长链非编码RNA SPRY4-IT1对髓母细胞瘤增殖及侵袭转移的影响

目的:探讨长链非编码RNA SPRY4-IT1(Lnc RNA)对髓母细胞瘤增殖及侵袭转移的影响。方法:髓母细胞瘤Daoy细胞分为对照组和si-SPRY4-IT1组,分别利用脂质体Lipofectamine 2000将阴性对照荧光序列和SPRY4-IT1-si RNA转入细胞中,采用Real-time PCR检测转染后各组细胞中SPRY4-IT1的表达情况,CCK-8实验及平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化,以细胞体外侵袭、迁移实验分别检测细胞侵袭、迁移能力的变化,Western blot检测SPRY4-IT1对基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白的影响。结果:si-SPRY4-IT1组SPRY4-IT1 m RNA表达水平、细胞体外增殖能力、细胞侵袭、迁移能力、细胞MMP-2蛋白表达均较对照组明显降低(P<0.05),而MMP-9蛋白表达未见明显变化。结论:干扰长链非编码RNA SPRY4-IT1在髓母细胞瘤Daoy细胞中的表达能显著抑制细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

长链非编码RNA SPRY4-IT1在食管鳞癌中的表达及对细胞生长的影响

目的:探讨长链非编码RNA SPRY4-IT1与食管鳞状细胞癌(ESCC)的临床病理及预后的相关性,以及对细胞生长的影响。方法:收集2008年1月至2009年12月南京医科大学附属南京医院肿瘤外科50例ESCC手术切除标本(包括癌组织和癌旁组织),荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测50例ESCC中SPRY4-IT1的表达情况,分析其与临床病理及预后的关系,用小干扰RNA(siRNA)干扰SPRY4-IT1后MTT法检测其对细胞生长的影响,流式细胞检测对细胞凋亡和周期的影响。结果:45例(90%)标本中SPRY4-IT1呈阳性表达,SPRY4-IT1在癌组织中的表达量显著高于癌旁组织(t=5.377,P<0.01)。SPRY4-IT1的相对表达水平与肿瘤大小、临床分期相关(P均<0.05)。SPRY4-IT1在ESCC细胞株中表达量高于正常食管上皮细胞。KYSE30细胞中干扰SPRY4-IT1的表达后可明显减慢细胞生长,阻滞细胞周期并促进细胞凋亡(P<0.01)。结论:SPRY4-IT1在ESCC组织中显著高表达,并且能促进细胞生长,可能成为诊断和判断预后的重要分子标记物。

长链非编码RNA SPRY4-IT1对结直肠癌细胞HT-29增殖凋亡的影响及机制

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)SPRY4-IT1对结直肠癌细胞HT-29增殖、凋亡的影响及机制。方法采用qRT-PCR方法检测LncRNA SPRY4-IT1在结直肠癌细胞株(HT-29、HCT-116、SW-480、SW-620、Caco-2)和正常肠上皮细胞(FHC)的表达。选择其相对表达最高的HT-29细胞,以慢病毒载体介导构建SPRY4-IT1过表达(上调组)和干扰的(下调组)稳转细胞株,并设立无义转染组和空白对照组;qRT-PCR检测各组HT-29细胞中SPRY4-IT1 mRNA的表达量;CCK-8法检测细胞增殖活力;克隆试验检测细胞的克隆形成率;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期。Western blotting法检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达量。结果 LncRNA SPRY4-IT1在结直肠细胞株(HT-29、HCT-116、SW-480、SW-620、Caco-2)相对FHC的表达增高,以HT-29细胞株中的表达最高(P均<0.05)。相对于空白对照组、无义转染组,上调组SPRY4-IT1 mRNA表达量升高,HT-29细胞增殖活力增强,克隆形成率升高,凋亡率降低(P<0.05或<0.01);而下调组SPRY4-IT1 mRNA表达量下降,细胞增殖活力减弱,克隆形成率降低,凋亡率升高(P<0.05或<0.01);在各组细胞间,细胞周期分布比较,P均>0.05。相对于空白对照组、无义转染组,上调组细胞Bcl-2蛋白表达量增多,Bax蛋白表达量减少(P<0.05或<0.01);下调组Bcl-2蛋白表达量减少,Bax蛋白表达量增多(P均<0.01)。结论 LncRNA SPRY4-IT1可能通过促进Bcl-2表达,抑制Bax表达而促进结直肠癌细胞增殖、抑制其凋亡。

