自建Lowry法测定B型肉毒神经毒素蛋白质含量

目的:探究适宜的B型肉毒神经毒素中蛋白质含量测定方法。方法:分别应用《中国药典》四部(2020版)中蛋白质测定法项下福林酚法(药典方法)和自建的Lowry法(本方法)测定3批B型肉毒神经毒素中的蛋白质含量,比较两种方法的线性关系、精密度和准确度。结果:两种方法的线性都具有良好的相关性,药典方法和本方法线性绝对系数R2分别为0.9972和0.9987;两种方法都具有良好的精密度和重复性,但本方法的相对标准偏差更低。结论:自建的Lowry法更适合B型肉毒神经毒素中蛋白质含量的测定。

Lowry法测定马铃薯中蛋白质提取物的含量

目的采用Lowry法测定马铃薯中蛋白质提取物的含量。方法以国家蛋白质标准品为含量测定对照品,样品溶液和标准品溶液分别取1 ml,加碱性铜溶液5 ml,室温放置10 min,快速加入酚试剂0.5 ml,室温放置30 min,在波长650 nm处检测吸光度,外标法测定蛋白含量。结果国家蛋白标准品线性范围0.1～0.5 mg.ml-1,回归方程为Y=1.874 X+0.064(R=0.999),平均加样回收率为100.24%,RSD为1.63%。结论用该Lowry法测定马铃薯蛋白质提取物的含量,方法准确、简便、重复性好。

微量Lowry法测定蛋白质含量

蛋白质浓度的测定方法有十几种,实验室中常用的比色法有考马斯亮蓝 G250法 Lowry 法,但它们各有优缺点.前者虽然具有快速、便于操作等优点,但某些含半胱氨酸及色氨酸少的蛋白质与考马斯亮蓝G250不易着色,故用牛血清白蛋白(BSA)作标准时,上述蛋白质与实际测定的值就会有一定的差别,而Lowry 法是国内外常用的测定微量蛋白质的经典方法,但该法有测定范围窄、使用试剂多、耗时等缺点.我们对经典的 Lowry 法进行了改进,建立了微量Lowry 法.本法对 Lowry 法的试剂配制作了调整,试验方法作了改进,最后用酶联免疫检测仪进行测定.

Lowry法测定芝芪菌质中蛋白质含量

目的:制定芝芪菌质中蛋白质的含量测定方法.方法:采用Lowry法测定含量,以750nm为测定波长测定吸收度.结果:芝芪菌质中蛋白质在9.662～48.308ug/ml范围内线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为99.11%,RSD=1.26%.结论:该方法简便,准确,重现性好,可作为芝芪菌质的质量控制方法.

Lowry法测定蛋白质含量的统计分析

在大量实验数据的基础上 ,提出了 L owry法定量测定蛋白质分段模型的模拟 ,经统计分析 ,该模型相对误差分别为 0 .935‰与 0 .1 36‰ ,从而将常规测定从 2 50μg.ml- 1 范围扩充到 1 2 50μg .ml- 1 .

甘露醇对Lowry法测定冻干注射用胸腺肽中多肽含量的影响

用Ｌｏｗｒｙ法测定冻干注射用胸腺肽中多肽含量时，由于冻干前所加赋形剂甘露醇的干扰，其测定结果明显偏高（Ｐ＜０．０００５）。本文经试验证明，用等量于检品中的甘露醇作空白对照，可以消除这种干扰。

Lowry法测定宫颈癌片中蛋白质的含量

目的:制定宫颈癌片中蛋白质的含量测定方法。方法:采用Lowry法测定含量,以660nm为测定波长测定吸收度。结果:宫颈癌片中水溶性蛋白质在0.048￣0.144mg/ml范围内线性关系良好(r=0.9997),平均回收率为97.70%(n=5),RSD=1.25%。结论:该方法简便,准确,重现性好,可作为宫颈癌片的质量控制标准。

探讨甘氨酸、甘露醇对Lowry法测蛋白含量的干扰

目的L ow ry法是蛋白质含量测定的普遍方法,广泛应用于测定生物制品蛋白质含量,本文目的在于探讨甘氨酸、甘露醇这两种常用制剂辅料对L ow ry法测定蛋白含量的干扰情况。方法用碱性铜试剂、酚试剂,检测波长为650nm,以标准蛋白浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。根据吸光度查标准曲线,求出在有辅料存在情况下的已知蛋白浓度样品的测试值。结果甘氨酸与酚试剂的反应没有特异性,但它的存在会对蛋白测定产生抑制。而甘露醇与酚试剂的作用与其浓度有正相关,会使蛋白测定值比理论值高。结论L ow ry法测蛋白质操作简便,结果准确,但甘氨酸对其有负干扰,甘露醇对测定结果有正干扰。

