龙柴方治疗慢性乙型病毒性肝炎的研究进展

龙柴方是南京中医药大学金实教授的经验方,治疗慢性乙型病毒性肝炎的效果较好,具有清热解毒、疏肝健脾的功效,能够抗化学性肝损伤、促进肝细胞生长、抑制乙型病毒性肝炎肝病毒复制的作用。该文就慢性乙型病毒性肝炎病因病机、龙柴方组方、龙柴方临床疗效、龙柴方治疗慢性乙型病毒性肝炎的实验研究作一综述。

龙柴方治疗乙肝肝纤维化疗效机制的理论探讨

肝纤维化常见于不同原因引起的慢性肝脏疾病病程中,进一步发展可形成肝硬化,严重影响患者健康,抗肝纤维化是慢性肝病的重要治疗措施,临床证实肝纤维化与一定程度的肝硬化都是可逆的,尤其是中医药具有较好的综合疗效。文章就龙柴方对乙肝肝纤维化的疗效作用,从中医学对肝纤维化病因病机认识、龙柴方的立法依据、组方意义及组分药物的现代药理研究等角度进行了分析研讨,为解释和揭示龙柴方对乙肝肝纤维化发挥的疗效作用提供一定的理论依据。

HPCE测定龙柴方及组方药甘草中5种指标成分的含量

目的:建立高效毛细管电泳(HPCE)法,同时测定龙柴方及其组方药材甘草中5种指标成分含量,控制该方药的质量。方法:40mmol/L硼砂-10mmol/L磷酸二氢钠-10%甲醇(p H=8.2)为电泳介质,未涂渍标准熔融石英毛细管(64.5cm×75μm,有效长度56cm)为分离通道,分离电压为20k V,检测波长为254nm,毛细管温度为20℃,压力进样为5k Pa×6s。结果:此方法可以使样品达到基线分离,阴性样品无干扰,5种指标成分的浓度与峰面积的线性关系良好(r>0.9950);加样回收率为95.00%-100.90%。结论:该方法分离良好、精密准确,可用于龙柴方及其组方药材甘草的质量控制。

龙柴方含药血清联合恩替卡韦对HepG2.2.15肝癌细胞中P-糖蛋白和PI3K/AKT信号通路的影响

目的观察龙柴方对恩替卡韦抗乙型肝炎病毒(HBV)效果的影响,并探讨可能作用机制。方法24只SD大鼠随机分为空白组和龙柴方低、中、高剂量组,每组6只。龙柴方低、中、高剂量组大鼠分别给予龙柴方药液9.84、19.68、39.36 g/(kg·d)灌胃,空白组给予和龙柴方中剂量组等量生理盐水灌胃,连续给药7天后制备含药血清。将HepG2.2.15肝癌细胞分为空白对照组(等量培养基)、空白血清组(100%空白血清∶培养基=1∶9)、恩替卡韦组(15μmol/ml恩替卡韦∶培养基=1∶9)及恩替卡韦+龙柴方低、中、高剂量血清组(15μmol/ml恩替卡韦∶100%龙柴方低、中、高剂量含药血清∶培养基=1∶1∶8),培养24 h。MTT法检测各组细胞存活率,荧光定量PCR法测定HBV DNA表达量;ELISA法测定乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)表达量;Western blot法检测P-糖蛋白(P-gp)、蛋白激酶B(AKT)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)蛋白表达。结果各组HepG2.2.15细胞存活率差异均无统计学意义(P>0.05)。与空白血清组比较,恩替卡韦+龙柴方中、低剂量血清组HBV DNA水平、HBeAg表达量明显降低(P<0.01)。与空白组对照比较,恩替卡韦+龙柴方中剂量血清组HBsAg表达量降低(P<0.05)。与空白血清组和恩替卡韦组比较,恩替卡韦+龙柴方低剂量血清组PI3K蛋白表达降低,恩替卡韦+龙柴方中剂量血清组PI3K、AKT、P-gp蛋白表达均降低,PTEN蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01)。与恩替卡韦组+龙柴方高剂量血清组比较,恩替卡韦组+龙柴方中剂量血清组HBV DNA水平降低,PTEN蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01)。结论龙柴方对恩替卡韦抗HBV产生增效作用,其机制可能与上调PETN蛋白,抑制PI3K/AKT信号通路,从而下调P-gp表达有关,且以中剂量效果最佳。