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Reversal of 5-flouroucial resistance by adenovirus-mediated transfer of wild-type p53 gene in multidrug-resiatant human colon carcinoma LoVo/5-FU cells 被引量:7
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作者 Zhi-WeiYu PengZhao +6 位作者 MingLiu Xin-ShuDong JiTao Xue-QinYao Xin-ttuaYin YuLi Song-BinFu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2004年第13期1979-1983,共5页
AIM: To observe the reversal effects of wide-type p53 gene on multi-drug resistance to 5-FU (LOVO/5-FU).METHODS: After treatment with Ad-p53, LOVO/5-FU sensitivity to 5-Fu was investigated using tetrazolium dye assay.... AIM: To observe the reversal effects of wide-type p53 gene on multi-drug resistance to 5-FU (LOVO/5-FU).METHODS: After treatment with Ad-p53, LOVO/5-FU sensitivity to 5-Fu was investigated using tetrazolium dye assay. Multidrug resistance gene-1 (MDR1) gene expression was assayed by semi-quantitative reverse transcriptionpolymerase chain reaction and the expression of p53 protein was examined by Western blotting.RESULTS: The reversal activity after treatment with wide type p53 gene was increased up to 4.982 fold at 48 h. The expression of MDR1 gene decreased significantly after treatment with wide-type p53 gene, and the expression of p53 protein lasted for about 5 d, with a peak at 48 h, and began to decrease at 72 h.CONCLUSION: Wide-type p53 gene has a remarkable reversal activity for the high expression of MDR1 gene in colorectal cancers. The reversal effects seem to be in a time dependent manner. It might have good prospects in clinical application. 展开更多
关键词 反向作用 5-氟 抵抗力 腺病毒 调节作用 基因表达 野生型 P53基因 多药炕药性 结肠癌 肿瘤 lovo/5-fu
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结肠癌耐药细胞株LoVo/5-Fu中microRNA表达的初步研究 被引量:4
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作者 何冬雷 谢小明 +2 位作者 刘玉 夏立平 许荣华 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第18期31-35,共5页
目的建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关的microRNA。方法采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用microRNA... 目的建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关的microRNA。方法采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用microRNA芯片技术检测耐药细胞株LoVo/5-FU与其亲本细胞株LoVo中mi-croRNA的表达谱,筛选差异表达的microRNA;用实时荧光定量PCR方法对筛选出的部分差异microRNA在耐药细胞及其亲本细胞中的表达情况进行验证。结果 LoVo/5-FU细胞与LoVo细胞相比,生长缓慢,细胞体积增大,耐药株LoVo/5-FU细胞相对于其亲本LoVo细胞的耐药倍数为8.08。microRNA芯片的结果显示,耐药株LoVo/5-FU细胞与亲本LoVo细胞比较,有10个microRNA表达上调,13个microRNA表达下调;实时荧光定量pcr的结果进一步证实mir-210、mir196a、mir-1281在LoVo/5-FU中显著上调,而let-7f、mir-1228显著下调,其中mir-210在LoVo/5-FU与LoVo中的表达有明显差异。结论 LoVo/5-FU细胞株耐药性稳定,筛选获得的差异miRNA可能通过调控其靶基因而参与人结肠癌细胞对5-Fu的耐药,为进一步研究microRNA在结肠癌耐药机制中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 结肠癌 耐药相关microRNA 5-氟尿嘧啶 lovo 5-fu细胞株 microRNA芯片