Lowry法测量重组艾塞那肽蛋白含量的不确定度分析

目的对Lowry法测量重组艾塞那肽蛋白含量的不确定度进行分析和评价。方法建立Lowry法测量重组艾塞那肽蛋白含量的的数学模型,找出影响不确定度的因素,并对各个不确定度分量进行评估。结果计算出了各变量的不确定度,取包含因子K=2,置信概率为95%,Lowry法测量重组艾塞那肽蛋白含量的扩展不确定度为0.0364。结论此评价方法适用于Lowry法测量重组艾塞那肽蛋白含量的不确定度评估。

Lowry法测定人凝血因子Ⅷ蛋白含量

目的:对Lowry法应用于人凝血因子Ⅷ蛋白含量测定中的可行性进行研究。方法:考察S公司人凝血因子Ⅷ原液及成品,比较凯氏定氮法与Lowry法对蛋白测定结果产生的差异,及不同浓度保护剂对Lowry法的影响。结果:甘露醇对蛋白含量测定有明显正干扰,甘氨酸有负干扰;对样品进行预稀释,辅料在低浓度范围内,当甘露醇浓度为0.1%和甘氨酸浓度为0.3%时,可减少辅料的干扰作用。结论:适当稀释样品可减少保护剂的干扰,用Lowry法测定人凝血因子Ⅷ蛋白含量,简单快速准确可行。

改良Lowry法测定不同产地凹纹胡蜂药材蛋白质含量

目的:建立凹纹胡蜂药材中蛋白质含量测定的方法。方法:采用改良Lowry法测定标准小牛血清蛋白(BSA)和凹纹胡蜂药材中的蛋白质含量并对其进行方法学考察。结果:该方法线性及相关度良好,线性范围较宽,精密度、稳定性、重复性和加样回收率较佳;用该方法分别对不同产地的3批凹纹胡蜂药材中蛋白质含量进行测定,蛋白质含量分别为:德宏州(批号:20150630)12.37%,保山市(批号:20150927)13.08%,曲靖市(批号:20151112)9.63%,药材含水量经测定依次为6.12%、9.92%、10.17%。结论:不同产地凹纹胡蜂药材中蛋白质含量有一定差异,采自曲靖市的样品蛋白质含量偏低;实验采用的改良Lowry法测定结果准确、简便、稳定,适用于凹纹胡蜂药材中蛋白含量的测定。

Lowry法测定重组人血清白蛋白-白细胞介素2融合蛋白含量的方法验证

试验验证了Lowry法测定重组人血清白蛋白-白细胞介素2融合蛋白含量的方法,为后续试验提供重组人血清白蛋白-白细胞介素2融合蛋白含量的检测方法。以蛋白含量测定国家标准品为标准品,在100~0μg/m L浓度范围内建立标准曲线,线性关系良好,相关系数(R^2)大于0.99。标准曲线上至少6点(包含两端)满足准确度介于95.2%~111.67%,标准曲线下限准确度介于95.98%~103.6%。高、中、低质量浓度(80,40,20μg/m L)质控样本批内精密度均介于1.51%~4.41%,批间精密度均介于3.83%~6.36%。综合上述信息,Lowry法测定重组人血清白蛋白-白细胞介素2融合蛋白含量的方法稳定,可重现。重组人血清白蛋白-白细胞介素2在200~10μg/m L质量浓度范围内均一。

Lowry法测定眼宁滴眼液中蛋白质的含量

目的 :制定眼宁滴眼液中蛋白质的含量测定方法。方法 :采用Lowry法测定含量 ,以 650nm为测定波长测定吸收度。结果 :在 0 0 4～ 0 2 0mg/ml之间呈良好线性关系 ,相关系数r=0 9990 ,平均回收率为 99 9% (n =6) ,RSD =1 3 %。结论 :本法简便、准确、重现性好 。

常用因子类辅料对蛋白含量检测(LOWRY法)的影响

目的探索因子类辅料对蛋白含量检测的影响。方法将不同含量的因子类辅料添加至人凝血因子峪样品中,采用中国药典三部中的蛋白含量检测方法(LOWRY法)检测添加辅料与未添加辅料的人凝血因子峪原液的蛋白含量,同时与凯氏定氮法进行比较,计算辅料的干扰率,以评价其干扰的大小。结果常用因子类辅料(甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、甘露醇)在因子类产品中对蛋白含量的干扰率,赖氨酸干扰最小,其次为甘氨酸,干扰最大的是精氨酸和甘露醇。结论采用LOWRY法显示这4种常用因子类辅料对蛋白含量的干扰并不强烈,但LOWRY法准确快速,操作简单,所以建议在生产过程控制中采用LOWRY法进行蛋白含量的快速检测。

