血清miR-98-5p、LncRNA XIST在急性呼吸窘迫综合征患儿中与疾病严重程度、预后的关系

目的:检测急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿血清中微小RNA(miR)-98-5p、长链非编码RNA(LncRNA)X染色体失活特异性转录因子(XIST)表达情况,并探究二者与疾病严重程度、预后的关系。方法:收集86例ARDS患儿为研究对象(研究组),同期健康体检儿童90名设为对照(对照组),参考柏林(2012年)ARDS病情严重程度诊断标准中动脉血氧分压/吸入氧浓度将ARDS患儿分为轻度组、中度组、重度组;另根据ARDS患儿28 d生存状况分为存活组和死亡组。实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测血清miR-98-5p、LncRNA XIST水平,绘制受试者工作特性(ROC)曲线分析血清中miR-98-5p、LncRNA XIST水平对ARDS患儿预后不良的预测价值;Kaplan-Meier生存曲线分析血清miR-98-5p、LncRNA XIST水平与ARDS患儿预后的关系;Pearson分析ARDS患儿血清中miR-98-5p与LncRNA XIST的相关性。结果:与对照组相比,研究组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.01),LncRNA XIST水平升高(P<0.01)。与轻度组相比,中度组、重度组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.05),LncRNA XIST水平升高(P<0.05);与中度组相比,重度组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.05),LncRNA XIST水平升高(P<0.05)。与存活组相比,死亡组血清中miR-98-5p水平降低(P<0.01),LncRNA XIST水平升高(P<0.01)。ROC曲线显示,血清中miR-98-5p、LncRNA XIST水平预测ARDS患儿预后不良的ROC曲线下面积分别为0.771、0.764,截断值分别为0.54、1.97,其敏感性分别为76.1%、86.9%,特异性分别为73.7%、52.6%;血清中miR-98-5p联合LncRNA XIST预测ARDS患儿预后不良的ROC曲线下面积为0.888,其敏感性为77.6%、特异性为94.7%。miR-98-5p高表达者存活率35.14%高于低表达者12.24%(P<0.05),LncRNA XIST高表达存活率12.73%低于低表达者38.71%(P<0.01)。Pearson分析发现ARDS患儿血清中miR-98-5p与LncRNA XIST呈负相关关系(r=-0.411,P<0.05)。Starbase3.0预测发现LncRNA XIST与miR-98-5p存在结合位点。结论:ARDS患儿血清中miR-98-5p水平降低、LncRNA XIST水平升高,二者均与疾病严重程度、预后关系密切,且二者呈显著负相关,有望用于评估ARDS疾病严重程度、预后。

子宫肌瘤患者血清lncRNA MIAT和lncRNA XIST的表达及临床意义

目的 检测子宫肌瘤患者血清长链非编码RNA(lncRNA)心肌梗死相关转录本(MIAT)、lncRNA X染色体失活特异转录本(XIST)的水平,并探究二者与子宫肌瘤的关系以及对子宫肌瘤的诊断价值。方法 选取2018年5月至2022年5月在张家口市妇幼保健院就诊的120例子宫肌瘤患者作为子宫肌瘤组,选择同时期在本院进行体检的120例健康体检者作为对照组。比较两组研究对象的基线资料;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测两组研究对象血清中lncRNA MIAT、lncRNA XIST表达水平;Pear?son相关性分析子宫肌瘤患者血清中lncRNA MIAT与lncRNA XIST表达水平的相关性;多因素logistic回归分析子宫肌瘤患病的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清lncRNA MIAT、lncRNA XIST对子宫肌瘤的诊断价值。结果 两组研究对象肌瘤最大径、肌瘤数目、有无乳腺增生、流产次数、有无妇科疾病比较,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,子宫肌瘤组血清中ln?cRNA MIAT、lncRNA XIST水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);肌瘤最大径≥5 cm、肌瘤数目≥2个、有乳腺增生、流产次数≥2次、有妇科疾病的子宫肌瘤患者血清中lncRNA MIAT、lncRNA XIST表达水平明显高于肌瘤最大径<5 cm、肌瘤数目<2个、无乳腺增生、流产次数<2次、无妇科疾病的子宫肌瘤患者,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示,子宫肌瘤患者血清中lncRNA MIAT、lncRNA XIST表达水平呈正相关(r=0.468,P<0.001);多因素logistic回归分析结果显示,lncRNA MIAT≥1.45(OR=1.678,95%CI:1.342~2.098)、lncRNA XIST≥1.35(OR=1.315,95%CI:1.033~1.673)是子宫肌瘤发生的危险因素(P<0.05);血清lncRNA MIAT、lncRNA XIST诊断子宫肌瘤的曲线下面积(AUC)分别为0.817、0.776,特异度分别为91.7%、86.7%,灵敏度分别为62.5%、71.7%,截断值分别为1.45、1.35,两者联合诊断子宫肌瘤的AUC为0.846,特异度为97.5%,灵敏度为61.2%。结论 子宫肌瘤患者血清中lncRNA MIAT、lncRNA XIST表达水平升高,二者与子宫肌瘤发生密切相关,二者联合对子宫肌瘤具有较高的辅助诊断价值。