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结肠癌耐药细胞株LoVo/5-FU的建立及其差异表达基因的筛选 被引量:3
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作者 盛雅萍 李建芳 +4 位作者 刘炳亚 罗建明 郑磊贞 陈强 郭伟剑 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第17期1899-1904,共6页
目的:建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关基因.方法:采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线:用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用基因芯片技术... 目的:建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关基因.方法:采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线:用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用基因芯片技术检测耐药细胞株LoVo/5-FU与其亲本细胞株LoVo中的差异表达基因,从中筛选出可能的耐药相关基因;用半定量RT-PCR方法对筛选出的部分耐药相关基因在耐药细胞及其亲本细胞中的表达情况进行验证.结果:LoVo/5-FU细胞与LoVo细胞相比,生长缓慢,细胞体积增大.LoVo/5-FU对5-FU、ADM、MMC耐药,而对CDDP无耐药性(RI:7.69,2.78,1.43和0.96).通过基因芯片筛选出差异表达基因425个,可能的耐药相关基因包括CYP1B1,NAT2,RNF20,SNAI2,MAP3K2,其中CYP1B1在LoVo/5-FU与LoVo中的表达有明显差异(Cy5/Cv3=5.877).结论:LoVo/5-FU细胞株耐药性稳定,耐药机制可能与CYP1B1,NAT2等耐药相关基因有关. 展开更多
关键词 结肠癌 耐药相关基因 5-氟尿嘧啶 lovo/5-fu细胞株 MTT法 基因芯片 逆转录-聚合酶链反应
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姜黄素与5-FU联用对人结肠癌LoVo细胞生长抑制与凋亡诱导作用研究 被引量:2
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作者 魏雯 贺彬 +1 位作者 刘骥 赵刚 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1885-1889,共5页
目的体外观察5-氟尿嘧啶(5-FU)与姜黄素联用对人结肠癌LoVo细胞的生长抑制和凋亡诱导的作用。方法采用MTT方法、流式细胞检测技术和荧光染料AO/EB双染法观察不同浓度姜黄素和5-氟尿嘧啶单独或联合应用对Lovo细胞生长和凋亡的影响。结果 ... 目的体外观察5-氟尿嘧啶(5-FU)与姜黄素联用对人结肠癌LoVo细胞的生长抑制和凋亡诱导的作用。方法采用MTT方法、流式细胞检测技术和荧光染料AO/EB双染法观察不同浓度姜黄素和5-氟尿嘧啶单独或联合应用对Lovo细胞生长和凋亡的影响。结果 MTT法检测结果显示,各药物组LoVo细胞的生长均受到了显著抑制,各剂量5-FU以及分别联合姜黄素对LoVo细胞的抑制率呈剂量-时间依赖关系;FCM检测结果表明,姜黄素联合低剂量5-FU组的早期、晚期凋亡率显著高于中剂量和高剂量5-FU单用组,姜黄素联合中剂量5-FU组的细胞凋亡率最高;荧光显微镜观察发现各实验组细胞同对照组相比呈现典型凋亡形态,且联合用药组细胞凋亡率最高。结论姜黄素与低剂量5-FU联用对体外培养的结肠癌LoVo细胞的的生长抑制和促凋亡作用能够达到高剂量5-FU单用的效果。 展开更多
关键词 姜黄素 5-fu lovo细胞 生长抑制 细胞凋亡
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人大肠癌多药耐药细胞LoVo/5-FU的建立及其生物学特性的初步研究 被引量:4
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作者 姚学清 卿三华 +3 位作者 杨洋 秦斌 袁玮 夏琼 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期19-21,共3页
目的建立人大肠癌LoVo细胞多药耐药细胞株LoVo/5-FU,并探讨其生物学特性及耐药机制。方法人大肠癌细 胞系 LoVo在体外经 2.5μg/ml5-氟尿嘧啶(5-FU)作用,成功诱导 LoVo/5-FU耐药细胞株。体... 目的建立人大肠癌LoVo细胞多药耐药细胞株LoVo/5-FU,并探讨其生物学特性及耐药机制。方法人大肠癌细 胞系 LoVo在体外经 2.5μg/ml5-氟尿嘧啶(5-FU)作用,成功诱导 LoVo/5-FU耐药细胞株。体外细胞毒性实验观察它 们对5-FU、丝裂酶素(MMC)、阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)、氨甲喋呤(MTX)和阿糖胞苷(AraC)等6种药物的敏感性。 用噻唑蓝(MTT)法、光镜及扫描电镜观察两种细胞形态及结构并绘制出细胞体外生长曲线。免疫组化LSAB法检测细 胞中P26-Bcl-2的表达。应用原位DNA末端转移酶标记法检测5-FU在两种细胞中诱导的细胞凋亡。结果LoVo/5-FU 细胞株对5-FU、MMC和ADM均有耐药性,且对5-FU的耐药程度较亲本细胞提高。与亲本细胞相比,耐药细胞株生长 慢,倍增期延长,汇合密度低,异型性明显。免疫组化LSAB法提示,LoVo/5-FU细胞的凋亡与P26-Bcl-2过度表达有 关。LoVo细胞原位DNA末端转移酶标记阳性率高于LoVo/5-FU。结论LoVo/5-FU多药耐药细胞株耐药性稳定,在相 同条件下与敏感细胞株LoVo相比,细胞凋亡受到抑制,提示LoVo/ 展开更多
