山银花茎叶化学成分及其抗炎活性研究

目的对山银花茎叶化学成分进行分离和结构鉴定,并进行体外抗炎活性评价。方法山银花茎叶80%甲醇提取物采用Diaion HP20SS、Sephadex LH-20、高速逆流色谱、反相半制备液相色谱等进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。通过测定单体化合物抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7释放NO水平评价其抗炎活性。结果从山银花茎叶中分离得到13个化合物,分别鉴定为苄醇-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、獐牙菜苷(2)、表断马钱子苷半缩醛内酯(3)、马钱子苷半缩醛内酯(4)、裂环马钱苷(5)、断氧化马钱苷(6)、裂马钱素二甲基乙缩醛(7)、绿原酸甲酯(8)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(9)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(10)、野漆树苷(11)、木犀草素-7-O-α-L-吡喃阿拉伯糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(12)、忍冬苷(13);化合物2~8、11~13可抑制LPS诱导RAW264.7细胞释放NO。结论化合物1首次从忍冬属植物中分离得到,化合物3、5、7、9、11~12首次从山银花茎叶中发现。化合物2~8、11~13具有一定的抗炎活性。

山银花中黄酮类成分的研究

目的 :寻找山银花 (LoniceraconfusaDC .)药效物质基础 ,评价金银花类药材的质量。方法 :应用各种柱层析方法进行化学成分分离 ,并利用各种光谱技术鉴定所分离得到的化学成分。结果 :从山银花中分离得到 8个黄酮类化合物 ,经鉴定为 :木犀草素 (Ⅰ ) ,槲皮素 (Ⅱ ) ,苜蓿素 (Ⅲ ) ,苜蓿素 7 O β D 葡萄糖苷 (Ⅳ ) ,木犀草素 7 O β D 半乳糖苷 (Ⅴ ) ,芦丁 (Ⅵ ) ,金圣草素 7 O 新橙皮糖苷 (Ⅶ ) ,苜蓿素 7 O 新橙皮糖苷 (Ⅷ )。 结论 :Ⅲ ,Ⅳ ,Ⅵ ,Ⅶ ,Ⅷ为从本属中首次分离得到 ,其它均系首次从该种中分离得到。

山银花中酚酸类成分研究

目的 :寻找山银花 (LoniceraconfusaDC )药效物质物基础 ,全面评价金银花类药材的质量。方法 :应用多种柱层析方法进行化学成分分离 ,并利用各种色谱和光谱技术鉴定所分离得到的化学成分。结果 :从山银花中分离得到 4个酚酸类化合物 ,经鉴定为 :咖啡酸 (caffeicacid) (Ⅰ ) ,绿原酸 (chlorogeniccacid) (Ⅱ ) ,绿原酸甲酯 (methylchlorogenate) (Ⅲ )和 5 O 咖啡酰基 奎宁酸丁酯 ( 5 O caffeoylquinicacidbutylester) (Ⅳ )。结论 :化合物IV为从本属中首次分离得到 。

山银花化学成分研究

目的 :寻找山银花Loniceraconfusa药效物质物基础 ,为金银花的质量评价提供更全面的证据。方法 :应用各种柱色谱方法对其进行化学成分提取、分离 ,并利用各种色谱和光谱技术鉴定所分离得到的化学成分。结果 :从山银花中分离得到 7个化合物 ,经鉴定为 :芦丁、槲皮素、木犀草素 7 O β D 半乳糖苷、绿原酸、忍冬苷、β 谷甾醇及三十四烷。结论 :芦丁为首次从忍冬属中分离得到 ,其他均系从该植物中首次分离得到。

