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Effect of all-trans retinoic acid on drug sensitivity and expression of survivin in LoVo cells 被引量:9
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作者 WEI Hong-bo HU Bao-guang +3 位作者 HAN Xiao-yan ZHENG Zong-heng WEI Bo HUANG Jiang-long 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2008年第4期331-335,共5页
Background All-trans retinoic acid (ATRA) can influence the tumor cell proliferation cycle, and some chemotherapeutic drugs are cycle specific. In this study, we hypothesize that ATRA can enhance chemotherapeutic dr... Background All-trans retinoic acid (ATRA) can influence the tumor cell proliferation cycle, and some chemotherapeutic drugs are cycle specific. In this study, we hypothesize that ATRA can enhance chemotherapeutic drug sensitivity by affecting the cell cycle of tumor cells.Methods The cell cycle of LoVo cells was evaluated using flow cytometry (FCM). Cell viability was analyzed using the MTT assay. The morphologic changes in the treated LoVo cells were measured with acridine orange (AO)/ethidium bromide (EB) staining. Expression of survivin in LoVo cells was analyzed by immunofluorescence assay.Results After LoVo cells were treated with ATRA, the G0/G1 ratio of the tumor cells increased and the cell ratio of S-and G2/M-phase decreased. Viability of the cells decreased significantly after combined treatment with ATRA and 5-fluorouracil (5-FU) or mitomycin c (MMC) and was evaluated by fluorescence microscopy. Expression level of survivin in the tumor cells decreased after ATRA combination treatment.Conclusions ATRA enhances drug sensitivity of the LoVo cell line to cell cycle-specific agents and inhibits the expression of survivin in LoVo cells. The combination of ATRA and 5-FU or MMC promoted cell apoptosis, and the mechanism involved in apoptosis may be related to inhibition of survivin gene expression. 展开更多
关键词 all-trans retinoic acid lovo cells drug sensitivity SURVIVIN
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LASP1基因对人结直肠癌LOVO细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制
2
作者 徐益平 尚韬 《肿瘤防治研究》 CAS 2023年第10期955-959,共5页