关键词 多药耐药性 大肠癌 lovo/5-fu 细胞凋亡 生物学特性
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三氧化二砷对大肠癌LoVo细胞的影响及其与5-Fu的协同作用 被引量:6
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作者 钱伟峰 黄宗海 潘玉先 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2003年第4期241-243,247,共4页
目的 :观察三氧化二砷 (ArsenicTrioxide ,As2 O3 )对大肠癌LoVo细胞的体外杀伤作用 ,并研究其和 5 氟脲嘧啶(5 FU)的协同作用。方法 :用MTT法检测细胞的体外生长抑制情况。用光镜、电镜观察细胞的形态学变化 ,流式细胞仪检测细胞周... 目的 :观察三氧化二砷 (ArsenicTrioxide ,As2 O3 )对大肠癌LoVo细胞的体外杀伤作用 ,并研究其和 5 氟脲嘧啶(5 FU)的协同作用。方法 :用MTT法检测细胞的体外生长抑制情况。用光镜、电镜观察细胞的形态学变化 ,流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果 :As2 O3 对LoVo细胞的抑制作用随着浓度和作用时间的增加而增大 ,通过光镜、电镜可观察到细胞的凋亡。经流式细胞仪检测As2 O3 作用后的肿瘤细胞 ,G0 /G1细胞从 42 3%下降到 31 3%,S期细胞从 39%上升到 6 2 %。药物作用48h ,As2 O3 (0 3mg/L)组抑制率为 30 38%,而联合治疗组抑制率增至 73 75 %。结论 :As2 O3 对LoVo细胞具有杀伤作用 ,其对LoVo细胞生长抑制的影响主要作用于G0 /G1期细胞。As2 O3 与 5 FU对大肠癌LoVo细胞具有协同作用。 展开更多
关键词 三氧化二砷 大肠癌 lovo细胞 5-fu 5-氟脲嘧啶 细胞周期
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槲皮素联合5-氟尿嘧啶对人结肠癌LoVo细胞凋亡、周期和迁移能力的影响 被引量:4
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作者 王惠丽 陈柳青 +2 位作者 刘艳 邓文喻 吴炳义 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第20期3023-3025,共3页
目的探讨槲皮素与5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合用药对人结肠癌LoVo细胞增殖、凋亡及其细胞周期的影响。方法将LoVo细胞分为4组,对照组:加入适量溶剂DMSO的阴性对照组;5-Fu组:加入10 mg/L5-Fu;Q50组:槲皮素浓度为50μmol/L;联合用药组:10 mg/L的... 目的探讨槲皮素与5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合用药对人结肠癌LoVo细胞增殖、凋亡及其细胞周期的影响。方法将LoVo细胞分为4组,对照组:加入适量溶剂DMSO的阴性对照组;5-Fu组:加入10 mg/L5-Fu;Q50组:槲皮素浓度为50μmol/L;联合用药组:10 mg/L的5-Fu和50μmol/L的槲皮素联合处理LoVo细胞。LoVo细胞加药处理后,放入培养箱中48 h。流式细胞术检测LoVo细胞凋亡和细胞周期,Transwell实验检测LoVo细胞的迁移能力。结果流式细胞术检测发现对照组、5-Fu组、Q50组及联合用药组的凋亡率分别为(5.00±0.87)%、(5.97±0.67)%、(9.47±1.27)%、(18.03±0.86)%(P<0.05)。细胞周期结果显示处于G0/G1期的细胞分别占(72.48±0.65)%、(70.36±0.24)%、(69.34±1.09)%、(60.14±0.27)%,处于S期的细胞分别占(24.74±0.44)%、(26.33±0.24)%、(28.94±0.89)%、(36.37±0.17)%(P<0.05)。Transwell结果显示加入槲皮素后能抑制细胞的迁移数目。结论槲皮素可进一步促进5-Fu对LoVo细胞凋亡的影响,且能协同5-Fu对细胞周期产生影响,使G0/G1期细胞减少,S期细胞增多。此外,槲皮素和5-Fu联合应用,可抑制细胞的迁移,增强5-Fu对肿瘤生长和远处转移的抑制作用。 展开更多
关键词 槲皮素 5-fu lovo 凋亡 细胞周期 迁移
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TNP-470联合5-FU抑制结肠癌生长的实验研究 被引量:2
8
作者 范应方 黄宗海 聂晶 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1319-1323,共5页
