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基于5-LOX/LTB4信号通路探讨黄芩苷/栀子苷对PM_(2.5)暴露致血管内皮功能障碍的干预作用及其机制 被引量:1
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作者 孙欠欠 张行行 +5 位作者 赵麓 赵安东 史永恒 王川 刘继平 王斌 《中南药学》 CAS 2024年第2期307-314,共8页
目的基于5-LOX/LTB4信号通路探究黄芩苷/栀子苷(BC/GD)对PM_(2.5)诱导的血管内皮功能障碍的改善作用及其机制。方法利用离体肌张力描记技术测定BC/GD对不同状态下血管环张力的影响。将32只大鼠随机分为对照组、PM_(2.5)组、30 mg·k... 目的基于5-LOX/LTB4信号通路探究黄芩苷/栀子苷(BC/GD)对PM_(2.5)诱导的血管内皮功能障碍的改善作用及其机制。方法利用离体肌张力描记技术测定BC/GD对不同状态下血管环张力的影响。将32只大鼠随机分为对照组、PM_(2.5)组、30 mg·kg^(-1)BC/GD组和60 mg·kg^(-1)BC/GD组,利用气管滴注法构建PM_(2.5)暴露模型,持续2个月,造模1个月后灌胃给予对应药物,持续1个月,末次给药后,HE染色观察肠系膜动脉血管内皮状态;化学发光法检测肠系膜动脉活性氧(ROS)水平;硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)水平;ELISA法检测血清炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子β1(TGF-β1)、白三烯B4(LTB4)水平;Western blot法检测5-脂氧酶(5-LOX)、内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达。结果BC/GD对基础状态的肠系膜动脉血管环张力无明显影响,但能明显舒张由5-HT预收缩的血管环;一氧化氮合酶抑制剂L-NAME、环氧合酶抑制剂INDO或L-NAME+INDO均能明显抑制BC/GD的血管舒张作用,但L-NAME的抑制作用更明显;50、100 mg·mL^(-1)PM_(2.5)能降低血管环对乙酰胆碱(ACh)的舒张血管效应,而BC/GD能明显改善PM_(2.5)诱导的舒张效应减弱。与对照组相比,PM_(2.5)组大鼠肠系膜动脉内皮完整性严重受损、内皮皱缩,大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、LTB4水平显著升高、TGF-β1水平显著降低,肠系膜动脉组织中5-LOX、iNOS蛋白表达明显增加,eNOS蛋白表达降低,ROS水平升高,NO水平降低。与PM_(2.5)组相比,BC/GD能改善内皮损伤程度和完整性,可显著降低血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、LTB4水平,升高TGF-β1水平;明显降低肠系膜动脉5-LOX、iNOS表达,升高eNOS蛋白表达;降低ROS水平,升高NO水平。结论BC/GD可通过抑制5-LOX/LTB4信号通路表达,从而降低ROS水平,抑制炎性损伤,上调eNOS表达,下调iNOS表达,升高血管中NO水平,改善PM_(2.5)诱导的血管内皮功能障碍。 展开更多
关键词 PM_(2.5) 黄芩苷 栀子苷 内皮功能障碍 5-lox/LTB4信号通路
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CgLOX4基因在长牡蛎幼虫发育中的表达特征
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作者 胡悦 冷金源 +2 位作者 孙洁洁 王玲玲 宋林生 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期38-47,共10页
为研究长牡蛎(Crassostrea gigas)LOX4基因(CgLOX4)在幼虫发育中的表达特征,采用PCR技术扩增CgLOX4的全长cDNA序列,利用荧光定量PCR和整体免疫荧光技术检测CgLOX4在幼虫不同发育时期的表达特征。结果表明:CgLOX4的cDNA全长为1 862 bp,... 为研究长牡蛎(Crassostrea gigas)LOX4基因(CgLOX4)在幼虫发育中的表达特征,采用PCR技术扩增CgLOX4的全长cDNA序列,利用荧光定量PCR和整体免疫荧光技术检测CgLOX4在幼虫不同发育时期的表达特征。结果表明:CgLOX4的cDNA全长为1 862 bp,开放阅读框为834 bp,可编码277个氨基酸,等电点为8.36,预测其氨基酸序列只含有一个保守的HOX结构域;CgLOX4在长牡蛎成体各组织中均有表达,其中在闭壳肌中的表达量显著高于肝胰腺、鳃、血淋巴、性腺和唇瓣组织(P<0.05);CgLOX4在所检测的早期胚胎中均有表达,其中在受精卵和4细胞期的表达量相对较高;CgLOX4阳性信号主要分布在担轮幼虫壳形成区、D型幼虫内脏团和壳顶幼虫消化腺中。研究表明,CgLOX4是长牡蛎早期发育过程中较早激活的转录因子之一,可能在调控幼虫壳形成和消化器官形成等方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 长牡蛎 lox4 幼虫发育 分布特征
