莲原花青素对链脲佐菌素诱导的糖尿病模型Wistar大鼠的降血糖作用

利用链脲佐菌素诱导并构建Wistar大鼠糖尿病模型,研究莲原花青素对糖尿病模型大鼠的降血糖活性,并初步探讨其作用机制。将实验大鼠分成空白对照组、模型组以及莲原花青素低、中、高剂量组。实验过程中分别测定各组大鼠体质量、进食量和饮水量、空腹血糖浓度、血清胰岛素浓度、C-肽质量浓度、氧化应激相关指标、总胆固醇(total cholesterol,TC)浓度、甘油三酯(triglyceride,TG)浓度并计算脏器指数,同时进行肝、肾的病理学观察。结果显示,莲原花青素有缓解糖尿病大鼠体质量减轻的趋势。高剂量莲原花青素与模型组相比可以显著或极显著降低大鼠的进食量和饮水量、空腹血糖浓度、血清TC和TG浓度(P<0.05、P<0.01)。与模型组相比,中、高剂量莲原花青素极显著降低了血清丙二醛浓度(P<0.01),显著或极显著增加了超氧化物歧化酶活力和谷胱甘肽过氧化物酶活力(P<0.05、P<0.01),从而使大鼠体内氧化应激状态得到改善。在显微镜下观察大鼠肝、肾组织的病理切片,发现莲原花青素可以在一定程度上起到保护肝脏、肾脏组织的作用。综上,莲原花青素具有明显的降血糖作用,其作用机制可能是影响脂代谢以及保护大鼠免受氧化应激。

莲房多酚的微波辅助提取技术

采用微波辅助提取莲房中多酚类化合物,并与体积分数60%丙酮回流提取法相比较.通过考察溶剂体积分数、微波输出功率、料液比、微波辅助萃取时间四因素,设计正交试验,优化莲房多酚提取工艺条件为:提取时间90 s,微波输出功率700 W,丙酮体积分数为60%,料液比1∶25(g.mL-1).在此条件下,莲房多酚和原花青素的提取得率分别为11.88%和5.58%,是体积分数60%丙酮回流提取法结果的2.1倍和2.6倍.经IR分析和HLPC检测,微波对莲房多酚类物质的结构和组成无影响,表明微波辅助法适合莲房多酚的提取.

莲房原花青素对小鼠S_(180)肉瘤及其免疫功能影响的研究

目的:探讨莲房原花青素(LSPC)对S180肉瘤小鼠及免疫功能的影响。方法:采用称重方法来讨论LSPC对小鼠S180肉瘤的抑制作用;采用小鼠碳廓清单核巨噬细胞吞噬功能测定法、迟发型超敏反应及血清溶血素测定方法,研究LSPC对荷S180肉瘤小鼠免疫功能的影响;结果:LSPC可抑制小鼠S180肉瘤生长、提高免疫器官的增长指数;能显著增强荷瘤小鼠巨噬细胞的吞噬功能、DNFB所致迟发型超敏反应以及抗体生成的能力。结论:初步证明LSPC对小鼠S180肉瘤的抑制作用与其增强荷瘤小鼠免疫功能有关。

莲房原花青素对酪氨酸酶活力和黑色素生物合成影响的初步研究

目的:探讨莲房原花青素(LSPC)对酪氨酸酶及其黑色素生物合成的抑制机理。方法:采用酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定药物干预前后酪氨酸酶活性,求出酪氨酸酶抑制率,并作出相应Lineweaver-Burk曲线,推断其抑制类型。结果:莲房原花青素能显著抑制酪氨酸酶活性,其半抑制浓度IC50为1.155g/L。并能有效抑制形成黑色素的中间产物L-多巴色素向黑色素转化其半抑制浓度IC50为1.750g/L。结论:莲房原花青素可抑制酪氨酸酶活性,且属于酪氨酸酶竞争性抑制剂。