背景与目的:新生血管生成是肿瘤生长转移的一个重要条件,本研究通过体内外实验观察血管生成抑制剂TNP-470联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对结肠癌生长的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测TNP-470和5-FU对LOVO细胞的生长... 背景与目的:新生血管生成是肿瘤生长转移的一个重要条件,本研究通过体内外实验观察血管生成抑制剂TNP-470联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对结肠癌生长的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测TNP-470和5-FU对LOVO细胞的生长抑制效应,用Burgi法分析联合用药效果。建立结肠癌皮下移植瘤模型,观察TNP-470单独或联合5-FU对移植瘤的生长抑制作用,采用免疫组化和图像分析系统定量检测肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,抗Ⅷ因子抗体标记计数肿瘤微血管密度(MVD)。结果:TNP-470和5-FU对体外培养的LOVO细胞的生长具有抑制作用,半数抑制浓度(IC50)分别为55.8ng/ml和4.6ng/ml,Burgi法分析表明两者联合应用具有协同效应,LOVO细胞生长进一步受到抑制。体内实验表明:各治疗组肿瘤的生长明显受到抑制,而联合治疗组抗瘤作用进一步增强。联合治疗组和5-FU组肿瘤组织中VEGF的表达较对照组显著减少,联合治疗组和TNP-470组肿瘤组织中的MVD与对照组比较也显著降低。结论:TNP-470能够抑制LOVO细胞及其皮下移植瘤的生长和新生血管形成,与5-FU联合应用具有协同作用,可提高抗瘤效应。 展开更多
关键词 实验研究 TNP-470 5-fu lovo细胞 结肠癌 血管生成 免疫组化 四甲基偶氮唑盐法
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5’-氮杂-2’-脱氧胞苷对HT-29和LoVo结直肠癌细胞株中Runx3基因甲基化状态、mRNA表达及蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 许春伟 王鲁平 +3 位作者 王琳 葛畅 方园 张玉萍 《贵州医药》 CAS 2015年第9期769-772,共4页
目的探讨甲基化酶抑制剂5’-氮杂-2’-脱氧胞苷(5’-Aza-2’-deoxycytidine,5’-Aza-CdR)对结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中Runx3基因甲基化水平、mRNA及蛋白表达的影响。方法用不同浓度5’-Aza-CdR处理结直肠癌细胞株HT-29和LoVo。应用Taq... 目的探讨甲基化酶抑制剂5’-氮杂-2’-脱氧胞苷(5’-Aza-2’-deoxycytidine,5’-Aza-CdR)对结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中Runx3基因甲基化水平、mRNA及蛋白表达的影响。方法用不同浓度5’-Aza-CdR处理结直肠癌细胞株HT-29和LoVo。应用TaqMan探针为基础的实时定量PCR(Methylight)方法、SYBR Green PCR方法及蛋白印迹实验(Western blot)检测药物处理前后HT-29和LoVo细胞中Runx3基因的甲基化状态、mRNA和蛋白表达。结果 TaqMan探针为基础的实时定量PCR法检测HT-29和LoVo细胞中Runx3蛋白在药物作用后异常甲基化得到逆转;实时荧光定量PCR和Western Blot检测到0.5,1.0,1.5μM 5’-Aza-CdR处理后Runx3基因mRNA和蛋白均重新表达,具有统计学意义(P均<0.05)。结论结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中Runx3启动子甲基化可能是导致该基因表达下调甚至失活的主要原因。5’-Aza-CdR能够较成功的逆转结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中Runx3基因的甲基化状态,并能恢复mRNA及蛋白重新表达。 展开更多
关键词 DNA甲基化 5’-氮杂-2’-脱氧胞苷 HT-29细胞 lovo细胞 RUNX3基因
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STAT3磷酸化抑制剂隐丹参酮提高5-FU诱导的结直肠癌细胞凋亡 被引量:4
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作者 黄岩 王洁 +1 位作者 常文军 陆一鸣 《国际药学研究杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期296-300,共5页
目的探究结直肠癌细胞中利用信号转导蛋白和转录激活因子3(STAT3)磷酸化抑制剂隐丹参酮(CTS)抑制STAT3 705位点磷酸化对5-氟尿嘧啶(5-FU)效果的影响。方法采用Western印迹法检测5株结直肠癌细胞中STAT3的磷酸化水平,挑选磷酸化程度最高... 目的探究结直肠癌细胞中利用信号转导蛋白和转录激活因子3(STAT3)磷酸化抑制剂隐丹参酮(CTS)抑制STAT3 705位点磷酸化对5-氟尿嘧啶(5-FU)效果的影响。方法采用Western印迹法检测5株结直肠癌细胞中STAT3的磷酸化水平,挑选磷酸化程度最高的2株细胞进行后续实验研究。采用Western印迹法检测5-FU处理后结直肠癌细胞STAT3磷酸化水平的变化。应用MTT实验评价5-FU与CTS联合处理结直肠癌细胞对细胞活性影响。利用流式细胞仪检测5-FU与CTS联合处理细胞后对细胞凋亡的影响,同时利用Western印迹法检测抗凋亡蛋白Bcl2的变化情况。结果 5-FU能够降低结直肠癌细胞STAT3 705位点磷酸化水平,利用CTS抑制STAT3磷酸化极大的增强了5-FU的作用效果,降低了结直肠癌细胞活性,促进了细胞凋亡。同时进一步机制研究表明CTS与5-FU联合作用降低了Bcl2蛋白水平。结论结直肠癌细胞中,利用STAT3磷酸化抑制剂CTS抑制STAT3磷酸化水平能够明显提高5-FU的作用效果。 展开更多
关键词 STAT3 结直肠癌 HCT116细胞 lovo细胞 5-氟尿嘧啶 细胞凋亡
