低特异性L-苏氨酸醛缩酶基因工程菌的构建

应用PCR技术从E coliJM 10 5中扩增出长约 1kb的低特异性L 苏氨酸醛缩酶基因 ,将其插入高表达载体 pET 11c的NdeI/BamHI位点 ,转化E coliBL 2 1(DE3) ,构建高产低特异性L 苏氨酸醛缩酶基因工程菌。SDS PAGE和薄层扫描表明 ,经IPTG诱导 2h ,工程菌低特异性L 苏氨酸醛缩酶的表达量占菌体总可溶性蛋白的 72 9%。酶活测定结果表明 ,39株工程菌低特异性L 苏氨酸醛缩酶的活力比宿主菌均有不同程度的提高 ,其中 86号是宿主菌的 31倍。