Roles of low?density lipoproteinreceptor?related protein 1 in tumors

Low-density lipoprotein receptor-related protein 1(LRP1,also known as CD91),a multifunctional endocytic and cell signaling receptor,is widely expressed on the surface of multiple cell types such as hepatocytes,fibroblasts,neurons,astrocytes,macrophages,smooth muscle cells,and malignant cells.Emerging in vitro and in vivo evidence demonstrates that LRP1 is critically involved in many processes that drive tumorigenesis and tumor progression.For example,LRP1 not only promotes tumor cell migration and invasion by regulating matrix metalloproteinase(MMP)-2and MMP-9 expression and functions but also inhibits cell apoptosis by regulating the insulin receptor,the serine/threonine protein kinase signaling pathway,and the expression of Caspase-3.LRPI-mediated phosphorylation of the extracellular signal-regulated kinase pathway and c-jun N-terminal kinase are also involved in tumor cell proliferation and invasion.In addition,LRP1 has been shown to be down-regulated by microRNA-205 and methylation of LRP1CpG islands.Furthermore,a novel fusion gene,LRP1-SNRNP25,promotes osteosarcoma cell invasion and migration.Only by understanding the mechanisms of these effects can we develop novel diagnostic and therapeutic strategies for cancers mediated by LRP1.

Association between Low-density Lipoprotein Receptor-related Protein 5 Polymorphisms and Type 2 Diabetes Mellitus in Han Chinese:a Case-control Study

Objective To investigate the association between low-density lipoprotein receptor-related protein 5 （LRPS） variants （rs12363572 and rs4930588） and type 2 diabetes mellitus （T2DM） in Han Chinese. Methods A total of 1842 T2DM cases （507 newly diagnosed cases and 1335 previously diagnosed cases） and 7777 controls were included in this case-control study. PCR-RFLP was conducted to detect the genotype of the two single nucleotide polymorphisms （SNPs）. Odds ratios （ORs） and 95% confidence intervals （95% CIs） were calculated to describe the strength of the association by logistic regression. Results In the study subjects, neither rs12363572 nor rs4930588 was significantly associated with T2DM, even after adjusting for relevant covariates. When stratified by body mass index （BMI）, the two SNPs were also not associated with T2DM. Among the 3 common haplotypes, only haplotype ~ was associated with reduced risk of T2DM （OR 0.820, 95% CI 0.732-0.919）. In addition, rs12363572 was associated with BMI （P〈0.001） and rs4930588 was associated with triglyceride levels （P=0.043） in 507 newly diagnosed T2DM cases but not in healthy controls. Conclusion No LRP5 variant was found to be associated with T2DM in Han Chinese, but haplotype TT was found to be associated with T2DM.

LRP5基因突变导致骨质疏松症-假性胶质瘤综合征一例报告

报告一例常染色体隐性遗传发病的骨质疏松症-假性胶质瘤综合征。先证者女性,23岁,父母非近亲结婚,出生后发现双目失明,婴儿期因发现右眼视网膜母细胞瘤行右眼球摘除术,9岁开始反复发生轻微外力骨折,诊断为成骨不全。查体发现脊柱侧凸畸形、胸廓畸形、双上肢肘外翻、四肢关节韧带松弛。双能X线吸收检测仪(dual energy X-ray absorptiometry,DXA)骨密度明显低于同龄人,腰椎1-4骨密度Z值-5,左髋骨密度Z值-1.8。X线摄片示全身骨小梁稀疏。Sanger测序显示低密度脂蛋白受体相关蛋白-5(lowdensity lipoprotein receptor-related protein 5,LRP5)基因的6号外显子和23号外显子发生复合杂合突变,导致p.Pro382Leu+p.Cys1611LeufsX33。本文通过文献复习对该病的临床表现和诊疗特点进行讨论及总结,以期帮助临床医生提高对这一疾病的认识。

