Long Evans大鼠视网膜神经节细胞培养与鉴定

目的 建立LongEvans大鼠视网膜神经节细胞 (RGCs)体外培养的方法 ,为RGCs的体外实验研究奠定基础。方法 出生后 1～ 3d的LongEvans大鼠视网膜神经上皮层 ,胰蛋白酶 +透明质酸酶消化制成单细胞悬液 ,用DMEM培养液进行培养 ,观察细胞生长规律 ,图像分析系统分析有突起的RGCs数目、胞体面积和最长的突起长度 ,Thy1 1单克隆抗体和微管相差蛋白 2多克隆抗体荧光双标法鉴定RGCs。结果 LongEvans大鼠RGCs体外培养存活 4d ;荧光双标显示RGCs纯度为 80 %～ 90 %。结论 在普通培养基中LongEvans大鼠RGCs体外培养能获成功。胰蛋白酶

视神经急性损伤后Long Evans大鼠闪光视觉诱发电位的实验研究

目的 探索视神经急性损伤后LongEvans大鼠闪光视觉诱发电位 (F VEP)。方法 使用AVE80 0 0自动视觉电生理系统 ,检测正常及视神经急性损伤后LongEvans大鼠F VEP。结果 测出了正常LongEvans大鼠F VEP潜伏时和振幅值 ;检测了视神经急性不完全损伤后F VEP ,其特点为潜伏时延迟 ,振幅值降低 ,与正常相比有显著性差异 ;视神经横断后F VEP波形呈熄灭型。结论 LongEvans鼠视神经损伤模型可用于观察视神经保护效应的研究 ,F

成年与幼年Long Evans大鼠视皮层蛋白的二维电泳分析

目的 利用双向电泳技术比较正常成、幼年LongEvans大鼠初级视皮层蛋白质组表达差异 ,探索蛋白质组学技术在视觉发育研究中应用的可能性。方法 2 2d龄和10 0d龄LongEvans大鼠各 3只 ,过量戊巴比妥钠处死 ,切取其初级视皮层的灰质 ,裂解抽提总蛋白 ,双向电泳分离总蛋白 ,比较 2组大鼠初级视皮层蛋白质表达差异。结果 胶图差异分析发现幼年鼠初级视皮层中有 12个蛋白质点表达较丰富 ,成年鼠初级视皮层中有 16个蛋白质点表达较丰富。结论 正常成、幼年LongEvans大鼠初级视皮层蛋白质组存在明显差异 ,蛋白质组学技术可以应用于视觉发育方面的研究。

蛋白质组学技术分析LongEvans大鼠眼优势柱可塑性终止相关蛋白

目的利用二维电泳-质谱技术分析LongEvans大鼠初级视皮层中与眼优势柱终止相关的蛋白质,探索蛋白质组学技术在视觉可塑性研究中的应用。方法取100d龄LongEvans大鼠通过向其初级视皮层中灌注硫酸软骨素酶建立成年眼优势柱移动的动物模型,然后分别提取22d龄大鼠、100d龄大鼠和100d龄硫酸软骨素酶灌注大鼠的初级视皮层灰质总蛋白,利用二维电泳-质谱技术分析与眼优势柱终止相关的蛋白质。结果通过双向电泳确定了与眼优势柱终止相关的4个蛋白质点,质谱分析鉴定了其中2种蛋白质。这2种蛋白为磷脂酰乙醇胺结合蛋白和胶质纤维酸性蛋白。结论二维电泳-质谱技术可以有效地分离和鉴定视皮层中的特殊蛋白质,随着技术的进步和完善,蛋白质组学技术必将在视觉可塑性研究中占有重要地位。

正常Long Evans大鼠不同发育阶段闪光视觉诱发电位波形的比较

目的 比较3组不同发育阶段正常Long Evans大鼠的闪光视觉诱发电位(Flash visual evoked potential,F-VEP)的异同,探索闪光视觉诱发电位波形在视觉发育过程中的变化规律。方法 随机抽取不同发育阶段的Long Evans大鼠50只,分成3组。每组大鼠用乙醚麻醉,使用视觉电生理检查系统采集其F-VEP。结果 未睁眼组未记录到大鼠明显的F-VEP波形,睁眼后可记录到大鼠F-VFP波形,但成年组和幼年组F-VEF主波(Pmax)的潜伏期和振幅有显著性差异,成年组与幼年组Long Evans大鼠相比,F-VEP主波(Pmax)的潜伏期缩短、振幅减小。结论 随着发育,Long Evans大鼠F-VEP主波(Pmax)的潜伏期缩短、振幅减小。F-VEP对大鼠视觉发育阶段的判断具有一定价值。

