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基于5-LOX/LTB4信号通路探讨黄芩苷/栀子苷对PM_(2.5)暴露致血管内皮功能障碍的干预作用及其机制 被引量:1
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作者 孙欠欠 张行行 +5 位作者 赵麓 赵安东 史永恒 王川 刘继平 王斌 《中南药学》 CAS 2024年第2期307-314,共8页
目的基于5-LOX/LTB4信号通路探究黄芩苷/栀子苷(BC/GD)对PM_(2.5)诱导的血管内皮功能障碍的改善作用及其机制。方法利用离体肌张力描记技术测定BC/GD对不同状态下血管环张力的影响。将32只大鼠随机分为对照组、PM_(2.5)组、30 mg·k... 目的基于5-LOX/LTB4信号通路探究黄芩苷/栀子苷(BC/GD)对PM_(2.5)诱导的血管内皮功能障碍的改善作用及其机制。方法利用离体肌张力描记技术测定BC/GD对不同状态下血管环张力的影响。将32只大鼠随机分为对照组、PM_(2.5)组、30 mg·kg^(-1)BC/GD组和60 mg·kg^(-1)BC/GD组,利用气管滴注法构建PM_(2.5)暴露模型,持续2个月,造模1个月后灌胃给予对应药物,持续1个月,末次给药后,HE染色观察肠系膜动脉血管内皮状态;化学发光法检测肠系膜动脉活性氧(ROS)水平;硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)水平;ELISA法检测血清炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子β1(TGF-β1)、白三烯B4(LTB4)水平;Western blot法检测5-脂氧酶(5-LOX)、内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达。结果BC/GD对基础状态的肠系膜动脉血管环张力无明显影响,但能明显舒张由5-HT预收缩的血管环;一氧化氮合酶抑制剂L-NAME、环氧合酶抑制剂INDO或L-NAME+INDO均能明显抑制BC/GD的血管舒张作用,但L-NAME的抑制作用更明显;50、100 mg·mL^(-1)PM_(2.5)能降低血管环对乙酰胆碱(ACh)的舒张血管效应,而BC/GD能明显改善PM_(2.5)诱导的舒张效应减弱。与对照组相比,PM_(2.5)组大鼠肠系膜动脉内皮完整性严重受损、内皮皱缩,大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、LTB4水平显著升高、TGF-β1水平显著降低,肠系膜动脉组织中5-LOX、iNOS蛋白表达明显增加,eNOS蛋白表达降低,ROS水平升高,NO水平降低。与PM_(2.5)组相比,BC/GD能改善内皮损伤程度和完整性,可显著降低血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、LTB4水平,升高TGF-β1水平;明显降低肠系膜动脉5-LOX、iNOS表达,升高eNOS蛋白表达;降低ROS水平,升高NO水平。结论BC/GD可通过抑制5-LOX/LTB4信号通路表达,从而降低ROS水平,抑制炎性损伤,上调eNOS表达,下调iNOS表达,升高血管中NO水平,改善PM_(2.5)诱导的血管内皮功能障碍。 展开更多
关键词 PM_(2.5) 黄芩苷 栀子苷 内皮功能障碍 5-lox/LTB4信号通路
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CgLOX4基因在长牡蛎幼虫发育中的表达特征
2
作者 胡悦 冷金源 +2 位作者 孙洁洁 王玲玲 宋林生 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期38-47,共10页
为研究长牡蛎(Crassostrea gigas)LOX4基因(CgLOX4)在幼虫发育中的表达特征,采用PCR技术扩增CgLOX4的全长cDNA序列,利用荧光定量PCR和整体免疫荧光技术检测CgLOX4在幼虫不同发育时期的表达特征。结果表明:CgLOX4的cDNA全长为1 862 bp,... 为研究长牡蛎(Crassostrea gigas)LOX4基因(CgLOX4)在幼虫发育中的表达特征,采用PCR技术扩增CgLOX4的全长cDNA序列,利用荧光定量PCR和整体免疫荧光技术检测CgLOX4在幼虫不同发育时期的表达特征。结果表明:CgLOX4的cDNA全长为1 862 bp,开放阅读框为834 bp,可编码277个氨基酸,等电点为8.36,预测其氨基酸序列只含有一个保守的HOX结构域;CgLOX4在长牡蛎成体各组织中均有表达,其中在闭壳肌中的表达量显著高于肝胰腺、鳃、血淋巴、性腺和唇瓣组织(P<0.05);CgLOX4在所检测的早期胚胎中均有表达,其中在受精卵和4细胞期的表达量相对较高;CgLOX4阳性信号主要分布在担轮幼虫壳形成区、D型幼虫内脏团和壳顶幼虫消化腺中。研究表明,CgLOX4是长牡蛎早期发育过程中较早激活的转录因子之一,可能在调控幼虫壳形成和消化器官形成等方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 长牡蛎 lox4 幼虫发育 分布特征