目的探讨LASP1基因表达对人结肠癌(LOVO)细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响及其作用机制。方法分别构建LASP1过表达质粒和LASP1干扰质粒转染LOVO细胞,qRT-PCR验证LASP1mRNA转染结果。MTT法、Tunel染色分别检测细胞增殖活性和细胞的凋亡... 目的探讨LASP1基因表达对人结肠癌(LOVO)细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响及其作用机制。方法分别构建LASP1过表达质粒和LASP1干扰质粒转染LOVO细胞,qRT-PCR验证LASP1mRNA转染结果。MTT法、Tunel染色分别检测细胞增殖活性和细胞的凋亡情况,细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。Westernblot测定细胞LASP1、p-FAK/FAK、p-AKT/AKT蛋白表达。结果质粒转染成功。LASP1过表达的LOVO细胞的增殖、迁移和侵袭能力增加,细胞凋亡率降低,细胞中LASP1、p-FAK/FAK、p-AKT/AKT蛋白表达升高(P<0.01)。而敲减LOVO细胞中LASP1的表达后,细胞增殖、迁移和侵袭能力减弱,细胞凋亡率增加,细胞中LASP1、p-FAK/FAK、p-AKT/AKT蛋白表达降低(P<0.01)。结论LASP1可正向调控FAK/AKT信号通路,促进LOVO细胞的增殖、迁移以及侵袭能力。 展开更多
关键词 结直肠癌 lovo细胞 LASP1基因 转移 侵袭 FAK/AKT信号通路
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丹参酚酸B通过抑制ROS对大肠癌LOVO细胞侵袭与迁移的作用
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作者 郭飘婷 汪鑫 《中医药学报》 CAS 2023年第9期23-28,共6页
目的:验证丹参酚酸B(SalB)通过上调细胞内活性氧(ROS)含量抑制LOVO细胞侵袭与迁移以及SalB对LOVO细胞侵袭和迁移的量效相关性调控。方法:体外培养人大肠癌LOVO细胞,并将其分成6组,Control组、SalB-L组、SalB-M组、SalB-H组、H_(2)O_(2)... 目的:验证丹参酚酸B(SalB)通过上调细胞内活性氧(ROS)含量抑制LOVO细胞侵袭与迁移以及SalB对LOVO细胞侵袭和迁移的量效相关性调控。方法:体外培养人大肠癌LOVO细胞,并将其分成6组,Control组、SalB-L组、SalB-M组、SalB-H组、H_(2)O_(2)组和SalB-M+NAC组,进行分组干预。显微镜下观察LOVO细胞形态,采用流式细胞术测定细胞内ROS浓度,Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力。结果:显微镜下可见,SalB干预后LOVO细胞生长抑制、细胞伪足变短或消失;低浓度SalB对LOVO细胞内ROS含量无影响(P>0.05),中、高浓度SalB浓度依赖性促进细胞内ROS生成(P<0.01),中浓度SalB诱导产生的ROS可被ROS清除剂NAC完全清除(P<0.01);低浓度SalB对LOVO细胞侵袭、迁移能力无影响(P>0.05),中、高浓度SalB可浓度依赖性抑制LOVO细胞侵袭、迁移(P<0.01),中浓度SalB对细胞侵袭、迁移的抑制作用可被NAC完全逆转(P<0.01)。结论:SalB可通过上调细胞内ROS浓度量效相关性抑制大肠癌LOVO细胞侵袭和迁移。 展开更多
关键词 丹参酚酸B 活性氧 大肠癌 lovo细胞 侵袭 迁移
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大黄酸对LoVo细胞水通道蛋白4表达的调节效应 被引量:16
4
作者 张文生 李锋 +4 位作者 鲍军强 王胜春 尚刚伟 李军昌 王长海 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期702-706,共5页
目的:探讨大黄酸对体外培养LoVo细胞水通道蛋白4(AQP4)的调节效应。方法:体外培养LoVo细胞并予不同浓度大黄酸含药培养液处理24 h及大黄酸含药培养液(20 mg/L)处理不同时间,其中不同浓度分为大黄酸高(40 mg/L)、中(20 mg/L)、低(10 mg/L... 目的:探讨大黄酸对体外培养LoVo细胞水通道蛋白4(AQP4)的调节效应。方法:体外培养LoVo细胞并予不同浓度大黄酸含药培养液处理24 h及大黄酸含药培养液(20 mg/L)处理不同时间,其中不同浓度分为大黄酸高(40 mg/L)、中(20 mg/L)、低(10 mg/L)剂量组和正常对照组;不同作用时间分为3、6、12、24、48 h组和正常对照组。采用免疫细胞化学方法观察LoVo细胞AQP4蛋白表达定位,采用Western blotting及半定量RT-PCR检测AQP4蛋白及mRNA的表达。结果:AQP4主要表达于LoVo细胞的细胞膜上,在细胞浆也有少量表达。随着大黄酸用药剂量增加,AQP4表达持续下降;大黄酸低剂量组与正常对照组比较,AQP4表达下降但无显著性差异;大黄酸中、高剂量组,AQP4表达则呈显著性下降。在时间效应方面,大黄酸3、6 h组AQP4表达无显著性下降,但在12、24、48 h组则显著下降;同时研究发现,AQP4表达下降的程度与大黄酸剂量及大黄酸作用时间均存在相关性。结论:大黄酸可抑制LoVo细胞AQP4基因转录与翻译,提示大黄酸对AQP4表达的调节可能与大黄的泻下作用有关。 展开更多