新生Long Evans大鼠视网膜小胶质细胞原代培养及鉴定

目的:建立稳定高产的新生Long Evans大鼠视网膜小胶质细胞(retinamicrogliacellRMG)体外培养、分离的方法。方法:取出生3d内的LongEvans新生大鼠视网膜神经上皮层进行混合细胞培养,10～12d后振荡分离,纯化培养得到小胶质细胞;小胶质细胞的特异性标记IB-4及CD11b进行组化及细胞免疫荧光鉴定,扫描电镜观察细胞表面突起。结果:得到纯度较高的小胶质细胞,IB-4组化及CD11b细胞免疫荧光鉴定纯度分别为94.5%和95.8%,扫描电镜观察细胞表面为棘状突起,明显与巨噬细胞的细胞表面区别。结论:本方法可以得到纯度高的视网膜小胶质细胞。

Long Evans和Wistar大鼠亚硒酸钠诱导白内障模型的比较

目的:比较Long Evans和Wistar大鼠在建立亚硒酸钠诱导的白内障动物模型中的异同。方法:给未睁眼的10d龄Wistar大鼠(10只)和Long Evans大鼠(10只)一次性腹腔注射亚硒酸钠(30μmol/kg)造模,在所有动物全部睁眼后(即实验第7d),用裂隙灯观察晶状体混浊情况并进行评分。结果:所有大鼠均安全诱导出白内障动物模型,但Wistar大鼠诱导后的晶状体混浊情况相对单一,而Long Evans大鼠具有多样性,Wistar大鼠的晶状体混浊程度明显重于Long Evans大鼠(P<0.01)。结论:Wistar大鼠经亚硒酸钠诱导后,晶状体的混浊情况较Long Evans大鼠相对稳定,便于对照研究,在研究治疗与预防白内障方面较Long Evans大鼠更适合。Long Evans大鼠经亚硒酸钠诱导后,晶状体混浊呈现出多样性,更接近于白内障的临床表现。

OTSUKA-LONG-EVANS-TOKUSHIMA FATTY糖尿病大鼠周围神经的结构蛋白改变

为了解 Otsuka-Long-Evans-Tokushima Fatty( OLETF)糖尿病大鼠周围神经的结构蛋白改变 ,使用 OL ETF大鼠 10只/L ong-Evans-Tokushima-Otsuka( LETO)对照大鼠 6只 ,于糖尿病发病后 6个月取坐骨神经 ,制成冰冻切片和单纤维贴片 ,进行神经结构蛋白的免疫组织化学染色。在光镜下观察到 OLETF大鼠周围神经部分区域有结构异常。轴索结构中 ,Ranvier结区的钠离子通道蛋白密度降低并向结旁区移位 ,近结旁段的钾离子通道蛋白 ( Kv1.1)向 Ranvier结区和节间段弥散 ,神经丝着色浅淡且不均匀。髓鞘结构中 ,结旁段的髓鞘相关糖蛋白着色不均匀并向节间段弥散 ,致密髓鞘层的髓鞘碱性蛋白和 Schwann细胞表面的半乳糖脑苷脂基本正常。上述结果提示 Ranvier结区的轴膜和结旁段的髓鞘是 OL

清洁级Long Evans大鼠生产性能的研究

目的通过对清洁级Long Evans大鼠生长发育及繁殖性能的主要指标测定,为其大量生产和使用提供基础数据。方法在屏障设施(SPF级)内饲养40对清洁级Long Evans大鼠种鼠,采用一雌一雄间隔同居方式交配5胎,测定其生长发育及繁殖性能的主要指标;从第2胎中选择60只离乳仔鼠,雌雄各半,间隔5d称重,描记生长曲线。结果以第2胎的产仔数、初生窝质量、离乳窝质量和离乳鼠质量最高,第5胎最低;描记的生长曲线与Taconic公司公布的相似。结论Long Evans大鼠以连续繁殖4胎为宜,第2胎最适合留种。

西藏自治区1例儿童Evans′综合征

1病例资料9个月龄藏族男孩,因“发现皮肤黄染伴发热、咳嗽、呕吐5天”入院。急诊血常规:白细胞14.62×10^(9)/L,红细胞数2.61×10^(12)/L,血红蛋白浓度68g/L,网织红细胞百分比8.63%,血小板数27×10^(9)/L,CRP 20.51mg/L。