绝经后2型糖尿病LRP5基因多态性与骨量异常的研究

目的分析低密度脂蛋白受体相关蛋白5(low density lipoprotein receptor related protein 5,LRP5)rs556442、rs312778位点基因多态性及突变在绝经后女性2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者中骨量异常的意义。方法收集2021年5月至2023年5月新疆石河子地区的142例绝经后女性资料进行回顾性分析,分为正常对照组(A组,n=29)、T2DM组(B组,n=30)、骨量降低组(C组,n=28)、骨量降低+T2DM组(D组,n=55)。收集记录相关基线资料,运用全自动生化测定仪测定受试者血糖、血脂及骨代谢指标。通过双能X线骨密度仪测定骨密度(bone mineral density BMD),LRP5基因位点多态性采用飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)测定,采用SNPscan技术对上述SNP位点进行基因分型。结果①四组基线资料比较,绝经年限、年龄及腰臀比(waist hip ratio,WHR)比较差异具有统计学意义(P<0.05);②与A组相比,B组的空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)升高(P<0.05);D组的FPG、HbA1c的血清学水平升高,甘油三酯(TG)血清学水平降低(P<0.05);③rs556442位点:与A组相比,D组基因型分布(AA/AG/GG基因型)有统计学意义(P<0.05);rs312778位点组间基因型(CC/CT/TT基因型)及等位基因分布频率均无统计学意义(P>0.05);④rs556442位点:与AA基因型相比,B、C组AG/GG基因型的股骨颈BMD水平降低;D组AG/GG型的HDL血清学水平降低(P<0.05)。rs312778位点:与CC基因型相比,A组HbA1C、FPG血清学水平较CT/TT基因型低(P<0.05);D组CT/TT基因型的低密度脂蛋白(LDL)血清学水平升高(P<0.05);⑤多元线性回归分析:rs556442位点,TG增加是腰L_(1~4)BMD降低的危险因素(P<0.05);rs312778位点,体质量指数(body mass index,BMI)降低是腰L_(1~4)及股骨颈BMD降低的危险因素,TG增加是腰L_(1~4)BMD降低的危险因素(P<0.05);⑥在rs556442、rs312778位点骨量异常与基因型分布均无统计学意义(P>0.05)。结论新疆石河子地区绝经后T2DM女性患者LRP5基因rs556442、rs312778基因位点的突变可能与骨量降低有关。

miR-370-3p和LRP6对胎儿生长受限孕妇的临床诊断价值

目的探讨微小RNA-370-3p(miR-370-3p)和低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6)对胎儿生长受限(FGR)孕妇的临床诊断价值。方法选取2020年6月—2022年6月期间产检并确诊为FGR的孕妇96例为观察组,另选取同期产检的健康孕妇96例作为对照组,记录两组分娩孕周、1 min Apgar评分、5 min Apgar评分、新生儿体重、胎盘质量,依据美国妇产科学院(ACOG)标准将观察组划分为FGR组、严重FGR组。qRT-PCR法检测血清miR-370-3p和LRP6 mRNA表达水平;血清miR-370-3p和LRP6 mRNA水平与分娩孕周、1 min Apgar评分、5 min Apgar评分、新生儿体重、胎盘质量的相关性采用Pearson法分析;miR-370-3p和LRP6 mRNA对FGR的诊断价值采用ROC曲线评估。结果两组孕妇年龄、分娩孕周、是否初产的比例差异有统计学意义(P<0.05);观察组miR-370-3p显著高于对照组,LRP6显著低于对照组(P<0.05);严重FGR组miR-370-3p显著高于FGR组,LRP6显著低于FGR组(P<0.05);对照组与观察组新生儿体重、1 min Apgar评分、5 min Apgar评分及胎盘质量之间差异有统计学意义(P<0.05);miR-370-3p与LRP6之间呈负相关(r=-0.692,P<0.05),miR-370-3p与分娩孕周、新生儿体重、1 min Apgar评分、5 min Apgar评分、胎盘质量均呈负相关(r=-0.401、-0.382、-0.425、-0.484、-0.504,均P<0.05),LRP6与分娩孕周、新生儿体重、1 min Apgar评分、5 min Apgar评分、胎盘质量均呈正相关(r=0.306、0.412、0.512、0.612、0.419,均P<0.05);ROC曲线显示,miR-370-3p对FGR诊断的AUC为0.877(95%CI:0.821~0.919),截断值为1.40,其敏感度、特异性分别为67.71%、93.75%;LRP6对FGR诊断的AUC为0.838(95%CI:0.778~0.887),截断值为0.83,其敏感度、特异性分别为84.37%、71.87%;二者联合对FGR诊断的AUC为0.923(95%CI:0.875~0.956),明显高于二者单独诊断(Z联合vs miR-370-3P=2.811、P=0.005;Z联合vs LRP6=3.372、P=0.001),其敏感度、特异性分别为85.42%、87.50%。结论FGR患者血清miR-370-3p高表达、LRP6低表达,二者联合对FGR具有一定诊断价值。

