Lowry2法检测组分百日咳疫苗中间产品蛋白含量的适用性验证

目的对组分百日咳疫苗中间产品的蛋白含量检测方法-Lowry2法[《中国药典》三部(2020版)福林酚法-第二法]进行适用性验证。方法标准品和样品经脱氧胆酸盐-三氯乙酸沉淀预处理去除杂质,随后与福林酚反应,在750 nm波长处测定吸光度值。以标准品浓度-吸光度绘制标准曲线,计算样品浓度。对该方法进行专属性、线性、准确性、精密性验证;并采用该方法检测3批组分百日咳疫苗中间产品的蛋白含量。结果该方法检测中间产品背景缓冲液蛋白含量与超纯水比较,差异无统计学意义(t=0.277~1.178,P=0.304~0.795);蛋白浓度在0~50μg/mL之间标准曲线线性关系良好,R^(2)均>0.98;准确性验证加标回收率在90%~110%之间;重复性及中间精密性验证的RSD均<3%。3批组分百日咳疫苗中间产品蛋白含量检测结果均符合企业内部《制造与检定规程》要求。结论Lowry2法专属性、准确性、精密性良好,可用于测定组分百日咳中间产品的蛋白含量,为Lowry2法的适用性提供了依据。