Therapeutic effects of sericin on diabetic keratopathy in Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty rats

An Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty(OLETF)rat provides a useful model for studies to develop corneal wound healing drugs for use in diabetic keratopathy resulting from type 2 diabetes mellitus.We investigated the effects of sericin on corneal wound healing in OLETF rats.Corneal wounds were prepared by removal of the corneal epithelium and documented using a TRC-50X.Sericin was instilled into the eyes of rats five times a day following corneal abrasion.The plasma levels of glucose,triglycerides,cholesterol and insulin in 38 wk old OLETF rats were significantly higher than in normal control rats(LETO rats),and the rate of corneal wound healing in OLETF rats was slower than in normal rat,probably due to the suppression of cell migration and proliferation caused by high plasma glucose levels.The corneal wounds of OLETF rats instilled with saline showed almost complete healing 72h after corneal epithelial abrasion.On the other hand,the instillation of sericin has a potent effect in promoting wound healing and wound size reduction in OLETF rats and the wounds showed almost complete healing at 48 h after abrasion.The sericin may be an effective and safe drug to promote corneal wound healing in diabetic keratopathy.

Proteins Associated with the Termination of Ocular Dominance Column Plasticity in Long Evans Rats

Purpose:To investigate the mechanism of the termination of ocular dominance column plasticity by electrophysiologic analysis and 2-dimensional electrophoresis-mass spectrography(2-DE/MS).Methods:The changes in ocular dominance columns following monocular deprivation were electrophysiologically detected in 22-day-old,100-day-old and chondroitinase-perfused 100-day-old rats.Total protein of grey matter of the primary visual cortex was extracted and studied by 2-DE/MS from the three groups of rats.Results:Monocular deprivation may lead to shifts in ocular dominance columns in 22-day-old and chondroitinase-perfused 100-day-old rats,but not in 100-day-old rats.Four protein spots present in grey matter of the primary visual cortex in 100-day-old,but not in that of 22-day-old and chondroitinase-perfused rats,and mass spectrography identified two of these proteins.Conclusions:The electrophysiologic results show that ocular dominance column plasticity presents in 22-day-old rats,ends up in 100-day-old rats and restored in chondroitinase-perfused 100-day-old rats.2-DE/MS results show that phosphatidylethanolamine binding protein and glial fibrillary acidic protein delta may be associated with the termination of ocular dominance column plasticity in the rat,but need more evidence to confirm it.

甲状腺亢进引起的肝衰竭合并Evans综合征1例

患者,女性,28岁,教师。因“持续乏力1月余,尿黄1周”于2022年9月中旬入院。患者2022年8月开始因劳累出现乏力,并逐渐加重,病初未行诊治。约9月6日开始出现心慌、手抖,伴尿黄,并逐渐加重,9月12日在当地医院就诊。查肝功能:ALT 11.3 U/L,AST 26 U/L,TBil 127.5μmol/L,DBil 110.1μmol/L,Alb 24.5 g/L,ALP 103 U/L,血钠131.7 mmol/L。甲状腺功能:TSH 0.005 U/mL,FT321.52 pmol/L,FT485.13 pmol/L。叶酸:7.88 nmol/L;维生素B 121476 pmol/L;铁蛋白762.7 ng/mL。血常规:WBC 10.01×10^(9)/L,NE 63.8%,HB 28 g/L,PLT 9×10^(9)/L;凝血常规:PT 23.7秒。乙型肝炎病毒表面抗体阳性;丙型肝炎病毒抗体阴性。