血浆sLRP-1水平对急性冠状动脉综合征患者预后的预测价值研究

目的研究血浆可溶性低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(sLRP-1)判断急性冠状动脉综合征患者预后的价值。方法通过回顾性分析法选择我院2020年8月-2022年5月收住的急性冠状动脉综合征患者157例进入试验,统计并整理所有患者的临床资料,对比不同冠脉狭窄程度患者的sLRP-1水平,同时比较不同sLRP-1水平患者的不良心血管事件的发生率,观察是否发生不良心血管事件患者的临床资料,将有差异项目通过Logistic回归方程计算,分析影响患者预后的风险因素。结果轻度组sLRP-1水平低于中度、重度组(P<0.05)。两组在年龄、患病至就诊时间、sLRP-1、射血分数(LVEF)、低密度脂蛋白(LDL-C)、空腹血糖上存在显著差别(P<0.05),经Logistics回归方程计算,发现上述指标均成为影响患者预后的风险因素。sLRP-1>0.8mg/L组不良心血管事件发生率高于<0.40mg/L组、0.40-0.8mg/L组(P<0.05)。结论sLRP-1成为判断患者预后的重要指标,能够准确评估患者冠脉狭窄程度,预测不良心血管事件发生的风险,值得推广。

氧化低密度脂蛋白通过PCSK9/LRP1信号途径促神经细胞凋亡的双向调节

目的阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是多种危险因素引起的中枢神经系统退行性疾病,其中神经细胞凋亡是其主要病理基础之一。高脂血症是AD发生的高危因素,可导致脑组织内氧化低密度脂蛋白(oxidized lowdensity lipoprotein,ox-LDL)水平增高。前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin kexin type 9,PCSK9)是一个与血脂代谢密切相关的蛋白酶,但有研究显示其与AD发生可能相关。本研究旨在探索PCSK9在介导ox-LDL促神经细胞凋亡中的作用及其机制,进一步阐述高脂血症导致AD等神经退行性疾病的发生机制。方法首先用不同浓度ox-LDL(0、25、50、75、100 mg/L)处理PC12细胞24 h,油红O染色检测PC12细胞脂质蓄积,Hoechst33258染色和流式细胞术检测PC12细胞凋亡,ELISA检测PC12分泌的β淀粉样肽(amyloidβ-peptide,Aβ)含量,蛋白质印迹(Western blot)法检测SREBP2、PCSK9和LRP1的表达。然后用75 mg/L ox-LDL处理PC12细胞不同时间(0、6、12、24、48 h),Western blot检测SREBP2、PCSK9和LRP1的表达情况。最后,100 nmol/L PCSK9 siRNA转染PC12细胞48 h后,用75 mg/L ox-LDL处理PC12细胞24 h,Hoechst33258染色和流式细胞术检测PC12细胞的凋亡率,Western blot检测PCSK9、LRP1、PI3K、AKT、P-PI3K、P-AKT、NF-κB、Bcl-2、Bax、Caspase-9和Caspase-3的表达,ELISA检测PC12细胞的Aβ分泌量。结果ox-LDL可以增加PC12细胞脂质蓄积,促进PC12细胞凋亡和Aβ分泌,同时增加PC12细胞中SREBP2和PCSK9的表达,减少LRP1的表达。敲低PCSK9的表达可以通过PI3K/AKT通路和NF-κB-Bcl-2/Bax-Caspase-9/3通路减弱ox-LDL诱导的PC12细胞凋亡,同时增加PC12细胞中Aβ的分泌。结论ox-LDL通过诱导PC12细胞中PCSK9表达增加,降低LRP1的表达,进而影响下游的不同信号途径,从而在ox-LDL诱导PC12细胞凋亡中发挥双向调节作用。