长链非编码RNA X失活特异转录物调控miR-340-5p对卵巢癌细胞上皮间质转化的影响

目的探讨长链非编码RNA X失活特异转录物(lncRNA XIST)通过调控miR-340-5p对卵巢癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测卵巢癌组织和细胞系中lncRNA XIST和miR-340-5p表达水平。A2780细胞分为Control组、si-NC组、si-lncRNA XIST组、si-lncRNA XIST+NC inhibitor组、si-lncRNA XIST+miR-340-5p inhibitor组。双荧光素酶实验证实lncRNA XIST和miR-340-5p的调控关系;划痕实验和Transwell法检测迁移和侵袭能力;RT-qPCR、Western blot和免疫荧光染色分析EMT标志蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)的mRNA和蛋白表达。结果在卵巢癌组织和细胞系中,lncRNA XIST高表达,miR-340-5p低表达(P<0.05)。选择lncRNA XIST表达最高的A2780细胞作为转染对象。lncRNA XIST能够直接靶向下调miR-340-5p表达(P<0.05)。转染si-lncRNA XIST后,lncRNA XIST水平、划痕愈合率、侵袭细胞数和N-cadherin、Vimentin表达降低,E-cadherin表达升高(P<0.05);共转染si-lncRNA XIST和miR-340-5p inhibitor后上述指标均得到逆转(P<0.05)。结论lncRNA XIST通过下调miR-340-5p促进卵巢癌细胞EMT。

长链非编码RNA X染色体失活特异转录物和微小RNA-146-5p在甲状腺癌中的表达及临床意义

目的探讨甲状腺癌组织中长链非编码RNA(LncRNA)X染色体失活特异转录物(XIST)、微小RNA-146-5p(miR-146-5p)的表达及其诊断价值。方法选取甲状腺癌患者92例为研究对象,均行手术切除术,术中收集甲状腺癌组织和癌旁正常组织。分析LncRNA XIST、miR-146-5p水平与患者临床病理特征之间的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估LncRNA XIST、miR-146-5p单独及联合对甲状腺癌的诊断价值。结果甲状腺癌组织中LncRNA XIST表达水平为(0.65±0.17),低于癌旁组织的(1.02±0.18),miR-146-5p表达水平为(2.56±0.87),高于癌旁组织的(1.07±0.25),差异有统计学意义(P<0.05)。临床分期Ⅲ~Ⅳ期、发生颈部淋巴结转移的甲状腺癌患者肿瘤组织中LncRNA XIST表达水平低于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、未发生颈部淋巴结转移的甲状腺癌患者,miR-146-5p表达水平高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、未发生颈部淋巴结转移的甲状腺癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线结果显示,LncRNA XIST、miR-146-5p二者联合诊断甲状腺癌的曲线下面积(AUC)大于LncRNA XIST、miR-146-5p单独诊断,差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲状腺癌组织中LncRNA XIST表达下调,miR-146-5p表达上调,二者与临床分期、颈部淋巴结转移有关,并对甲状腺癌有一定的诊断价值。