关键词 大黄酸 lovo细胞系 水通道蛋白4 药理作用
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大黄素对LoVo细胞水通道蛋白2表达的调节效应 被引量:18
5
作者 张文生 李锋 +4 位作者 鲍军强 王胜春 尚刚伟 李军昌 王长海 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期718-723,共6页
目的探讨大黄素对体外培养LoVo细胞水通道蛋白2(aquaporin 2,AQP2)表达的调节效应。方法体外培养LoVo细胞并予不同质量浓度大黄素含药培养液24 h处理及大黄素含药培养液(20 mg/L)不同时间处理,采用免疫细胞化学方法观察LoVo细胞AQP2蛋... 目的探讨大黄素对体外培养LoVo细胞水通道蛋白2(aquaporin 2,AQP2)表达的调节效应。方法体外培养LoVo细胞并予不同质量浓度大黄素含药培养液24 h处理及大黄素含药培养液(20 mg/L)不同时间处理,采用免疫细胞化学方法观察LoVo细胞AQP2蛋白表达位置并初步观察AQP2蛋白表达的变化趋势,采用Western blotting及半定量RT-PCR检测AQP2蛋白及mRNA的表达。结果AQP2表达于LoVo细胞的细胞膜,且与大黄素用药浓度及用药时间存在着相关性。进一步的Western blotting证实,不同质量浓度大黄素含药培养液均可抑制AQP2蛋白的表达,药物质量浓度愈大,AQP2蛋白的表达愈低,其中大黄素20 mg/L组及40 mg/L组AQP2蛋白表达显著性降低;大黄素作用3、6 h组,AQP2蛋白表达上升,但与对照组比较,无显著差异;作用12、24、48 h组,AQP2蛋白表达呈进行性下降趋势。半定量RT-PCR结果显示,随着大黄素质量浓度的增加,AQP2 mRNA表达呈进行性下降趋势;在时间-效应方面,随着用药时间的延长,AQP2 mRNA表达呈进行性下降趋势。结论大黄素可抑制LoVo细胞AQP2基因转录与翻译,这提示大黄素对AQP2表达的调节效应可能与大黄的泻下作用有关。 展开更多
关键词 大黄素 lovo细胞系 水通道蛋白2
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钩吻素子体外诱导人结肠腺癌LoVo细胞凋亡的实验研究 被引量:24
6
作者 迟德彪 雷林生 +2 位作者 金宏 庞建新 蒋毅萍 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第9期911-913,共3页
目的探讨钩吻素子(Kou)体外能否诱导LoVo细胞凋亡。方法以Kou(50 μmol/L)作用于LoVo细胞,经光镜、电镜和荧光显微镜观察细胞凋亡情况,并用流式细胞仪检测细胞增殖周期状态。结果通过光镜、电镜和荧光显微镜观察均证实Kou可诱导LoVo细... 目的探讨钩吻素子(Kou)体外能否诱导LoVo细胞凋亡。方法以Kou(50 μmol/L)作用于LoVo细胞,经光镜、电镜和荧光显微镜观察细胞凋亡情况,并用流式细胞仪检测细胞增殖周期状态。结果通过光镜、电镜和荧光显微镜观察均证实Kou可诱导LoVo细胞凋亡,且凋亡百分率随Kou作用时间的延长而升高。经Kou作用后的肿瘤细胞,细胞周期状态发生明显变化,G0/G1期细胞从31.3%上升到42.3%,S期细胞从62.0%下降到38.7%。结论Kou可诱导LoVo细胞凋亡,且存在时间依赖关系,Kou可抑制细胞DNA的合成,阻止细胞由G1期向S期转化。 展开更多
关键词 结肠腺癌 钩吻素子 体外诱导 lovo细胞 细胞凋亡 实验研究
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大黄蒽醌衍生物对大鼠结肠及LoVo细胞水通道蛋白4表达的调节效应 被引量:19
7
作者 张文生 李锋 +4 位作者 鲍军强 王胜春 尚刚伟 李军昌 王长海 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期818-823,共6页
