相关(r=0.633、0.732、0.573、0.749、0.764、0.832、0.583;P=0.016、0.002、0.025、0.011、0.003、0.001、0.020)。结论芪黄疽愈方在大鼠ASO模型中具有调节脂质代谢与降低血液黏稠度的作用,从而抑制炎症细胞因子TNF-α表达,也能抑制miR-133a mRNA及蛋白表达,从而起到保护动脉内皮、干预ASO发展进程的作用。

miR-133a通过靶向调控G6PD的表达对肝癌的抑制作用

目的:探究miR-133a是否可通过调节G6PD参与肝细胞癌(HCC)的发生与发展进程。方法:生物信息学分析预测miR-133a和G6PD的结合位点;RT-PCR或Western blot检测miR-133a和G6PD在HCC组织及癌旁组织中的表达;CCK-8、流式细胞术实验检测miR-133a/G6PD对HCC细胞生长、凋亡的影响;荧光报告基因实验及Western blot技术检测miR-133a对G6PD表达的影响。结果:在HCC组织中miR-133a低表达,而G6PD高表达(P<0.01);过表达miR-133a降低了G6PD的表达(P<0.01);过表达miR-133a明显抑制了Hep G2细胞增殖,并促进了细胞凋亡(P<0.05)。结论:miR-133a通过降低G6PD的表达抑制HCC的发生及发展。

冠心病病人外周血微RNA-133b表达与预后的关系分析

目的 探究冠心病病人外周血微RNA-133b(miR-133b)表达水平,并分析其表达与病人预后的关系。方法 选取2019年7月至2021年1月于华北石油管理局总医院就诊的冠心病病人95例,其中稳定性冠心病(SACD)病人54例为SACD组,急性冠状动脉综合征(ACS)41例为ACS组,另选同期该院进行体检的健康人群60例作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-133b水平;随访6个月,根据是否出现主要心脏不良事件,分为预后不良组(出现主要心脏不良事件,33例)和预后良好组(未出现主要心脏不良事件,62例)。采用Spearman相关性分析检验血清miR-133b水平与Gensini评分的关系;采用多因素logistic回归分析影响冠心病病人预后的危险因素;采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-133b水平对冠心病病人预后不良的预测价值。结果 SACD组、ACS组身体质量指数、高血压、吸烟史及血脂异常者比例高于对照组(P<0.05),ACS组Gensini评分、病变支数≥3支占比高于SACD组(P<0.05)。ACS组、SACD组血清miR-133b(1.59±0.15比1.36±0.12比1.02±0.05)水平均高于对照组(P<0.05),ACS组血清miR-133b水平高于SACD组(P<0.05)。SACD组病人血清miR-133b水平与Gensini评分呈正相关(r=0.58,P<0.001),ACS组病人血清miR-133b水平与Gensini评分也呈正相关(r=0.57,P<0.001)。预后不良组病人Gensini评分、血清miR-133b水平及病变支数≥3支占比高于预后良好组(P<0.05)。Gensini评分、病变支数、miR-133b均为影响冠心病病人预后的危险因素(P<0.05)。血清miR-133b水平预测冠心病病人预后不良的曲线下面积为0.83,最佳截断值为1.55,灵敏度高达97.0%,特异度为64.5%。结论 冠心病病人血清miR-133b水平升高,对病人的预后不良有一定的预测价值。

