目的探讨祁州漏芦水提取物(Radix Rhapontici water extract,RRWE)对叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide,TBHP)所致血管内皮细胞凋亡的保护作用。方法体外利用TBHP制备人脐静脉血管内皮细胞损伤模型,随机分为正常对照组、TBHP损...目的探讨祁州漏芦水提取物(Radix Rhapontici water extract,RRWE)对叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide,TBHP)所致血管内皮细胞凋亡的保护作用。方法体外利用TBHP制备人脐静脉血管内皮细胞损伤模型,随机分为正常对照组、TBHP损伤组、RRWE低剂量组和高剂量组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力,比色法观察丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用荧光染色法观察活性氧(ROS)、细胞凋亡及线粒体跨膜电位水平,免疫印迹法检测细胞NF-κB、JNK、Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白的表达情况。结果 RRWE增高TBHP所致损伤的内皮细胞活力,降低细胞ROS水平,减少MDA生成,增高GSH水平与SOD活性,升高线粒体跨膜电位水平,并降低细胞p-JNK及p-NF-κB水平,降低细胞Bax/Bcl-2比值,减少caspase-3活化,抑制细胞凋亡。结论RRWE对TBHP所致的血管内皮细胞损伤具有保护作用,并抑制细胞凋亡,其机制可能与抑制JNK和NF-κB活化有关。展开更多
目的采用一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)测定漏芦中5种成分含量。方法采用HPLC,流动相为乙腈(A)-0.02%磷酸水溶液(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^(-1);柱温:30℃;检测波长:210 nm。...目的采用一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)测定漏芦中5种成分含量。方法采用HPLC,流动相为乙腈(A)-0.02%磷酸水溶液(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^(-1);柱温:30℃;检测波长:210 nm。以β-蜕皮甾酮为内参物,分别建立咖啡酸、甘草苷、迷迭香酸、齐墩果酸的相对校准因子,利用该相对校准因子计算其他4种成分含量。结果咖啡酸、β-蜕皮甾酮、甘草苷、迷迭香酸、齐墩果酸分别在2.09~104.5,2.62~131.2,1.31~65.4,3.06~152.8,1.33~66.6μg·mL^(-1)内线性关系良好(r≥0.999 5),平均加样回收率分别为98.68%,99.21%,96.50%,97.44%,100.76%,RSD分别为1.12%,0.95%,1.63%,1.60%,2.03%。12批不同产地的漏芦中5种有效成分采用QAMS与外标法的实测值之间无显著性差异。结论该方法结果准确可靠、重复性好,可用于漏芦的质量控制。展开更多
文摘目的采用一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)测定漏芦中5种成分含量。方法采用HPLC,流动相为乙腈(A)-0.02%磷酸水溶液(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^(-1);柱温:30℃;检测波长:210 nm。以β-蜕皮甾酮为内参物,分别建立咖啡酸、甘草苷、迷迭香酸、齐墩果酸的相对校准因子,利用该相对校准因子计算其他4种成分含量。结果咖啡酸、β-蜕皮甾酮、甘草苷、迷迭香酸、齐墩果酸分别在2.09~104.5,2.62~131.2,1.31~65.4,3.06~152.8,1.33~66.6μg·mL^(-1)内线性关系良好(r≥0.999 5),平均加样回收率分别为98.68%,99.21%,96.50%,97.44%,100.76%,RSD分别为1.12%,0.95%,1.63%,1.60%,2.03%。12批不同产地的漏芦中5种有效成分采用QAMS与外标法的实测值之间无显著性差异。结论该方法结果准确可靠、重复性好,可用于漏芦的质量控制。