HOXA9和LRP6在甲状腺癌中的表达及其在预后评估中的价值

目的探讨甲状腺癌组织中同源盒基因A9(HOXA9)、低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6)表达情况及其在预后评估中价值。方法收集山东省菏泽市立医院2018年1月至2020年1月150例甲状腺癌患者术中切除的癌组织(TC组),另以同期100例甲状腺瘤患者术中切除的组织为对照(腺瘤组)。免疫组化法检测组织HOXA9、LRP6蛋白表达,分析HOXA9、LRP6蛋白表达与临床病理特征关系。Kaplan-Meier法分析HOXA9、LRP6蛋白表达与生存率关系。甲状腺癌患者预后影响因素利用COX回归模型。结果TC组HOXA9阳性表达率(72.67%vs 16.00%)、LRP6阳性表达率(68.67%vs 14.00%)明显高于腺瘤组(P<0.05)。经卡方检验以及GEPIA数据库检索发现,甲状腺癌组织HOXA9与LRP6表达水平呈正相关(P<0.05)。HOXA9、LRP6阳性表达者临床分期为Ⅲ期、有淋巴结转移、细胞低分化者占比高于HOXA9、LRP6阴性表达(P<0.05)。HOXA9阳性表达总生存率(72.48%vs 92.68%)、LRP6阳性表达总生存率(71.84%vs 91.49%)低于HOXA9阴性表达、LRP6阴性表达(χ^(2)=6.829、6.508,P=0.009、0.011)。COX回归分析显示,临床分期Ⅲ期、HOXA9阳性表达、淋巴结转移、LRP6阳性表达是甲状腺癌患者不良预后的影响因素(P<0.05)。结论甲状腺癌组织中HOXA9、LRP6呈高表达,与临床病理特征及预后有关,可用于评估甲状腺癌预后指标。

LRP1B对Lewis细胞增殖、迁移、侵袭及免疫微环境的影响

目的探讨LRP1B基因对Lewis肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及免疫微环境的影响。方法采用TCGA数据库分析LRP1B基因在肺癌及其他癌种中的表达情况。使用CRISPR/Cas9技术构建LRP1B敲除的Lewis细胞(KO组),选择野生型Lewis细胞作为对照组(NC组)。免疫印迹法验证上述2组细胞中LRP1B蛋白的表达。采用CCK-8法检测细胞存活率,划痕实验和细胞侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。将制备好的KO组或NC组细胞悬液注射到C57BL/6小鼠右侧腋窝皮下,分别标记为KO组小鼠和NC组小鼠,观察小鼠皮下移植瘤生长情况,流式细胞术检测荷瘤小鼠移植瘤中骨髓源性抑制细胞(MDSC)和CD8^(+)T细胞浸润的变化,免疫组化法检测程序性死亡受体-1(PD-1)及其配体(PD-L1)的水平。结果LRP1B基因在肺腺癌和肺鳞癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织。与NC组细胞相比,LRP1B基因敲除后KO组细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著增加(P<0.05)。与NC组小鼠相比,KO组小鼠形成的移植瘤体积明显增加(P<0.05);移植瘤中MDSC比例显著增加、CD8^(+)T细胞比例减少,PD-L1、PD-1表达水平显著增加(P<0.05)。结论LRP1B基因敲除可促进Lewis肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进PD-L1、PD-1表达。

血浆sLRP-1水平及MHR对急性冠状动脉综合征患者介入治疗后发生MACE的预测价值

目的 探究血浆可溶性低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(sLRP-1)水平及单核细胞与高密度脂蛋白胆固醇比值(MHR)对急性冠状动脉综合征(ACS)患者介入治疗后发生主要心血管不良事件(MACE)的预测价值。方法 选取2019年1—12月接受介入治疗的240例ACS作为研究对象,治疗后均随访12个月,根据随访期间MACE的发生情况,将患者分为MACE组55例和非MACE组185例。比较2组的一般资料、血浆sLRP-1水平及MHR。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆sLRP-1水平及MHR对ACS患者介入治疗后发生MACE的诊断价值;采用Cox回归分析探讨ACS患者介入治疗后发生MACE的危险因素。结果 与非MACE组比较,MACE组血浆sLRP-1水平、MHR、肌钙蛋白I水平均明显升高(P<0.01)。血浆sLRP-1水平及MHR联合预测ACS患者介入治疗后发生MACE的敏感度为83.60%,特异度为82.70%,曲线下面积为0.892(95%CI:0.833,0.951),高于二者单独预测。血浆sLRP-1水平及MHR是ACS患者介入治疗后发生MACE的独立危险因素(P<0.05)。结论 血浆sLRP-1水平及MHR对ACS患者介入治疗后近期发生MACE具有重要的预测价值。