长链非编码RNASPRY4-IT1对膀胱癌生长的影响

目的研究长链非编码RNA(LncRNA)SPRY4内含子转录本1(SPRY4-IT1)对膀胱癌生长的影响。方法使用qRT-PCR法检测SPRY4-IT1标本和细胞表达水平并分析其临床病理特征之间的关联;使用特异性小干扰RNA(siSPRY4-IT1)转染两种膀胱癌细胞,使用qRT-PCR法检测siSPRY4-IT1效果,再分别以CCK-8实验、MTT实验、划痕实验、ELISA实验和流式细胞术检测SPRY4-IT1对膀胱癌细胞在增殖、迁移和凋亡等方面的影响。结果 SPRY4-IT1在膀胱癌组织中高表达(68.33%,P=0.026 3)。SPRY4-IT1表达水平与病理分级(P<0.05)和TMN分期(P<0.001)有关。SPRY4-IT1在5637(P=0.002 29)和T24(P=0.000 12)细胞中明显高表达。si-SPRY4-IT1可显著降低SPRY4-IT1表达(P<0.001);si-SPRY4-IT1可显著抑制两种细胞的增殖、迁移和增加凋亡(P<0.01)。结论 SPRY4-IT1在膀胱癌标本组织和细胞水平中高表达,有促进膀胱癌细胞生长的作用,在膀胱癌中起着癌基因的作用。

长链非编码RNA SPRY4-IT1在恶性肿瘤中的研究进展

SPRY4-IT1是转录自SPRY4基因的长度为708个核苷酸的转录产物,许多恶性肿瘤的发生、发展与其密切相关,如黑色素瘤。在这些肿瘤中,SPRY4-IT1表达量大致增高,主要通过染色体甲基化、细胞周期蛋白调控以及脂质蛋白表达途径对于肿瘤细胞增殖、转移、凋亡等过程进行调节,在转移过程中主要通过上皮细胞-间质化途径引导。同时,随着临床研究的进展,其未来有望成为潜在的肿瘤标志物。

长链非编码RNA SPRY4-IT1对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响及机制

目的:探讨长链非编码RNA SPRY4-IT1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织和细胞系中的表达水平,以及SPRY4-IT1对NSCLC细胞增殖和侵袭功能的影响及分子机制。方法:用实时定量PCR技术检测SPRY4-IT1在NSCLC组织及细胞系中的表达水平。将p CDNA-SPRY4-IT1转染SPC-A1和A549细胞,过表达SPRY4-IT1,用MTT法和克隆形成实验检测SPRY4-IT1对SPC-A1和A549细胞增殖和克隆形成能力的影响。Transwell实验评价SPRY4-IT1对细胞迁移、侵袭能力的影响。q PCR和Western blot检测过表达SPRY4-IT1对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物上皮性钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达水平的影响。结果:SPRY4-IT1的表达在NSCLC组织和细胞系中出现显著下调(P<0.01)。过表达SPRY4-IT1能降低SPC-A1细胞和A549细胞的增殖和侵袭能力。过表达SPRY4-IT1显著上调E-cadherin的水平、抑制Vimentin的表达,从而影响肿瘤细胞EMT过程。结论:长链非编码RNA SPRY4-IT1表达下调可能通过调控EMT机制促进NSCLC细胞的增殖和侵袭。