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芸香苷逆转人大肠癌LoVo/5-氟尿嘧啶细胞耐药性及其机制 被引量:3
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作者 王婷婷 刘超怡 +2 位作者 李秀芬 李娜 刘安丽 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期906-911,共6页
目的探讨芸香苷(RT)对大肠癌耐药株LoVo/5-氟尿嘧啶(5-FU)细胞耐药性的影响及其机制。方法采用浓度梯度递增法建立耐药株LoVo/5-FU细胞;用不同剂量的RT和(或) 5-FU处理48 h后,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞活力,流式细胞术检测... 目的探讨芸香苷(RT)对大肠癌耐药株LoVo/5-氟尿嘧啶(5-FU)细胞耐药性的影响及其机制。方法采用浓度梯度递增法建立耐药株LoVo/5-FU细胞;用不同剂量的RT和(或) 5-FU处理48 h后,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,RT-PCR法检测P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)的mRNA表达水平,Western blotting法检测P-gp、MRP1、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、Akt、Survivin、细胞周期蛋白A(cyclin A)和细胞周期素依赖性蛋白激酶2 (CDK2)的蛋白表达水平。结果 LoVo/5-FU细胞中P-gp、MRP1和Survivin蛋白表达水平均显著高于LoVo细胞;5-FU和RT对LoVo/5-FU细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为21. 77 mg/L和98. 43 mg/L;在10 mg/L RT作用下,5-FU对LoVo/5-FU细胞的IC50降至10. 64mg/L,逆转倍数为2. 05;RT可协同增强5-FU引起的LoVo/5-FU细胞凋亡和S期阻滞,抑制P-gp和MRP1基因表达以及Akt磷酸化,下调Survivin、cyclin A和CDK2蛋白水平。结论 RT可通过抑制Akt信号通路以及耐药相关蛋白的表达反转LoVo/5-FU细胞对5-FU的耐药性。 展开更多
关键词 芸香苷 5-氟尿嘧啶 大肠癌lovo/5-fu细胞系 逆转耐药 免疫印迹法
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华蟾素注射液联合5-氟尿嘧啶对大肠癌LoVo细胞粘附侵袭能力的影响 被引量:1
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作者 陈映文 廖泳欣 +2 位作者 林敏 赖欣倩 耿燚 《中国医药导刊》 2022年第2期140-143,共4页
目的:探讨华蟾素注射液联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对于大肠癌LoVo细胞粘附侵袭能力的影响。方法:根据实验目的将大肠癌LoVo细胞划分为如下4组:空白对照组、5-Fu组、华蟾素组、5-Fu+华蟾素组。通过CCK-8法检测细胞粘附能力,通过Transwell小室... 目的:探讨华蟾素注射液联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对于大肠癌LoVo细胞粘附侵袭能力的影响。方法:根据实验目的将大肠癌LoVo细胞划分为如下4组:空白对照组、5-Fu组、华蟾素组、5-Fu+华蟾素组。通过CCK-8法检测细胞粘附能力,通过Transwell小室法对细胞侵袭能力加以检验。结果:通过测定各组在450 nm波长处的吸光值(OD450值)得到:5-Fu+华蟾素组的OD450值低于其余3组,5-Fu组的OD450值低于对照组和华蟾素组,华蟾素组的OD450值低于对照组(P<0.01);通过测定各组细胞侵袭个数得出:5-Fu+华蟾素组LoVo细胞侵袭细胞数目低于其余三组,5-Fu组LoVo细胞侵袭细胞数目低于对照组和华蟾素组,华蟾素组LoVo细胞侵袭细胞数目低于对照组(P<0.01)。结论:5-Fu+华蟾素可以有效抑制大肠癌LoVo细胞的粘附侵袭能力,联合用药较单药使用效果更显著,但是常规化疗治疗手段优于单独使用华蟾素。 展开更多
关键词 华蟾素注射液 5-氟尿嘧啶 大肠癌 lovo细胞 细胞粘附侵袭
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千金藤碱对结肠癌细胞5-氟尿嘧啶耐药性的逆转作用和对HO-1和NQO1表达的影响 被引量:3
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作者 马克龙 汪远金 +2 位作者 汪天明 宋睿 罗晓莹 《江西中医学院学报》 2013年第2期59-63,共5页