山银花中皂苷类成分研究

目的 :探讨山银花药效物质基础 ,全面评价金银花类药材质量。方法 :对山银花乙醇提取物的正丁醇萃取部分进行化学成分研究 ,并利用各种化学、色谱和光谱技术鉴定其化学结构。结果 :从山银花中分离得到 7个常春藤皂苷类化合物 ,经鉴定为常春藤皂苷元 2 8 O β D 吡喃葡萄糖基 (6→ 1) O β D 吡喃葡萄糖基酯 (Ⅰ )、常春藤皂苷元 3 O α L 吡喃阿拉伯糖基 (2→ 1) O α L 吡喃鼠李糖苷 (Ⅱ )、常春藤皂苷元 3 O α L 吡喃阿拉伯糖基 (2→ 1) O α L 吡喃鼠李糖基 (3→ 1) O β D 吡喃葡萄糖苷 (Ⅲ )、常春藤皂苷元 3 O α L 吡喃阿拉伯糖基 (2→ 1) O α L 吡喃鼠李糖基 (3→ 1) O β D 吡喃葡萄糖基 (4→ 1) O β D 吡喃葡萄糖苷 (Ⅳ )、3 O α L 吡喃阿拉伯糖基 (2→ 1) O α L 吡喃鼠李糖基 常春藤皂苷元 2 8 O β D 吡喃葡萄糖基 (6→ 1) O β D 吡喃葡萄糖基酯 (Ⅴ )、3 O α L 吡喃阿拉伯糖基 (2→ 1) O α L 吡喃鼠李糖基 (3→ 1) O β D 吡喃葡萄糖基 常春藤皂苷元 2 8 O β D 吡喃葡萄糖基 (6→ 1) O β D 吡喃葡萄糖基酯 (Ⅵ )及 3 O α L 吡喃阿拉伯糖基 (2→ 1) O α L 吡喃鼠李糖基 (3→ 1) O β D 吡喃葡萄糖基 (4→ 1) O β D 吡喃葡萄糖基 常春藤皂苷元 2

丽花蓟马对不同颜色的趋性及田间诱杀效果研究

采用7种颜色粘虫色板对丽花蓟马进行诱杀试验,从中筛选出诱杀效果较佳的4种颜色粘虫板,然后,设置不同高度粘虫板对丽花蓟马进行田间诱杀效果的对比试验,探索丽花蓟马对不同颜色的趋性以及不同高度粘虫色板对丽花蓟马的防治效果。结果显示,丽花蓟马对7种颜色粘虫板的正趋性由强到弱依次为:蓝色>黄色>白色>浅蓝色>粉红色>青色>深红色;丽花蓟马对蓝色、黄色、白色和浅蓝色粘虫板具有较强的正趋性,这4种颜色粘虫板最佳挂放高度分别为高于山银花花蕾顶端10～30、10～20、20～40cm和20～30cm,其中高于花蕾顶端10～30cm的蓝色粘虫板诱杀丽花蓟马数量较多。

山银花茎、叶、花中绿原酸分布规律研究

目的 揭示山银花茎、叶及花中绿原酸的分布状况 ,为确定金银花药材合理的药用部位及良种选育特征提供依据。方法 利用荧光显微镜观察山银花茎、叶及花中有效成分绿原酸的分布规律。结果 绿原酸在花中主要分布于萼筒 -子房壁外表皮细胞及其下 3～ 5层细胞、花冠外表皮细胞及其下 1～ 2层细胞和花冠内表皮纤毛细胞 ;在叶片中主要分布于上表皮细胞和下表皮纤毛细胞 ;在茎中仅零星分布于次生韧皮部细胞。结论 花中绿原酸分布最为广泛、含量最丰富 ,叶片次之 ,茎中最少 ;花冠内表皮纤毛和花冠外表皮腺毛的密集程度 ,以及萼筒和花冠的长度可作为山银花的育种特征。

山银花不同发育阶段花结构与绿原酸含量变化关系研究

利用HPLC测定了山银花不同发育阶段花中绿原酸的含量变化,同时采用荧光显微镜和石蜡制片法观察了花器官中绿原酸的分布部位及其在花发育过程中的结构变化,以探讨绿原酸含量变化与花结构间的相互关系。结果显示:绿原酸主要分布于萼筒和花冠筒的内、外表皮细胞及外表皮下的几层细胞中;在花发育过程中,当花蕾外观上呈绿色时含绿原酸细胞处于分化之中,而呈白色时则分化成熟,至花开放呈白色和黄色时则趋于衰亡;花中绿原酸含量在细胞分化早期较高,在细胞分化接近成熟时则开始急剧减少,至细胞趋于衰老时,绿原酸含量最低。这些结果说明,花中绿原酸含量的变化与花的发育过程密切相关;推测可能是花发育过程中的叶绿体变化直接影响了淀粉合成,进而对绿原酸含量积累产生了影响;本研靠结果为制定金银花药材的合理采收期标准提供了理论依据。

