长期冰冻贮藏对龙眼肉多酚含量及抗氧化活性的影响

以广西产22个品种龙眼肉为研究对象,采用福林酚法测定不同品种龙眼肉的多酚含量,利用1,1‐二苯基‐2‐三硝基苯肼(1,1‐diphenyl‐2‐picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力、2,2′‐联氮‐双‐3‐乙基苯并噻唑啉‐6‐磺酸[2,2′‐azinobis(3‐ethylbenzothiazoline‐6‐sulfonic acid),ABTS]阳离子自由基清除能力、铁离子还原能力法测定其抗氧化活性,并研究长期冰冻贮藏前后多酚含量和抗氧化活性的变化。研究结果表明,不同品种龙眼肉之间多酚含量差异明显,鲜品中大乌圆多酚含量最高,畹町多酚含量最低,分别为84.83、6.74 mg/g,两者之比为12.59。冰冻贮藏5个月后,冻品中多酚含量最高和最低的品种分别为龙优和西贡1号。对比研究长期冷冻贮藏前后多酚含量变化发现,灵龙和畹町冷冻前后多酚含量基本不变,均在7 mg/g左右,其余品种均明显下降。其中下降最明显的前3个品种为大乌圆、早熟广眼和泰国热带,分别下降92.17%、91.87%和90.38%。与鲜品早熟广眼、青皮石硖相比,鲜品大乌圆具有更好的抗氧化活性。长期冰冻条件下,龙眼肉对ABTS+自由基清除能力和对铁离子还原能力均下降,对DPPH自由基清除能力增加。综上,龙眼肉鲜品多酚含量高、抗氧化能力强。

龙眼乳酸菌发酵工艺条件优化及其挥发性风味物质变化

【目的】建立龙眼乳酸菌发酵的优化工艺条件,明确乳酸菌发酵前后其挥发性风味物质的变化,为龙眼功能性饮料的开发提供指导。【方法】采用梯度浓度驯化法将乳酸菌(保加利亚乳杆菌﹕嗜热链球菌=1﹕1)依次接入到含60%、70%、80%、90%(质量分数)龙眼果浆和10%脱脂乳的混合物中进行驯化,分析驯化过程中龙眼果浆酸度和p H的变化;以总酸为指标,通过Box-Benhnken中心组合试验设计优化乳酸菌发酵龙眼果浆的工艺条件,建立包括发酵时间、发酵温度、脱脂奶粉添加量和接种量的4因素回归模型;采用顶空固相微萃取和气相色谱-质谱联用的方法分析龙眼果浆发酵前后主要挥发性风味物质变化。【结果】(1)经过梯度浓度驯化后,得到了能在高浓度龙眼果浆中发酵的乳酸菌,经过12 h发酵,90%龙眼果浆的酸度由9.5oT升至104.4oT,p H由7.12降至4.44,其酸度显著高于60%和70%的龙眼果浆(P<0.05),而p H与60%、70%和80%龙眼果浆无显著差异(P>0.05)。(2)经回归模型并结合验证试验,确定乳酸菌发酵龙眼果浆的最佳工艺条件为:发酵时间12 h、发酵温度45℃、脱脂奶粉添加量5%、接种量3%。在该条件下,龙眼果浆的酸度由发酵前的9.5oT升为105.1oT,与模型预测值的相对误差为1.2%,可用于实际生产中预测。(3)龙眼果浆经乳酸菌发酵后其挥发性风味物质发生了显著变化。共有53种挥发性物质被检测出,其中萜烯烃类15种、醇类6种、酯类18种、酮类7种、醛类3种、酸类2种以及其他类2种。与发酵前相比,龙眼果浆发酵后新产生了18种挥发性风味物质。发酵后醇类、醛类、酯类、酮类和酸类挥发性风味物质的含量呈增加趋势,而萜烯烃类含量呈降低趋势。乳酸菌发酵龙眼果浆主要挥发性风味物质为乙醇25.68μg·g-1、4-(1-甲基乙基)-苯甲醇2.42μg·g-1、乙醛1.95μg·g-1、苯甲醛1.25μg·g-1、乙酸乙酯2.19μg·g-1、苯甲酸甲酯1.05μg·g-1、水杨酸甲酯1.93μg·g-1、3-羟基-2-丁酮1.085μg·g-1、反式-罗勒烯97.81μg·g-1、别罗勒烯1.923μg·g-1、乙酸1.84μg·g-1,其中苯甲醛和乙酸乙酯由发酵产生,乙醇、乙醛、别罗勒烯及乙酸经发酵后含量增加。【结论】乳酸菌发酵显著增加龙眼果浆的总酸及挥发性风味物质,通过优化控制发酵条件,可以开发风味独特的龙眼乳酸菌饮料新产品。