目的:探讨千金藤碱(Cepharanthine,CEP)逆转人结肠癌耐药细胞株Lovo/5-FU对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)的耐药性以及对HO-1和NQO1表达的影响。方法:采用药物浓度梯度递增法诱导建立结肠癌耐药细胞亚系LoVo/5-FU;用四甲基偶氮唑蓝(M... 目的:探讨千金藤碱(Cepharanthine,CEP)逆转人结肠癌耐药细胞株Lovo/5-FU对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)的耐药性以及对HO-1和NQO1表达的影响。方法:采用药物浓度梯度递增法诱导建立结肠癌耐药细胞亚系LoVo/5-FU;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测千金藤碱和化疗药物对结肠癌细胞的细胞毒性;RT-PCR和Western blot技术检测NQO1和HO-1基因的mRNA和蛋白表达水平。结果:LoVo/5-FU细胞对包括5-FU在内的4种化疗药物产生耐药性,其中对5-FU耐药性最高,是LoVo细胞的18.82倍;千金藤碱对LoVo和LoVo/5-FU细胞增殖均有抑制作用,其浓度超过20-25μg mL-1时最为明显,但是对2种细胞的抑制效果无明显差别(P>0.05);千金藤碱(2.5-10.0μg mL-1)可降低LoVo/5-FU细胞5-FU的IC50值(P<0.05-0.01),在此浓度范围内,IC50值降低的程度与剂量成正相关;LoVo/5-FU细胞中HO-1和NQO1的mRNA和蛋白表达水平明显高于LoVo细胞(P<0.05-0.01),10.0μg mL-1千金藤碱与5-FU联合处理后,LoVo/5-FU细胞中两个基因的表达水平明显降低(P<0.05-0.01)。结论:千金藤碱可抑制结肠癌细胞增殖,增加结肠癌耐药细胞株Lovo/5-FU对5-FU的敏感性,原因可能与其抑制结肠癌细胞中HO-1和NQO1的表达水平有关。 展开更多
关键词 千金藤碱 lovo/5-fu 5-氟尿嘧啶 HO-1 NQO1
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生长激素联合氟尿嘧啶对结肠癌LOVO细胞影响的实验研究
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作者 王琳 刘华 +5 位作者 谢贤和 李苏宜 陈岩菊 赵英 白殿卿 麦泽锋 《肠外与肠内营养》 CAS 北大核心 2009年第6期343-345,350,共4页
目的:探讨生长激素(GH)联合氟尿嘧啶(5-Fu)在体外对结肠癌LOVO细胞的影响。方法:将培养的结肠癌LOVO细胞分为对照组、GH组、5-Fu组和GH+5-Fu组,GH组又按剂量分为两个亚组,即GH1终浓度为50ng/mL和GH2终浓度为100 ng/mL;GH+5-Fu组又按剂... 目的:探讨生长激素(GH)联合氟尿嘧啶(5-Fu)在体外对结肠癌LOVO细胞的影响。方法:将培养的结肠癌LOVO细胞分为对照组、GH组、5-Fu组和GH+5-Fu组,GH组又按剂量分为两个亚组,即GH1终浓度为50ng/mL和GH2终浓度为100 ng/mL;GH+5-Fu组又按剂量分为两个亚组,即GH1+5-Fu(GH 50 ng/mL+5-Fu 100μg/mL)和GH2+5-Fu(GH 100 ng/mL+5-Fu 100μg/mL),加入不同浓度的处理液后24、48和72 h,分别行四基偶氮唑蓝(MTT)比色观察,计算细胞存活率。并于加入不同浓度的处理液24 h后,以流式细胞仪测定细胞周期和凋亡情况。结果:5-Fu组和GH+5-Fu组与对照组比较,细胞存活率明显下降(P<0.05)。GH+5-Fu组与单用5-Fu组比较,细胞生存率均有所降低,但各时间段无显著性差异(P>0.05)。GH组与对照组比较,S期细胞百分比和增殖指数(PI)均增加(P<0.05),G0/G1细胞百分比有所减少(P<0.05)。GH+5-Fu组的S期细胞百分比和PI均降低(P<0.05)。5-Fu组和GH+5-Fu组的细胞凋亡率均升高(P<0.05);GH+5-Fu组与5-Fu组比较,S期细胞百分比、PI和凋亡率均无显著性差异(P>0.05)。结论:rhGH体外作用于结肠癌LOVO细胞,未刺激细胞生长,GH与化疗联合用是安全的。 展开更多
关键词 生长激素 5-氟尿嘧啶 lovo细胞
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人参皂苷Rg3对大肠癌细胞系Lovo/5-Fu侵袭性及耐药影响的相关研究 被引量:7
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作者 杨茂鹏 王艳 +1 位作者 王晓红 刘静蕾 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2018年第1期24-28,共5页
目的探讨Rg3抑制大肠癌高侵袭细胞系Lovo/5-Fu的侵袭能力和逆转化疗耐药的机制。方法应用MTT法、穿膜实验、细胞膜流动性实验、Western blot等检测方法,检测不同浓度Rg3原液对Lovo/5-Fu逆转耐药的机制、细胞膜流动性的影响、细胞侵袭和... 目的探讨Rg3抑制大肠癌高侵袭细胞系Lovo/5-Fu的侵袭能力和逆转化疗耐药的机制。方法应用MTT法、穿膜实验、细胞膜流动性实验、Western blot等检测方法,检测不同浓度Rg3原液对Lovo/5-Fu逆转耐药的机制、细胞膜流动性的影响、细胞侵袭和转移能力及对转移和耐药相关蛋白nm23、caspase-8、LRP表达的影响。结果 Rg3作用后,Lovo/5-Fu细胞对氟尿嘧啶类的耐药性下降(P<0.05),细胞膜的流动性减低(P<0.05),细胞的穿膜能力减低(P<0.05),Rg3作用后caspase-8及nm23的表达明显上调,耐药相关蛋白LRP的表达无明显改变。结论 Rg3通过上调nm23的表达抑制了Lovo/5-Fu细胞的侵袭和转移能力,降低细胞膜的流动性而逆转耐药与上调caspase-8的表达相关。 展开更多
关键词 RG3 lovo/5-fu细胞 NM23 CASPASE-8 LRP
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中成药逆转人结肠癌细胞株对化疗药物耐药的研究 被引量:4
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作者 张念华 陈高峰 +2 位作者 李寿杰 武如通 高海利 《新中医》 CAS 2017年第2期11-14,共4页