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JA-mediated MYC2/LOX/AOS feedback loop regulates osmotic stress response in tea plant
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作者 Junyan Zhu Hongrong Chen +5 位作者 Lu Liu Xiaobo Xia Xiaomei Yan Xiaozeng Mi Shengrui Liu Chaoling Wei 《Horticultural Plant Journal》 SCIE CAS CSCD 2024年第3期931-946,共16页
Osmotic stress caused by low-temperature,drought and salinity was a prevalent abiotic stress in plant that severely inhibited plant development and agricultural yield,particularly in tea plant.Jasmonic acid(JA)is an i... Osmotic stress caused by low-temperature,drought and salinity was a prevalent abiotic stress in plant that severely inhibited plant development and agricultural yield,particularly in tea plant.Jasmonic acid(JA)is an important phytohormone involving in plant stress.However,underlying molecular mechanisms of JA modulated osmotic stress response remains unclear.In this study,high concentration of mannitol induced JA accumulation and increase of peroxidase activity in tea plant.Integrated transcriptome mined a JA signaling master,MYC2 transcription factor is shown as a hub regulator that induced by mannitol,expression of which positively correlated with JA biosynthetic genes(LOX and AOS)and peroxidase genes(PER).CsMYC2 was determined as a nuclei-localized transcription activator,furthermore,ProteinDNA interaction analysis indicated that CsMYC2 was positive regulator that activated the transcription of CsLOX7,CsAOS2,CsPER1 and CsPER3via bound with their promoters,respectively.Suppression of CsMYC2 expression resulted in a reduced JA content and peroxidase activity and osmotic stress tolerance of tea plant.Overexpression of CsMYC2 in Arabidopsis improved JA content,peroxidase activity and plants tolerance against mannitol stress.Together,we proposed a positive feedback loop mediated by CsMYC2,CsLOX7 and CsAOS2 which constituted to increase the tolerance of osmotic stress through fine-tuning the accumulation of JA levels and increase of POD activity in tea plant. 展开更多