早发型子痫前期患者血清ESM1及LRP1表达水平及其与病情严重程度的相关性研究

目的探讨早发型子痫前期(early onset pre-eclampsia,EOSP)患者血清内皮细胞特异性分子-1(endothelial cell specific molecule-1,ESM1)及低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(low-density lipoprotein receptor-related protein-1,LRP1)水平及与病情严重程度的相关性。方法选取2019年2月~2021年2月盐城市妇幼保健院218例早发型子痫前期患者为研究对象(病例组),根据病情分为轻度组(n=117)和重度组(n=101),以同期健康体检的80例健康孕妇为对照组。比较各组血清ESM1和LRP1水平。采用多因素Logistic回归分析早发型子痫前期病情严重程度的影响因素。绘制受试者工作曲线分析血清ESM1和LRP1对早发型重度子痫前期的诊断价值。结果病例组血清ESM1(323.05±45.17 mmol/L),LRP1(12.25±0.97μg/ml)水平高于对照组(195.20±31.67 mmol/L,6.41±0.84μg/ml),差异具有统计学意义(t=23.291,47.677,均P<0.05)。重度组患者血清ESM1(672.44±83.61 pg/ml),血清LRP1(14.52±1.05μg/ml)、舒张压(113.17±12.24mmHg)、收缩压(165.19±16.63mmHg)、24h尿蛋白量(2.63±0.45g/24h)、血肌酐(74.47±20.82μmol/L)、血尿素氮(4.32±0.78mmol/L)、血尿酸(339.65±50.13μmol/L)高于轻度组(551.74±72.20 pg/ml,9.63±0.89μg/ml,92.41±9.29mmHg,147.25±14.66mmHg,1.42±0.33g/24h,69.64±15.07μmol/L,3.95±0.91mmol/L,303.82±41.71μmol/L),新生儿体质量低于轻度组(2.73±0.62 kg vs 3.20±0.62 kg),差异具有统计学意义(t=1.980~37.978,均P<0.05)。病例组患者血清ESM1及LRP1水平与舒张压、收缩压、24h尿蛋白定量、血肌酐、血尿素氮及血尿酸呈正相关(r=0.413~0.515,均P<0.05),与胎儿体质量呈负相关(r=-0.563,-0.604,均P<0.05)。高血清ESM1水平(OR=1.217,95%CI:1.036~1.429)和高血清LRP1水平(OR=1.486,95%CI:1.056~2.090)是影响早发型重度子痫前期发生的独立危险因素。血清ESM1联合LRP1诊断早发型重度子痫前期的曲线下面积(area under the curve,AUC)0.884(0.853~0.916)大于ESM1(AUC=0.749,95%CI:0.705~0.792)和LRP1(AUC=0.760,95%CI:0.712~0.807)单独诊断(Z=6.752,4.297,均P<0.05)。结论早发型子痫前期患者血清ESM1和LRP1水平升高,二者均与早发型子痫前期疾病严重程度有关,联合检测能提高早发型重度子痫前期的诊断效能。

LRP6基因突变导致选择性先天缺牙的研究进展

选择性先天缺牙是由遗传或环境因素导致的牙齿数目异常,多累及恒牙列。低密度脂蛋白受体相关蛋白6(low-density lipoprotein receptor-related protein 6,LRP6)是选择性先天缺牙的常见致病基因之一,该基因突变为常染色体显性遗传,可导致非综合征型先天缺牙或综合征型先天缺牙;非综合征型先天缺牙仅表现为牙齿数目、形态异常;综合征型先天缺牙可表现为耳部发育畸形、口面裂、毛发稀少、汗腺异常等。笔者就近年来关于LRP6基因突变导致选择性先天缺牙的表型及基因突变特点的研究现况进行综述,文献收纳24个LRP6基因突变位点和38例相关先天缺牙患者,发现LRP6基因突变导致的选择性先天缺牙好发于上颌侧切牙及上下颌第二前磨牙和第一前磨牙,极少发生于第一磨牙,尤其是下颌第一磨牙,未见上颌中切牙缺失。LRP6基因在牙发育过程中主要通过WNT/β-catenin信号通路发挥重要作用,LRP6基因突变可导致蛋白表达和功能异常、信号通路破坏从而导致选择性先天缺牙。现有文献结果显示,LRP6基因突变好发于胞外段E1、E2亚结构域,影响WNT/β-catenin信号通路的传导而致病。然而目前对于选择性先天缺牙仍缺乏成熟完善的对因治疗。