RohA信号通路介导miR-133b调控脑缺血再灌注后血脑屏障通透性

目的:探究miR-133b在脑缺血再灌注后血脑屏障通透性调控中的作用及其机制。方法:采用大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)小鼠模型,小鼠脑内注射miR-133b agomir进行miR-133b过表达,TTC染色检测miR-133b过表达对小鼠脑梗死体积的影响;实时定量PCR检测MCAOR小鼠缺血侧脑组织及外周血miR-133b表达水平;采用悬挂实验评估miR-133b过表达对MCAO/R模型小鼠神经功能改善的影响;Western blot及ELISA检测miR-133b过表达对MCAO/R模型小鼠脑内RohA、claudin-5、ZO-1表达水平的影响;采用伊文思蓝渗透法评估小鼠血脑屏障通透性。结果:在MCAO/R模型小鼠缺血侧脑皮层组织与血浆中的miR-133b表达水平均降低,miR-133b过表达可显著减少MCAO/R小鼠脑梗死的体积,改善小鼠神经功能损害;miR-133b过表达可使MCAO/R小鼠脑内缺血区RohA、claudin-5、ZO-1蛋白表达显著降低。结论:小鼠脑缺血再灌注后体内miR-133b表达水平下降,miR-133b过表达具有降低脑缺血再灌注后脑血屏障通透性,发挥抗脑缺血作用,其机制可能是通过RohA信号通路介导的。

黄芩总黄酮对支气管哮喘大鼠的治疗作用及miR-133a-3p/NOX4/NLRP3信号轴表达的影响

目的黄芩总黄酮对支气管哮喘大鼠的治疗作用及miR-133a-3p/NOX4/NLRP3信号轴表达的影响。方法清洁级SD大鼠100只分为正常对照组、模型组、地塞米松组(200 mg/kg)、黄芩总黄酮低剂量组(100 mg/kg)、黄芩总黄酮高剂量组(200 mg/kg),每组20只。除正常对照组外,模型组、地塞米松组、黄芩总黄酮低高剂量组通过卵清蛋白(OVA)建立支气管哮喘模型,并予以相应药物干预。实验结束后,检测肺泡灌洗液淋巴细胞百分比、中性粒细胞百分比、白细胞计数,以及肺/体比值、肺损伤评分、动脉血氧分压(PaO_(2))水平;反逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白印迹法检测肺支气管组织微小RNA-133a-3p(miR-133a-3p)、NADPH氧化酶4(NOX4)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)水平。结果与正常对照组比较,模型组肺泡灌洗液淋巴细胞百分比、中性粒细胞百分比、白细胞计数、肺/体比值、肺损伤评分,以及支气管组织中NOX4、NLRP3蛋白和mRNA表达水平升高,PaO_(2)水平、支气管组织中miR-133a-3p表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,地塞米松组、黄芩总黄酮低剂量组和黄芩总黄酮高剂量组肺泡灌洗液淋巴细胞百分比、中性粒细胞百分比、白细胞计数、肺/体比值、肺损伤评分,以及支气管组织中NOX4、NLRP3蛋白和mRNA表达水平降低,PaO_(2)水平、支气管组织中miR-133a-3p表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与地塞米松组比较,黄芩总黄酮低剂量组、黄芩总黄酮高剂量组肺泡灌洗液淋巴细胞百分比、中性粒细胞百分比、白细胞计数、肺/体比值、肺损伤评分,以及支气管组织中NOX4、NLRP3蛋白和mRNA表达水平升高,PaO_(2)水平、支气管组织中miR-133a-3p表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与黄芩总黄酮低剂量组比较,黄芩总黄酮高剂量组肺泡灌洗液淋巴细胞百分比、中性粒细胞百分比、白细胞计数、肺/体比值、肺损伤评分,支气管组织中NOX4、NLRP3蛋白和mRNA表达水平升高,PaO_(2)水平、支气管组织中miR-133a-3p表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黄芩总黄酮对大鼠支气管哮喘具有明显治疗作用,其机制可能与黄芩总黄酮促进miR-133a-3p的表达进而抑制NOX4/NLRP3信号轴的激活相关。