关键词 Camellia sinensis Jasmonic acid(JA) MYC2 transcription factor Lipoxygenase(lox) Osmotic stress Peroxidase(POD) Reactive oxygen species(ROS)
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基于LOX-1/NOX2信号通路探讨槲皮素抑制中性粒细胞胞外诱捕网形成机制
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作者 刘思 罗纲 +3 位作者 王君畅 应琳瑶 王严 肖琳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2047-2054,共8页
目的探讨溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine,LPC)诱导中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)形成的分子机制及槲皮素的干预作用。方法使用LPC诱导大鼠原代中性粒细胞,构建NETs形成的体外模型并进行槲皮素干... 目的探讨溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine,LPC)诱导中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)形成的分子机制及槲皮素的干预作用。方法使用LPC诱导大鼠原代中性粒细胞,构建NETs形成的体外模型并进行槲皮素干预,检测NETs形成情况及相关通路蛋白表达水平。结果100 mg·L^(-1) LPC可在体外诱导NETs形成,其与LOX-1/NOX2通路相关蛋白表达上调有关,槲皮素干预可有效降低LOX-1和NOX2蛋白表达水平并减少NETs形成。结论槲皮素通过调控LOX-1/NOX2信号通路抑制NETs形成,发挥对相关炎症性疾病的保护作用。 展开更多
关键词 炎症 溶血磷脂酰胆碱 中性粒细胞胞外诱捕网 槲皮素 lox-1 NOX2
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血必净通过调节miR-145-5p/LOX信号通路对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞氧化应激及凋亡的影响
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作者 李英 冯凯 +4 位作者 王文霞 严丽娟 张国旗 刘志艳 周来来 《陕西中医药大学学报》 2024年第5期97-102,共6页
目的探讨血必净对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞氧化损伤及凋亡的影响及其分子机制。方法培养H9C2细胞后将其随机分为对照组(Control)、模型组(Model)和血必净组(XBJ)3组,除Control组外,其余组的H9C2细胞用H_(2)O_(2)诱导构建氧化应激损伤... 目的探讨血必净对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞氧化损伤及凋亡的影响及其分子机制。方法培养H9C2细胞后将其随机分为对照组(Control)、模型组(Model)和血必净组(XBJ)3组,除Control组外,其余组的H9C2细胞用H_(2)O_(2)诱导构建氧化应激损伤细胞模型,然后XBJ组用12.5 g·L^(-1)、25 g·L^(-1)和50 g·L^(-1)浓度的XBJ处理24 h。CCK-8法检测不同浓度的XBJ对细胞活力的影响;生化试剂盒检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及还原型谷胱甘肽(GSH)的活性;流式检测H9C2细胞凋亡率;qRT-PCR检测miR-145-5p、LOX mRNA的表达;Western blot检测赖氨酰氧化酶蛋白(lysyloxidase,LOX)的表达;双荧光素酶实验检测miR-145-5p与LOX的靶向结合关系。结果不同浓度XBJ处理后,细胞活性呈梯度性显著增高;与对照组相比,模型组细胞CK-MB、MDA的活性显著增加(P<0.01),SOD、GSH活性显著降低,细胞凋亡率显著提高,miR-145-5p表达水平显著降低,LOX水平显著增加(P<0.01);经血必净处理后上述指标的水平得到有效改善(P<0.05)。结论XBJ能通过提高抗氧化应激能力,抑制细胞凋亡并调控miR-145-5p/LOX信号通路保护H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 血必净 心肌细胞 氧化应激 细胞凋亡 miR-145-5p/lox通路