子宫内膜癌组织中lncRNA XIST、miR-132-3p的表达及与病理参数和预后的关系

目的探讨子宫内膜癌(EC)组织中长链非编码RNA X非活性特异性转录本(lncRNA XIST)、微RNA-132-3p(miR-132-3p)的表达及与病理参数和预后的关系。方法选取2016年2月至2019年12月江苏省南通市第六人民医院及江苏省南通市肿瘤医院收治的100例EC患者,采用q PCR检测癌组织与癌旁正常组织中lncRNA XIST、miR-132-3p表达。Star Base数据库预测lncRNA XIST与miR-132-3p的关系,Pearson相关性分析lncRNA XIST与miR-132-3p的相关性。随访3年,根据EC组织中lncRNA XIST、miR-132-3p的平均表达量将患者分为高表达组和低表达组,采用K-M法绘制不同lncRNA XIST、miR-132-3p表达患者的生存曲线。结果癌组织中lncRNA XIST表达高于癌旁正常组织,miR-132-3p表达低于癌旁正常组织(P<0.05)。lncRNA XIST与miR-132-3p存在互补序列,lncRNA XIST与miR-132-3p表达呈负相关(r=-0.694,P<0.01)。不同分化程度、国际妇产科联盟(FIGO)分期、脉管侵犯和淋巴结转移EC组织中lncRNA XIST、miR-132-3p表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。lncRNA XIST高表达组3年累积生存率低于lncRNA XIST低表达组,miR-132-3p高表达组3年累积生存率高于miR-132-3p低表达组(P<0.05)。结论EC组织中lncRNA XIST高表达和miR-132-3p低表达,两者与分化程度、FIGO分期、脉管侵犯、淋巴结转移及预后有关。

血清lncRNA XIST与老年膝关节骨性关节炎病情严重程度及炎性因子水平的相关性

目的分析血清长链非编码RNA(lncRNA)X非活性特异性转录本(XIST)水平与老年膝关节骨性关节炎(KOA)患者病情严重程度及炎性因子水平的相关性。方法选择2019年3月至2021年4月确诊的96例KOA患者为研究对象(研究组),同期健康体检者100例作为对照(对照组),实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测血清中XIST水平,酶联免疫吸附(ELISA)检测血清中白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL-6)水平。根据X线片评估,参考Kellgren-Lawrence(K-L)分级标准对所有受试者病情严重程度进行分级;Spearman分析KOA患者病情严重程度与血清中XIST、IL-1β、TNF-α、IL-6水平关系;Pearson分析KOA患者血清中XIST与IL-1β、TNF-α、IL-6水平关系。结果与对照组比较,研究组血清中XIST、IL-1β、TNF-α、IL-6水平升高(P<0.05)。K-L分级判定结果:对照组均为0级,研究组Ⅰ级19例、Ⅱ级24例、Ⅲ级36例、Ⅳ级17例。Spearman分析发现KOA患者血清中XIST、IL-1β、TNF-α、IL-6水平与病情严重程度呈正相关(r值分别为0.784、0.791、0.657、0.703,P<0.05);Pearson分析发现KOA患者血清中XIST水平与IL-1β、TNF-α、IL-6水平均呈正相关(r值分别为0.635、0.525、0.414,P<0.05)。结论老年KOA患者血清中XIST水平升高,且其与病情严重程度、炎性因子水平关系密切,可能对于指导临床治疗老年KOA患者具有一定意义。

LncRNA XIST调节miR-545-3p/SMAD5轴对人成骨细胞增殖、迁移及成骨分化的影响

目的探讨长链非编码RNA X染色体失活特异转录本(lncRNA XIST)调控miR-545-3p/SMAD5轴对人成骨细胞(hOB)增殖、迁移及成骨分化的影响。方法将hOB细胞分为ctrl组、pcDNA组、pcDNA-XIST组、pcDNA-XIST+miR-NC组、pcDNA-XIST+miR-545-3p mimic组;qRT-PCR检测细胞中XIST、miR-545-3p表达;CCK-8法检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移;Western blot检测细胞中SMAD5、碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)蛋白及细胞核中p-SMAD5蛋白表达;茜素红S染色检测矿化结节形成;双荧光素酶报告基因实验分别验证XIST和miR-545-3p、miR-545-3p和SMAD5的关系。结果与ctrl组、pcDNA组比较,pcDNA-XIST组hOB细胞中XIST表达、OD_(450)值(48、72 h)、划痕愈合率、SMAD5、ALP、Runx2、OCN蛋白及核p-SMAD5蛋白表达升高,miR-545-3p表达降低,矿化结节形成增多(P<0.05);上调miR-545-3p减弱了过表达XIST对hOB细胞增殖、迁移及成骨分化的促进作用;XIST靶向负调控miR-545-3p表达,miR-545-3p靶向调控SMAD5表达。结论过表达XIST可能通过海绵化miR-545-3p来上调SMAD5表达,进而促进hOB细胞增殖、迁移及成骨分化。