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JA-mediated MYC2/LOX/AOS feedback loop regulates osmotic stress response in tea plant
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作者 Junyan Zhu Hongrong Chen +5 位作者 Lu Liu Xiaobo Xia Xiaomei Yan Xiaozeng Mi Shengrui Liu Chaoling Wei 《Horticultural Plant Journal》 SCIE CAS CSCD 2024年第3期931-946,共16页
Osmotic stress caused by low-temperature,drought and salinity was a prevalent abiotic stress in plant that severely inhibited plant development and agricultural yield,particularly in tea plant.Jasmonic acid(JA)is an i... Osmotic stress caused by low-temperature,drought and salinity was a prevalent abiotic stress in plant that severely inhibited plant development and agricultural yield,particularly in tea plant.Jasmonic acid(JA)is an important phytohormone involving in plant stress.However,underlying molecular mechanisms of JA modulated osmotic stress response remains unclear.In this study,high concentration of mannitol induced JA accumulation and increase of peroxidase activity in tea plant.Integrated transcriptome mined a JA signaling master,MYC2 transcription factor is shown as a hub regulator that induced by mannitol,expression of which positively correlated with JA biosynthetic genes(LOX and AOS)and peroxidase genes(PER).CsMYC2 was determined as a nuclei-localized transcription activator,furthermore,ProteinDNA interaction analysis indicated that CsMYC2 was positive regulator that activated the transcription of CsLOX7,CsAOS2,CsPER1 and CsPER3via bound with their promoters,respectively.Suppression of CsMYC2 expression resulted in a reduced JA content and peroxidase activity and osmotic stress tolerance of tea plant.Overexpression of CsMYC2 in Arabidopsis improved JA content,peroxidase activity and plants tolerance against mannitol stress.Together,we proposed a positive feedback loop mediated by CsMYC2,CsLOX7 and CsAOS2 which constituted to increase the tolerance of osmotic stress through fine-tuning the accumulation of JA levels and increase of POD activity in tea plant. 展开更多
关键词 Camellia sinensis Jasmonic acid(JA) MYC2 transcription factor Lipoxygenase(lox) Osmotic stress Peroxidase(POD) Reactive oxygen species(ROS)
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血必净通过调节miR-145-5p/LOX信号通路对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞氧化应激及凋亡的影响
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作者 李英 冯凯 +4 位作者 王文霞 严丽娟 张国旗 刘志艳 周来来 《陕西中医药大学学报》 2024年第5期97-102,共6页