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20个小麦品种(系)籽粒LOX活性和类胡萝卜素含量及全麦粉色泽的研究 被引量:16
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作者 汪帆 郑文寅 +4 位作者 黄建华 王冠球 崔文礼 张文明 姚大年 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期68-73,共6页
为给小麦粉营养品质与商品性的协同改良提供参考,以20个小麦品种(系)为试材,分析了不同角质类型的籽粒中脂肪氧化酶(LOX)活性和类胡萝卜素含量的变化,并初步探讨了LOX活性和类胡萝卜素含量的高低与全麦粉白度、黄度间的相关性。结果表明... 为给小麦粉营养品质与商品性的协同改良提供参考,以20个小麦品种(系)为试材,分析了不同角质类型的籽粒中脂肪氧化酶(LOX)活性和类胡萝卜素含量的变化,并初步探讨了LOX活性和类胡萝卜素含量的高低与全麦粉白度、黄度间的相关性。结果表明,不同品种(系)间LOX活性、类胡萝卜素含量、全麦粉白度、全麦粉黄度均存在极显著差异;LOX活性与类胡萝卜素含量呈极显著负相关,与全麦粉白度呈显著正相关,与全麦粉黄度相关性不显著;类胡萝卜素含量与全麦粉黄度呈显著正相关,与白度相关性不显著。采用欧式最长距离法对供试小麦品种(系)的LOX、类胡萝卜素以及全麦粉白度、黄度进行聚类分析,结果,LOX活性和白度较高、类胡萝卜素含量和黄度较低的周麦19和偃展4110聚为一类;LOX活性和白度较低、类胡萝卜素含量和黄度较高的烟农21、皖麦47等9个品种聚为一类;上述性状值居中的其他9个品种聚为一类。 展开更多
关键词 小麦 lox 类胡萝卜素 全麦粉白度、黄度 相关性
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PG和LOX对采后番茄果实软化及细胞超微结构的影响 被引量:53
7
作者 生吉萍 罗云波 申琳 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期276-281,共6页
以番茄 (Lycopersiconesculentum)品种‘丽春’为试验材料研究了果实采后多聚半乳糖醛酸酶 (PG)和脂氧合酶 (LOX)的活性变化与果实硬度的关系 ,并观察了细胞超微结构的变化。结果表明 ,随着果实采后呼吸强度和乙烯释放量不断增加 ,PG和... 以番茄 (Lycopersiconesculentum)品种‘丽春’为试验材料研究了果实采后多聚半乳糖醛酸酶 (PG)和脂氧合酶 (LOX)的活性变化与果实硬度的关系 ,并观察了细胞超微结构的变化。结果表明 ,随着果实采后呼吸强度和乙烯释放量不断增加 ,PG和LOX活性迅速增加 ,而果实硬度逐渐下降。呼吸强度和LOX活性高峰出现在发白期 (BR) ,而乙烯释放量高峰延迟至转色期 (TU)。PG活性随着果实的成熟逐渐增加 ,而LOX活性在发白期之后保持较高水平。分别用外源LOX和LOX加底物处理番茄组织切片 ,发现组织细胞的衰老进程加速 ,进而导致细胞膜瓦解、胞壁纤维松弛以及细胞器空胞化。PG和LOX都与果实的后熟软化有关 。 展开更多
关键词 番茄 果实软化 PG lox 酶活性 细胞超微结构
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Cre/lox位点特异性重组系统在高等真核生物中的研究进展 被引量:12
8
作者 龙定沛 谭兵 +2 位作者 赵爱春 许龙霞 向仲怀 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期177-189,共13页