脉冲超声辅助提取莲房多酚的工艺

为了充分利用莲房资源,利用脉冲超声技术辅助提取其中的多酚类化合物,研究了温度、超声时间、超声功率、料液比对多酚和原花青素得率的影响。试验结果表明,莲房多酚最佳提取工艺条件为:温度55℃,超声功率1000W,超声时间35min,料液比1∶35。在此条件下,莲房多酚和原花青素的得率分别为11.82%和6.60%,比70%丙酮回流提取法分别高2.0倍和2.9倍。并建立了多酚和原花青素得率与温度、超声功率、超声时间、料液比关系的数学模型。脉冲超声辅助提取莲房多酚与常规法相比,具有提取时间短、得率高等优点,有着较为广阔的应用前景。

莲房原花青素的提取纯化技术研究

对莲房原花青素的提取纯化工艺条件进行了研究,得到较优提取工艺为:提取温度50℃,提取溶剂60%乙醇,料液比1:30,提取时间30min。采用大孔吸附树脂D-101、DA-201、DM-301和聚酰胺树脂对原花青素进行纯化,结果表明,大孔树脂DA-201对莲房原花青素有较好的吸附和洗脱效果,以70%乙醇为洗脱剂,初步得到纯化的莲房原花青素,洗脱率为84.1%。

莲房原花青素对免疫功能的影响

探讨莲房原花青素(procyanidins of lotus seedpod,简称LSPCs)对机体免疫功能的影响。采用小鼠碳廓清单核巨噬细胞吞噬功能测定法、迟发型超敏反应及血清溶血素测定方法、MTT法检测T、B淋巴细胞增殖、乳酸脱氢酶法检测NK细胞活性等,研究LSPCs对小鼠免疫功能的影响。结果:LSPCs能显著增强巨噬细胞的吞噬功能、对二硝基氟苯(DNFB)所致迟发型超敏反应以及抗体生成的能力;能刺激T、B淋巴细胞增殖、提高NK细胞活性。结论:LSPCs能有效地增强机体免疫功能。

莲房原花青素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨莲房原花青素 (LSPC)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用。方法 用麻醉大鼠冠脉结扎 30min后 ,再灌注 4 5min造成心肌损伤模型。离体大鼠心脏经停灌 30min后 ,用正常K H液复灌 30min ,造成心肌损伤模型。均于实验前给予药物或生理盐水。结果 LSPC可降低复灌后血清ET和AngII的浓度 ,抑制MDA含量升高 ,并保持SOD活性及NO的水平。心脏复灌以后冠脉流量和心率明显恢复 ,心肌细胞酶CK和LDH漏出减少 ,心肌组织黄嘌呤氧化酶 (XO)的活性降低 ,心肌超微结构的病理变化改善等。

莲房原花青素对家兔血脂及肝组织形态的影响

目的 :观察莲房原花青素 (LSPC)对实验性高血脂兔及其肝组织形态学的影响。方法 :按血胆固醇水平将实验性高血脂兔随机分组 :空白对照组 ,三个不同LSPC剂量 (10 0 ,2 0 0 ,40 0mg/kg)组 ,测定口服LSPC前后血清和肝总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、血清低密度脂蛋白 胆固醇 (LDL C)、高密度脂蛋白 胆固醇 (HDL C)等指标 ,并对家兔肝脏进行病理学检查。结果 :低剂量LSPC能明显降低高血脂兔的血清及肝脏中TG(P <0 0 5 ) ,显著升高血清HDL C值 (P <0 0 1) ;高剂量LSPC能显著减少高血脂兔血清TC、LD1 C(P <0 0 1) ,同时升高血清HDL C值 (P <0 0 5 ) ,但对肝组织形态有一定的副作用。结论