金银花与山银花的性状差异及鉴别方法

综述了金银花的植物来源忍冬和山银花的植物来源灰毡毛忍冬、红腺忍冬、华南忍冬和黄褐毛忍冬,并对其来源植物花蕾性状在表面、萼筒、萼齿、花丝和花蕾大小等方面的特点加以区分,从内部显微结构和挥发油、黄酮类化合物、有机酸类化合物等化学成分对二者进行比较,同时结合DNA指纹图谱的研究,寻找金银花与山银花的区别,形成一套多元多息鉴别金银花与山银花的方法,促进合理开发和利用金银花与山银花药用植物资源,达到金银花药材"真实、优质、稳定、可控"的目的。

金银花与山银花原植物叶表皮特征的比较研究

目的探求一种准确、简便、快速鉴定金银花药材和山银花药材植物来源的方法。方法利用光学显微镜和扫描电子显微镜观察比较忍冬属5种植物(忍冬、华南忍冬、红腺忍冬、水忍冬、大花忍冬)的叶表皮特征。结果在光学显微镜和扫描电镜下该属不同植物的叶表皮特征存在显著差异。结论叶表皮特征可有效地用于金银花和山银花药材原植物的物种鉴别,并据此分别列出了光学显微镜和扫描电镜下忍冬属5种植物叶表皮特征的分种检索表。

华南忍冬组织培养的无菌体系建立

以广西山银花的种植品种华南忍冬带腋芽茎段为外植体建立无菌体系。结果表明,较适宜的灭菌处理为外植体用75%酒精处理25s,再用0.1%升汞溶液(加吐温80)处理9min,污染率最低为6.7 %;初代培养腋芽萌发较适宜的培养基为MS+6-BA2.0mg/L,萌发率63.3%,比CK组的高33.3%;继代周期为30d,继代增殖较适宜培养基为MS+6-BA1.7mg/L,芽比较粗壮,平均每丛丛芽增加芽数为10.7个,比CK组高9.5个。

金银花与山银花HPLC指纹图谱比较研究

目的通过建立HPLC指纹图谱,对金银花与山银花的化学成分进行比较研究。方法 Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.4%的磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长:238 nm,柱温:30℃,流速:1 mL/min。结果建立了金银花与山银花的高效液相指纹图谱,发现成分的相对含量有明显差异。结论利用HPLC指纹图谱可较全面的反映金银花与山银花间的差异。

金银花和山银花有效成分测定及比较分析

为了比较金银花与山银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含量差异．采用Dia—monsil C18色谱柱（4．6mmX250mm，5pm），分别以流动相乙腈-0．5％磷酸（10：90）和检测波长327nm，流动相乙腈一0．5％醋酸梯度洗脱和检测波长348nIn测定绿原酸、木犀草苷，以蒸发光散射检测器和流动相乙腈～0．4％醋酸梯度洗脱检测灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙．结果发现：绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的线性范围分别为15．28-76．4、10．8～43．2、49-196和54．6-218．4μg／mL．山银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙含量分别为0．0513％、6．953％、1．132％、5．59％；金银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙含量分别为2．82％、0．1847％、0．056％．本结果可为有效鉴别金银花和山银花提供依据，同时HPLC方法为全面控制金银花和山银花药材的质量提供了可靠的方法．

金银花、山银花药理学研究现状

忍冬属植物在我国资源丰富,且多数具有药用价值,而金银花、山银花作为主要的药用植物,具有悠久的历史。随着现代科学技术的发展,对金银花和山银的研究日趋深入和广泛。文章旨在对金银花、忍冬藤、忍冬叶及山银花的药理作用的研究现状进行总结,为今后进一步开展对忍冬属其它药用植物的研究打下基础。

药用植物华南忍冬居群遗传多样性的RAPD分析

目的:分析药用植物华南忍冬5个居群的遗传多样性和分化程度。方法:应用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术扩增可分析位点。结果:10条随机引物扩增出100个可分析位点,多态位点百分率(PPL)为87.00%。经POPGENE分析发现,华南忍冬居群平均水平的多态位点百分率为58.86%,Ne i′s基因多样性(H)为0.2647,Shannon′s信息指数(I)为0.4022,具有较高水平的遗传多样性。居群间遗传分化程度较高(Gst=0.3839);地理距离与遗传距离之间具有显著相关性(r=0.8504,P=96.80%),表明地理隔离效应是导致居群间遗传分化的重要因素。根据遗传距离(POPGENE软件)和遗传相似系数(NTSYS-pc软件)的UPGMA聚类分析,罗浮山居群(LFS)和新兴居群(XX)先聚在一起,再与南宁居群(NN)聚成一类,而徐闻居群(XW)和海口居群(HK)聚成另一类。结论:基于华南忍冬的物种保护与资源利用,建议加强现有自然居群的就地保护,促进居群的自然更新;建立种质资源库,从中选育优良品系用于药材的规范化种植。