来自于P1噬菌体的Cre/lox系统通过位点特异性重组可以迅速而有效地实现各种生理环境下的基因定点插入、删除、替换和倒位等操作。Cre/lox系统作为目前基因打靶技术的核心工具,已被广泛应用于拟南芥、水稻、小鼠、果蝇、斑马鱼等高等真... 来自于P1噬菌体的Cre/lox系统通过位点特异性重组可以迅速而有效地实现各种生理环境下的基因定点插入、删除、替换和倒位等操作。Cre/lox系统作为目前基因打靶技术的核心工具,已被广泛应用于拟南芥、水稻、小鼠、果蝇、斑马鱼等高等真核模式生物。文章较为全面地介绍了Cre/lox系统的基本概况及其在高等真核生物中的应用,讨论了Cre/lox系统在研究中存在的主要问题和今后的发展方向,为利用该系统在不同高等生物中进行基因操作提供有用的参考。 展开更多
关键词 Cre/lox重组系统 基因操作 位点特异性重组 基因打靶
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外源乙烯对CA贮藏桃果实MDA含量、PPO和LOX活性变化的影响 被引量:14
9
作者 胡花丽 梁丽松 +1 位作者 王贵禧 李艳菊 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2007年第3期38-42,共5页
以‘八月脆’桃果实为材料,研究了常温条件下,不同浓度外源乙烯(10~20μL.L-1和50~80μL.L-1)处理对气调贮藏(9%~11%CO2+9%~11%O2)期间以及在20℃回温3 d后桃果实MDA(丙二醛)含量、PPO(多酚氧化酶)和LOX(脂氧合酶)活性的影响。结果... 以‘八月脆’桃果实为材料,研究了常温条件下,不同浓度外源乙烯(10~20μL.L-1和50~80μL.L-1)处理对气调贮藏(9%~11%CO2+9%~11%O2)期间以及在20℃回温3 d后桃果实MDA(丙二醛)含量、PPO(多酚氧化酶)和LOX(脂氧合酶)活性的影响。结果表明:常温贮藏条件下,桃果实MDA含量随着果实的成熟而升高,PPO和LOX活性在第4 d出现高峰。外源乙烯提高了气调贮藏果实MDA含量,贮藏60 d时,高浓度外源乙烯处理果实MDA含量明显升高。回温后,冷藏对照果实MDA含量随着贮藏时间的延长而增加,且在贮藏60 d时,MDA含量高于常温贮藏果实的MDA含量。外源乙烯对LOX的作用与其对MDA的作用一致。高浓度的外源乙烯可抑制贮藏前期桃果实PPO活性,低浓度外源乙烯则降低了贮藏后期桃果实PPO活性,但回温后,低浓度外源乙烯处理果实PPO活性明显升高。综合考虑不同处理对CA贮藏桃果实MDA含量、PPO、LOX活性的作用特点,认为50~80μL.L-1外源乙烯处理对减轻桃果实的低温冷害、抑制果实褐变有一定的作用。 展开更多
关键词 桃果实 外源乙烯 CA贮藏 MDA PPO lox
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枇杷幼果PLD和LOX对低温胁迫的响应 被引量:10
10
作者 吴锦程 吴毕莎 +4 位作者 黄审剑 陈祠贤 颜亮 许宏斌 林建琼 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期203-209,共7页
以3年生枇杷品种‘早钟6号’(Eriobotrya japonica‘Zaozhong No.6’)容器嫁接苗为试材,于0℃、-1℃、-3℃人工气候室内进行低温胁迫处理,探讨枇杷幼果细胞膜磷脂及相关酶对低温胁迫的响应机制。结果显示,在不同温度胁迫过程中,枇杷... 以3年生枇杷品种‘早钟6号’(Eriobotrya japonica‘Zaozhong No.6’)容器嫁接苗为试材,于0℃、-1℃、-3℃人工气候室内进行低温胁迫处理,探讨枇杷幼果细胞膜磷脂及相关酶对低温胁迫的响应机制。结果显示,在不同温度胁迫过程中,枇杷幼果磷脂酶D(PLD,EC 3.1.4.4)和脂氧合酶(LOX,EC 1.13.11.12)活性均呈上升趋势;质膜磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰肌醇(PI)含量因逐渐被降解而呈下降趋势,磷脂酸(PA)含量出现积累、增加,而膜结合Ca2+含量有不同程度的降低。随处理时间的延长和处理温度的降低,枇杷幼果细胞PLD和LOX活性增幅加大,从而加速了膜PC和PI的降解和PA的积累。低温胁迫过程中幼果细胞膜PC含量的降幅大于PI,膜结合Ca2+含量的变化与PLD和LOX活性变化呈负相关。低温胁迫下枇杷幼果细胞膜结合Ca2+含量的减少诱导了膜脂降解酶PLD和LOX活性的提高,并导致膜结构稳定性下降,加剧了低温胁迫对膜脂的降解和脂质过氧化伤害,其中尤以-3℃胁迫处理4~6 h对幼果细胞质膜的伤害最严重。表明低温胁迫下Ca2+·Ca M信使系统可能参与枇杷幼果细胞膜PLD和LOX活性的调控。 展开更多
关键词 枇杷 低温胁迫 磷脂酶D(PLD) 脂氧合酶(lox) 膜结合Ca2+
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利用Cre/lox定位重组系统获得无选择标记GFP转基因烟草 被引量:9