湖羊lncRNA-269的鉴定及转录调控分析

[目的]本文旨在研究湖羊长链非编码RNA-269(long no-coding RNA-269,lncRNA-269)序列特征、表达模式和转录调控,为后续开展lncRNA-269的功能研究提供理论基础。[方法]以湖羊为研究对象,采用5′/3′RACE结合PCR扩增方法获得其序列全长,利用RT-qPCR方法鉴定其在湖羊组织中的表达模式,并利用PCR方法扩增其启动子区,鉴定其启动子区特征,分析其转录调控情况。[结果]湖羊lncRNA-269全长3 146 bp,组织表达谱显示其在湖羊各组织中广泛表达,且在健康卵泡中显著高表达,其表达水平与NR5A1 mRNA水平和血清中雌二醇(E_(2))水平呈正相关。荧光素酶活性分析发现在lncRNA-269启动子区的-359~-17 nt有1个转录激活基序,在-1 485~-942 nt有1个转录抑制基序。JASPAR软件预测发现在lncRNA-269转录抑制启动子区域存在FOXO3、PDX1等转录因子结合位点,在转录激活区域有SMAD4、YY1等转录因子结合位点。过表达SMAD4可显著提升lncRNA-269启动子区荧光素酶活性,染色质免疫沉淀(ChIP)-PCR试验进一步确认了SMAD4特异性与lncRNA-269启动子区结合。[结论]湖羊lncRNA-269在健康卵泡中显著高表达,其启动子区存在一个转录激活区域和一个转录抑制区域,转录因子SMAD4可通过与lncRNA-269启动子区结合显著上调lncRNA-269的启动子活性。

CD133在肿瘤免疫逃逸及诊断的研究进展

肿瘤干细胞(CSCs)是在肿瘤中发现的与正常干细胞一样具有自我更新特性的细胞。近年随着科学研究的不断发展,人们对肿瘤的研究不断加深,CSCs已被定义为促进肿瘤发展的关键因素,参与推动肿瘤复发、转移、化疗、耐药性等。CD133已成为热门的CSCs标志物之一,可在多种CSCs中高表达,且与肿瘤诊断的联系密不可分,可在胃癌、肺癌、脑肿瘤、肝癌、卵巢癌以及结直肠癌中发挥重要诊断及药物研究靶点作用。本文主要介绍CD133的结构、功能、免疫机制逃逸及其介导的肿瘤信号通路,并总结其与各类肿瘤的相关性。

结缔组织病合并肺间质病变患者血清中miR-133a和miR-424表达及与T淋巴细胞亚群关系的研究

目的 探究结缔组织病(connective tissue disease,CTD)合并肺间质病变(interstitial lung disease,ILD)患者血清中miR-133a和miR-424表达及与T淋巴细胞亚群的关系。方法 选取我院2019年12月至2022年12月收治的96例CTD-ILD患者为CTD-ILD组,选择同期我院收治的CTD无ILD患者96例为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miR-133a和miR-424水平;通过流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群水平。采用Pearson法分析miR-133a、miR-424与T淋巴细胞亚群的关系。结果 与对照组相比,CTD-ILD组血清中miR-133a水平显著降低,miR-424的表达水平显著升高(P<0.05)。不同肺通气障碍程度下,轻度、中度和重度患者血清中miR-133a表达水平依次显著降低,miR-424表达水平依次显著升高(P<0.05)。不同肺弥散功能障碍分级下,轻度、中度和重度患者血清中miR-133a表达水平依次显著降低,miR-424表达水平依次显著升高(P<0.05)。CTD-ILD组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平与对照组相比显著升高,CD8^(+)、CD3^(+)水平显著降低(P<0.05)。miR-133a与CD4^(+)均呈负相关关系,与CD8^(+)、CD3^(+)呈正相关关系;miR-424与CD4^(+)均呈正相关关系,与CD8^(+)、CD3^(+)呈负相关关系(P<0.05)。结论 CTD-ILD患者血清miR-133a表达水平降低,miR-424表达水平升高,且与患者T淋巴细胞亚群有关。