莲房原花青素对乙醇诱导肝细胞损伤的拮抗作用

目的:研究莲房原花青素(LSPC)对乙醇诱导的人胚肝细胞株L-02损伤的拮抗作用。方法:观察5、10、25mg/L的LSPC与200mmol/L乙醇共同作用于肝细胞L-0224h后,对细胞的生存率,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)含量、凋亡率以及DNA损伤等指标的影响。结果:与乙醇组相比,5mg/L和10mg/LLSPC使细胞的生存率由73.14%上升到84.79%和90.52%,提高了细胞SOD、CAT、GSH的含量(P<0.01),降低MDA的生成;有效降低细胞的凋亡率,降低细胞p53和生长抑制DNA损伤基因(GADD)34、45β、153的表达,但高剂量组(25mg/L)对乙醇的拮抗作用不明显。结论:适量浓度的莲房原花青素对乙醇诱导的肝细胞L-02的损伤有拮抗作用。

莲房原花青素对D-半乳糖衰老小鼠脑组织抗氧化的作用

目的:探讨莲房原花青素(lotus seedpod procyanidins,LSPC)对D-半乳糖衰老小鼠脑组织抗氧化系统的影响。方法:雄性健康昆明种小鼠60只,随机分为对照组、衰老模型组、LSPC低剂量组(15 mg·ml^(-1))、LSPC中剂量组(30 mg·ml^(-1))和LSPC高剂量组(60 mg·ml^(-1))。采用小鼠皮下注射D-半乳糖(120 mg·kg^(-1)·d^(-1)),连续注射8周,建立小鼠衰老模型,LSPC组造模同时灌胃给予LSPC,qd,连续给药8周。化学比色法检测5组小鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量。结果:衰老模型组与对照组相比,小鼠脑组织SOD和GSH-Px活性明显降低,MDA含量明显增高(P<0.01)。与衰老模型组相比较,LSPC能明显提高衰老小鼠脑组织中SOD活性和GSH-Px活性(P<0.01),能减少MDA含量(P<0.01)。结论:LSPC对D-半乳糖所致衰老小鼠具有明显的抗氧化作用。

莲房原花青素改善小鼠学习记忆障碍的研究

目的:研究莲房原花青素(LSPC)抑制东莨菪碱和乙醇致小鼠学习记忆障碍的作用,并探讨其作用机制。方法:100只昆明小鼠分两批(50,50)进行实验,每批实验皆为5组,即正常对照组、模型组、22.5、45、90mg/kgbwLSPC组,每组10只,分别灌胃等量生理盐水、生理盐水、LSPC22.5、45、90mg/kgbw。20d后制备学习记忆障碍模型。按0.1ml/10gbw分别i.p.3mg/kgbw东莨菪碱或40%乙醇,采用Y迷宫法测定LSPC对小鼠学习记忆的影响。对于乙醇诱导的学习记忆障碍小鼠,Y迷宫结束后,取脑组织,采用试剂盒检测脑组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和B型单胺氧化酶(MAO-B)的含量及活性。结果:22.5和90mg/kgbwLSPC对东莨菪碱致学习记忆障碍小鼠有显著的改善作用。而三种不同剂量的LSPC对乙醇致学习记忆障碍小鼠均有显著的改善作用;而且可减少小鼠脑中MDA的含量、提高SOD活性和降低MAO-B活性。结论:LSPC对东莨菪碱和乙醇诱导的小鼠学习记忆障碍都有很好的改善效果。对于乙醇诱导的小鼠学习记忆障碍,LSPC的改善作用机制可能与抑制乙醇引起的小鼠脑中MAO-B活性的升高,同时减少神经元的氧化损伤有关。