目的探讨大黄总蒽醌对SD大鼠的泻下效应及对结肠水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)表达的影响及大黄酸、大黄素对体外培养LoVo细胞AQP4的调节效应。方法雄性SD大鼠24只随机分为正常对照组、大黄总蒽醌泻下剂量组及高剂量组,分别予大黄总蒽... 目的探讨大黄总蒽醌对SD大鼠的泻下效应及对结肠水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)表达的影响及大黄酸、大黄素对体外培养LoVo细胞AQP4的调节效应。方法雄性SD大鼠24只随机分为正常对照组、大黄总蒽醌泻下剂量组及高剂量组,分别予大黄总蒽醌悬液或蒸馏水灌胃5天,观察大鼠结肠粪便含水量;应用Western blot、RT-PCR方法观察其近端结肠AQP4表达的变化。体外培养LoVo细胞并予不同浓度大黄酸/大黄素含药培养液作用24 h及大黄酸/大黄素含药培养液(20 mg/L)不同时间作用,采用Western blot及RT-PCR检测AQP4蛋白及mRNA的表达。结果大黄总蒽醌泻下剂量组及高剂量组作用后,大鼠结肠内粪便含水量明显增加,同时其近端结肠AQP4表达降低且表现为量效关系。大黄酸/大黄素能够显著下调体外培养LoVo细胞的AQP4蛋白及mRNA表达,且表现为剂量-效应及时间-效应关系。结论大黄总蒽醌在发挥泻下作用的同时,能够有效下调大鼠近端结肠AQP4的表达;大黄酸、大黄素可抑制体外培养Lo- Vo细胞AQP4的表达,可能是大黄泻下作用机制之一。 展开更多
关键词 大黄蒽醌衍生物 大黄总蒽醌 大黄酸 大黄素 近端结肠 泻下作用 lovo细胞系 水通道蛋白4
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大蒜素对结肠癌LoVo细胞增殖的影响 被引量:17
8
作者 刘扬清 高勇 +4 位作者 万一元 易竹筠 惠红霞 徐丽娟 刘华 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2009年第2期139-143,共5页
目的:观察大蒜素对结肠癌细胞LoVo生长、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法:不同浓度的大蒜素作用于体外培养的LoVo细胞,倒置显微镜下观察LoVo细胞的形态学变化,采用MTT法检测大蒜素对LoVo细胞增殖抑制能力,An-nexinV-FITC标记流式细胞术... 目的:观察大蒜素对结肠癌细胞LoVo生长、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法:不同浓度的大蒜素作用于体外培养的LoVo细胞,倒置显微镜下观察LoVo细胞的形态学变化,采用MTT法检测大蒜素对LoVo细胞增殖抑制能力,An-nexinV-FITC标记流式细胞术检测大蒜素对LoVo细胞的凋亡抑制率,流式细胞术检测大蒜素对LoVo细胞周期影响。结果:大蒜素可抑制人结肠癌LoVo细胞增殖,具有明显量效和时间依赖性,24、48和72h大蒜素抑制LoVo细胞的IC50分别为32.23、10.74和6.58μg/ml;大蒜素能够诱导LoVo细胞凋亡,作用24h其诱导凋亡率随着药物浓度的递增具有增高趋势,作用48h其诱导凋亡作用峰值浓度为8μg/ml,后再继续增加浓度凋亡率反而下降;大蒜素作用LoVo细胞24h后,大蒜素浓度低于4μg/ml时,LoVo细胞周期被阻滞于G2/M;而高于4μg/ml时,细胞周期被阻滞于G2/M和G1期。结论:大蒜素能够诱导LoVo细胞凋亡,阻滞细胞周期,抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 大蒜素 结肠癌 lovo细胞株 细胞增殖 凋亡
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犀黄丸对大肠癌LoVo细胞基质金属蛋白酶2,9蛋白表达的影响 被引量:13
9
作者 孙莉娜 孟静岩 +4 位作者 王威 应森林 李丹 马佐英 贾彦焘 《天津中医药》 CAS 2012年第4期378-380,共3页
[目的]研究犀黄丸含药血清对大肠癌LoVo细胞中基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,MMP-9)表达的影响及意义。[方法]应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测犀黄丸含药血清作用下LoVo细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平。[结果]在犀黄丸... [目的]研究犀黄丸含药血清对大肠癌LoVo细胞中基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,MMP-9)表达的影响及意义。[方法]应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测犀黄丸含药血清作用下LoVo细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平。[结果]在犀黄丸含药血清的干预下,LoVo细胞中MMP-2、MMP-9的蛋白分泌水平与空白对照组比较明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]犀黄丸可能通过抑制MMP-2和MMP-9的蛋白表达,达到抑制大肠癌转移的作用。 展开更多