胶质瘤干细胞标志物Prominin-1/CD133在胶质母细胞瘤中的表达及临床意义

胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)是最常见的恶性脑肿瘤,恶性程度高、侵袭力强、易复发和预后差是其显著的特点[1]。胶质瘤干细胞(glioma Stem Cells,GSCs)是神经胶质瘤细胞中所包含的一种具有自我更新能力的亚群,其特性包括高致瘤性、自我更新的能力和对放化疗的抵抗,被认为是GBM复发的关键因素之一,也被称之为胶质瘤起始细胞(glioma initiating cells,GICs)。GSCs正是因为具有神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的特征,即自我更新、增生、归巢行为及多向分化的潜能[2,3],故也被称之为GSCs[4]。参照NSCs的特点,如形成神经球、自我更新和分化,多个研究小组在胶质瘤中找到了GSCs,这类细胞在体外实验的神经干细胞培养条件下可以悬浮生成神经球样的结构。

槐耳颗粒通过抑制Bmi-1与CD133表达减少三阴性乳腺癌全身转移的研究

目的研究在不同给药方式下槐耳颗粒对三阴性乳腺癌细胞的作用效果,及槐耳颗粒是否可以影响Bmi-1进而调节肿瘤细胞CD133表达以发挥抑制肿瘤细胞转移的作用。方法选择40只3~4周龄雌性裸鼠随机分成四组,预防组、预防及治疗组、治疗组分别于建模前3周、建模前及建模后3周、建模后3周口服给予槐耳清膏溶液,对照组不给予药物治疗;建模方式采用左心室注射的方法建立三阴性乳腺癌全身转移模型,建模后六周观察期后统一处死裸鼠并取标本;通过Kaplan-Meier法分析裸鼠生存时间,免疫组化法检测裸鼠转移灶内CD133及Bmi-1的表达,组间比较采用方差分析。结果预防及治疗组裸鼠的生存时间最长(MST=42d),其次为治疗组(MST=39d),再次为预防组(MST=38 d),对照组裸鼠的生存时间最短(MST=32d);预防及治疗组的Bmi-1平均表达最低,对照组的Bmi-1平均表达最高,不同给药方式与Bmi-1的表达之间存在显著性差异(P<0.05);预防及治疗组的CD133平均表达最低,对照组的CD133平均表达最高,不同给药方式与CD133的表达之间存在显著性差异(P<0.05)。结论槐耳颗粒对三阴性乳腺癌全身转移具有预防及治疗作用;槐耳颗粒可能通过激活Bmi-1凋亡基因从而减少了三阴性乳腺癌干细胞CD133的比例,进而发挥了预防及治疗三阴性乳腺癌全身转移的作用。

甲亢患者血清miR-133a水平变化与甲状腺激素及脂质代谢的关联性研究

目的探讨甲亢患者血清miR-133a水平变化与甲状腺激素及脂质代谢的关联性。方法招募2020年10月至2022年8月中国人民解放军联勤保障部队第九八三医院收治的新发显性甲亢患者100例(甲亢组),其中28例患者接受标准甲巯咪唑治疗;另选择同期健康体检者100名作为对照组。收集研究对象的性别、年龄、甲状腺激素、肝功能及其他生化指标等临床资料。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测血清miR-133a水平,分析其与甲状腺激素及脂质代谢水平的相关性。结果与对照组相比,甲亢组游离甲状腺素(FT_(4))、游离三碘甲状腺原氨酸(FT_(3))、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)、舒张压、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)水平较高,体质量指数(BMI)、腰围、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、促甲状腺激素(TSH)水平较低,差异有统计学意义(P<0.05)。甲亢组血清miR-133a水平显著低于对照组(Z=9.796,P<0.001)。甲亢组血清miR-133a水平与ALT、FT_(3)、FT_(4)水平呈负相关(P<0.05),与TC、LDL-C和TSH水平呈正相关(P<0.05)。在接受甲巯咪唑治疗后,甲亢患者FT_(3)和FT_(4)水平显著降低(P<0.05),TC、LDL-C、TSH及血清miR-133a水平显著升高(P<0.05)。治疗前后血清miR-133a水平变化值与FT_(3)(r s=-0.728,P<0.001)、FT_(4)(r s=-0.377,P=0.048)水平变化值呈负相关,但与TC、TG、LDL-C和TSH水平变化值相关性不显著(P>0.05)。结论甲亢患者血清miR-133a水平下调,这可能与甲状腺激素升高导致的脂质代谢紊乱有关。