龙眼果肉提取物改善东莨菪碱诱导小鼠学习记忆功能

【目的】比较不同剂量龙眼果肉醇提物和水提物对东莨菪碱所致记忆获得性障碍小鼠学习记忆功能的影响,初步解释龙眼果肉改善学习记忆的作用机制。【方法】分析龙眼果肉醇提物和水提物中主要活性物质含量。将无特定病原体(SPF级)雄性昆明小鼠随机分为空白组、模型组、龙眼果肉醇提物低剂量组/高剂量组(150 mg·kg^(-1)/300mg·kg^(-1))、龙眼果肉水提物低剂量组/高剂量组(150 mg·kg^(-1)/300 mg·kg^(-1)),共6组,连续灌胃28 d后,空白组腹腔注射等量生理盐水,各试验组腹腔注射东莨菪碱造模,0.5 h后,以潜伏期和穿梭次数为考察指标,采用避暗试验进行行为学测试,作为习得成绩;24 h后再次进行避暗试验,对小鼠进行记忆保持测试,测试结束后摘眼球取血,脱颈致死,取脑组织进行生化指标检测。测定脑组织的胆碱类(乙酰胆碱转移酶choline acetyltransferase,ChAT和乙酰胆碱酯酶acetylcholinesterase,AChE活力)及抗氧化相关指标(超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量),血清中抗氧化相关指标(SOD、GSH-Px活力及MDA含量)。通过综合比较各组间行为学试验指标、脑组织、血清生化指标,判断龙眼果肉改善学习记忆功能的作用效果及作用机制。【结果】分析龙眼果肉提取物成分发现,龙眼果肉水提物主要为多糖及蛋白质,醇提物除含有糖类外,还含有较丰富的酚类、黄酮类和磷脂物质,其中,醇提物中总酚、总黄酮、总磷脂含量显著高于水提物的(P<0.05)。行为学试验表明,模型组小鼠在避暗试验中5 min内穿梭次数为2.89次,是正常小鼠的6.09倍,高剂量龙眼果肉醇提物和水提物组小鼠穿梭次数分别为0.75次和0.56次,与正常组无显著差异;痴呆小鼠在避暗试验中的潜伏期仅为正常组的0.43倍,与模型组相比,各剂量龙眼果肉醇提物和水提物均能显著增加痴呆小鼠在避暗试验中的潜伏期(P<0.05),且存在一定剂量效应关系,其中龙眼果肉醇提物和水提物高剂量组小鼠的避暗潜伏期分别为289.18 s、290.80 s,与正常组相比无显著差异(P>0.05)。生化指标方面,与模型组相比,各剂量龙眼果肉醇提物和水提物均能显著增加痴呆小鼠脑组织中ChAT活力,显著降低AChE活力(P<0.05),且存在一定的剂量效应关系。相同剂量时,龙眼果肉水提物效果优于醇提物,其中龙眼果肉醇提物高剂量组,龙眼果肉水提物低、高剂量组小鼠脑组织中ChAT活力基本恢复正常水平;在抗氧化水平方面,与模型组相比,龙眼果肉醇提物高剂量组显著增加痴呆小鼠脑组织和血清中SOD、GSH-Px活力,显著降低MDA含量(P<0.05),基本达到正常水平,效果优于同等剂量的龙眼果肉水提物。【结论】龙眼果肉水提物和醇提物均可改善东莨菪碱诱导记忆获得性障碍小鼠的学习记忆功能,但二者的作用机制可能存在差异,龙眼果肉水提物主要通过调节胆碱能神经系统改善学习记忆功能,其主要作用的物质基础可能为多糖或糖蛋白;醇提物则主要通过提高机体抗氧化活力改善学习记忆功能,其主要作用物质可能为多酚、黄酮、磷脂等。