急性冠脉综合征患者血清LncRNA XIST和miR-330-3p水平表达与心脏自主神经功能的相关性研究

目的检测急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者血清长链非编码RNA X染色体失活特异转录物(LncRNA X inactivate-specific transcript,LncRNA XIST)和微小RNA(miR)-330-3p水平,分析二者与心脏自主神经功能的关系。方法选取2020年2月~2021年6月在华北石油管理局总医院诊断为ACS的患者156例,包括不稳定型心绞痛(unstable angina,UA)80例(UA组)和急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)76例(AMI组);另选取同期体检健康者100例作为对照组。实时荧光定量PCR法检测受试者血清LncRNA XIST和miR-330-3p水平;24 h动态心电图检测受试者心率变异性(heart rate variability,HRV)时域指标[包括:24 h内正常R-R间期标准差(SDNN)、每5 min R-R间期平均值的标准差(SDANN)、每5 min R-R间期标准差的平均值(SDNN index)、相邻R-R间期之差的均方根(RMSSD)及相邻R-R间期相差>50 ms心搏数占总心搏数的百分比(PNN50)]以及Pearson法分析ACS患者血清LncRNA XIST和miR-330-3p水平与HRV时域指标的相关性。结果与对照组比较,UA组和AMI组血清LncRNA XIST(1.37±0.26,1.69±0.31 vs 1.09±0.22)水平升高(F=113.587,P=0.000),miR-330-3p(0.82±0.15,0.53±0.12 vs 1.03±0.18)及SDANN(115.96±19.57 ms,98.96±16.57 ms vs 133.43±21.01 ms),SDNN(113.84±15.26 ms,101.84±11.22 ms vs 136.41±31.53 ms),SDNN index(54.68±6.72 ms,46.73±5.14 ms vs 64.68±10.64 ms),RMSSD(27.48±5.62 ms,21.37±3.64 ms vs 36.48±8.62 ms)和PNN50(7.58%±2.83%,4.18%±1.13%vs 10.72%±3.21%)水平均降低(F=54.923~225.201,均P=0.000),差异均有统计学意义。与UA组比较,AMI组血清LncRNA XIST水平升高(t=10.792,P<0.05),miR-330-3p及SDANN,SDNN,SDNN index,RMSSD和PNN50水平降低,差异有统计学意义(t=4.743~16.538,均P<0.05);ACS患者血清LncRNA XIST与SDNN index,RMSSD和PNN50呈负相关(r=-0.465,-0.532,-0.542,均P<0.05);miR-330-3p与SDNN index,RMSSD和PNN50呈正相关(r=0.471,0.562,0.561,均P<0.05)。结论ACS患者血清LncRNA XIST水平升高,miR-330-3p水平降低,与心脏自主神经功能有关,可作为防治ACS的重要靶点。

lncRNA XIST靶向miR-15b-5p调控细胞凋亡及自噬参与帕金森病发病机制研究

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)X染色体失活特异转录本(XIST)对帕金森病(PD)的潜在分子机制。方法用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导建立PD模型。用爬杆和转棒法检测小鼠行为变化。四甲基偶氮唑盐法和流式细胞术检测人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)活力和凋亡。双荧光素酶报告基因法、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot、免疫组化探讨lncRNA XIST在PD中的分子机制。结果PD体内外模型XIST表达上调,miR-15b-5p表达下调。沉默XIST(si-XIST)可缩短小鼠准备向下爬行的时间,延长停留时间。此外,si-XIST也可增加酪氨酸羟化酶阳性(TH+)神经元数。miR-15b-5p是XIST的靶基因。结论si-XIST可通过调控miR-15b-5p抑制PD的自噬和凋亡。

LncRNA Xist通过调控SDF-1/CXCR4轴促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖与迁移

[目的]探讨lncRNAXist在大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖和迁移中的作用及其可能机制。[方法]取3周龄的雌性SD大鼠的股骨和胫骨,分离BMSC细胞,体外培养并鉴定。设计并筛选对lncRNAXist沉默效率高的siRNA;利用Lipo2000分别将si-Xist和si-NC转染入实验组(si-Xist组)和对照组(si-NC组)BMSC中。CCK-8实验检测各组BMSC增殖能力。划痕及Transwell迁移实验检测各组BMSC横向和纵向迁移能力。qPCR验证lncRNAXist的沉默效率及检测各组BMSC中SDF-1和CXCR4mRNA水平的相对表达量;westernblot检测各组BMSC中CXCR4蛋白水平的相对表达量。[结果]B MSC第3代细胞呈梭状、漩涡状生长,流式细胞术示CD11b(-)、CD34(-)、CD45(-)、CD44(+)、CD90(+)、CD105(+)。使用siRNA干扰BMSC中lncRNAXist的表达,三条siRNA沉默效率分别为67.92%、68.72%、98.32%。CCK-8实验证明,12h时两组间OD450差异无统计学意义(P>0.05),而在24h和48h时,si-Xist组OD450均低于si-NC组(P<0.001、P<0.01)。划痕实验显示,si-Xist组伤口愈合百分比低于si-NC组(P<0.05);Transwell迁移实验显示,si-Xist组6h迁移细胞数低于si-NC组(P<0.001)。qPCR实验证明,在mRNA水平,si-Xist组CXCR4相对表达量低于si-NC组(P<0.05),而SDF-1在两组间差异无统计学意义(P>0.05);Westernblot实验证实,在蛋白水平,si-Xist组CXCR4相对表达量低于si-NC组(P<0.05)。[结论]L ncRNAXist通过调控CXCR4的表达,提高大鼠BMSC的增殖、迁移能力。