血浆lncRNA SNHG12、miR-133b预测乳腺癌新辅助治疗效果的价值

目的探讨血浆长非编码RNA小核仁宿主基因12(lncRNA SNHG12)、微小RNA(miR)-133b预测乳腺癌新辅助治疗效果的价值。方法选取2022年1月至2023年1月在该院进行新辅助治疗的86例乳腺癌患者作为乳腺癌组,依据新辅助治疗效果分为病理学完全缓解(pCR)组和non-pCR组。另选取同期在该院进行健康体检的50例健康女性作为对照组。检测并比较所有研究对象lncRNA SNHG12、miR-133b表达水平。采用多因素Logistic逐步回归模型分析影响乳腺癌新辅助治疗效果的因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆lncRNA SNHG12、miR-133b单独及联合检测对乳腺癌新辅助治疗效果的预测价值。结果乳腺组血浆lncRNA SNHG12表达水平高于对照组,miR-133b表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。pCR组纳入34例患者,non-pCR组纳入52例患者。pCR组与non-pCR组雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体-2(HER-2)、细胞增殖核抗原、分子分型比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。pCR组lncRNA SNHG12表达水平低于non-pCR组,miR-133b表达水平高于non-pCR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic逐步回归分析结果显示,分子分型为HER-2过表达型、lncRNA SNHG12表达水平升高、miR-133b表达水平降低是乳腺癌新辅助治疗效果的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血浆lncRNA SNHG12、miR-133b单独检测预测乳腺癌患者新辅助治疗效果的曲线下面积(AUC)分别为0.850、0.951,均低于二者联合检测的0.963。86例乳腺癌中Luminal A型11例(pCR 1例、non-pCR 10例)、Luminal B型43例(pCR 12例、non-pCR 31例)、HER-2过表达型16例(pCR 14例、non-pCR 2例)、三阴型16例(pCR 7例、non-pCR 9例)。ROC曲线分析lncRNA SNHG12、miR-133b对4种不同亚型乳腺癌新辅助治疗效果的预测效能结果显示,血浆lncRNA SNHG12、miR-133b单独及联合检测预测Luminal B型乳腺癌患者新辅助治疗效果的AUC分别为0.753、0.974、0.981,预测HER-2过表达型乳腺癌患者新辅助治疗效果的AUC分别为0.804、0.857、0.893。预测三阴型乳腺癌患者新辅助治疗效果的AUC分别为0.849、1.000、1.000。结论乳腺癌患者血浆lncRNA SNHG12表达增高,miR-133b表达降低,二者联合检测对乳腺癌新辅助治疗效果具有较好的预测价值。

地红方通过miR-133b/DUSP1/JNK通路干预糖尿病肾病氧化应激损伤

目的研究地红方对糖尿病肾病细胞模型氧化应激损伤的影响。方法地红方含药血清制备,小鼠肾小球系膜细胞常规培养、传代。按以下分组:对照组(5.5mmol/L葡萄糖+正常血清)、高糖组(30mmol/L葡萄糖+正常血清)、地红方低剂量组(30mmol/L葡萄糖+5%地红方含药血清)、地红方中剂量组(30mmol/L葡萄糖+10%地红方含药血清)、地红方高剂量组(30mmol/L葡萄糖+20%地红方含药血清)。采用实时荧光定量PCR检测miR-133b、DUSP1 mRNA表达。Western blotting检测DUSP1、p-JNK、Drp1、Fis1蛋白表达。Elisa检测SOD、MDA表达。结果与高糖组比较,地红方组miR-133b、MDA、p-JNK、Drp1、Fis1表达明显下降(P<0.05),而DUSP1、SOD表达显著升高(P<0.05)。结论地红方可通过miR-133b/DUSP1/JNK通路调控线粒体分裂改善糖尿病肾病氧化应激损伤。