莲房原花青素对二甲基苯芘蒽诱发金黄地鼠口腔癌的预防作用

目的:研究莲房原花青素总提取物(LSPC)对二甲基苯芘蒽(DMBA)诱发金黄地鼠口腔癌的预防作用.方法:用电喷雾电离质谱分析LSPC,及用100 mg/(kg bw·d)LSPC灌胃金黄地鼠或涂布地鼠颊囊,以肉眼观察颊囊粘膜、体重及死亡率变化,以实验结束后被处死动物血清中MDA、GSH-PX、T-SOD值和口腔粘膜组织常规HE染色病理观察等为指标,研究LSPC的防癌作用.结果:LSPC含量＞98%,含单体、二聚体、三聚体、四聚体原花青素和原花青素二聚体棓酸单酯和三聚体棓酸单酯,分子量范围为290～1154.3.口服和涂布LSPC对DMBA诱发金黄地鼠颊囊黏膜癌变均具有预防作用,且以涂布LSPC的预防效果较佳.

莲房原花青素低聚体纳米脂质体的制备及其稳定性、抗氧化性分析

采用逆向蒸发法和超声处理相结合成功地制备莲房原花青素低聚体(lotus seedpod oligomeric procyanidins,LSOPC)纳米脂质体,优化制备工艺并考察其稳定性和抗氧化活性。结果表明,LSOPC纳米脂质体的最佳制备工艺参数为大豆卵磷脂-胆固醇质量比3∶1、LSOPC添加量0.33 mg/m L、吐温80添加量16.7 mg/m L。在此条件下,LSOPC纳米脂质体的平均粒径为(35.57±0.08)nm,多分散指数为0.153±0.01。当LSOPC载量为1%时,脂质体为最高包埋率(71.97±0.42)%。LSOPC纳米脂质体在透射电子显微镜观察下为球状的囊泡结构,在低温时比较稳定。低浓度的葡萄糖、蔗糖及防腐剂对LSOPC纳米脂质体的粒径无显著性影响,而金属离子Fe^(3+)、Cu^(2+)、Zn^(2+)、Pb^(2+)显著影响其粒径。在4℃贮藏7 d后,与脂质体相比,LSOPC溶液清除2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基和铁还原能力显著下降。总抗氧化能力测定结果说明,LSOPC纳米脂质体的总抗氧化能力优于LSOPC溶液。

莲房原花青素对人口腔表皮样癌(KB)细胞生长及形态的影响

目的观察体外应用莲房原花青素(LSPC)对人口腔表皮样癌(KB)细胞生长的抑制作用及形态学上的影响。方法采用体外细胞培养技术、噻唑蓝显色(MTT)法观察LSPC对KB细胞生长的抑制作用;倒置显微镜、HE染色法、透射电镜研究用药前后细胞形态的变化。结果LSPC对KB细胞有很好的抑制作用,在一定浓度范围内呈剂量效应关系且只有较小的细胞毒性,细胞形态发生明显的变化。结论LSPC可抑制KB细胞生长且使KB细胞形态发生明显的变化。

莲房原花青素对乙醇诱导肝细胞DNA损伤的拮抗作用

[目的]研究莲房原花青素(LSPC)对乙醇诱导的人胚肝L-02细胞株DNA损伤的拮抗作用。[方法]观察5、 10、25 mg/L的LSPC与200 mmol/L乙醇共同作用于L-02肝细胞24 h后,对细胞生存率,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)含量,DNA损伤修复酶:[切除修复鼠缺陷交叉互补蛋白1(ERCC1)、O6- 甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)、错配修复hMSH2基因、DNA依赖的蛋白激酶复合物(DNA-PKcs)]表达水平等方面的差异进行比较。[结果]与乙醇组相比,5、10 mg/L的LSPC使细胞的生存率分别由73．14%上升到84．79％和90．52％,细胞SOD、CAT、GSH含量增加(P<0．01),MDA含量减少(P<0．01);有效降低细胞DNA损伤程度(P<0．05)。5 mg/L的 LSPC可显著增加乙醇处理细胞中ERCC1、DNA-PKcs、hMSH2的表达(P<0．01),但对MGMT的表达无影响(P>0．05), 10、25 mg/L的LSPC与乙醇组比较,所有4种DNA损伤修复酶的表达均无明显改变。[结论]适量的LSPC可拮抗乙醇诱导的L-02肝细胞的DNA损伤作用。