目的探讨血必净对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞氧化损伤及凋亡的影响及其分子机制。方法培养H9C2细胞后将其随机分为对照组(Control)、模型组(Model)和血必净组(XBJ)3组,除Control组外,其余组的H9C2细胞用H_(2)O_(2)诱导构建氧化应激损伤... 目的探讨血必净对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞氧化损伤及凋亡的影响及其分子机制。方法培养H9C2细胞后将其随机分为对照组(Control)、模型组(Model)和血必净组(XBJ)3组,除Control组外,其余组的H9C2细胞用H_(2)O_(2)诱导构建氧化应激损伤细胞模型,然后XBJ组用12.5 g·L^(-1)、25 g·L^(-1)和50 g·L^(-1)浓度的XBJ处理24 h。CCK-8法检测不同浓度的XBJ对细胞活力的影响;生化试剂盒检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及还原型谷胱甘肽(GSH)的活性;流式检测H9C2细胞凋亡率;qRT-PCR检测miR-145-5p、LOX mRNA的表达;Western blot检测赖氨酰氧化酶蛋白(lysyloxidase,LOX)的表达;双荧光素酶实验检测miR-145-5p与LOX的靶向结合关系。结果不同浓度XBJ处理后,细胞活性呈梯度性显著增高;与对照组相比,模型组细胞CK-MB、MDA的活性显著增加(P<0.01),SOD、GSH活性显著降低,细胞凋亡率显著提高,miR-145-5p表达水平显著降低,LOX水平显著增加(P<0.01);经血必净处理后上述指标的水平得到有效改善(P<0.05)。结论XBJ能通过提高抗氧化应激能力,抑制细胞凋亡并调控miR-145-5p/LOX信号通路保护H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 血必净 心肌细胞 氧化应激 细胞凋亡 miR-145-5p/lox通路
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钩吻脂氧合酶基因GeLOX1的鉴定及低温胁迫表达分析 被引量:1
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作者 尤垂淮 谢津津 +7 位作者 张婷 崔天真 孙欣路 臧守建 武奕凝 孙梦瑶 阙友雄 苏亚春 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期318-327,共10页
近年来,钩吻(Gelsemium elegans)的药用和饲用价值日益凸显,但钩吻在生长过程中不耐低温,挖掘其低温响应基因,为钩吻的抗寒育种研究奠定基础。植物中,脂氧合酶(lipoxygenase, LOX)在种子老化、抗逆境胁迫等方面的生理生化过程中有重要... 近年来,钩吻(Gelsemium elegans)的药用和饲用价值日益凸显,但钩吻在生长过程中不耐低温,挖掘其低温响应基因,为钩吻的抗寒育种研究奠定基础。植物中,脂氧合酶(lipoxygenase, LOX)在种子老化、抗逆境胁迫等方面的生理生化过程中有重要影响。基于课题组构建的钩吻转录组数据库,挖掘响应低温胁迫的钩吻LOX基因,运用RT-PCR技术,从中克隆到一条GeLOX1的cNDA全长序列,对其进行生物信息学、亚细胞定位、基因表达、原核表达及平板胁迫等分析。结果显示,GeLOX1所编码蛋白的氨基酸长度为761 aa,蛋白相对分子质量为87.00 kD,预测为不稳定的亲水性蛋白,含有28个丝氨酸磷酸化位点,22个苏氨酸磷酸化位点和9个酪氨酸磷酸化位点。进化树分析结果表明,GeLOX1属于9-LOX家族的成员。亚细胞定位检测结果显示,GeLOX1蛋白定位于细胞质中。实时荧光定量PCR分析发现,GeLOX1在钩吻的根中高表达,且其在4℃低温胁迫下的表达量呈现下调的趋势。经原核表达诱导后,GeLOX1的重组蛋白在约111 kD处出现目标条带,且重组蛋白的积累量在诱导8 h时达到峰值。此外,平板胁迫试验表明,GeLOX1的原核表达菌株相较于对照组对低温胁迫更敏感。钩吻GeLOX1能够应答低温胁迫。 展开更多
关键词 钩吻 脂氧合酶(lox) 序列分析 低温胁迫 表达分析
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LOX1在胃癌中的表达及其促肿瘤生长的机制探讨
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作者 李伟 朱晓奕 +2 位作者 钱华 杨细虎 毛飞 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第14期2563-2569,共7页