目的:本研究拟观察鸦胆子油乳注射液、华蟾素注射液和注射用黄芪多糖对结肠癌耐药细胞株的杀伤作用,为临床合理、有效使用中成药提供实验依据。方法:运用药物浓度梯度递增间歇诱导法建立人结肠癌lovo细胞耐5-氟尿嘧啶细胞株,并命名为lov... 目的:本研究拟观察鸦胆子油乳注射液、华蟾素注射液和注射用黄芪多糖对结肠癌耐药细胞株的杀伤作用,为临床合理、有效使用中成药提供实验依据。方法:运用药物浓度梯度递增间歇诱导法建立人结肠癌lovo细胞耐5-氟尿嘧啶细胞株,并命名为lovo/5-Fu。MTT法检测lovo/5-Fu的耐药能力及不同浓度中成药对lovo/5-Fu细胞株的耐药逆转作用,并根据相应结果计算耐药逆转倍数(RF)。细胞迁移实验分为4组:空白对照组、黄芪多糖组、鸦胆子组和华蟾素组,检测不同中成药对lovo/5-Fu细胞株迁移能力的影响。结果:5-Fu对lovo细胞株的IC_(50)为14.5 mg/L,对lovo/5-Fu细胞株的IC_(50)为115.1 mg/L,根据上述两株细胞的IC_(50)可算出lovo/5-Fu细胞株对5-Fu的耐药指数为:7.94。浓度为17.3、45.3、83.8、112.5 mg/L鸦胆子油乳注射液的耐药逆转倍数分别为9.5、23.5、54.4、86.5倍;浓度为8.2、21.2、38.6、50.1 mg/L华蟾素注射液的耐药逆转倍数分别为11.2、25.2、56.6、90.5倍;浓度为26.3、70.9、115.2、163.4 mg/L注射用黄芪多糖的耐药逆转倍数分别为1.5、8.2、26.5、74.2倍。与空白对照组比较,黄芪多糖组、鸦胆子组和华蟾素组侵出小室的细胞数目明显减少,迁移能力明显减弱,其中以鸦胆子组和华蟾素组更为明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:鸦胆子油乳注射液、华蟾素注射液和注射用黄芪多糖这三种中成药均能不同程度的逆转lovo/5-Fu对5-Fu的耐药性,其中以鸦胆子油乳注射液和华蟾素注射液最为明显。 展开更多
关键词 人结肠癌lovo细胞株 多药耐药性 5-氟尿嘧啶(5-fu):lovo/5-fu细胞株 鸦胆子油乳注射液 华蟾素注射液 注射用黄芪多糖
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慢病毒介导RNAi抑制大肠癌细胞APRIL表达对化疗敏感性的影响 被引量:4
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作者 关婧 孙爱民 +1 位作者 王莉慧 何美蓉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1600-1604,共5页
目的探讨慢病毒介导的RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默APRIL基因对大肠癌细胞株LOVO化疗敏感性的影响。方法实验分为3组:siRNA-APRIL组、非特异性序列组和空白对照组。制备siRNA-APRIL慢病毒表达载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。转... 目的探讨慢病毒介导的RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默APRIL基因对大肠癌细胞株LOVO化疗敏感性的影响。方法实验分为3组:siRNA-APRIL组、非特异性序列组和空白对照组。制备siRNA-APRIL慢病毒表达载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。转染LOVO细胞48 h后,Western blot检测LOVO细胞的APRIL表达水平;同时用10μg/ml5-FU处理细胞,5-FU作用72 h后,采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期变化,MTT法检测细胞增殖抑制率。结果PCR和测序证实,成功构建siRNA-APRIL慢病毒表达载体。Western blot检测表明siRNA-APRIL组的APRIL表达水平下调。5-FU处理LOVO细胞后,流式细胞仪检测各组的凋亡率分别为(21.12±3.35)%、(13.06±1.92)%和(12.28±1.79)%,siRNA-APRIL组显著高于另两组(P<0.01),且G0/G1期细胞增多,G2/M期细胞减少(P<0.05);MTT法检测显示各组的增殖抑制率分别为(59.67±5.03)%、(42.33±4.16)%、和(39.67±4.73)%,siRNA-APRIL组显著高于另两组(P<0.01)。结论以APRIL为靶标的RNA干扰能下调大肠癌细胞株LOVO中的APRIL表达,增强其对5-FU的化疗敏感性。 展开更多
关键词 增殖诱导配体 RNA干扰 lovo细胞 5-氟尿嘧啶
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噻唑蓝还原法测脂肪乳剂对人结肠癌细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 高振明 王澍 +1 位作者 罗福文 王立明 《海南医学院学报》 CAS 2005年第1期21-23,共3页
目的:测定脂肪乳剂和5-FU单独或共同培养情况下对人结肠癌细胞增殖的影响,为肿瘤患者应用脂肪乳剂作为营养支持手段提供必要的理论基础。方法:应用噻唑蓝还原法(MTT法)观察LoVo结肠癌细胞株与不同浓度脂肪乳剂和5-FU单独或共同培养情况... 目的:测定脂肪乳剂和5-FU单独或共同培养情况下对人结肠癌细胞增殖的影响,为肿瘤患者应用脂肪乳剂作为营养支持手段提供必要的理论基础。方法:应用噻唑蓝还原法(MTT法)观察LoVo结肠癌细胞株与不同浓度脂肪乳剂和5-FU单独或共同培养情况下,脂肪乳剂和5-FU对LoVo细胞增殖的影响。结果:5-FU对LoVo细胞增殖的抑制随其浓度的增加而增加;较高浓度脂肪乳剂对LoVo细胞的增殖有促进作用;不同浓度的脂肪乳剂与5-FU联合应用并不影响5-FU对LoVo细胞的抑制作用。结论:体外实验表明,脂肪乳剂并不影响化疗药物抑制肿瘤细胞增殖的作用,化疗期间可应用脂肪乳剂提供必要的营养支持。 展开更多