长链非编码RNASPRY4-IT1对宫颈癌细胞的生物学行为影响

目的探讨长链非编码RNA(lnc RNA)SPRY4-IT1对宫颈癌细胞增殖侵袭及迁移的影响。方法宫颈癌细胞株He La中设计并合成SPRY4-IT1 RNA片段及其转染形成的si RNA片段(si-SPRY4-IT1 RNA),q RT-PCR技术检测其沉默效率,MTT检测SPRY4-IT1 RNA片段对He La细胞的增殖影响,Transwell实验检测He La细胞的侵袭、迁移能力,研究si-SPRY4-IT1 RNA对宫颈癌细胞He La侵袭凋亡能力的影响。结果长链非编码RNA SPRY4-IT1在人宫颈癌细胞He La中的表达明显增高,si-SPRY4-IT1RNA可下调He La细胞中SPRY4-IT1的表达,并抑制宫颈癌细胞He La的增殖和侵袭迁移能力。结论 SPRY4-IT1是宫颈肿瘤的一个致癌基因,可作为新的靶向治疗目标。

IncRNASPRY4-IT1在肝癌中的作用研究

目的研究长链非编码RNASPRY4-IT1（1ncRNASPRY4-ITI）在肝细胞肝癌（HCC）中的表达，及其对肝癌细胞系HepG2恶性生物学表型的调控作用。方法收集2013年9月至2014年12月60例肝癌及癌旁组织样本，利用荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测IncRNASPRY4-IT1在肝癌组织中的表达，并检测IncRNASPRY4-IT1在人源性肝癌细胞系HepG2、HHCC、SK-HEP-1中的表达；利用小干扰RNA沉默HepG2细胞内IncRNASPRY4-IT1表达，分别进行Transwell细胞迁移、侵袭及CCK8细胞增殖实验；建立肝癌裸鼠成瘤模型，观察干扰IncRNASPRY4-IT1表达后荷瘤小鼠肿瘤生长的情况。结果比较癌旁组织，IncRNASPRY4-IT1肝癌组织中的表达显著上升（P=0．0109）；比较正常人肝细胞系L02，IncRNASPRY4-IT1在肝癌细胞系HepG2、HHCC、SK—HEP-1中表达明显升高（P均〈0．01），且在HepG2中上调尤为显著。干扰IncRNASPRY4-IT1表达后，HepG2细胞的迁移和侵袭并未受到明显影响（P〉0．05），然而其体外增殖活性受到显著抑制（P〈0．01）；荷瘤小鼠的肿瘤生长也明显受到抑制（P〈0．01）。结论长链非编码RNASPRY4-IT1在HCC中高表达，并通过促进肝癌的增殖而发挥重要的生物学功能，可能是HCC潜在的治疗靶点。

SPRY4-IT1与乳腺癌

长非编码RNA(lncRNA)是一种不编码表达蛋白质的RNA分子, 在多种肿瘤的发生、发展中发挥着重要作用。SPRY4-IT1作为一种lncRNA, 在乳腺癌组织中高表达, 可作为乳腺癌上下游调控因子, 促进乳腺癌的进展并与乳腺癌分期及预后密切相关。深入研究SPRY4-IT1与乳腺癌的相关分子机制, 可为发现乳腺癌早期诊断生物标志物、评估疾病预后和寻找靶向位点提供新的思路。

沉默长链非编码RNA SPRY4-IT1对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的探究长链非编码RNA SPRY4-IT1在宫颈癌中的表达水平及其对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法 20对宫颈癌组织和癌旁组织取自2016年2月-2017年2月到该院就诊的20例宫颈癌患者,qRT-PCR检测长链非编码RNA SPRY4-IT1在宫颈癌组织和宫颈癌HeLa细胞中的表达水平;通过小RNA干扰技术检测沉默长链非编码RNA SPRY4-IT1,CCK-8实验检测沉默长链非编码RNA SPRY4-IT1对HeLa细胞增殖能力的影响;划痕愈合实验和Transwell迁移侵袭实验检测沉默长链非编码RNA SPRY4-IT1对HeLa细胞迁移及侵袭能力的影响。结果长链非编码RNA SPRY4-IT1的表达水平在宫颈癌组织和HeLa细胞中显著高于癌旁组织和人永生化表皮细胞HaCaT,差异有统计学意义(t=3.21,P<0.01;t=4.58,P<0.001)。HeLa细胞转染si-SPRY4-IT1 48 h后,HeLa细胞的增殖能力明显降低,差异有统计学意义(t=2.75,P<0.01);迁移距离显著减少(t=4.19,P<0.001);迁移和侵袭能力明显降低,差异有统计学意义(t=3.84,P<0.001;t=3.96,P<0.001)。结论长链非编码RNA SPRY4-IT1的表达水平在宫颈癌中显著上调,沉默长链非编码RNA SPRY4-IT1抑制HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

