ESET通过lncRNA GMDS-AS1调控肝癌细胞增殖、凋亡、糖酵解的研究

目的探究组蛋白甲基转移酶集合域分叉1(ESET)、长链非编码RNA甘露糖4,6-脱水酶反义RNA1(lncRNA GMDSAS1)对肝癌细胞增殖、凋亡、糖酵解的调控及二者之间的潜在关系。方法收集右江民族医学院附属医院和百色市人民医院2019年1月至2020年1月期间手术切除的肝癌组织及癌旁组织49例。脂质体法将空白组(不做任何处理)、空载体组(转染pcDNA或si-con)、敲减ESET组(转染si-ESET)、过表达lncRNA GMDS-AS1组(转染pcDNA-GMDS-AS1)转染至HepG2细胞;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)实验、蛋白质印迹法实验检测ESET、lncRNA GMDS-AS1、细胞增殖抗原标志物Ki-67、葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)、活化胱天蛋白酶-3(C-caspase-3)的表达;细胞计数试剂盒(CCK8)法、流式细胞术检测细胞增殖、凋亡;RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验检测ESET与lncRNA GMDS-AS1的关系。结果肝癌组织中ESETmRNA和蛋白表达量为5.18±0.94、0.69±0.14,显著高于癌旁组织的0.99±0.33、0.23±0.07,肝癌组织lncRNA GMDS-AS1表达量为0.63±0.20,显著低于癌旁组织的1.02±0.31(P<0.05),二者呈负相关性;与空载体组相比,敲减ESET组细胞ESET的表达明显降低,细胞增殖抗原标志物Ki-67蛋白表达显著降低,细胞活性显著降低,GLUT-1、LDHA的蛋白表达明显降低,C-caspase-3蛋白表达显著升高,凋亡率显著升高(P<0.05);过表达lncRNA GMDS-AS1组细胞具有与敲减ESET组相似的上述检测指标的变化。RIP实验显示,ESET与lncRNA GMDS-AS1具有结合能力。结论甲基转移酶ESET参与肝癌细胞的增殖、凋亡和糖酵解过程,其潜在的机制可能与负向调节lncRNA GMDS-AS1有关。