目的:探讨血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,LOX1)在胃癌中的表达及与预后相关性,同时明确其促胃癌生长作用及潜在机制。方法:利用人类癌症基因组图谱(TCGA)、基因表达汇编(G... 目的:探讨血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,LOX1)在胃癌中的表达及与预后相关性,同时明确其促胃癌生长作用及潜在机制。方法:利用人类癌症基因组图谱(TCGA)、基因表达汇编(GEO)和癌症细胞系百科全书(CCLE)数据库分析LOX1在胃癌组织和细胞中的表达水平;利用多种统计方法分析LOX1表达水平与胃癌患者预后及临床特征的相关性;通过质粒转染敲低LOX1,进一步应用细胞功能实验(CCK-8、克隆形成、EdU实验)探究LOX1对胃癌细胞增殖能力的调控作用;通过Western blot、qPCR、免疫荧光分析LOX1对NF-κB信号通路激活的调控作用。结果:LOX1在胃癌组织和细胞中显著高表达;高水平LOX1提示胃癌患者预后较差且肿瘤较易发生转移;敲低LOX1显著抑制肿瘤细胞增殖;敲低LOX1显著抑制胃癌细胞中NF-κB信号通路的激活。结论:LOX1通过激活NF-κB信号通路对胃癌细胞增殖能力具有调控作用;LOX1可作为生物标记物提示患者预后;靶向LOX1可作为潜在胃癌治疗新方案。 展开更多
关键词 胃癌 lox1 NF-ΚB信号通路
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赖氨酰氧化酶(LOX)和赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2) 在细胞核内转录调控中的作用研究综述 被引量:1
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作者 熊伟 李彬 +4 位作者 梅雯 赵一 王播勇 自加吉 周静华 《平顶山学院学报》 2023年第2期125-128,共4页
赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)蛋白家族由LOX和4种LOX样蛋白(lysyl oxidase like 1~4,LOXL 1~4)组成,其作用主要是氧化位于赖氨酸ε位的氨基以生成醛基.通常来说,它们被认为是以细胞外蛋白质,尤其是弹性蛋白和胶原蛋白为主要底物.然... 赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)蛋白家族由LOX和4种LOX样蛋白(lysyl oxidase like 1~4,LOXL 1~4)组成,其作用主要是氧化位于赖氨酸ε位的氨基以生成醛基.通常来说,它们被认为是以细胞外蛋白质,尤其是弹性蛋白和胶原蛋白为主要底物.然而,最近研究结果表明LOX和LOXL2也可以在细胞核内基因转录调控中发挥关键的作用.值得一提的是,这两种蛋白质的细胞核定位和它们的底物可以是核内组蛋白的事实已被阐明,提示它们在组蛋白修饰等表观遗传学领域发挥作用.重点综述和探讨LOX蛋白和LOXL2蛋白这2个LOX家族成员在细胞核内的基因转录调控作用. 展开更多
关键词 赖氨酰氧化酶(lox) 赖氨酰氧化酶样蛋白2(loxL2) 转录调控 表观遗传学 组蛋白
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脂氧合酶基因LOX6克隆及其表达与鲜切芋头褐变的相关性 被引量:1
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作者 袁晓 杨盼迪 +3 位作者 林冲 朱云娜 王光 王斌 《山东农业科学》 北大核心 2023年第12期17-25,共9页
细胞膜脂质过氧化是引起鲜切果蔬褐变的重要原因,脂氧合酶(LOX)在膜脂过氧化反应中具有重要作用。为探究脂氧合酶基因LOX6表达与鲜切芋头褐变的相关性,本研究以芋头球茎cDNA为模板,克隆了LOX6基因的cDNA全长序列,并分析了其在鲜切芋头... 细胞膜脂质过氧化是引起鲜切果蔬褐变的重要原因,脂氧合酶(LOX)在膜脂过氧化反应中具有重要作用。为探究脂氧合酶基因LOX6表达与鲜切芋头褐变的相关性,本研究以芋头球茎cDNA为模板,克隆了LOX6基因的cDNA全长序列,并分析了其在鲜切芋头褐变过程中的表达模式。结果表明,芋头LOX6编码序列全长2 751 bp,编码916个氨基酸残基。不同植物LOX6氨基酸序列之间的相似性不是很高,芋头LOX6与同属天南星科的马蹄莲ZaLOX6的亲缘关系最近。随着鲜切芋头褐变加重,LOX6表达量逐渐增加,LOX6表达水平与褐变指标△E呈显著正相关(R2=0.72);外源香草酸处理显著抑制鲜切芋头褐变,且显著下调LOX6基因的表达。表明LOX6表达与鲜切芋头褐变具有明显相关性,抑制其表达可抑制鲜切芋头褐变。LOX6基因启动子中含有丰富的逆境响应相关元件,表明鲜切处理诱导LOX6表达可能是促进鲜切芋头褐变的重要原因。本研究结果可为不易褐变的芋头品种培育提供重要的基因资源,并为优化鲜切芋头褐变防控技术提供帮助。 展开更多
关键词 鲜切芋头 褐变 脂氧合酶基因lox6 低温贮藏 膜脂过氧化
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宗地花猪LOX基因CDS区克隆、真核表达载体构建及生物信息学分析
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作者 王鑫 徐龙鑫 +6 位作者 莫本田 武俊达 周文章 张凯凯 李干洲 周迪 杨蓉 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期265-271,共7页