lncRNA-XIST在小鼠急性缺血再灌注肾损伤中的表达情况

目的探讨长链非编码RNA-X染色体失活特异转录本(lncRNA-XIST)在小鼠急性缺血再灌注肾损伤(AIKI)中的表达情况。方法选取清洁级雄性C57小鼠90只,将其随机分为对照组、模型组与实验组,各30只。模型组与实验组均根据国际标准建立小鼠AIKI模型,实验组建模成功后注射干扰腺相关病毒lncRNA-XIST siRNA。于lncRNA-XIST siRNA表达2周后的第2、24、48、72小时及第7、14天各处死5只小鼠,采用实时定量PCR法检测小鼠肾组织中lncRNA-XIST的表达水平,于lncRNA-XIST siRNA表达2周后的第48、72 h检测小鼠的血尿素氮(BUN)及血肌酐(Scr)水平。结果在肾皮质及肾髓质中,模型组第2、24、48、72小时及第7、14天的lncRNA-XIST表达水平均高于对照组(P<0.05)。在肾皮质中,从第24小时开始,lncRNA-XIST表达水平呈不断升高趋势。模型组第48、72小时BUN、Scr水平高于对照组及实验组,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组第48、72小时血清BUN、Scr水平高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论lncRNA-XIST在AIKI小鼠肾组织中高表达,特别是在肾皮质中,下调lncRNA-XIST有助于延缓早期急性肾损伤。

lncRNA XIST和miR-124在支气管哮喘患儿外周血单个核细胞中表达关系研究

目的检测支气管哮喘患儿外周血单个核细胞中长链非编码RNA X染色体失活特异性转录本(lncRNA XIST)、微小RNA-124(miR-124)表达水平,并探讨其临床意义。方法选取2020年1月至2021年3月因支气管哮喘于河南大学第一附属医院门诊及病房接受治疗168例患儿,其中急性发作期82例(急性发作组)、缓解期86例(缓解组);同期选取84例健康体检儿童作为对照组。实时荧光定量PCR法检测外周血单个核细胞中lncRNA XIST、miR-124水平,肺功能仪检测肺功能指标第一秒用力呼气量(FEV1),酶联免疫吸附法检测炎症因子白细胞介素(IL)-17、IL-1β、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Pearson法分析支气管哮喘患儿lncRNA XIST、miR-124与肺功能指标、炎症因子水平相关性。结果与对照组比较,缓解组、急性发作组lncRNA XIST及IL-17、IL-1β、TNF-α水平升高,miR-124、FEV1、IL-10水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与缓解组比较,急性发作组lncRNA XIST及IL-17、IL-1β、TNF-α水平升高,miR-124、FEV1、IL-10水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。支气管哮喘患儿外周血单个核细胞lncRNA XIST与miR-124水平呈负相关(r=-0.668,P<0.001)。支气管哮喘患儿lncRNA XIST与IL-17、IL-1β、TNF-α呈正相关(P<0.05),与FEV1、IL-10呈负相关(P<0.05);miR-124与FEV1、IL-10呈正相关(P<0.05),与IL-17、IL-1β、TNF-α呈负相关(P<0.05)。结论支气管哮喘患儿外周血单个核细胞lncRNA XIST高表达,miR-124低表达,二者可能参与支气管哮喘疾病的发生发展。