关键词 lovo细胞 犀黄丸 含药血清 基质金属蛋白酶-2 9
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放线菌酮和TNFα协同诱导Lovo细胞凋亡 被引量:16
10
作者 梁卫江 黄卓垣 +1 位作者 丁彦青 张万岱 《世界华人消化杂志》 CAS 1999年第4期326-328,共3页
目的探索放线菌酮和TNFα协同诱导人大肠癌Lovo细胞凋亡的发生规律.方法用细胞体外培养方法,以放线菌酮和TNFα均小剂量作用于人大肠癌Lovo细胞,经Hoechst33258荧光染色,光镜观察形态改变,并用流式细胞... 目的探索放线菌酮和TNFα协同诱导人大肠癌Lovo细胞凋亡的发生规律.方法用细胞体外培养方法,以放线菌酮和TNFα均小剂量作用于人大肠癌Lovo细胞,经Hoechst33258荧光染色,光镜观察形态改变,并用流式细胞术检测DNA断裂情况.结果单用TNFα5×105U/L或放线菌酮4mg/L,均未引起Lovo细胞凋亡效应.而两者协同,随作用12h~48h,Lovo细胞渐出现明显的凋亡形态学改变和DNA断裂.结论小剂量的放线菌酮和TNFα协同作用于人大肠癌Lovo细胞,出现明显的凋亡效应. 展开更多
关键词 放线菌酮 TNFΑ 大肠肿瘤 lovo细胞 细胞凋亡
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三氧化二砷诱导人结肠癌LoVo细胞凋亡的细胞生物学研究 被引量:8
11
作者 魏晓莹 郑杰 +1 位作者 张东生 张建民 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2001年第6期508-511,共4页
目的 :观察三氧化二砷 (As2 O3 )对结肠癌LoVo细胞体外生长的影响。方法 :选用不同剂量As2 O3 处理LoVo细胞后 ,通过光镜、电镜、MTT法、AO/EB荧光染色法和流式细胞术研究As2 O3 对LoVo细胞生长的影响。结果 :As2 O3 具有抑制Lo Vo细胞... 目的 :观察三氧化二砷 (As2 O3 )对结肠癌LoVo细胞体外生长的影响。方法 :选用不同剂量As2 O3 处理LoVo细胞后 ,通过光镜、电镜、MTT法、AO/EB荧光染色法和流式细胞术研究As2 O3 对LoVo细胞生长的影响。结果 :As2 O3 具有抑制Lo Vo细胞生长和其凋亡的作用 ,这种作用主要在低浓度 (0 5~ 2 0 μmol/L)产生 ,而在高浓度 (5 0~ 10 0 μmol/L)可引起细胞死亡。结论 :As2 O3 有明显抑制LoVo细胞生长的作用 ,并诱导细胞凋亡 ,其作用机制尚不清楚。 展开更多
关键词 三氧化二砷 lovo细胞 细胞 凋亡 结肠肿瘤
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LHRH-PE40对LOVO细胞的靶向杀伤作用 被引量:5
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作者 吴广谋 张国利 +2 位作者 岳玉环 何畅 朱平 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期349-351,共3页
目的研究LHRH-PE40对LOVO细胞的靶向杀伤作用。方法用XTT检测LHRH-PE40对LOVO细胞的体外细胞毒性。将LOVO细胞移植于裸鼠,测定静脉注射LHRH-PE40对体内肿瘤细胞生长的抑制作用。结果LHRH-PE40对LOVO细胞细胞毒作用的半数抑制浓度为2... 目的研究LHRH-PE40对LOVO细胞的靶向杀伤作用。方法用XTT检测LHRH-PE40对LOVO细胞的体外细胞毒性。将LOVO细胞移植于裸鼠,测定静脉注射LHRH-PE40对体内肿瘤细胞生长的抑制作用。结果LHRH-PE40对LOVO细胞细胞毒作用的半数抑制浓度为2·103μg/ml,在裸鼠肿瘤模型中,LHRH-PE40剂量为150μg/kg时抑瘤率为68·49%,这种细胞毒性作用可以被LHRH(或LHRH类似物)特异性抑制。结论在体内外LHRH-PE40对LOVO细胞具有很强的细胞毒作用,其机制是LHRH-PE40通过与癌细胞膜上的LHRH受体特异结合发挥细胞杀伤作用。 展开更多
关键词 LHRH-PE40 XTT 细胞毒性 lovo细胞系
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反义DLC-1基因对结直肠癌LoVo细胞增殖和细胞周期的影响 被引量:8
13
作者 金月玲 商延芳 +2 位作者 田小强 方媛 黄培林 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期493-496,共4页