龙眼采后果肉生理生化变化研究

观察了石硖、储良龙眼 (DimocarpuslonganLour.cv .Shixia&Chuliang)在 4和 2 0℃条件下的贮藏效果 ,测定了果肉生理生化变化 .结果表明 :低温能够大大延缓果肉的衰败进程 ,石硖明显比储良耐贮藏 ,储良 33d、石硖 5 0d时果肉几乎全部流汁 .随着贮期延长 ,整果和果肉质量损失率和霉烂率增加 ,好果率降低 ,果皮褐变 .生理生化变化表现为丙二醛 (MDA)含量逐渐增加 ;超氧化物岐化酶 (SOD)活性 (4和 2 0℃ )变化不明显 ,相对较稳定 ,储良活性比石硖低 ;过氧化物酶 (POD)呈上升趋势 ,2 0℃下活性明显比 4℃下高 ;过氧化氢酶 (CAT)活性呈显著下降趋势 。

荔枝、龙眼果肉及荔枝、龙眼多糖清除活性氧自由基的研究

利用过硫酸铵N,N,N',N'-一四甲基乙二胺体系检测O2-·氧自由基的方法(AP-TEMED法),研究荔枝果肉、龙眼果肉对活性氧自由基O2-·的清除作用以及对龙眼多糖、荔枝多糖的抗脂质过氧化物的作用进行了测定。实验结果表明,两种水果果肉对活性氧具有较强的清除能力,而且龙眼果肉的清除作用比荔枝强,而荔枝多糖在清除自由基的作用呈正相关系,龙眼多糖在这方面能力比荔枝弱。

不同干燥方法对龙眼果肉品质特性的影响

【目的】考察不同干燥方法对去壳龙眼果肉品质特性的影响,评价微波真空干燥工艺的可行性。【方法】以龙眼果肉干制品的收缩率、复水率、色泽、多糖含量、SOD活性和感官品质为评价指标,研究热风干燥、真空干燥、微波干燥、微波真空干燥和真空冷冻干燥5种干燥方法对龙眼果肉品质特性的影响。【结果】5种干燥方法所得龙眼果肉的收缩率、复水率、色泽、多糖含量和SOD活性存在差异,微波真空干燥所制龙眼果肉的色泽最佳,收缩率、复水率、多糖含量和SOD活性仅次于真空冷冻干燥,但微波真空干燥的时间短、温度低、效率高,且所制龙眼果肉结构完整,金色饱满,质地适中,具有龙眼特有的风味,综合品质最好。【结论】微波真空干燥是最适的龙眼果肉干燥方法,可应用于工业化生产。

响应面试验优化龙眼肉多糖乙酰化工艺及其抗氧化活性

对龙眼肉多糖进行乙酰化修饰最佳工艺研究,采用乙酸酐法制备乙酰化龙眼肉多糖,以取代度为指标,采用响应面法对工艺条件进行优化,并研究乙酰化龙眼肉多糖的体外抗氧化活性。结果显示,龙眼肉多糖的最佳乙酰化条件为:乙酸酐-多糖物质的量比(投料比)10.2∶1、反应温度42℃、反应时间30 min。该工艺条件下龙眼肉多糖乙酰化取代度达到0.443。乙酰化龙眼肉多糖能够清除羟自由基、抑制脂质过氧化以及H2O2诱导的红细胞溶血,半数抑制浓度(IC50)分别为702.41、646.04μg/m L和380.11μg/m L,表现出比未修饰龙眼肉多糖更强的抗氧化活性。

