长链非编码RNANEAT1对HaCaT细胞中miR-485-5p和STAT3表达的影响

目的:探讨LncRNA NEAT1对HaCaT细胞中miR-485-5p和STAT3表达的调控及对HaCaT细胞增殖、凋亡的影响。方法:采用PCR、Western印迹法检测HaCat细胞和正常人表皮角质形成细胞(NHEK细胞)中LncRNANEAT1、miR-485-5p及STAT3 mRNA和蛋白表达情况。荧光原位杂交技术(FISH)和双荧光素酶报告基因检测LncRNA NEAT1、miR-485-5p和STAT3之间的靶向调控关系。再通过RNA干扰技术分别沉默HaCat细胞中LncRNANEAT1、STAT3表达,以及转染miR-485-5p模拟剂(mimic)和抑制剂(inhibitor)分别上、下调miR-485-5p,然后应用PCR、Western Blot、流式细胞术、CCK8等实验技术分别检测LncRNANEAT1、miR-485-5p、STAT3表达及细胞增殖、凋亡情况。结果:与NHEK细胞组相比,LncRNA NEAT1和STAT3在HaCaT细胞组中高表达,而miR-485-5p在HaCaT细胞中低表达;miR-485-5p与LncRNA NEAT1共定位于HaCaT细胞质,且miR-485-5p与LncRNA NEAT1 3′-UTR、STAT3 3′-UTR之间存在互补结合序列;共转染转野生型psiCHECK-LncRNA NEAT1-3′UTR-WT、psiCHECK-STAT3-3′UTR-WT重组质粒时,miR-485-5pmimic组相对萤光素酶活性明显低于miR-NC组。而共转染突变型psiCHECK-LncRNANEAT1-3′UTR-MUT、psiCHECK-STAT3-3′UTR-MUT重组载体质粒时,miR-485-5p mimic组和miR-NC组萤光素酶活性无明显差异;沉默LncRNA NEAT1或STAT3均可抑制HaCaT细胞增殖及促进其凋亡;下调miR-485-5p可促进HaCaT细胞增殖及抑制其凋亡,而上调miR-485-5p则与之相反;下调miR-485-5p可减弱沉默LncRNANEAT1对HaCaT细胞功能的影响。结论:LncRNANEAT1可通过充当竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)吸附miR-485-5p增强STAT3表达来促进HaCaT细胞增殖并抑制其凋亡。

弥散加权成像参数联合血清LncRNA-NEAT1、miR-182-5p对脑胶质瘤术前分级的评估价值

目的:探讨弥散加权成像(DWI)参数联合血清长链非编码核糖核酸-核富集丰富转录本1(LncRNA-NEAT1)、microRNA(miR)-182-5p对脑胶质瘤术前分级的评估价值。方法:112例脑胶质瘤患者根据术后病理分级将其分为低级别组(60例)和高级别组(52例)。术前所有患者接受DWI检查获得表观弥散系数(ADC)、相对ADC(r ADC)参数。检测脑胶质瘤患者的血清LncRNA-NEAT1、miR-182-5p表达。受试者工作特征(ROC)曲线分析DWI参数联合血清LncRNA-NEAT1、miR-182-5p诊断脑胶质瘤术前分级的价值。结果:高级别组ADC、r ADC值低于低级别组(P<0.05),血清LncRNA-NEAT1、miR-182-5p高于低级别组(P<0.05)。ADC、r ADC、LncRNA-NEAT1、miR-182-5p诊断脑胶质瘤术前高分级的曲线下面积(AUC)分别为0.834(95%CI:0.756~0.896)、0.840(95%CI:0.762~0.900)、0.784(95%CI:0.700~0.853)、0.812(95%CI:0.731~0.878),联合诊断AUC为0.959(95%CI:0.907~0.987),高于单独指标诊断。结论:高级别脑胶质瘤患者ADC、r ADC降低,血清LncRNA-NEAT1、miR-182-5p升高,联合DWI参数(ADC、r ADC)和血清LncRNA-NEAT1、miR-182-5p检测对脑胶质瘤术前分级具有较高的诊断价值。