miR-133a-5p调控细胞焦亡抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:研究miR-133a-5p靶向半胱天冬酶3(caspase-3)调控细胞焦亡对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制。方法:以Hela细胞为研究对象并分为Control组(正常培养宫颈癌Hela细胞)、mimic-NC组(宫颈癌Hela细胞转染mimic-NC)和miR-133a-5p mimic组(宫颈癌Hela细胞转染miR-133a-5p mimic过表达);利用CCK-8检测细胞增殖,染色法检测细胞迁移和细胞侵袭,ELISA检测活性氧(ROS)水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平,蛋白质印迹法检测caspase-3、cleaved caspase-3、GSDME和GSDME-NT蛋白的表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应检测caspase-3和miR-133a-5p的mRNA表达水平。结果:对照组和mimic-NC组的细胞增殖、迁移和侵袭结果对比没有明显差异,而miR-133a-5p mimic组细胞增殖、迁移和侵袭结果相较于mimic-NC组明显被抑制(均P<0.05);流式细胞术检测结果发现miR-133a-5p mimic组细胞凋亡水平明显高于mimic-NC组(P<0.05);ELISA检测结果发现miR-133a-5p mimic组ROS水平明显高于mimic-NC组(P<0.05);Western Blot和PCR检测结果发现与mimic-NC组相比,过表达miR-133a-5p能够明显提升cleaved caspase-3和GSDME-NT的表达,降低caspase-3和GSDME的表达(P<0.05)。结论:miR-133a-5p对Hela细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用或与靶向调控caspase-3来调节Hela细胞焦亡相关,对caspase-3/GSDME通路的干预有望成为宫颈癌治疗的新方向。

MGSGCN:基于多图结构和注意力机制的图卷积网络预测lncRNA-疾病关联

研究表明长非编码RNA (long non-coding RNA, lncRNA)在许多生物的生命活动中发挥着重要作用。识别潜在的lncRNA-疾病关联(lncRNA-disease associations, LDAs)有助于研究疾病的发病机制,及时地诊断、预防和治疗疾病。本文提出了一种基于多图结构和注意力机制的图卷积网络模型预测LDAs,简称MGSGCN。该模型综合了疾病语义相似性、lncRNA功能相似性、疾病与lncRNA高斯相互作用谱核相似性和余弦相似性,构建了疾病和lncRNA的特征向量。基于图卷积网络(graph conventional network, GCN)和图注意力网络(graph attention network, GAT),使用了提取封闭子图和交互信息传播的多图结构策略来训练和预测LDAs。MGSGCN在Dataset1和Dataset2上的五折交叉验证(five-fold cross validation, 5-CV)的准确率分别为94.55%和87.44%。将MGSGCN与其它四个前人研究的计算模型进行比较,评价指标结果凸显了MGSGCN具有良好的分类性能。此外,对与子宫颈癌相关的lncRNA进行了案例分析。发现MGSGCN预测出了未被实验证实的LDAs,这说明该模型具有预测新的LDAs的能力。

