过表达lncRNA HAGLR促胫骨骨折大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的机制研究

目的研究骨质疏松(OP)-胫骨骨折(TF)大鼠长链非编码RNA同源盒D基因簇反义生长相关长链非编码RNA(lncRNA HAGLR)与其下游靶基因的表达情况,并探讨lncRNA HAGLR对大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)成骨分化的作用与机制。方法30只SD雌性大鼠随机分为sham组、OP组、OP-TF组,每组10只。ELISA法检测大鼠血清碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的水平。对大鼠MSC细胞系R7500使用成骨分化诱导培养基进行诱导,并分为MSC组和成骨诱导组(Osteogenic-MSC组)。分别转染pcDNA-HAGLR、pcDNA-NC、miR-19a-3p的模拟物(miR-19a-3p mimic)、mimic的阴性对照(NC mimic)、miR-19a-3p的抑制剂(miR-19a-3p inhibitor)、miR-19a-3p inhibitor的阴性对照(NC inhibitor)至R7500后进行相应分组。双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA HAGLR和miR-19a-3p以及骨形态发生蛋白2(BMP2)和miR-19a-3p的靶向关系。qRT-PCR检测各组lncRNA HAGLR和miR-19a-3p的表达。Western blot检测BMP2、ALP、胶原蛋白I(COL-I)、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)的表达。ALP染色和AR染色检测MSC的成骨分化能力。结果OP组和OP-TF组的血清ALP和TRAP水平均高于sham组,差异有统计学意义(P<0.05)。而OP组与sham组胫骨组织中lncRNA HAGLR、miR-19a-3p、BMP2的表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05),而OP-TF组胫骨组织中lncRNA HAGLR、BMP2的表达水平均明显低于sham组和OP组(P<0.05),OP-TF组胫骨组织中miR-19a-3p的表达水平高于sham组和OP组(P<0.05)。与MSC组相比,Osteogenic-MSC组的lncRNA HAGLR表达水平明显升高(P<0.05),而miR-19a-3p的表达降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验表明lncRNA HAGLR与miR-19a-3p具有靶向关系,miR-19a-3p与BMP2具有靶向关系。pcDNA-HAGLR组的miR-19a-3p的表达水平低于pcDNA-NC组(P<0.05)。miR-19a-3p mimic组与NC mimic组的lncRNA HAGLR的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与NC mimic组相比,miR-19a-3p mimic组BMP2的表达水平降低(P<0.05),miR-19a-3p表达水平升高(P<0.05)。pcDNA-HAGLR组细胞较pcDNA-NC组具有更强的成骨分化能力和更高的ALP活性(P<0.05)。miR-19a-3p inhibitor组细胞较NC inhibitor组具有更强的成骨分化能力和更高的ALP活性(P<0.05)。结论胫骨骨折大鼠lncRNA HAGLR和BMP2表达降低,miR-19a-3p表达增高。过表达lncRNA HAGLR通过靶向调控miR-19a-3p/BMP2轴促进大鼠MSC的成骨分化。

沙利度胺联合常规化疗治疗急性髓细胞白血病的效果

目的探讨沙利度胺联合常规化疗治疗急性髓细胞白血病(AML)的效果。方法选取我院2013年1~12月明确诊断为初发AML的患者63例,根据治疗方法将患者分为沙利度胺联合常规化疗组(联合组)35例和常规化疗组(对照组)28例。两组患者均采用DA化疗方案给予治疗4个疗程(7 d为1个疗程),同时给予联合组口服沙利度胺4个月。记录并比较两组治疗前后的血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)及骨髓微血管密度(MVD)水平变化和远期生存情况,分析其疗效和不良反应发生情况。结果联合组治疗有效率为88.57%,高于对照组的60.71%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组的VEGF、VEGFR、b FGF和MVD水平均较治疗前低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,联合组VEGF、VEGFR和MVD水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合组消化系统症状的发生率(65.71%)高于对照组(17.86%),差异有统计学意义(P<0.05),两组其他的不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论沙利度胺联合常规化疗可有效抑制AML患者体内VEGF、VEGFR的表达和生成骨髓微血管,通过抗血管生成显著提高临床疗效,但对患者的远期生存率无显著影响。