关键词 脂肪乳剂 5-fu lovo细胞 噻唑蓝 癌细胞增殖 人结肠癌 共同培养 还原法 结论 情况
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The Effect of Targeted Magnetic Nanopaticles on Hepatoma and the Expression of bcl-2/bax Protein 被引量:2
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作者 王剑明 肖宝来 +1 位作者 郑建伟 邹声泉 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2008年第4期443-446,共4页
The effect of targeted magnetic nanoparticles on hepatoma and the underlying mechanism were examined. Nude mice transplanted with a human hepatoma cell line (HepG2 cells) were randomized into 5 groups, including: ... The effect of targeted magnetic nanoparticles on hepatoma and the underlying mechanism were examined. Nude mice transplanted with a human hepatoma cell line (HepG2 cells) were randomized into 5 groups, including: (1) group A, receiving normal saline, (2) group B, receiving 5-fluorouracil (5-Fu), (3) group C, receiving magnetic nanoparticles containing 5-Fu, (4) group D, consisting of treatment with magnetic nanoparticles containing 5-Fu and inside magnetic field and (5) group E, receiving pure magnetic nanoparticles and inside magnetic field. Morphological features of transplanted tumors in mice in each group were observed under transmission electron microscope (TEM). The expression of bcl-2/bax protein was immunohistochemically detected by SABC method. The results showed that a large number of apoptotic tumor cells were found in group B and group D under TEM. The expression of bcl-2 protein was significantly decreased and the expression of bax protein increased significantly in both group B and D as compared with those in group A, C and E (P〈0.01 for all). The decrease in bcl-2 and the increase in bax were more in group D as compared with group B (P〈0.01). It is concluded that the targeted magnetic nanoparticles containing 5-Fu can improve the chemotherapeutic effect of 5-Fu by decreasing bcl-2 expression, increasing bax expres- sion and inducing apoptosis of the liver cancer cells. 展开更多
关键词 liver neoplasms cell line bcl-2 BAX magnetic nanoparticles 5-fu
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5-氟脲嘧啶与γ-干扰素作用于Lovo细胞的实验观察
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作者 刘宗荣 马淙 +2 位作者 马文松 邵明 苏卓娃 《热带医学杂志》 CAS 2010年第7期812-814,共3页
目的观察5-氟脲嘧啶与γ-干扰素联合应用对人结肠癌Lovo细胞株的影响。方法采用Lovo结肠癌细胞体外培养,流式细胞仪检测细胞生长、增殖和凋亡的变化。结果 5-氟尿嘧啶与γ-干扰素联合应用后,细胞增殖率下降指数为0.82~1.99,而细胞凋亡... 目的观察5-氟脲嘧啶与γ-干扰素联合应用对人结肠癌Lovo细胞株的影响。方法采用Lovo结肠癌细胞体外培养,流式细胞仪检测细胞生长、增殖和凋亡的变化。结果 5-氟尿嘧啶与γ-干扰素联合应用后,细胞增殖率下降指数为0.82~1.99,而细胞凋亡率增加指数为2.48~4.89。结论 5-氟尿嘧啶与γ-干扰素联合应用可降低肿瘤细胞的增殖和提高肿瘤细胞的凋亡。 展开更多
关键词 人结肠癌lovo细胞株 5-氟脲嘧啶 Γ-干扰素
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