彩色多普勒超声联合血清PAPP-A、LRP-1对胎盘植入的诊断价值分析

目的探讨彩色多普勒超声联合妊娠相关的血浆蛋白A(PAPP-A)、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)对胎盘植入的诊断价值。方法选择2019年至2021年在海安市人民医院收治的单胎妊娠孕产妇180例,根据产后临床诊断和病理诊断结果分别纳入非胎盘植入者90例和胎盘植入者90例作为对照组和研究组。研究组孕妇年龄28~40岁,平均年龄34.75岁;单胎妊娠,其中初产妇和经产妇分别为28例、62例(2次40例,3次22例);剖宫产史者16例。对照组孕妇年龄26~41岁,平均年龄35.01岁;单胎妊娠,其中初产妇和经产妇分别为31例、59例(2次38例,3次21例);剖宫产史者18例。在手术前对所有孕产妇进行彩色多普勒超声检查,并采用酶联免疫吸附分析(ELISA)法测定血清PAPP-A、LRP-1表达水平。以病理诊断为金标准,绘制受试者工作特性(ROC)曲线,比较彩色多普勒超声诊断、血清PAPP-A诊断、LRP-1诊断和三者联合诊断对胎盘植入的诊断价值。结果研究组孕妇血清PAPP-A、LRP-1表达水平高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,研究组孕妇的剖宫产史比例明显更高(P<0.001),且其超声图像特征主要表现为胎盘后可见丰富血流信号、胎盘后肌层变薄甚至消失、胎盘后间隙消失、胎盘前置、胎盘陷窝、子宫-膀胱交界线不规则、胎盘附着处可见局部向子宫外凸包块等(P<0.05)。血清PAPP-A预测胎盘植入的曲线下面积(AUC)为0.733[95%可信区间(CI)0.737~0.864],最佳截断值为4056.5 mU/L,灵敏度、特异度分别为57.8%、70.0%;血清LRP-1预测胎盘植入的AUC为0.675(95%CI 0.715~0.846),最佳截断值为4.12μg/mL,灵敏度、特异度分别为52.2%、74.4%;彩色多普勒超声、血清PAPP-A、血清LRP-1三者联合诊断的ROC AUC为0.887(95%CI 0.821~0.932),灵敏度、特异度分别为84.4%、67.8%,灵敏度显著高于各单一指标检测。结论相比单一检测,彩色多普勒超声联合血清PAPP-A、LRP-1诊断对胎盘植入鉴别诊断具有较高灵敏度,在术前筛查诊断方面具有重要临床应用价值。

新疆地区绝经后T2DM患者LRP6基因位点多态性及突变与骨密度的相关性

目的 探讨新疆地区绝经后2型糖尿病(T2DM)患者低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6)基因位点多态性及突变与骨密度(BMD)的关系,为防治T2DM合并骨质疏松症奠定基础。方法 选取2018年11月至2019年10月石河子大学医学院第一附属医院门诊、住院及社区收治的绝经后女性136例,根据不同血糖及BMD分为糖耐量正常伴骨量正常组(A组,26例)、T2DM伴骨量正常组(B组,27例)、糖耐量正常伴骨量异常组(C组,28例)和T2DM伴骨量异常组(D组,55例)。采用双能X线吸收法测定腰椎(L)_(1~4)和股骨颈BMD,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱方法测定LRP6基因rs10743980、rs2302685位点基因多态性及频率分布。结果 D组患者中LRP6基因rs10743980位点CC基因型者糖化血红蛋白低于CT/TT基因型,甘油三酯、股骨颈BMD均高于CT/TT基因型;LRP6基因rs2302685位点TT基因型者高密度脂蛋白胆固醇低于TC/CC基因型,甘油三酯、钙、L_(1~4)BMD均高于TC/CC基因型。与CC×TT组比较,CT/TT×TT组患者L_(1~4)BMD较低,CC×CT/CC组患者股骨颈BMD较低,CT/TT×CT/CC组患者L_(1~4)、股骨颈BMD降低更明显。高密度脂蛋白胆固醇升高、体重指数降低是股骨颈BMD降低的危险因素,LRP6基因rs10743980位点突变是L_(1~4)BMD降低的危险因素(P<0.05)。结论 新疆地区绝经后T2DM患者LRP6基因rs10743980、rs2302685位点多态性与BMD无关,但绝经后T2DM合并骨质疏松症患者中LRP6基因突变参与了BMD的降低。当LRP6基因中两位点同时突变时BMD下降更明显。LRP6基因rs10743980位点突变参与了血糖升高、血脂降低,rs2302685位点突变参与了血脂降低。