Lowry法检测百日咳抗原中百日咳毒素、丝状血凝素、黏附素含量方法验证

目的对Lowry法2检测百日咳抗原中百日咳毒素(pertussis toxin, PT)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin, FHA)、黏附素(pertactin, Prn)含量进行方法学验证。方法将PT、FHA、Prn国家标准品系列稀释, 在0~50 μg/ml浓度范围内建立标准曲线。在已知浓度的PT、FHA、Prn精制液中加入国家标准品配制加标样品, 采用Lowry法2检测蛋白含量, 考察准确度和精密度。对原液生产中使用的400 mmol/L PBS进行专属性试验。分别在检测后10、20、30 min再进行检测以考察方法的耐用性。结果回收率介于91.1%~110.7%;准确度相对标准偏差为1.8%~9.2%, 批间精密度相对标准偏差为2.6%~6.2%;400 mmol/L PBS对样品测定无干扰;检测样品在30 min内读取数据有效。结论该法具有良好的线性、准确性、精密性、专属性和耐用性, 可用于百日咳抗原中PT、FHA、Prn含量的测定。

威廉环毛蚓提取物蛋白质含量测定方法研究

目的 建立威廉环毛蚓提取物蛋白质含量测定的最佳方法。方法 以氨基酸分析仪测定的威廉环毛蚓提取物中的氨基酸含量为指标,对蛋白质含量检测方法 Lowry法2、改良Lowry法、BCA法、Bradford法进行对比评价。结果 Lowry法2、改良Lowry法、BCA法、Bradford法测定威廉环毛蚓提取物蛋白质含量(上清液)结果分别为27.03%、45.85%、31.58%、11.11%,威廉环毛蚓提取物蛋白质含量(混悬液)的结果分别为38.44%、52.39%、44.06%、11.56%。采用氨基酸分析仪法测定得到威廉环毛蚓提取物中游离氨基酸含量为4.18%,将威廉环毛蚓提取物蛋白质酸水解之后测定总氨基酸含量为48.53%。结论 在威廉环毛蚓提取物样品溶液的处理方式上,与样品上清液相比,样品混悬液的测定结果更接近样品中蛋白质的真实含量。以牛血清白蛋白(BSA)为对照品,相较于Lowry法2、改良Lowry法和Bradford法,BCA法更适宜用于威廉环毛蚓提取物中的蛋白质含量测定。

两种Lowry法检测百日咳疫苗原液蛋白含量的比较

目的比较《中国药典》三部(2015版)收录的两种Lowry法测定百日咳疫苗原液蛋白定量的差异,为原液蛋白准确定量和新版药典Lowry法的适用性确认提供依据。方法 9个实验室分别按照现行药典收录的两种Lowry法,对4家15批百日咳疫苗原液蛋白含量进行测定。并与凯氏定氮法检测结果进行比较。结果方法 1(未经酸沉淀Lowry法)实验室内测定结果的变异系数(CV)均值在1.7%~8.9%之间,实验室间测定结果的CV值在3.9%~9.3%之间;方法 2(酸沉淀Lowry法)实验室内测定结果的CV均值在3.6%~7.4%之间,实验室间测定结果的CV值在3.9%~18.1%之间。同一样品两种方法测定结果差异有统计学意义(P<0.001),结果呈相关性(R2=0.944 9)。在与部分样品测得的凯氏定氮法结果的比较中,方法 1差异有统计学意义(P<0.001),方法 2差异无统计学意义(P>0.05)。结论所有样品采用同一种Lowry方法测定时所得结果实验室内和实验室间一致性较好,采用方法 2测定结果明显低于方法 1,更接近凯氏定氮法结果真实值,表明酸沉淀对Lowry法百日咳原液蛋白定量有显著影响。与Lowry方法 1相比,Lowry方法 2更能准确反映百日咳疫苗原液的真实蛋白含量,且精密度、适用性均符合要求。

Lowry法测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗蛋白含量干扰现象的排除

目的探讨Lowry法测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗蛋白含量干扰现象的排除方法。方法分别应用《中国药典》三部(2005版)中Lowry法与第5版《欧洲药典》2.5.16法测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗原液的蛋白含量,并以碳二亚胺(EDAC)为干扰性物质,验证两方法排除干扰的能力。结果同一批结合疫苗原液用两种方法测定的结果不一致,应用《中国药典》方法测定的结果明显高于第5版《欧洲药典》的方法。在多糖的活化衍生及多糖蛋白结合过程中加入EDAC、己二酰二肼(ADH)等,可干扰测定结果,使结果偏高。结论应用Lowry法测定多糖蛋白结合疫苗中蛋白含量时,应排除干扰性物质的影响。

Triton X-100存在下的Lowry蛋白定量法

本文建立了一种ＴｒｉｔｏｎＸ－１００存在下的Ｌｏｗｒｙ蛋白定量法，可在ＴｒｉｔｏｎＸ－１００存在下较简便、准确地测定蛋白质的含量。

一种新的Lowry氏蛋白质定量测定方法

液体闪烁计数中的淬灭效应被应用于Lowry氏蛋白质定量测定。结果表明:不同浓度的显色蛋白样品与仪器计数效率之间存在较好的线性关系。实验证明液闪测定法较传统的分光光度计测定法具有误差小、可测范围大、便于自动化分析等特点。