长链非编码RNASPRY4-IT1对结肠癌细胞SW48恶性生物学行为的影响

目的观察长链非编码RNASPRY4-IT1（1ncRNASPRY4-IT1）对结肠癌细胞株SW48恶性生物学行为的影响。方法合成针对IncRNASPRY4-IT1的特异性小干扰RNA（si-SPRY4-IT1），转染SW48细胞，利用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）技术检测SW48细胞中SPRY4-IT1表达量，验证siRNA效果；细胞计数试剂盒（CCK-8）增殖实验检测低表达IncRNASPRY4-IT1对SW48细胞增殖能力的影响；膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（AnnexinV-FITC）／碘化丙锭（PI）染色流式检测法检测对凋亡的影响；Transwell侵袭实验观察对细胞侵袭能力的影响。结果RT-qPCR证实与对照组比较（0．923±0．025），si-SPRY4-IT1可使IncRNASPRY4-IT1表达量（0．3124-0．034）明显降低；CCK-8增殖实验中，IncRNASPRY4-IT1低表达可抑制SW48细胞的增殖能力（P〈0．05）；凋亡实验中，低表达SPRY4-IT1细胞的凋亡率[（15．140±0．680）％]较对照组细胞凋亡率[（4．223±0．724）％]明显增高（P〈0．05）；侵袭实验中低表达SPRY4-IT1细胞穿膜数目为（29．6±4．2）个，较对照组（92．3±2．5）个明显减少（P〈0．05）。结论低表达IncRNASPRY4-IT1可抑制结肠癌细胞SW48增殖和侵袭能力，促进其凋亡。

SPRY4-IT1通过激活锌指蛋白703基因表达增强肺癌细胞增殖能力

目的观察长链非编码RNA SPRY4-IT1在非小细胞肺癌（NSCLC）患者中的表达及其调控细胞增殖的分子生物学功能。 方法采用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测32例NSCLC患者癌组织和远癌正常肺组织中SPRY4-IT1的相对表达量；肺癌A549细胞株内转染针对SPRY4-IT1序列的小干扰RNA（si-SPRY4-IT1）和无关序列（si-nc），采用细胞计数试剂盒（CCK-8）实验计数两组细胞增殖情况并绘制生长曲线；采用结晶紫染色实验观察细胞克隆形成情况。采用Western blot检测转染si-SPRY4-IT1后A549细胞中锌指蛋白703（ZNF703）蛋白表达。 结果SPRY4-IT1在NSCLC患者癌组织和癌旁组织中的相对表达量分别为3.24±2.01和1.12±0.78，癌组织中的相对表达量显著高于癌旁组织（t＝5.560，P＝0.001）；非小细胞肺癌细胞株A549转染si-SPRY4-IT1后，细胞中SPRY4-IT1表达水平显著降低（P＝0.001）；CCK-8实验显示，转染si-SPRY4-IT1的A549细胞增殖能力显著降低（P＝0.001）；结晶紫染色显示，转染si-SPRY4-IT1的A549细胞克隆形成能力显著降低（P＝0.001）；转染si-SPRY4-IT1和si-nc的A549肺癌细胞中ZNF703 mRNA相对表达量分别为0.61±0.07和0.96±0.08，si-SPRY4-IT1细胞显著低于si-nc细胞（P＝0.001）；ZNF703蛋白相对表达量分别为0.08±0.02和0.12±0.03，si-SPRY4-IT1细胞显著低于si-nc细胞（P＝0.001）。 结论长链非编码RNA SPRY4-IT1在NSCLC中高表达，并可通过增强ZNF703表达促进肺癌细胞的增殖。