长链非编码RNA XIST可能通过miR-22/NLRP3促进喉鳞癌细胞增殖

目的:探讨长链非编码RNA X染色体失活特异转录本(XIST)通过miR-22/NLRP3通路对喉鳞状细胞癌(LSCC)增殖的影响。方法:RT-PCR检测34例LSCC患者癌组织和癌旁组织中XIST的表达;CCK-8法和平板细胞克隆形成实验检测肿瘤细胞增殖活性;Western blot检测蛋白表达水平。荧光素酶报告分析法验证XIST对miR-22/NLRP3的靶向作用。用XIST siRNA慢病毒治疗BALB/c肿瘤小鼠,观察肿瘤生长变化。结果:与癌旁组织相比,LSCC组织中XIST表达水平较高(P<0.05)。肿瘤分期越高,XIST表达水平越高(P<0.05)。下调XIST表达可抑制肿瘤细胞增殖(P<0.05)。荧光素酶报告分析结果显示,XIST可通过靶向miR-22调节NLRP3。抑制XIST后,miR-22表达水平显著上调(P<0.05),下调XIST表达或miR-22过表达可导致NLRP3表达上调(P<0.05)。用shXIST慢病毒干预LSCC小鼠后,肿瘤体积和重量明显缩小,肿瘤增殖抗原Ki-67和NLRP3表达水平降低(P<0.05)。结论:XIST过表达可通过调控miR-22/NLRP3通路促进LSCC增殖,靶向XIST可能为LSCC的治疗提供新的方向。

胃癌组织lncRNA XIST、miR-337-3p表达变化及其临床意义

目的观察胃癌组织长链非编码RNA X染色体失活特异转录本(lncRNA XIST)、微小RNA-337-3p(miR-337-3p)表达变化,并分析二者表达的关系及其与患者临床病理特征的关系。方法选择胃癌患者79例,取活检或手术切除的胃癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用RT-qPCR法检测lncRNA XIST、miR-337-3p表达。比较胃癌组织与癌旁正常组织lncRNA XIST、miR-337-3p表达变化,并分析胃癌组织lncRNA XIST、miR-337-3p表达的关系及其与患者临床病理特征的关系。结果胃癌组织lncRNA XIST相对表达量高于癌旁正常组织,miR-337-3p相对表达量低于癌旁正常组织(t分别为19.081、13.459,P均<0.05)。Pearson线性相关分析显示,胃癌组织lncRNA XIST相对表达量与miR-337-3p相对表达量呈负相关关系(r=-0.672,P<0.05)。胃癌组织lncRNA XIST、miR-337-3p相对表达量均与TNM分期、组织分化程度、淋巴结转移有关(P均<0.05),与性别、年龄、肿瘤直径无关(P均>0.05)。结论胃癌组织lncRNA XIST高表达、miR-337-3p低表达,二者表达呈负相关关系,并且二者共同参与胃癌的发生、发展。lncRNA XIST、miR-337-3p有望成为胃癌早期诊断和靶向治疗的分子生物标志物。

长链非编码RNA在膜性肾病中的作用研究进展

在基因组非编码基因特异性的RNA分子表达产物中,长链非编码RNA(lncRNA)广泛参与代谢、免疫等关键病理生理过程,与肿瘤、心血管疾病、神经系统疾病等的发生发展密切相关。随着lncRNA种类数量的不断增加,其在肾脏疾病中的作用越来越受到关注。膜性肾病(MN)是我国常见的原发性肾小球肾炎,严重威胁人们的健康和生命。lncRNA,尤其是X非活性特异性转录物、浆细胞瘤变体易位1参与MN的发生发展。但目前关于lncRNA在MN中的作用机制研究较少,深入研究lncRNA在MN中的作用机制,可能为MN的诊断及治疗提供新的治疗靶点。

老年急性脑梗死患者血清lncRNA XIST和lncRNA SOX2OT水平及其预后价值

目的分析老年急性脑梗死(ACI)患者血清长链非编码RNA染色体X失活特异转录本(lncRNA XIST)、长链非编码RNA性别决定相关基因簇2重叠转录本(lncRNA SOX2OT)水平变化,并评估其预后价值。方法选取首都医科大学附属北京天坛医院2021年2月-2023年2月收治的154例老年ACI患者为研究对象,采用改良Rankin量表(mRS)评分将患者分为预后良好组(n=111)和预后不良组(n=43),另选取同期健康体检者160人为健康组。采用qRT-PCR分析患者血清lncRNA XIST、lncRNA SOX2OT水平,采用多因素logistic回归分析ACI患者预后不良影响因素;采用Spearman法进行相关性分析。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA XIST、lncRNA SOX2OT水平对ACI患者预后的诊断价值。结果预后不良组lncRNA XIST[(0.47±0.09)vs.(0.61±0.09)vs.(1.01±0.27)]水平低于良好组和健康组,lncRNA SOX2OT[(2.16±0.37)vs.(1.73±0.33)vs.(1.03±0.21)]水平高于良好组和健康组,差异均有统计学意义(F=190.845、367.704,P均<0.001)。预后良好组m RS评分[(1.52±0.37)分vs.(3.79±0.45)分]、NIHSS评分[(3.57±1.11)分vs.(9.72±3.12)分]显著低于预后不良组,差异均有统计学意义(t=32.097、18.092,P均<0.001)。lncRNA XIST与mRS评分、NIHSS评分成负相关(r=-0.503、-0.479,P均<0.001),lncRNA SOX2OT与mRS评分、NIHSS评分成正相关(r=0.525、0.493,P均<0.001)。lncRNA XIST、lncRNA SOX2OT是ACI患者预后的影响因素(P均<0.001)。血清lncRNA XIST、lncRNA SOX2OT联合诊断ACI患者预后的曲线下面积(AUC)为0.920,显著优于单独诊断(Z_(lncRNA XIST vs.联合)=2.123,P=0.034;Z_(lncRNA SOX2OT vs.联合)=2.108,P=0.035),联合诊断的敏感性为90.99%,特异性为79.07%。结论ACI患者血清lncRNA XIST水平下调,lncRNA SOX2OT水平上调,与患者预后密切相关。