Long Evans大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型的特征及其造模前后谷氨酸的含量

目的观察Long Evans大鼠视网膜缺血再灌注(retinal ischemia reperfusion,RIR)损伤后视网膜的功能、结构及谷氨酸含量的变化,为视网膜的损伤及可能保护机制研究提供参考。方法随机选取30只成年SPF级Long Evans大鼠,对其左眼前房持续60 min灌注高压生理盐水(132 mmHg),构建RIR损伤模型,右侧眼不处理作为自身对照。在造模后1、3、7和14 d,利用闪光全视网膜电图(flash electroretinogram,f-ERG)检测视网膜电生理功能的变化情况;在造模前及造模后3、7、14 d,利用光学相干断层技术(optical coherence tomography,OCT)测量视网膜厚度,眼底成像观察眼底血管的变化情况;于造模后14 d处死大鼠,进行石蜡包埋、苏木精伊红(hematoxylin eosin,HE)染色和缺口末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)荧光染色观察视网膜形态结构、细胞凋亡及分布情况,ELISA检测视网膜谷氨酸的含量。结果与对照眼相比,造模眼从第1天开始视网膜电图b波振幅极显著下降(P<0.01),潜伏期极显著延迟(P<0.01);OCT显示从第3天开始视网膜神经节细胞复合体(retinal ganglion cell complex,GCC)厚度极显著变薄(P<0.01),从第7天开始全层视网膜厚度极显著变薄(P<0.01),且都随着时间延长越来越薄(P<0.05);眼底照片显示视网膜从第3天开始出现明显的缺血,一直到第14天都没有恢复到正常水平;第14天HE染色切片结果显示视网膜萎缩,内层明显变薄,视网膜神经节细胞(ganglion cells,RGCs)减少;TUNEL荧光染色结果显示视网膜各层出现明显的细胞凋亡;ELISA结果显示造模后视网膜谷氨酸含量增加(P<0.05)。结论Long Evans大鼠RIR损伤引起视觉电生理功能严重损伤,视网膜萎缩,尤其GCC厚度减少最明显,且随着时间延长损伤加剧,不可逆转,RGCs凋亡,眼底血管缺血,视网膜谷氨酸含量增加,为视网膜损伤类疾病的研究提供良好的动物模型。

股骨近端防旋髓内钉结合加速康复理念在Evans-JensenⅤ型股骨转子间骨折治疗中的应用效果

目的 探究股骨近端防旋髓内钉联合加速康复理念在Evans-JensenⅤ型股骨转子间骨折治疗中的临床效果。方法 选取2021年7月—2023年10月南宁市第三人民医院骨科住院确诊为Evans-JensenⅤ型股骨转子间骨折的80例患者为研究对象,按治疗方法的不同分为对照组与观察组,各40例。对照组采用股骨近端锁定加压钢板,观察组采用股骨近端防旋髓内钉+加速康复理念。比较两组术中与术后指标(术中出血量、手术时间、术后下床活动时间、骨折愈合时间、术后1年颈干角丢失)、Harris评分及并发症发生情况。结果 观察组术中与术后指标、Harris评分明显优于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。观察组并发症总发生率为5.00%(2/40),低于对照组的20.00%(8/40),差异有统计学意义(χ^(2)=4.114,P<0.05)。结论 在Evans-JensenⅤ型股骨转子间骨折患者中应用股骨近端防旋髓内钉联合加速康复理念,效果显著,能促进髋关节功能的良好恢复,具有较高的安全性。

人工髋关节置换术与股骨近端防旋髓内钉治疗EvansⅠ型股骨粗隆间骨折患者的临床效果

目的探讨人工髋关节置换术与股骨近端防旋髓内钉对EvansⅠ型股骨粗隆间骨折患者的临床疗效,以及对关节功能的改善效果。方法回顾性分析2019年6月至2022年8月砀山县人民医院收治的75例EvansⅠ型股骨粗隆间骨折患者的临床资料,根据治疗方法的不同,分为A组(人工髋关节置换术治疗,37例)和B组(股骨近端防旋髓内钉治疗,38例)。两组患者术后均进行常规功能锻炼、消炎、抗凝等治疗,并持续随访12个月。比较两组患者的各项围术期指标,术前、术后3个月患者关节功能评分、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10),全血血红蛋白(Hb)、红细胞比积(HCT)水平的变化情况,以及随访期间并发症的发生情况。结果B组手术时间短于A组,术中出血量、术后引流量均低于A组,卧床时间、术后负重时间均长于A组;与术前比,术后3个月两组患者各项髋关节功能Harris评分均升高,且A组高于B组;TNF-α、IL-10水平及全血Hb、HCT水平均降低,但B组均高于A组(均P<0.05);两组并发症总发生率经组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论EvansⅠ型股骨粗隆间骨折患者采用股骨近端髓内钉治疗可降低术中出血量、术后引流量,并减少术后并发症的发生。而人工髋关节置换术术后无需进行长时间卧床休养,髋关节功能恢复良好。两种方法各具利弊,可根据患者个体情况择优选择手术术式。