莲房原花青素和银杏内酯联用对东莨菪碱所致小鼠记忆获得性障碍的改善作用

目的观察莲房原花青素和银杏内酯联用对小鼠学习记忆能力的影响。方法采用Morris水迷宫筛选空间学习记忆能力相近的昆明种雄性小鼠50只,随机分为5组,即正常对照组、模型组、低剂量治疗组、中剂量治疗组、高剂量治疗组,每组10只;行为学测试开始前10min腹腔注射东莨菪碱,建立小鼠记忆获得障碍模型;3个治疗组分别灌胃50mg/kg莲房原花青素+10mg/kg银杏内酯、100mg/kg莲房原花青素+20mg/kg银杏内酯、150mg/kg莲房原花青素+30mg/kg银杏内酯;其余两组灌胃生理盐水。喂养30d后以行为学实验(Morris水迷宫法、跳台法)为指标观察莲房原花青素和银杏内酯的联合作用。结果在东莨菪碱所致小鼠记忆障碍模型中,莲房原花青素和银杏内酯联用在Morris水迷宫中可缩短潜伏期,减少游泳距离;在跳台实验中可以延长平台停留期,显著减少错误次数。结论莲房原花青素和银杏内酯联用能够改善东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍。

莲房原花青素体内抗氧化研究

目的 : 探讨莲房原花青素体内抗氧化机制。方法 : 选用 4月龄 Wistar健康大鼠1 9只 ,按性别、体重随机分成对照组和莲房原花青素组。经口灌胃 1 0 0 mg/kg,3 5 d。结果 : 原花青素组大鼠血清和皮肤组织中 MDA值显著低于对照组 (P<0 .0 5 ) ,而血清和皮肤组织中的 SOD活性、GSH- Px活性和羟脯氨酸 (Hyp)含量均显著高于对照组。结论 : 莲房原花青素能提高大鼠机体抗氧化能力 ,抑制脂质过氧化作用的发生 ,并能增加皮肤中的胶元蛋白含量。

莲房原花青素对极低频电磁场致海马神经元损伤的预防作用

研究极低频电磁场(ELF-EMF)对原代培养的大鼠海马神经元的损伤作用及莲房原花青素(LSPC)的预防作用。采用原代培养建立海马神经元极低频电磁场损伤模型及LSPC预处理模型细胞,检测神经细胞生存率、细胞形态、海马神经元细胞内活性氧(ROS)含量。结果表明:2.5、5、10μg/mL LSPC预处理组的细胞生存率分别为81.23%、90.18%和93.45%,明显高于模型组(66.88%,P<0.05);ELF-EMF引起神经元细胞内ROS含量上升(荧光强度(228.19±16.28)),经2.5、5、10μg/mL LSPC预处理后细胞内ROS荧光强度显著下降(P<0.05)。由此提示LSPC对ELF-EMF导致的大鼠海马神经元损伤有明显的预防作用。

莲房原花青素对东莨菪碱所致小鼠记忆获得性障碍的改善作用

目的观察莲房原花青素(LSPC)对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍的影响。方法采用东莨菪碱致小鼠记忆障碍模型,以行为学实验(Morris水迷宫实验、跳台实验)和乙酰胆碱酯酶活性为指标观察LSPC对小鼠记忆障碍的作用。结果 Morris水迷宫实验结果显示,LSPC可缩短东莨菪碱所致记忆障碍模型小鼠的潜伏期,减少游泳距离;跳台实验结果显示,LSPC可延长其平台停留期,显著减少错误次数;乙酰胆碱酯酶活性检测结果显示LSPC能显著抑制其乙酰胆碱酯酶活性。结论 LSPC对东莨菪碱所致小鼠学习记忆能力障碍有改善作用,其机制之一是基于对胆碱能系统的影响。