急性冠脉综合征患者血清COMP、sST2及sLRP-1变化及与冠脉病变的相关性分析

目的探讨急性冠脉综合征患者血清软骨寡聚基质蛋白(COMP)、可溶性生长刺激表达基因2(sST2)、可溶性低密度脂蛋白受体相关蛋白1(sLRP-1)变化及与冠状动脉(冠脉)病变的相关性。方法选择2020年1月至2022年1月于青岛市市立医院治疗的120例急性冠脉综合征患者作为病例组,并选择我院同期体检的健康人群100例作为对照组,分析两组COMP、sST2及sLRP-1水平变化及与冠脉病变程度的相关性。结果病例组患者血清COMP、sST2及sLRP-1显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);轻度组(Gensini评分<50分)COMP、sST2及sLRP-1显著低于中度组(Gensini评分50~90分)和重度组(Gensini评分>90分),且中度组血清COMP、sST2及sLRP-1显著低于重度组,差异有统计学意义(P<0.05);预后不良组血清COMP、sST2及sLRP-1较预后良好组更高,差异有统计学意义(P<0.05);相关性分析显示,血清COMP、sST2及sLRP-1均与冠脉病变程度之间呈正相关(P<0.05)。结论血清COMP、sST2及sLRP-1在急性冠脉综合征患者中均呈高表达,且与冠脉病变程度关系密切,对于控制病情具有重要意义。

高糖条件下沉默LRP6通过Wnt/β-catenin途径抑制大鼠视网膜Müller细胞的自噬与凋亡

目的:探究在高糖作用下大鼠视网膜Müller细胞中低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6)的表达及其对高糖条件诱导的Müller细胞自噬与凋亡的作用和机制。方法:体外培养大鼠视网膜Müller细胞,采用RT-PCR与Western blotting检测高糖条件下Müller细胞中LRP6 mRNA和蛋白的表达水平;利用siRNA干扰技术沉默Müller细胞中的LRP6,并分别在葡萄糖浓度为5.6 mmol·L^(-1)(NG)与35 mmol·L^(-1)的DMEM培养液(HG)中进行培养,按处理方式的不同将Müller细胞分为葡萄糖浓度为5.6 mmol·L^(-1)的DMEM培养的正常葡萄糖组(NG组)、葡萄糖浓度为35 mmol·L^(-1)的DMEM培养的转染si-NC组(HG+si-NC组)和si-LRP6的Müller细胞组(HG+si-LRP6组);采用Western blotting检测各组Müller细胞中自噬相关蛋白P62的表达、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ之值、Beclin1与Atg12-Atg5复合体的表达;共聚焦显微镜观察RFP-GFP-LC3串联质粒转染后各组Müller细胞中自噬通量的变化;TUNEL染色检测各组Müller细胞的凋亡率,Western blotting法检测细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax与cleaved Caspase-3及Wnt/β-catenin途径中β-catenin蛋白的表达。结果:与NG组相比,HG组Müller细胞中LRP6 mRNA和蛋白的表达水平明显增高(P<0.01);与NG组比较,HG+si-NC组、HG+si-LRP6组Müller细胞中除P62和Bcl-2蛋白表达显著降低外(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ之值、Beclin1与Atg12-Atg5复合体、细胞中自噬通量、TUNEL阳性细胞率及细胞中Bad、cleaved Caspase-3蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);而与HG+si-NC组比较,HG+si-LRP6组中除P62、Bcl-2蛋白明显升高外(P<0.05),其他检测指标均显著降低;此外,与NG组比较,HG+si-NC组中β-catenin蛋白表达显著升高(P<0.05),而HG+si-LRP6组明显降低(P<0.05);其中与HG+si-NC组相比,HG+si-LRP6组中β-catenin蛋白的降低趋势更为显著(P<0.01)。结论:高糖可促进Müller细胞中LRP6的表达,采用siRNA干扰技术沉默细胞中LRP6表达可能通过下调Wnt/β-catenin途径抑制高糖诱导的Müller细胞自噬,并减少细胞的凋亡。

血清S-100B蛋白、可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1、胶质纤维酸性蛋白检测在新生儿缺血缺氧性脑病病情严重程度中的诊断价值

目的:探讨血清S-100B蛋白、可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)与新生儿缺血缺氧性脑病(HIE)病情严重程度的关系。方法:选择80例HIE患儿作为观察组,另选择90例健康新生儿作为对照组,收集所有患儿一般资料,并检测两组患儿血清S-100B蛋白、sLOX-1、GFAP水平,分析HIE患儿血清S-100B蛋白、sLOX-1、GFAP与病情严重程度的相关性及预后不良的影响因素。结果:对照组血清S-100B蛋白、sLOX-1、GFAP水平低于观察组(均P<0.05)。重度组血清S-100B蛋白、sLOX-1、GFAP水平高于中度组、轻度组和对照组(均P<0.05)。Pearson相关分析显示,疾病严重程度与HIE患儿血清S-100B蛋白、sLOX-1、GFAP水平呈正相关(均P<0.001)。随访预后良好患儿59例,预后不良21例,经多因素Logistic回归分析显示,产程异常、病情重度、S-100B蛋白、sLOX-1、GFAP为影响HIE患儿预后的危险因素(均P<0.05)。结论:HIE患儿病情严重程度和预后与血清S-100B蛋白、sLOX-1、GFAP水平有关,监测其水平变化有利于临床早期完善干预方案改善预后。