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作者 宋洪元 任雪松 +2 位作者 司军 李成琼 宋明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期2973-2982,共10页
【目的】利用Cre/lox系统具有的特异重组特性,以绿色荧光蛋白GFP为目的基因,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【方法】将Bar基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与GFP基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草后获得抗除草剂Bast... 【目的】利用Cre/lox系统具有的特异重组特性,以绿色荧光蛋白GFP为目的基因,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【方法】将Bar基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与GFP基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草后获得抗除草剂Basta的GFP转基因植株。GFP转基因植株叶盘二次转化导入重组酶Cre基因后,实现与GFP基因连锁的Bar基因表达盒剔除,剔除Bar基因的植株开花后自交使重组酶Cre基因分离,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【结果】将含Bar基因表达盒以及GFP基因表达盒的植物表达载体转化烟草Wisconsin38后获得了抗除草剂Basta以及GFP荧光表达的转基因植株。随机抽取5株转基因植株二次转化导入Cre基因,所获得的再生植株叶盘进行Basta的抗性检测,绝大多数单株对应叶盘在含8mg·L-1PPT(phosphinothricin)的筛选培养基上无法再生死亡,删除效率在76%~100%。对Bar基因删除后区域片段进行克隆测序分析显示,Bar基因表达盒已经被精确删除。Bar基因删除植株开花后自交,获得的自交后代进行NPTⅡ抗性检测,NPTⅡ敏感植株分子检测显示均只含有GFP基因。【结论】利用Cre/lox系统获得烟草无选择标记的转基因植物是稳定可行的,可广泛应用于其它无选择标记转基因植物的培育。 展开更多
关键词 Cre/lox定位重组系统 无选择标记转基因烟草 绿色荧光蛋白 转基因
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热处理对黄瓜LOX和PLD活性的影响 被引量:5
12
作者 王国泽 莎娜 +3 位作者 云月英 李俊芳 王文龙 付文菊 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第6期100-102,共3页
为了研究冷害温度(2℃)下PLD和LOX活性的变化规律,以黄瓜为研究对象,对其进行采后38,45和52℃30 min热水处理,测定2℃贮藏期间(15 d)黄瓜的细胞膜透性、丙二醛含量、PLD活性和LOX活性。结果表明:热水处理可以抑制果实细胞膜渗透率的升高... 为了研究冷害温度(2℃)下PLD和LOX活性的变化规律,以黄瓜为研究对象,对其进行采后38,45和52℃30 min热水处理,测定2℃贮藏期间(15 d)黄瓜的细胞膜透性、丙二醛含量、PLD活性和LOX活性。结果表明:热水处理可以抑制果实细胞膜渗透率的升高,减少低温贮藏期间丙二醛的积累,降低黄瓜低温贮藏过程中PLD及LOX的活性,且以45℃3、0 min热水处理效果最显著。 展开更多
关键词 热处理 黄瓜 PLD活性 lox活性
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利用Cre/lox重组系统获得无选择标记的SKTI抗虫转基因烟草 被引量:6
13
作者 宋洪元 任雪松 +3 位作者 司军 李成琼 宋明 雷建军 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期21-29,共9页