龙眼果肉多糖超微粉碎-酶解提取工艺优化及其免疫活性

依据Box-Benhnken中心组合原则,分别选取超声时间、酶添加量和提取时间3个因素对超微粉碎纤维素酶辅助提取工艺进行优化。通过分析多糖基本成分、分子质量、黏度、溶解度等比较热水浸提法、超微粉碎辅助法和超微粉碎纤维素酶辅助法3种方法制得的龙眼果肉多糖(LP、LP-S、LP-SE)的理化特性。通过分析对巨噬细胞分泌细胞因子的刺激作用,比较3种龙眼果肉多糖的免疫活性。结果表明:①最佳的提取工艺参数为:超微时长2 min,酶添加量140 U/g,pH值5,料液比1∶40,提取温度50℃,提取时长90 min,在此条件下,多糖提取率为38.49%;②LP-SE与LP和LP-S相比,具有得率高,分子质量小,糖醛酸含量低,鼠李糖和阿拉伯糖含量高,低黏度和高溶解性的特性;③LP-SE激活巨噬细胞分泌NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的能力显著高于LP和LP-S。不同提取工艺制备的龙眼果肉多糖的理化性质和免疫活性存在显著性差异,超微粉碎-纤维素酶辅助提取法制备的龙眼果肉多糖表现出较好的免疫调节活性。

桂圆肉中二氧化硫残留的风险评估

为了解桂圆肉中二氧化硫残留状况．采用点评估法对龙眼主产区的桂圆肉中二氧化硫残留进行慢性暴露评估。结果表明：慢性暴露量为每日允许摄入量（ADI）的0．285～0．600倍。因此，需要关注居民膳食二氧化硫摄人安全情况，尤其是对生长发育阶段的少年儿童。

响应面法优化龙眼肉微波真空干燥工艺

干燥是贮藏龙眼肉最有效的方法,本文采用响应面分析法(RSM)优化龙眼肉微波真空干燥工艺参数。以龙眼果肉为原料,采用中心组合试验设计,考察微波强度(2.0~10.0 W/g)和真空度(-55^-85 kPa)2个主要因子对干燥时间、产品色度、多糖含量和单位能耗4个指标的影响。以最短干燥时间、最大色度、最大多糖含量以及最小单位能耗为目标确定龙眼肉微波真空干燥最优工艺参数。结果表明,龙眼肉微波真空干燥最优工艺为:微波强度4 W/g,真空强度-85 kPa。在此条件下,其干燥时间、产品色度、多糖含量以及单位能耗分别为18 min,28.82,19.09%和16.45 kJ/g。

龙眼肉干品中活性物质的提取工艺优化及抗氧化作用研究

采用正交试验研究了影响龙眼肉干品中活性物质提取率的因素,通过DPPH法测定活性物质清除自由基的能力。试验结果表明,以龙眼肉干品(含水量13.62%)为原料,采用80℃热水、料水比1∶12提取2 h,龙眼多糖提取率为40.28%,总可溶性固形物提取率达73.24%;此外,龙眼肉干品提取物具有较强的抗氧化活性,其清除DPPH自由基的IC50为2.2 g/L。

高效液相色谱法分析龙眼多糖的单糖组成

以新鲜龙眼果肉为原料,采用热水浸提法提取多糖,其提取工艺条件为:料液比(W∕V)1∶3,提取温度90℃,提取时间2 h.2次重复实验的龙眼多糖得率为0.52%,总糖含量为20.23%,还原糖含量3.45%.多糖经硫酸水解后,通过PMP柱前衍生化处理后,以V(水)∶V(甲醇)=50∶50作流动相,1.0 m L/min的流速,检测波长254 nm的色谱条件,利用高效液相色谱法进行分析.结果表明,龙眼多糖中存在L-鼠李糖(L-Rha)、D-葡萄糖(D-Glc)、D-半乳糖(D-Gal)3种单糖.