本研究旨在对宗地花猪LOX(Lysyl Oxidase)基因编码区(Coding Sequence,CDS)区进行克隆和分析,构建其真核表达载体,并对该基因进行生物信息学分析。实验采用RT-PCR克隆方法,以GenBank中公布的猪LOX基因序列为模板,克隆宗地花猪背最长肌组... 本研究旨在对宗地花猪LOX(Lysyl Oxidase)基因编码区(Coding Sequence,CDS)区进行克隆和分析,构建其真核表达载体,并对该基因进行生物信息学分析。实验采用RT-PCR克隆方法,以GenBank中公布的猪LOX基因序列为模板,克隆宗地花猪背最长肌组织LOX基因CDS区序列,测序鉴定后进行生物信息学分析,同时构建该基因真核表达载体pEGFP-C1-LOX。结果表明:克隆得到LOX基因CDS区全长1260 bp,编码419个氨基酸,编码蛋白的分子量为47009.34Da,有45个磷酸化位点,为无跨膜区域的疏水性蛋白,其核苷酸序列与牛、鸡、黑猩猩、狗、驴、羊、马及人的相似性分别为90.9%、74.6%、89.2%、91%、91.3%、90.8%、84.4%和44.5%,不同物种间相似性较高,进化过程中具有高度保守性,与牛、羊、驴、狗亲缘关系较近,LOX蛋白主要定位在细胞核。本研究首次克隆出宗地花猪LOX基因CDS区全长序列,并成功构建LOX基因真核表达载体pEGFP-C1-LOX,为进一步探索宗地花猪LOX基因功能及作用机制提供了理论基础。 展开更多
关键词 宗地花猪 lox基因 克隆 载体构建 生物信息学
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赖氨酰氧化酶(LOX)家族蛋白质与肺癌发生发展的研究进展
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作者 王播勇 罗中贵 +4 位作者 周崇熙 李彬 刘如爱 杨玺 熊伟 《楚雄师范学院学报》 2023年第3期70-75,140,共7页
赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)家族由LOX和4种LOX样蛋白(lysyl oxidase like 1-4,LOXL1-4)组成,主要作用于细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的重塑以及胶原和弹性纤维的交联。肺癌是全世界范围内第二大常见癌症,其发病率仅次于... 赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)家族由LOX和4种LOX样蛋白(lysyl oxidase like 1-4,LOXL1-4)组成,主要作用于细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的重塑以及胶原和弹性纤维的交联。肺癌是全世界范围内第二大常见癌症,其发病率仅次于乳腺癌,死亡率第一。近年来,越来越多的研究表明,LOX家族与肺癌细胞增殖、迁移、侵袭和转移等过程密切相关。本综述介绍LOX家族各个成员在肺癌发生和进展中的作用机制及其研究进展。 展开更多
关键词 赖氨酰氧化酶(lox)家族 细胞外基质(ECM) 肺癌 发生和发展
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一种利用Cre/loxP系统进行标记基因删除与靶基因置换的细胞模型研究(英文) 被引量:2
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作者 崔文涛 任立明 +3 位作者 侯健 张颖 陈永福 安晓荣 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第6期650-660,共11页
Cre/lox系统可以介导DNA的定点插入和定点删除,可利用其实现转基因动物中'友好位点'的重复利用及标记基因的有效删除.为直观地评估该系统介导的以上两种重组反应的效果,通过标记基因并利用大鼠乳腺癌细胞系SHZ-88进行了模型研究... Cre/lox系统可以介导DNA的定点插入和定点删除,可利用其实现转基因动物中'友好位点'的重复利用及标记基因的有效删除.为直观地评估该系统介导的以上两种重组反应的效果,通过标记基因并利用大鼠乳腺癌细胞系SHZ-88进行了模型研究.首先构建了两个载体:a.整合载体pTE-lox2272-DsRed-loxP-GFP-loxP,含有红色荧光标记基因DsRed和绿色荧光标记基因GFP;b.置换载体pT-lox2272-neo-loxP,含有筛选标记基因neo,用以置换DsRed基因.然后,用整合载体转染SHZ-88细胞,并随机挑取了3个同时表达DsRed和GFP的稳定整合细胞克隆.随后用置换载体和Cre表达载体PBS185对以上每个克隆分别进行了3次共转染,通过G418筛选并扩增培养后,总共获得1070个克隆.通过分析标记基因DsRed和GFP在这些克隆中的表达情况:Cre介导的删除效率为91.1%,定点置换效率为29.3%.最后对部分克隆进行了PCR和DNA印迹鉴定,分子鉴定结果与发光的表型状况一致.这一方法为Cre/lox系统在转基因家畜生产中的进一步应用提供了实验依据. 展开更多
关键词 lox2272 loxP CRE 标记基因删除 靶基因置换
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香青菜BraLOX6基因的克隆与功能分析
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作者 王镇 任萌 +2 位作者 周冰瑶 周方晨 张轶凡 《现代园艺》 2023年第7期1-3,共3页