SCH合并VH患者血LncRNA XIST、miR-192水平与慢性肝炎转化间关系

目的 探究精神分裂症(schizophrenia, SCH)合并病毒性肝炎(viral hepatitis, VH)患者血长链非编码RNA-X染色体失活特异转录物(long non-coding RNA X inactive-specific transcript, LncRNA XIST)、微小RNA-192(micro RNA,miR-192)水平变化,并评估VH转化为慢性肝炎的风险。方法 选取2020年4月-2021年10月贺州市某医院207例SCH患者,其中合并VH患者138例(研究组)和未合并VH患者69例(对照组)。比较两组患者的LncRNA XIST和miR-192水平,统计SCH合并VH患者的慢性肝炎转化率。采用Cox回归分析SCH合并VH患者转化为慢性肝炎影响因素。采用相加模型评价血LncRNA XIST和miR-192水平对SCH合并VH患者转化为慢性肝炎的交互作用,并评估其转化为慢性肝炎的价值。结果 与对照组相比,研究组LncRNA XIST水平升高、miR-192水平降低(t=4.218、4.946,P<0.05);研究组患者慢性肝炎转化率为69.57%(96/138);转化为慢性肝炎的SCH患者,服用抗精神病药物数量1种以上者占比更多,SCH病程较未转化患者长,LncRNA XIST水平、病毒载量高于未转化患者(t=5.437、2.430,P<0.05),miR-192水平低于未转化患者(t=5.908,P<0.05);血LncRNA XIST和miR-192水平升高是研究组患者转化为慢性肝炎的独立影响因素(HR=3.278、0.381,P<0.05);血LncRNA XIST和miR-192水平对患者转化为慢性肝炎存在拮抗作用;血LncRNA XIST和miR-192水平曲线下面积(area under the curve, AUC)值分别为0.840、0.790,两者联合检测AUC值为0.926,高于单独检测值(Z=2.352、4.623,P<0.05)。结论 SCH合并VH患者LncRNA XIST水平异常升高、miR-192水平有所下调,评估两者水平变化可提高预测VH患者向慢性肝炎转化的风险,对临床评估病情变化有重要意义。