浓缩生长因子在口腔修复中的应用效果评价

目的 :探讨浓缩生长因子(concentrated growth factor,CGF)在口腔修复中的临床效果。方法 :选取2013年2月—2016年2月在我院就诊的种植区骨量不足患者60例,其中,单独使用CGF患者27例(CGF组),使用CGF与自体骨或骨材料混合患者33例(CGF混合组),观察2组的骨修复情况。采用SPSS19.0软件包对数据进行统计学处理。结果:CGF组和CGF混合组伤口愈合时间分别为(8.43±0.72)d和(8.04±0.98)d,伤口一期愈合率分别为92.60%和90.91%,两者差异无显著性(P>0.05);CGF组和CGF混合组种植成功率均较高,分别为92.31%和96.36%,差异无显著性(P>0.05)。结论:CGF在骨缺损修复中有较好的应用效果,且远期效果稳定,是一种简单、安全的骨移植材料。

长骨骨折患者合并脊髓损伤对骨折愈合和血清血小板衍生因子、血管内皮生长因子含量的影响

目的探讨长骨骨折患者合并脊髓损伤对骨愈合的影响及血清血小板衍生因子(PDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法收集2012年8月‐2016年10月在该院治疗的长骨骨折患者,根据是否合并脊髓损伤将其分为单纯骨折组(A组,22例)和骨折合并脊髓损伤组(B组,26例)。分析A组B组之间骨折愈合比率、骨折愈合时间和骨痂最大厚度的差异,探讨脊髓损伤对骨折愈合的影响;分析骨折后血清PDGF、VEGF水平的变化。结果与A组相比,B组患者骨折愈合比率高(100%vs 77.3%),愈合时间短[(7.1±1.7)周vs(23.2±9.6)周],骨架最大厚度大[(32.3±11.2)mm vs(9.3±8.7)mm]。骨折后血清PDGF、VEGF水平B组也显著高于A组。结论长骨骨折患者合并脊髓损伤能显著加快骨折修复,生长因子PDGF、VEGF可能参与了这个过程。

急性白血病患者骨髓基质造血微环境的某些异常<英文>

为了探索人白血病骨髓造血微环境的异常所在,本实验采用胶体金标记及银增染的免疫电镜方法,检测了急性白血病患者及正常人骨髓长期培养的基质细胞某些生长因子、粘附分子及细胞外基质的表达情况。结果表明,急性白血病患者长期培养的基质细胞表达的GM-CSF(粒-巨噬系集落刺激因子)较对照组高,淋巴细胞归巢相关粘附分子(HCAM),血管内皮细胞粘附分子-1(VCAM-1)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)较对照组低,纤连蛋白(Fn)和Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)与对照组无差别。结论提示急性白血病患者骨髓长期培养的基质细胞某些生长因子和粘附分子表达异常。

孕期尼古丁暴露所致子代胎鼠长骨宫内发育迟缓

目的:通过检测孕期尼古丁暴露胎鼠长骨病理学变化和尼古丁处理后原代成骨细胞基因表达的影响,探讨尼古丁影响长骨发育的可能机制。方法:健康Wistar雌性大鼠受孕后第9天起皮下注射给予尼古丁2 mg/(kg·d),孕20d处死孕鼠收集胎骨,检测骨化中心病理学变化和基因表达;在原代成骨细胞成骨分化模型上给予不同浓度尼古丁处理7d,检测成骨和破骨分化基因表达。结果:与对照组相比,尼古丁组胎鼠股骨缩短,初级骨化中心长度缩短;尼古丁处理下调成骨细胞成骨分化基因runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(BGLAP)和骨涎蛋白(BSP)的表达,抑制破骨细胞分化因子(RANKL)表达,并呈现良好的剂量依赖关系。结论:孕期尼古丁暴露子代大鼠存在长骨发育迟缓,可能与成骨分化功能抑制有关。

C型利钠肽和长骨生长

C型利钠肽（CNP）是长骨生长重要的局部调节因子,与受体NPR-B结合后催化cGMP的合成,激活下游因子调节长骨生长.CNP信号系统的调节机制尚未完全阐明,目前已知CNP信号系统与成纤维细胞生长因子受体3（FGFR-3）信号通路存在交联对话.NPR-B基因突变的杂合子可能是引起特发性矮小的原因之一.CNP可作为线性生长的生物标记,用于生长监测及生长障碍性疾病的诊断和治疗.对CNP信号系统与长骨生长关系的深入研究,有助于为今后骨骼发育障碍疾病的药物治疗开辟新途径.