山银花的组培快繁和种质离体保存研究

以山银花(Lonicera confusaDC.)嫩茎段为外植体,研究不同培养基(MS、1/2MS、1/3MS、N68、White)和植物生长调节剂(6-BA、IBA、NAA、2,4-D、BR)对其诱导、分化和增殖的影响,建立山银花的快速繁殖再生体系,并探讨在温度15～20℃条件下,不同保存培养基(MS、1/2MS、1/4MS)对种质离体保存的影响。结果表明:山银花嫩茎段分化能力较强,在培养基MS+6-BA0.5mg·L-1+IBA0.1mg·L-1上培养7d腋芽开始萌发,15d时的诱导率达到90%;以N68为基本培养基,附加6-BA0.4mg·L-1和IBA0.4mg·L-1能较好地促进芽的伸长和增殖,避免叶片发黄脱落,每30d的增殖倍数为5.0倍;生根培养基以1/2MS+IBA0.2mg·L-1最好,培养30d时生根率达95%;以单株芽段为离体保存材料,在1/2MS+蔗糖20g.L-1培养基上培养30d后无菌条件下加入0.5mg·L-1硝普钠溶液,继代间隔期可以延长至180d。

山银花黄酮类提取物对人肝L-02细胞甘油三酯蓄积及SREBP-1c表达的影响

目的观察山银花黄酮类提取物对人肝L-02细胞甘油三酯蓄积的影响,并初步探讨SREBP-1c蛋白及基因表达在其中的作用。方法油红O染色初步观察山银花黄酮类提取物对脂变人肝L-02细胞中脂滴形成的影响。然后以脂变人肝L-02细胞为模型,不同浓度(0、5、10、20 mg/L)山银花黄酮类提取物作用于细胞24 h以及10 mg/L山银花黄酮类提取物作用于细胞不同时间(0、12、24、48、72 h),生化试剂盒测定细胞内甘油三酯(TG)的含量,Western印迹法检测细胞内SREBP-1c蛋白表达变化,实时荧光定量PCR检测细胞内SREBP-1c mRNA表达变化。结果山银花黄酮类提取物显著降低人肝L-02细胞中脂滴含量,细胞内TG水平下降,SREBP-1c蛋白及基因表达下调,且呈现一定的剂量和时间依赖性。结论山银花中黄酮类提取物能引起人肝L-02细胞TG含量下降,且这种作用与SREBP-1c蛋白及基因表达下调有一定关系。

山银花绿原酸提取方法的比较

分别采用水提法、醇提法、酶解法、超声波法、微波法提取山银花中绿原酸,通过高效液相色谱测定提取物中绿原酸的含量。结果表明,水提法、醇提法、酶解法、超声波法、微波法均能不同程度提取山银花中绿原酸,其中微波法提取率最高,醇提法提取率最低。

山银花药用成分的提取及抑菌活性研究

目的对山银花中所含的四类药用成分进行提取及分离,并对它们进行体外抑菌试验。方法对不同提取物初步鉴定后,分别制备3个系列浓度,点样于相同培养基在37℃恒温箱培养24 h后,用纸片法测量出1～4号药对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的抑菌圈大小。结果山银花中所含酚酸类(总绿原酸)、苷类、黄酮类(总黄酮)及挥发油类成分对各试验菌株均有不同程度的抑制,且对金黄色葡萄球菌抑菌效果大于大肠埃希菌。结论山银花中酚酸类成分的抑菌效果明显高于其他三种药用成分。

广西不同产地华南忍冬中绿原酸含量测定

目的测定广西不同产地华南忍冬中绿原酸含量,评价华南忍冬药材质量。方法采用高效液相色谱法,Angilent ODSC18(4.6mm×150mm,5μm)柱,以乙腈-甲醇-0.05%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,三相的比例0～20min为7∶5∶88,25min为13∶13∶74;流速为0.5mL/min;检测波长为327nm;柱温为30℃。结果广西不同产地华南忍冬中绿原酸含量范围为2.21%～3.94%。结论广西不同产地华南忍冬中绿原酸含量存在一定的差异,但均已达到《中华人民共和国药典》的要求。