人工全髋关节置换术治疗Evans-JensenⅢ型股骨转子间骨折的效果观察

目的:探讨人工全髋关节置换术(THA)治疗Evans-JensenⅢ型股骨转子间骨折的效果.方法:选择2021年1月-2022年10月在我院进行手术治疗的84例Evans-JensenⅢ型股骨转子间骨折患者作为研究对象,随机将其分为对照组与观察组,各42例.观察组采用THA治疗,对照组采用股骨近端髓内钉内固定手术治疗,比较2组围手术期指标、疼痛视觉模拟(VAS)评分、血流动力学变化与并发症发生情况.结果:观察组的手术时间、术后住院时间及切口长度均短于对照组,术中出血量均少于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05).术后1、3、7 d,观察组的VAS评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).术后7 d,观察组血小板聚集指数、血浆比黏度均低于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05).观察组术后1、2、3个月的髋关节Harris评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).观察组并发症发生率为4.76%,低于对照组的19.05%,差异有统计学意义(P<0.05).结论:THA治疗Evans-JensenⅢ型股骨转子间骨折能提升患者康复速度,缓解疼痛,调节血液流变学指标,减少并发症的发生,促进髋关节功能的恢复.

PFNA与DHS治疗EvansⅠ型老年股骨粗隆间骨折的疗效分析

目的比较EvansⅠ型老年股骨粗隆间骨折的应用动力髋螺钉(DHS)和股骨近端防旋髓内钉(PFNA)治疗的临床疗效。方法选取2009年2月至2013年4月收治的62例EvansⅠ型老年股骨粗隆间骨折患者,其中DHS组30例采用动力髋螺钉进行内固定治疗,PFNA组32例采用股骨近端防旋髓内钉内固定手术治疗,比较2组患者VAS评分、手术时间、术中出血量、住院时间、骨折愈合时间、术后并发症及患髋功能恢复情况。结果患者均获随访,随访时间12~32个月,平均(15.0±3.2)个月,DHS组有内固定失败2例,1例患者术后出现伤口液化,经过换药处理后痊愈,PFNA组有内固定失败1例,骨不愈合或延迟愈合1例。PFNA组较DHS组在手术时间、术中出血量、住院时间比较,差异有统计学意义(P<0.05),术后髋关节功能Harris评分方面有优势。2组术后VAS评分、骨折愈合时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PFNA和DHS内固定手术都是治疗EvansⅠ股骨粗隆间骨折的有效治疗方法,PFNA手术创伤较小、术中出血量少,而且并发症少,住院时间较短,髋关节功能恢复更好。

基于Evans截割模型的镐型截齿峰值截割力的计算

为了能对镐型截齿在平面截割截槽对称条件下的峰值截割力进行较为准确的预测,基于Evans的截割模型,通过分析截割时齿头的锥形表面因岩石的夹制效应而接触应力分布有所不同,理论推导出了一个新的峰值截割力计算公式以及公式应满足的截割边界条件。相比现有其他截割力计算公式,除了考虑截齿半锥角θ、煤岩抗拉强度σt及齿岩之间摩擦因数f等参数的影响,且将煤岩的脆性指数m引入其中,计算结果与试验值更为接近。公式所应满足的截割边界条件,可用截深h和加载位置与相邻自由边界垂直距离s比值的最低限值smin/h表示,且值大小受截齿半锥角θ影响较小,而主要与煤岩脆性指数m有关,当m介于5～15时,smin/h介于2～3,符合既有试验所得结果。所得公式和结论可为进一步分析和推导镐型截齿在实际采掘条件下包含更多参数的峰值截割力提供理论基础和指导。

Evans蓝灌注血管造影对改良型高氧诱导小鼠视网膜新生血管形态观察

目的验证Evans蓝灌注血管造影对小鼠视网膜新生血管形态观察的可行性。方法C57BL/6J小鼠于生后7d置于含体积分数(75±2)%氧气的密闭氧箱内,每日加食换水替换母鼠,5d后返回正常大气环境,制作高氧诱导的小鼠视网膜新生血管动物模型。于生后15d、17d、19d、21d、24d、30d麻醉小鼠后行质量分数2%Evans蓝上腔静脉灌注,5min后处死,摘取眼球,固定后视网膜铺片,荧光显微镜下观察、照相。结果Evans蓝灌注血管造影可以清楚地显示小鼠视网膜深浅2层血管网及中间的连接血管,并能动态反映高氧诱导的小鼠视网膜形成无灌注区、血管扩张迂曲及渗漏、新生血管及血管瘤的形成。后期血管增殖反应慢慢消退这一过程也能呈现。显影清晰、完全,方法简便、可重复性高。结论Evans蓝灌注血管造影可准确、动态反映小鼠视网膜新生血管病变形态特点,且价格低廉、简单易行,为视网膜新生血管性眼病的预防与治疗提供广阔的研究前景。