以香青菜2个品种‘绣花筋’和‘黑叶香青菜’为材料,克隆得到LOX6基因,并进一步分析其二级和三维结构信息,分析其和同源基因的进化关系,应用实时定量(q PCR)分析BraLOX6基因的表达水平。结果表明,BraLOX6基因的开放阅读框(ORF)大小为275... 以香青菜2个品种‘绣花筋’和‘黑叶香青菜’为材料,克隆得到LOX6基因,并进一步分析其二级和三维结构信息,分析其和同源基因的进化关系,应用实时定量(q PCR)分析BraLOX6基因的表达水平。结果表明,BraLOX6基因的开放阅读框(ORF)大小为2757bp,编码氨基酸918个,其与拟南芥同源性最高,达到85.84%,该基因的启动子中motif元件较多,响应多种胁迫和激素等。BraLOX6基因在亚麻酸含量低的品种‘绣花筋’中表达量较高,表明其参与香青菜的亚麻酸代谢过程。 展开更多
关键词 香青菜 lox基因 香味 亚麻酸代谢
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小麦籽粒成熟与萌发期间LOX的动态变化 被引量:2
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作者 顾明超 吴萍 +2 位作者 郑文寅 张文明 姚大年 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期60-64,共5页
为了解小麦籽粒中脂肪氧化酶(LOX)同工酶的代谢过程,选用4个小麦品种(鲁麦22、中优9507、内乡188、蒿优9409)为材料,采用薄层等电聚焦电泳(IEF)活性染色法检测和分析了小麦在籽粒成熟与种子萌发期间LOX同工酶酶谱的变化,并采用分光光度... 为了解小麦籽粒中脂肪氧化酶(LOX)同工酶的代谢过程,选用4个小麦品种(鲁麦22、中优9507、内乡188、蒿优9409)为材料,采用薄层等电聚焦电泳(IEF)活性染色法检测和分析了小麦在籽粒成熟与种子萌发期间LOX同工酶酶谱的变化,并采用分光光度计法测定其活性。结果表明,在籽粒成熟期间,中优9507、内乡188、蒿优9409含有5条不同的同工酶条带,鲁麦22含有8条不同的LOX同工酶条带;随籽粒成熟度的增加,酸性和中性部分的LOX同工酶的合成与含量逐渐减少,碱性部分的LOX同工酶的合成与含量缓慢增加,说明成熟末期小麦籽粒主要积累碱性LOX;4个品种的LOX活性随籽粒成熟均呈现先逐渐降低至最低点后轻微反弹的变化趋势。在种子萌发期间,4个小麦品种都含有7条LOX同工酶条带,除萌发第一天外,随种子萌发的进行,酸性部分的LOX同工酶合成与含量减少,碱性和中性部分的LOX同工酶合成与含量缓慢增加,说明小麦种子在萌发过程中主要积累碱性LOX;4个品种的LOX活性均呈先保持一恒定高值后迅速下降至一恒定低值的变化趋势。无论是籽粒成熟期间还是种子萌发期间,影响小麦籽粒或种子中LOX酶活性大小的主要是酸性的LOX同工酶。 展开更多
关键词 小麦 籽粒成熟期 种子萌发期 lox酶活性 lox同工酶
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20个小麦品种(系)籽粒LOX活性和类胡萝卜素含量及全麦粉色泽的研究 被引量:16
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作者 汪帆 郑文寅 +4 位作者 黄建华 王冠球 崔文礼 张文明 姚大年 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期68-73,共6页
为给小麦粉营养品质与商品性的协同改良提供参考,以20个小麦品种(系)为试材,分析了不同角质类型的籽粒中脂肪氧化酶(LOX)活性和类胡萝卜素含量的变化,并初步探讨了LOX活性和类胡萝卜素含量的高低与全麦粉白度、黄度间的相关性。结果表明... 为给小麦粉营养品质与商品性的协同改良提供参考,以20个小麦品种(系)为试材,分析了不同角质类型的籽粒中脂肪氧化酶(LOX)活性和类胡萝卜素含量的变化,并初步探讨了LOX活性和类胡萝卜素含量的高低与全麦粉白度、黄度间的相关性。结果表明,不同品种(系)间LOX活性、类胡萝卜素含量、全麦粉白度、全麦粉黄度均存在极显著差异;LOX活性与类胡萝卜素含量呈极显著负相关,与全麦粉白度呈显著正相关,与全麦粉黄度相关性不显著;类胡萝卜素含量与全麦粉黄度呈显著正相关,与白度相关性不显著。采用欧式最长距离法对供试小麦品种(系)的LOX、类胡萝卜素以及全麦粉白度、黄度进行聚类分析,结果,LOX活性和白度较高、类胡萝卜素含量和黄度较低的周麦19和偃展4110聚为一类;LOX活性和白度较低、类胡萝卜素含量和黄度较高的烟农21、皖麦47等9个品种聚为一类;上述性状值居中的其他9个品种聚为一类。 展开更多
关键词 小麦 lox 类胡萝卜素 全麦粉白度、黄度 相关性
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PG和LOX对采后番茄果实软化及细胞超微结构的影响 被引量:52
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作者 生吉萍 罗云波 申琳 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期276-281,共6页