目的应用核糖核酸干扰(RNAi)技术,通过对大肠癌细胞株LoVo中DLC-1基因mRNA表达的抑制,初步探讨DLC-1基因对大肠癌细胞株的生物学行为影响。方法构建DCL-1的RNAi重组体pGCsiDLC,转染大肠癌LoVo细胞株。采用RT-PCR观察转染前后细胞株中DLC... 目的应用核糖核酸干扰(RNAi)技术,通过对大肠癌细胞株LoVo中DLC-1基因mRNA表达的抑制,初步探讨DLC-1基因对大肠癌细胞株的生物学行为影响。方法构建DCL-1的RNAi重组体pGCsiDLC,转染大肠癌LoVo细胞株。采用RT-PCR观察转染前后细胞株中DLC-1 mRNA以及Bax、Bcl-2基因表达的改变,MTT比色法检测转染前后细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期。结果成功构建发卡siRNA真核表达载体pGCsiDLC;pGCsiDLC转染LoVo细胞后,电泳显示DLC-1 mRNA表达水平明显下降;LoVo细胞生长曲线增长幅度亦随时间的增加而逐渐增高,在48h最为明显,RNAi组细胞比脂质体组及空白对照组细胞增殖明显增高(P<0.05);干扰后的LoVo细胞株G0/G1期发生阻滞,而G2/M期细胞数量分布减少。而Bax和bcl-2基因表达在干扰前后未见明显改变。结论成功构建载体介导的DLC-1靶向RNAi重组体可有效抑制LoVo细胞DLC-1 mRNA表达;DLC-1基因可抑制结直肠癌细胞增殖并且对细胞周期重新分布,其可能与结直肠癌的发生发展有一定关系,可能是一个新的抑癌基因。 展开更多
关键词 核糖核酸干扰 DLC-1基因 lovo细胞株 结直肠癌
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Akt shRNA载体的构建及其对结肠癌细胞株Lovo Akt基因表达的抑制作用 被引量:5
14
作者 黄宪章 赵学芹 +2 位作者 李曼 何敏 庄俊华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1914-1917,共4页
目的构建靶向人Akt基因的shRNA真核表达载体,通过RNAi下调Akt基因在结肠癌Lovo细胞系中的表达,观察对结肠癌细胞生长的影响。方法将靶向人Akt基因的两条shRNA(Akt1-U6-1#;Akt1-U6-2#)表达序列克隆到入门载体pENTRTM/U6的黏性末端,测序... 目的构建靶向人Akt基因的shRNA真核表达载体,通过RNAi下调Akt基因在结肠癌Lovo细胞系中的表达,观察对结肠癌细胞生长的影响。方法将靶向人Akt基因的两条shRNA(Akt1-U6-1#;Akt1-U6-2#)表达序列克隆到入门载体pENTRTM/U6的黏性末端,测序鉴定后与目的表达载体Plentio/Block-iT DEST Vector进行LR位点特异性重组;分别将入门载体与目的表达载体转染入Lovo细胞,对细胞株行RT-PCR和Western blotting检测,观察siRNA对靶基因Akt的抑制效果。结果 DNA测序证实pENTRTM/U6-TF-shRNA入门载体和Plentio/Block-iT DEST目的表达载体为阳性克隆,转染Lovo细胞后,Akt基因在mRNA和蛋白水平的表达量受到明显抑制。结论成功构建了靶向人Akt的shRNA表达载体,且该载体在体外能有效抑制Lovo细胞Akt基因表达,为进一步研究Akt的功能和肿瘤的基因治疗奠定了实验基础。 展开更多
关键词 蛋白激酶B SHRNA 表达载体 结肠癌细胞
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重组苦瓜MAP30蛋白对大肠癌LoVo细胞凋亡的影响 被引量:4
15
作者 樊剑鸣 张晓峰 +2 位作者 张巧 姚武 徐玉宝 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第1期116-119,共4页
目的:克隆及重组苦瓜蛋白MAP30,观察MAP30对大肠癌LoVo细胞凋亡的影响。方法:RT-PCR法克隆MAP30基因的cDNA序列,并表达、纯化MAP30蛋白;MTT法测定纯化的MAP30蛋白对LoVo细胞的生长抑制作用;彗星实验观察MAP30引起凋亡的LoVo细胞基因组... 目的:克隆及重组苦瓜蛋白MAP30,观察MAP30对大肠癌LoVo细胞凋亡的影响。方法:RT-PCR法克隆MAP30基因的cDNA序列,并表达、纯化MAP30蛋白;MTT法测定纯化的MAP30蛋白对LoVo细胞的生长抑制作用;彗星实验观察MAP30引起凋亡的LoVo细胞基因组的降解情况。结果:成功克隆了苦瓜蛋白MAP30基因;MAP30蛋白对LoVo细胞体外生长具有抑制作用;MAP30蛋白对LoVo细胞半数抑制质量浓度(IC50)为70.0mg/L。MAP30在体外能诱导LoVo细胞凋亡。结论:重组的苦瓜MAP30蛋白在体外能抑制LoVo细胞生长,并能诱导其凋亡。 展开更多
关键词 苦瓜蛋白MAP30 大肠肿瘤 lovo细胞 细胞生长抑制率 凋亡
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enmein、serrin B、nodosin和lasiodonin对HL60细胞株和LOVO细胞株的增殖抑制作用 被引量:10