不同贮藏条件下储良龙眼果实纤维素酶活性的变化

定期测定了储良龙眼(Longan chinensis Sonn.cv.chuliang)果实在不同贮藏条件下的纤维素酶活性,并探索其与果肉自溶的关系。结果表明:常温和丙烯处理后,随着贮藏时间的延长,果肉纤维素酶的活性逐渐增强,最大值分别出现在第4天和第5天,果肉自溶指数也随之增高,二者的变化趋势一致。4℃下贮藏1个月时,纤维素酶活性变化较小,始终保持在100μg/(mL.h)左右,此条件下贮藏的果实只在贮藏后期开始自溶,但在之后的货架期纤维素酶活性迅速升高,24 h就达150μg/(mL.h),自溶指数也迅速提高。

基于综合加权评分法研究不同干燥方法对龙眼肉品质特性的影响

为了提高龙眼肉干制品的品质,采用太阳能辅助热泵干燥、微波真空干燥、热风干燥、热泵干燥等干燥方法对龙眼肉进行干制,并应用综合加权评分法对龙眼肉干制品感官品质、单位能耗、多糖含量等指标进行评价。结果表明:太阳能辅助热泵干燥龙眼肉所测指标的综合加权评分在4种干燥方法中得分最高。该方法可作为最佳干燥方法应用于生产。

中温热泵干燥龙眼果肉工艺优化研究

为提高中温热泵干燥龙眼肉干制品品质及工业化应用,本文以龙眼为原料,采用Box-Behnken试验设计优化封闭式中温热泵干燥工艺参数,考察中温热泵干燥过程中干燥时间、温度、风速对龙眼肉总酸、总糖含量及色差等的影响,并采用响应面分析法建立其多元二次回归模型。结果表明,干燥温度60℃、干燥风速1.75m3/s条件下,干燥时间6~12h时龙眼肉色泽较好,干燥时间过长引起龙眼肉褐变,且样品总糖和总酸含量下降;干燥温度55~65℃时,龙眼肉色泽较好;干燥风速增大时样品总糖、总酸含量增加;干燥风速超过1.75m3/s时,龙眼肉中心温度约为58℃,龙眼肉褐变严重。封闭式热泵干燥龙眼肉的最优工艺参数为干燥时间11.50h,干燥温度65℃,干燥风速1.73m3/s,经最优的中温热泵干燥工艺制备的龙眼肉总色差7.98,总酸17.14%,总糖16.75%。

龙眼果肉干制预处理工艺的研究

以减轻龙眼果肉干制期间的皱缩变形及褐变度为目的,通过L9(34)正交试验设计,研究不同温度、热烫时间和冷却方式对热烫处理后龙眼果肉中多酚氧化酶和过氧化物酶活性的影响,比较不同浓度配比护色液对龙眼果肉干制产品色泽和感官品质的影响,并采用正交试验设计优化工艺参数。结果表明:最佳的热烫工艺参数为热烫温度100℃、热烫时间3 min、室温冷却;0.10%抗坏血酸+0.20%柠檬酸+0.10%半胱氨酸+0.10%CaCl2的复合护色液可以保持龙眼果肉干制品的最佳品质。该工艺的实施能有效抑制龙眼果肉的褐变,使果肉在干制加工过程中保持自然色泽和良好风味,解决了产品干制后果肉皱缩变形、褐变严重、色泽差、二氧化硫残留等问题,并延长了产品保质期。