以番茄 (Lycopersiconesculentum)品种‘丽春’为试验材料研究了果实采后多聚半乳糖醛酸酶 (PG)和脂氧合酶 (LOX)的活性变化与果实硬度的关系 ,并观察了细胞超微结构的变化。结果表明 ,随着果实采后呼吸强度和乙烯释放量不断增加 ,PG和... 以番茄 (Lycopersiconesculentum)品种‘丽春’为试验材料研究了果实采后多聚半乳糖醛酸酶 (PG)和脂氧合酶 (LOX)的活性变化与果实硬度的关系 ,并观察了细胞超微结构的变化。结果表明 ,随着果实采后呼吸强度和乙烯释放量不断增加 ,PG和LOX活性迅速增加 ,而果实硬度逐渐下降。呼吸强度和LOX活性高峰出现在发白期 (BR) ,而乙烯释放量高峰延迟至转色期 (TU)。PG活性随着果实的成熟逐渐增加 ,而LOX活性在发白期之后保持较高水平。分别用外源LOX和LOX加底物处理番茄组织切片 ,发现组织细胞的衰老进程加速 ,进而导致细胞膜瓦解、胞壁纤维松弛以及细胞器空胞化。PG和LOX都与果实的后熟软化有关 。 展开更多
关键词 番茄 果实软化 PG lox 酶活性 细胞超微结构
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外源乙烯对CA贮藏桃果实MDA含量、PPO和LOX活性变化的影响 被引量:14
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作者 胡花丽 梁丽松 +1 位作者 王贵禧 李艳菊 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2007年第3期38-42,共5页
以‘八月脆’桃果实为材料,研究了常温条件下,不同浓度外源乙烯(10~20μL.L-1和50~80μL.L-1)处理对气调贮藏(9%~11%CO2+9%~11%O2)期间以及在20℃回温3 d后桃果实MDA(丙二醛)含量、PPO(多酚氧化酶)和LOX(脂氧合酶)活性的影响。结果... 以‘八月脆’桃果实为材料,研究了常温条件下,不同浓度外源乙烯(10~20μL.L-1和50~80μL.L-1)处理对气调贮藏(9%~11%CO2+9%~11%O2)期间以及在20℃回温3 d后桃果实MDA(丙二醛)含量、PPO(多酚氧化酶)和LOX(脂氧合酶)活性的影响。结果表明:常温贮藏条件下,桃果实MDA含量随着果实的成熟而升高,PPO和LOX活性在第4 d出现高峰。外源乙烯提高了气调贮藏果实MDA含量,贮藏60 d时,高浓度外源乙烯处理果实MDA含量明显升高。回温后,冷藏对照果实MDA含量随着贮藏时间的延长而增加,且在贮藏60 d时,MDA含量高于常温贮藏果实的MDA含量。外源乙烯对LOX的作用与其对MDA的作用一致。高浓度的外源乙烯可抑制贮藏前期桃果实PPO活性,低浓度外源乙烯则降低了贮藏后期桃果实PPO活性,但回温后,低浓度外源乙烯处理果实PPO活性明显升高。综合考虑不同处理对CA贮藏桃果实MDA含量、PPO、LOX活性的作用特点,认为50~80μL.L-1外源乙烯处理对减轻桃果实的低温冷害、抑制果实褐变有一定的作用。 展开更多
关键词 桃果实 外源乙烯 CA贮藏 MDA PPO lox
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Cre/lox位点特异性重组系统在高等真核生物中的研究进展 被引量:11
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作者 龙定沛 谭兵 +2 位作者 赵爱春 许龙霞 向仲怀 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期177-189,共13页
来自于P1噬菌体的Cre/lox系统通过位点特异性重组可以迅速而有效地实现各种生理环境下的基因定点插入、删除、替换和倒位等操作。Cre/lox系统作为目前基因打靶技术的核心工具,已被广泛应用于拟南芥、水稻、小鼠、果蝇、斑马鱼等高等真... 来自于P1噬菌体的Cre/lox系统通过位点特异性重组可以迅速而有效地实现各种生理环境下的基因定点插入、删除、替换和倒位等操作。Cre/lox系统作为目前基因打靶技术的核心工具,已被广泛应用于拟南芥、水稻、小鼠、果蝇、斑马鱼等高等真核模式生物。文章较为全面地介绍了Cre/lox系统的基本概况及其在高等真核生物中的应用,讨论了Cre/lox系统在研究中存在的主要问题和今后的发展方向,为利用该系统在不同高等生物中进行基因操作提供有用的参考。 展开更多
关键词 Cre/lox重组系统 基因操作 位点特异性重组 基因打靶
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枇杷幼果PLD和LOX对低温胁迫的响应 被引量:10
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作者 吴锦程 吴毕莎 +4 位作者 黄审剑 陈祠贤 颜亮 许宏斌 林建琼 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期203-209,共7页
以3年生枇杷品种‘早钟6号’(Eriobotrya japonica‘Zaozhong No.6’)容器嫁接苗为试材,于0℃、-1℃、-3℃人工气候室内进行低温胁迫处理,探讨枇杷幼果细胞膜磷脂及相关酶对低温胁迫的响应机制。结果显示,在不同温度胁迫过程中,枇杷... 以3年生枇杷品种‘早钟6号’(Eriobotrya japonica‘Zaozhong No.6’)容器嫁接苗为试材,于0℃、-1℃、-3℃人工气候室内进行低温胁迫处理,探讨枇杷幼果细胞膜磷脂及相关酶对低温胁迫的响应机制。结果显示,在不同温度胁迫过程中,枇杷幼果磷脂酶D(PLD,EC 3.1.4.4)和脂氧合酶(LOX,EC 1.13.11.12)活性均呈上升趋势;质膜磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰肌醇(PI)含量因逐渐被降解而呈下降趋势,磷脂酸(PA)含量出现积累、增加,而膜结合Ca2+含量有不同程度的降低。随处理时间的延长和处理温度的降低,枇杷幼果细胞PLD和LOX活性增幅加大,从而加速了膜PC和PI的降解和PA的积累。低温胁迫过程中幼果细胞膜PC含量的降幅大于PI,膜结合Ca2+含量的变化与PLD和LOX活性变化呈负相关。低温胁迫下枇杷幼果细胞膜结合Ca2+含量的减少诱导了膜脂降解酶PLD和LOX活性的提高,并导致膜结构稳定性下降,加剧了低温胁迫对膜脂的降解和脂质过氧化伤害,其中尤以-3℃胁迫处理4~6 h对幼果细胞质膜的伤害最严重。表明低温胁迫下Ca2+·Ca M信使系统可能参与枇杷幼果细胞膜PLD和LOX活性的调控。 展开更多