血清miR-133a、sCD44v6、胃泌素-17在胃癌和癌前病变筛查中的应用及与Hp-IgG表达的关系

目的 探究血清微小RNA-133a(miR-133a)、可溶性CD44变体6(sCD44v6)和胃泌素-17在胃癌和癌前病变筛查中的应用,并研究其与幽门螺杆菌-免疫球蛋白G(Hp-IgG)表达的关系。方法 回顾性选取2020年1月至2023年1月在重庆市开州区人民医院就诊的胃癌患者103例(胃癌组)、癌前病变患者112例(癌前病变组)及同期在本院进行体检的健康志愿者100名(对照组)作为本次研究对象。收集各组对象的血清miR-133a、sCD44v6、胃泌素-17水平,并探究其对胃癌及癌前病变筛查的诊断价值。比较癌前病变组及胃癌组患者Hp-IgG检测结果,并分析胃癌组及癌前病变组Hp-IgG阳性率与血清miR-133a、sCD44v6、胃泌素-17水平的相关性。结果 癌前病变组、胃癌组患者血清miR-133a相对表达水平低于对照组,sCD44v6、胃泌素-17水平高于对照组,且胃癌组血清miR-133a相对表达水平低于癌前病变组,sCD44v6、胃泌素-17水平高于癌前病变组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清miR-133a相对表达水平、sCD44v6、胃泌素-17水平诊断癌前病变的曲线下面积(AUC)值分别为0.621、0.932、0.945(P<0.05)。血清miR-133a相对表达水平、sCD44v6、胃泌素-17水平诊断胃癌的AUC值分别为0.864、0.876、0.845(P<0.05)。胃癌组患者的Hp-IgG阳性率为79.61%,高于癌前病变组(41.07%),差异有统计学意义(P<0.05)。癌前病变组患者的Hp-IgG阳性率与血清miR-133a相对表达水平无明显相关性(r=-0.065,P>0.05),与sCD44v6、胃泌素-17水平呈正相关(r=0.404、0.344,P<0.05)。胃癌组患者的Hp-IgG阳性率与血清miR-133a相对表达水平呈负相关(r=-0.693,P<0.05),与sCD44v6、胃泌素-17水平呈正相关(r=0.765、0.766,P<0.05)。结论 在胃癌和癌前病变中,血清miR-133a的相对表达水平较低,而sCD44v6和胃泌素-17的水平较高,且具有一定诊断价值,可用于胃癌和癌前病变的筛查。胃癌患者的Hp-IgG阳性率较高,并且与血清miR-133a呈负相关,与sCD44v6和胃泌素-17呈正相关。在癌前病变患者中,Hp-IgG阳性率与血清miR-133a相对表达水平无明显相关性,但与sCD44v6和胃泌素-17的水平呈正相关,应密切关注Hp-IgG在患者中的表达情况。

胃癌患者血清中CA125、CEA及mi R-133a水平及其与病理特征及预后的相关性

目的 探究胃癌患者血清中CA125、CEA及miR-133a水平与病理特征及预后的相关性。方法 选取2017年3月至2020年3月我院收治的70例胃癌患者为观察组,选取同期进行健康体检者70例作为对照组,采用全自动化化学发光仪测定血清中CA125、CEA含量,采用实时定量PCR测定miR-133a水平,并分析其与胃癌临床特征及患者预后之间的关系。采用Kaplan-Meier生存曲线分析CA125、CEA及miR-133a与生存时间的联系。结果 观察组患者血清中CA125、CEA含量明显高于对照组,miR-133a明显低于对照组(P<0.05);腺癌患者血清中CA125、CEA及miR-133a含量明显高于鳞癌(P<0.05);胃癌病理分期越高,CA125、CEA含量越高,miR-133a含量越低;存在淋巴转移的患者血清中的CA125、CEA含量高于无淋巴转移的患者,miR-133a含量低于无淋巴转移的患者(P<0.05);CA125高表达组中位生存时间明显短于CA125低表达组,CEA高表达组中位生存时间明显短于CEA低表达组,miR-133a高表达组中位生存时间明显长于miR-133a低表达组(P<0.05)。结论 血清中CA125、CEA及miR-133a水平与病理特征关系密切,可用于患者病情的评估,对胃癌的筛查及诊治具有重要意义。

以“133”校本研修助力教师专业成长的实践——联盟式集团化办学背景下校本研修的实践

校本研修是教师学习与发展的重要研修平台,是教师培训体系“落地生根”、解决教师培训“最后一公里”问题的关键环节。南宁市武鸣区城厢镇第三小学教育集团为全面提高教师专业素质、推动教育资源共享、促进教育优质均衡发展,在集团化办学实践中探索出一条校本研修的新路子——“133”校本研修,形成了系统化、可持续、可操作、可复制的教师队伍发展模式。