16
作者 海广范 闫琰 +1 位作者 刘巨源 杨锦南 《新乡医学院学报》 CAS 2008年第6期564-566,共3页
目的研究enmein、serrin B、nodosin和lasiodonin对HL60细胞株和LOVO细胞株的增殖抑制活性。方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法筛选enmein、serrin B、nodosin和lasiodonin对HL60细胞株和LOVO细胞株的细胞毒活性。结果enmein、serrin B、no... 目的研究enmein、serrin B、nodosin和lasiodonin对HL60细胞株和LOVO细胞株的增殖抑制活性。方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法筛选enmein、serrin B、nodosin和lasiodonin对HL60细胞株和LOVO细胞株的细胞毒活性。结果enmein、serrin B、nodosin和lasiodonin对HL60细胞株和LOVO细胞株都有一定程度的抑制作用,其抑制活性呈现剂量-效应关系,其中以serrin B和nodosin效果较为显著。结论enmein、serrin B、nodosin和lasiodonin是中药溪黄草拮抗白血病和结肠癌的有效成分,溪黄草具有一定的防治白血病和结肠癌的作用。 展开更多
关键词 溪黄草 HL60细胞 lovo细胞
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23-羟基白桦酸诱导LoVo细胞凋亡与线粒体膜电位的变化 被引量:5
17
作者 程燕 叶文才 +2 位作者 石俊敏 姚新生 栗原博 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期350-353,共4页
目的探讨23-羟基白桦酸对人结肠癌细胞株LoVo细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法检测23-羟基白桦酸对LoVo细胞的增殖抑制作用。Hoechst染色、流式细胞仪检测细胞凋亡及线粒体膜电位的变化。结果23-羟基白桦酸能抑制LoVo细胞的增殖,其... 目的探讨23-羟基白桦酸对人结肠癌细胞株LoVo细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法检测23-羟基白桦酸对LoVo细胞的增殖抑制作用。Hoechst染色、流式细胞仪检测细胞凋亡及线粒体膜电位的变化。结果23-羟基白桦酸能抑制LoVo细胞的增殖,其作用呈明显的时间和剂量依赖性。Hoechst33258染色显示细胞凋亡特征。23-羟基白桦酸25、50、100及200μmol·L-1作用LoVo细胞48h后,其凋亡率分别为11.32%±0.92%、19.23%±0.78%、24.51%±5.88%及42.22%±2.32%,显示一定的剂量依赖性关系。与空白组相比,23-羟基白桦酸可明显降低LoVo细胞线粒体膜电位(P<0.01)。结论23-羟基白桦酸可抑制LoVo细胞的增殖,其机制与降低线粒体膜电位继而诱导LoVo细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 23-羟基白桦酸 lovo细胞 细胞凋亡 线粒体膜电位
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齐墩果酸诱导人结肠癌LoVo细胞凋亡作用研究 被引量:8
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作者 吴珍 王启斌 +1 位作者 陈永顺 童强 《医药导报》 CAS 2011年第2期176-180,共5页
目的研究齐墩果酸(oleanolic acid,OA)诱导人结肠癌LoVo细胞株凋亡的机制。方法应用浓度为2.00~32.00 mg.L-1OA作用于人结肠癌LoVo细胞12~96 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测OA对LoVo细胞的抑制作用,采用流式细胞术、Western blot印迹法... 目的研究齐墩果酸(oleanolic acid,OA)诱导人结肠癌LoVo细胞株凋亡的机制。方法应用浓度为2.00~32.00 mg.L-1OA作用于人结肠癌LoVo细胞12~96 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测OA对LoVo细胞的抑制作用,采用流式细胞术、Western blot印迹法等检测细胞周期变化、凋亡及Bcl-2、Bax、p53、Caspase-3蛋白表达,在光镜及电镜下观察细胞形态学变化。结果 OA呈时间-剂量依赖性抑制LoVo细胞增殖,能诱导LoVo细胞凋亡及阻滞细胞于G2/M期,OA作用LoVo细胞48 h后,各组的细胞凋亡率为10.32%~14.24%(P〈0.05),并出现Bcl-2蛋白表达抑制,p53、Bax及Caspase-3活性增强。结论 OA可以促进人结肠癌LoVo细胞凋亡,其促凋亡机制与抑制Bcl-2表达及促进p53、Bax及Caspase-3表达有关。 展开更多