关键词 枇杷 低温胁迫 磷脂酶D(PLD) 脂氧合酶(lox) 膜结合Ca2+
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利用Cre/lox定位重组系统获得无选择标记GFP转基因烟草 被引量:9
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作者 宋洪元 任雪松 +2 位作者 司军 李成琼 宋明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期2973-2982,共10页
【目的】利用Cre/lox系统具有的特异重组特性,以绿色荧光蛋白GFP为目的基因,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【方法】将Bar基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与GFP基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草后获得抗除草剂Bast... 【目的】利用Cre/lox系统具有的特异重组特性,以绿色荧光蛋白GFP为目的基因,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【方法】将Bar基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与GFP基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草后获得抗除草剂Basta的GFP转基因植株。GFP转基因植株叶盘二次转化导入重组酶Cre基因后,实现与GFP基因连锁的Bar基因表达盒剔除,剔除Bar基因的植株开花后自交使重组酶Cre基因分离,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【结果】将含Bar基因表达盒以及GFP基因表达盒的植物表达载体转化烟草Wisconsin38后获得了抗除草剂Basta以及GFP荧光表达的转基因植株。随机抽取5株转基因植株二次转化导入Cre基因,所获得的再生植株叶盘进行Basta的抗性检测,绝大多数单株对应叶盘在含8mg·L-1PPT(phosphinothricin)的筛选培养基上无法再生死亡,删除效率在76%~100%。对Bar基因删除后区域片段进行克隆测序分析显示,Bar基因表达盒已经被精确删除。Bar基因删除植株开花后自交,获得的自交后代进行NPTⅡ抗性检测,NPTⅡ敏感植株分子检测显示均只含有GFP基因。【结论】利用Cre/lox系统获得烟草无选择标记的转基因植物是稳定可行的,可广泛应用于其它无选择标记转基因植物的培育。 展开更多
关键词 Cre/lox定位重组系统 无选择标记转基因烟草 绿色荧光蛋白 转基因
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利用Cre/lox重组系统获得无选择标记的SKTI抗虫转基因烟草 被引量:6
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作者 宋洪元 任雪松 +3 位作者 司军 李成琼 宋明 雷建军 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期21-29,共9页
将置于两个同向lox位点之间的Bar基因表达盒与大豆胰蛋白酶抑制剂SKTI基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草Wisconsin 38后获得对棉铃虫具有明显抗性的SKTI转基因植株。SKTI转基因植株通过叶盘二次转化法导入Cre基因,对再生... 将置于两个同向lox位点之间的Bar基因表达盒与大豆胰蛋白酶抑制剂SKTI基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草Wisconsin 38后获得对棉铃虫具有明显抗性的SKTI转基因植株。SKTI转基因植株通过叶盘二次转化法导入Cre基因,对再生植株叶盘进行Basta的抗性检测,检测Bar基因的删除情况。结果表明:绝大多数再生植株对应叶盘在含8 mg/L PPT的筛选培养基上无法再生,Bar基因被删除的效率在38%-100%之间。对Bar基因删除区域进行PCR及克隆测序后发现Bar基因表达盒被精确删除。对Bar基因删除植株开花自交获得的分离后代进行NPTⅡ抗性检测,5株NPTⅡ敏感植株分子检测显示均只含有SKTI基因而无Cre基因存在,为无选择标记基因的SKTI转基因植株。 展开更多
关键词 Cre/lox重组系统 SKTI基因 无选择标记 抗虫转基因烟草
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