Mechanisms of dysregulation of low-density lipoprotein receptor expression in HepG2 cells induced by inflammatory cytokines

Background Low-density lipoprotein （LDL） receptor is normally regulated via a feedback system that is dependent on intracellular cholesterol levels. We have demonstrated that cytokines disrupt cholesterol-mediated LDL receptor feedback regulation causing intracellular accumulation of unmodified LDL in peripheral cells. Liver is the central organ for lipid homeostasis. The aim of this study was to investigate the regulation of cholesterol exogenous uptake via LDL receptor and its underlying mechanisms in human hepatic cell line （HepG2） cells under physiological and inflammatory conditions. Methods Intracellular total cholesterol （TC）, free cholesterol （FC） and cholesterol ester （CE） were measured by an enzymic assay. Oil Red O staining was used to visualize lipid droplet accumulation in cells. Total cellular RNA was isolated from cells for detecting LDL receptor, sterol regulatory element binding protein （SREBP）-2 and SREBP cleavage-activating protein （SCAP） mRNA levels using real-time quantitative PCR. LDL receptor and SREBP-2 protein expression were examined by Western blotting. Confocal microscopy was used to investigate the translocation of SCAP-SREBP complex from the endoplasmic reticulum （ER） to the Golgi by dual staining with anti-human SCAP and anti-Golgin antibodies. Results LDL loading increased intracellular cholesterol level, thereby reduced LDL receptor mRNA and protein expression in HepG2 cells under physiological conditions. However, interleukin 1β （IL-1β） further increased intracellular cholesterol level in the presence of LDL by increasing both LDL receptor mRNA and protein expression in HepG2. LDL also reduced the SREBP and SCAP mRNA level under physiological conditions. Exposure to IL-1β caused over-expression of SREBP-2 and also disrupted normal distribution of SCAP-SREBP complex in HepG2 by enhancing translocation of SCAP-SREBP from the ER to the Golgi despite a high concentration of LDL in the culture medium. Conclusions IL-1β disrupts cholesterol-mediated LDL receptor feedback regulation by enhancing SCAP-SREBP complex translocation from the ER to the Golgi, thereby increasing SREBP-2 mediated LDL receptor expression even in the presence of high concentration of LDL. This results in LDL cholesterol accumulation in hepatic cells via LDL receptor pathway under inflammatory stress.

LRP5基因多态性与绝经后妇女2型糖尿病伴骨质疏松症的相关性研究

目的探讨上海地区绝经后2型糖尿病和骨质疏松症妇女的低密度脂蛋白受体相关蛋白5基因多态性与骨密度、骨代谢、糖代谢的关系。方法选取上海市普陀区无亲缘关系的绝经后汉族妇女354例,其中骨质疏松组(A组)90例、2型糖尿病组(B组)96例、2型糖尿病伴骨质疏松组(C组)90例、健康老年对照组(D组)78例。运用双能X线骨密度仪检测腰椎(L2-4)及股骨颈骨密度,同时检测骨代谢指标:BALP、TRACP-5b;糖代谢指标:Hb A1c、FINS。应用基因测序技术检测LRP5基因A1330V位点多态性。采用协方差分析校正年龄、绝经年限、体重指数后比较LRP5基因多态性与骨密度的相关性。结果 A组LRP5基因A1330V位点CC型与CT/TT型相比腰椎骨密度增高(P<0.05),经年龄、绝经年限、BMI校正后仍有显著差异(P<0.01);D组LRP5基因A1330V位点多态性与Hb A1c相关(P<0.05),CC型较CT/TT型Hb A1c高,经年龄、绝经年限、BMI校正后无统计学意义(P>0.05)。结论上海地区汉族绝经后骨质疏松症妇女LRP5基因型与腰椎骨密度相关,提示LRP5基因可能是上海地区汉族绝经后骨质疏松症妇女的易感基因。2型糖尿病患者BMD增高,可能与BMI、胰岛素水平增高有关。LRP5基因可能不是上海地区绝经后2型糖尿病妇女的易感基因。