关键词 齐墩果酸 lovo细胞 细胞凋亡
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23-羟基白桦酸诱导LoVo细胞凋亡与细胞内活性氧的关系 被引量:5
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作者 程燕 叶文才 +4 位作者 石俊敏 张坤 吕艳青 姚新生 栗原博 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期772-775,共4页
目的:研究23-羟基白桦酸诱导人结肠癌细胞株LoVo细胞凋亡过程中活性氧(ROS)的变化及其作用机制。方法:光学显微镜法观察23-羟基白桦酸作用LoVo细胞后细胞形态学改变,并采用流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞内ROS水平。结果:分别以浓度为25... 目的:研究23-羟基白桦酸诱导人结肠癌细胞株LoVo细胞凋亡过程中活性氧(ROS)的变化及其作用机制。方法:光学显微镜法观察23-羟基白桦酸作用LoVo细胞后细胞形态学改变,并采用流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞内ROS水平。结果:分别以浓度为25、50、100、200μmol/L 23-羟基白桦酸作用LoVo细胞48h后,在光学显微镜下观察到明显的凋亡细胞形态学改变;经流式细胞仪检测,细胞凋亡率分别为(7.17±2.31)%、(15.60±4.02)%、(32.47±5.25)%及(52.71±5.93)%,呈现一定的浓度依赖性关系。23-羟基白桦酸可使LoVo细胞内ROS的水平明显高于空白对照组。细胞内ROS含量(MFI,平均荧光强度)分别为2.83±0.80、5.97±1.72、12.53±2.57及16.73±4.58。其中,浓度为100和200μmol/L 23-羟基白桦酸的作用较明显,与对照组(2.13±0.32)比有显著差异(P<0.05)。结论:23-羟基白桦酸具有明显的诱导LoVo细胞凋亡作用,其作用机制可能与23-羟基白桦酸引起细胞内ROS水平增加有关。 展开更多
关键词 23-羟基白桦酸 lovo细胞 细胞凋亡 活性氧
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大黄酚对LoVo细胞AQP2表达的调节效应 被引量:5
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作者 刘青 李锋 +4 位作者 任秦有 王新 王文 王长海 杜永平 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第9期849-852,共4页
目的:探讨大黄酚对体外培养LoVo细胞AQP2表达的调节效应.方法:体外培养LoVo细胞,随机分为对照组,大黄酚10,20,40mg/L不同浓度组.间接免疫荧光定性LoVo细胞AQP2表达,WesternBlot、半定量RT-PCR检测药物处理24h后AQP2蛋白及mRNA表达.体外... 目的:探讨大黄酚对体外培养LoVo细胞AQP2表达的调节效应.方法:体外培养LoVo细胞,随机分为对照组,大黄酚10,20,40mg/L不同浓度组.间接免疫荧光定性LoVo细胞AQP2表达,WesternBlot、半定量RT-PCR检测药物处理24h后AQP2蛋白及mRNA表达.体外培养LoVo细胞后,随机又将细胞分为对照组,大黄酚40mg/L组,PKA激动剂8-Bromo-cAMP10mg/L组,大黄酚40mg/L+PKA激动剂8-Bro-mo-cAMP10mg/L组.非放射性法检测药物处理24h后LoVo细胞PKA的活性水平.结果:AQP2表达于LoVo细胞膜,药物处理24h后,大黄酚20,40mg/L组AQP2蛋白分别为(0.64±0.08),(0.46±0.09)显著低于对照组(0.83±0.05),(P<0.01);AQP2mRNA分别为(0.50±0.12),(0.39±0.09),显著低于对照组(0.73±0.08),(P<0.01).40mg/L大黄酚组PKA活性(0.54±0.08)显著低于对照组(0.78±0.10),(P<0.05).结论:大黄酚可抑制LoVo细胞AQP2基因转录与翻译.大黄酚对AQP2表达的调节效应可能与大黄泻下作用有关,其可能是通过PKA信号通路调节AQP2的表达. 展开更多
关键词 大黄酚 lovo细胞系 水通道蛋白2 药理作用
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