羧甲基化龙眼肉多糖制备工艺优化及其抗氧化、免疫活性

利用响应面法优化羧甲基化龙眼肉多糖制备工艺,并测定其体外抗氧化活性,同时建立小鼠免疫低下模型,对所得多糖进行体内免疫调节活性研究。以羧甲基取代度为指标,通过单因素试验对一氯乙酸(monochloroacetic acid,MCA)浓度、反应温度、反应时间进行分析,得到羧甲基化龙眼肉多糖最佳制备条件为MCA浓度1.2 mol/L、反应温度73℃、反应时间3.2 h,取代度可达1.053。抗氧化活性研究表明,在质量浓度为200~3 200μg/mL范围内,龙眼肉多糖(polysaccharide from Dimocarpus longan pulp,LYP)、羧甲基化龙眼肉多糖(crboxymethylated polysaccharide from Dimocarpus longan pulp,CM-LYP)的抗氧化能力与质量浓度呈剂量依赖关系,当剂量质量浓度达3 200μg/mL时,LYP、CM-LYP对羟自由基清除率分别为(42.35±5.67)%、(84.39±4.47)%,对超氧阴离子自由基的清除率分别为(51.91±5.34)%、(87.91±7.32)%,对脂质过氧化的抑制率分别为(67.91±5.72)%、(79.85±2.92)%、对H2O2诱导的红细胞溶血的抑制率分别为(47.23±3.5)%、(54.66±2.83)%,表明羧甲基的引入增强了龙眼肉多糖的抗氧化活性;体内免疫活性实验表明,羧甲基化龙眼肉多糖可提高免疫抑制小鼠的脾脏指数、促进血清溶血素形成、提高血清和脾脏中溶菌酶含量及调节Th1/Th2平衡,与修饰前龙眼肉多糖相比,羧甲基化龙眼肉多糖具有更好的免疫调节作用。

龙眼采后果肉自溶研究进展

果肉自溶是影响龙眼采后果实贮运、货架寿命和贮藏品质的重要因素。本文综述了龙眼果肉自溶过程的组织结构变化、生理生化变化及微生物侵染与自溶的关系、果肉自溶相关的分子生物学等的研究进展,探讨龙眼果肉自溶的机理和常用的保鲜技术,并提出未来研究的方向,以期对龙眼果实采后贮运保鲜提供参考。

龙眼果肉自溶与部分氧化还原酶同工酶变化的关系

以‘石硖’龙眼果肉为材料,在(4±0.5)℃条件下贮藏,并将贮藏后期不同状态果肉分为自溶与未自溶2部分,对其中的乙醇脱氢酶(ADH)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、过氧化氢酶(CAT)、细胞色素氧化酶(COD)、苹果酸脱氢酶(MDH)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、超氧物歧化酶(SOD)8个酶进行同工酶电泳检测,以果肉在贮藏过程中的变化为参照,对龙眼果肉自溶与同工酶变化的关系进行探讨。结果表明:"石硖"龙眼低温贮藏过程中,整果果肉除POD外其余7个酶同工酶酶谱变化不大;但贮藏后期自溶果肉与未自溶果肉酶谱差异显著,其中未自溶果肉与刚采收果肉(第0天)酶谱差异不大。说明即使在同一果实中,自溶与未自溶果肉生理状况明显不同,龙眼采后果肉的生理变化主要集中在自溶果肉部分,未自溶的果肉基本维持与刚采收时相近的生理状态。自溶与未自溶果肉中,APX、CAT、MDH、COD、PPD和POD酶谱条带数目、种类以及表达量间差异显著,这几种酶可能与龙眼果肉的自溶有密切关系。

龙眼果肉自溶相关基因DlMC4的克隆和表达分析

果肉自溶是影响龙眼采后果实贮运、货架寿命和贮藏品质的重要因素。本研究通过同源序列比对及PCR技术在龙眼果肉中克隆获得与龙眼自溶相关基因cDNA序列,命名为DlMC4。同源比对及系统进化树分析结果表明,DlMC4与荔枝LcMC氨基酸序列的相似性最高。定量结果表明:在采后常温贮藏期间,果肉自溶指数随DlMC4基因表达量的上升逐步升高,且DlMC4基因在自溶指数较高的‘东壁’果肉中表达量高于自溶指数较低的‘石硖’果肉。果肉中Caspase-4酶活性的分析结果表明,2个品种的DlMC4基因表达与其酶活性和果肉自溶指数呈显著正相关。据此推测,采后贮藏后期果肉中DlMC4基因的上调表达可能对其果肉自溶起促进作用。