LncRNA XIST通过miR-494-3p/MTUS1轴对乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA X染色体失活特异转录本(lncRNA XIST)调控miR-494-3p/微管相关肿瘤抑制基因1(MTUS1)轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响。方法2020年2月-2022年2月期间共收集濮阳市人民医院51对乳腺癌组织及癌旁组织。人正常乳腺上皮细胞MCF-10A及人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、SKBR3均购自中国科学院上海细胞库。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot分别检测乳腺癌癌组织、癌旁组织及人正常乳腺上皮细胞MCF-10A、人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、SKBR3中XIST、miR-494-3p、MTUS1蛋白表达;将MCF-7细胞分为Ctrl组、pcDNA组、pcDNA-XIST组、pcDNA-XIST+mimic NC组、pcDNA-XIST+miR-494-3p mimic组,qRT-PCR检测细胞中XIST、miR-494-3p表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;划痕实验检测细胞迁移;Transwell检测细胞侵袭;Western blot检测细胞中MTUS1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达;双荧光素酶报基因实验分别验证XIST和miR-494-3p、miR-494-3p和MTUS1的关系。结果与癌旁组织比较,乳腺癌组织中XIST、MTUS1蛋白表达降低,miR-494-3p表达升高,差异有统计学意义(P<0.05),与MCF-10A细胞比较,MCF-7细胞中XIST、MTUS1蛋白表达量降低,miR-494-3p表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-XIST组XIST、MTUS1蛋白表达量升高[(1.03±0.12)vs.(1.92±0.14)、(0.24±0.01)vs.(0.88±0.07)],miR-494-3p表达量降低[(1.02±0.08)vs.(0.35±0.03)],差异均有统计学意义(t=11.82、22.17、19.21,P均<0.001);与pcDNA-XIST+mimic NC组比较,pcDNA-XIST+miR-494-3p mimic组XIST表达量[(1.94±0.13)vs.(1.93±0.15)]变化差异无统计学意义(t=0.12,P=0.904),miR-494-3p表达升高[(0.36±0.04)vs.(0.78±0.07))],MTUS1蛋白表达量降低[(0.89±0.08)vs.(0.45±0.04)],差异均有统计学意义(t=12.76、12.05,P均<0.001);与pcDNA组比较,pcDNA-XIST组OD_(450)值、划痕愈合率、侵袭细胞数、PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白表达降低,细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。XIST靶向调控miR-494-3p/MTUS1轴;与pcDNA-XIST+mimic NC组比较,pcDNA-XIST+miR-494-3p mimic组OD_(450)值、划痕愈合率、侵袭细胞数、PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白表达升高,细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论过表达XIST可能通过海绵化miR-494-3p来上调MTUS1表达,进而抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭与迁移,促进细胞凋亡。

长链非编码RNA XIST可预测乳腺癌新辅助治疗的敏感性及预后

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)X染色体失活特异性转录本(X chromosome inactivation specific transcript,XIST)对乳腺癌新辅助治疗敏感性和预后的预测价值。方法:共选取115例接受新辅助治疗的乳腺癌患者,采用实时荧光定量PCR法检测乳腺癌组织中lncRNA XIST的表达水平。通过单因素和多因素Logistic回归法分析乳腺癌患者获得病理完全缓解的独立预测因子。通过单因素log-rank检验和多因素COX风险回归模型对乳腺癌患者生存情况进行分析。结果:多因素Logistic回归分析发现,在激素受体阴性乳腺癌[比值比(odds ratio(OR)=0.176,95%可信区间(confidence interval,CI)为0.034~0.906,P=0.038]和三阴性乳腺癌(OR=0.058,95%CI为0.004~0.782,P=0.032)患者中,lncRNA XIST表达水平越低,患者越容易获得病理完全缓解。多因素COX风险回归模型分析发现,lncRNA XIST低表达乳腺癌患者的无病生存期较短[危险比(hazard ratio,HR)=0.204,95%CI为0.042~0.980,P=0.047]。结论:在激素受体阴性和三阴性乳腺癌中,lncRNA XIST低表达患者较容易获得病理完全缓解。然而,在接受新辅助治疗的全组乳腺癌患者中,lncRNA XIST低表达患者的预后较差。

慢性肾小球肾炎患者血清lncRNA XIST、miR-217表达及其预后相关性研究

目的检测慢性肾小球肾炎患者血清长链非编码RNA X染色体失活特异转录物(Lnc RNA XIST)和微小RNA-217(mi R-217)的表达情况,并探究其表达水平与慢性肾小球肾炎患者预后的相关性。方法选取2015年12月—2017年4月浙江省台州医院收治的慢性肾小球肾炎患者70例作为研究组,同期选取在医院进行常规体检的健康者70例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测所有研究对象血清lnc RNA XIST、mi R-217表达水平;通过研究对象工作特征曲线(ROC)评估血清lnc RNA XIST、mi R-217表达水平对慢性肾小球肾炎的诊断价值;分析患者预后不良情况发生率;并采用Cox回归分析患者发生预后不良的影响因素。结果研究组血清lnc RNA XIST和mi R-217表达水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。ROC结果显示,血清lnc RNA XIST和mi R-217诊断慢性肾小球肾炎的AUC分别为0.903、0.797,截断值分别为0.843、1.197,此时对应灵敏度分别为88.6%、70.0%,特异度分别为75.7%、78.6%。血清lnc RNA XIST和mi R-217联合检测慢性肾小球肾炎的AUC为0.941,此时对应灵敏度和特异度分别为94.3%、74.3%。Cox回归分析结果显示,血清lnc RNA XIST高表达和mi R-217高表达是影响慢性肾小球肾炎患者预后的独立危险因素。结论血清lnc RNA XIST和mi R-217可作为慢性肾小球肾炎的早期诊断及预后评估的潜在生物学指标。