将置于两个同向lox位点之间的Bar基因表达盒与大豆胰蛋白酶抑制剂SKTI基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草Wisconsin 38后获得对棉铃虫具有明显抗性的SKTI转基因植株。SKTI转基因植株通过叶盘二次转化法导入Cre基因,对再生... 将置于两个同向lox位点之间的Bar基因表达盒与大豆胰蛋白酶抑制剂SKTI基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草Wisconsin 38后获得对棉铃虫具有明显抗性的SKTI转基因植株。SKTI转基因植株通过叶盘二次转化法导入Cre基因,对再生植株叶盘进行Basta的抗性检测,检测Bar基因的删除情况。结果表明:绝大多数再生植株对应叶盘在含8 mg/L PPT的筛选培养基上无法再生,Bar基因被删除的效率在38%-100%之间。对Bar基因删除区域进行PCR及克隆测序后发现Bar基因表达盒被精确删除。对Bar基因删除植株开花自交获得的分离后代进行NPTⅡ抗性检测,5株NPTⅡ敏感植株分子检测显示均只含有SKTI基因而无Cre基因存在,为无选择标记基因的SKTI转基因植株。 展开更多
关键词 Cre/lox重组系统 SKTI基因 无选择标记 抗虫转基因烟草
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鸭梨采后果肉LOX同工酶变化及其与果实褐变关系的研究 被引量:5
14
作者 李晓丹 宋方圆 +2 位作者 朱文嫱 梁丽雅 闫师杰 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2013年第4期214-217,共4页
以河北鸭梨为试材,通过鸭梨果实褐变指数和果肉LOX同工酶变化的测定,研究缓慢和急速2种降温处理对不同成熟度鸭梨果肉褐变情况和LOX同工酶活性的影响。结果表明,果实褐变严重程度为:晚采果>早采果>中采果,急速降温>缓慢降温,因... 以河北鸭梨为试材,通过鸭梨果实褐变指数和果肉LOX同工酶变化的测定,研究缓慢和急速2种降温处理对不同成熟度鸭梨果肉褐变情况和LOX同工酶活性的影响。结果表明,果实褐变严重程度为:晚采果>早采果>中采果,急速降温>缓慢降温,因此,鸭梨的最佳储藏方法为中采鸭梨(9月中旬)采用缓慢降温处理。鸭梨果肉中LOX同工酶有9条,急降温和缓降温处理对不同成熟度鸭梨果实LOX同工酶表达有一定的影响。急速降温处理比缓慢降温的LOX同工酶活性高,不同成熟度LOX酶活性大小顺序为:晚采果>中采果>早采果,这与褐变指数测定的结果相一致,暗示了脂肪氧合酶与鸭梨果肉的褐变有密切的联系。 展开更多
关键词 鸭梨 果肉 褐变指数 lox酶同工酶 非变性PAGE
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利用Cre/lox重组系统建立番茄基因工程雄性不育恢复系 被引量:3
15
作者 宋洪元 任雪松 +3 位作者 司军 李成琼 宋明 雷建军 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期3581-3591,共11页
【目的】利用Cre/lox重组系统具有的重组删除特性建立番茄工程恢复系,特异删除F1中的雄性不育基因恢复其育性。【方法】将TA29-Barnase雄性不育基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与NPTⅡ基因、Bar基因融合后获得植物表达载体pBinBarl... 【目的】利用Cre/lox重组系统具有的重组删除特性建立番茄工程恢复系,特异删除F1中的雄性不育基因恢复其育性。【方法】将TA29-Barnase雄性不育基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与NPTⅡ基因、Bar基因融合后获得植物表达载体pBinBarloxTABn,转化番茄获得雄性不育转基因植株。Cre基因在CaMV35S启动子的驱动下转入番茄获得工程恢复系。两者在开花时进行杂交,利用Cre重组酶删除F1中的TA29-Barnase不育基因表达盒使育性恢复。【结果】利用NPTⅡ作为转化筛选标记基因获得了番茄雄性不育转基因植株。转基因植株中的Bar基因能正常表达,真叶叶盘在含PPT3mg·L-1(phosphinothricin)分化培养基上能分化愈伤组织及芽;真叶具有抗PPT20mg·L-1浓度以上的能力。获得的TA29-Barnase转基因植株表现雄蕊退化、无花粉产生或产生少量形状畸形且无生活力的花粉。雄性不育植株自花授粉不能坐果,用非转基因保持系花粉授粉后,果实正常膨大结籽,杂交后代对除草剂Basta的抗性按1﹕1分离。不育植株与Cre转基因工程恢复系杂交后,果实也正常膨大结籽。对不育植株与Cre转基因工程恢复系杂交后代进行分子检测,结果发现同时含Bar基因和Cre基因F1植株中的TA29-Barnase雄性不育基因被精确删除。TA29-Barnase基因删除植株育性被恢复,能正常开花结果。【结论】利用Cre/lox重组系统建立的Cre工程恢复系成功将番茄F1代中的不育基因删除,恢复了F1的育性。该研究结果为植物基因工程雄性不育系的育性恢复提供了一条新的途径。 展开更多
关键词 Cre/lox重组系统 工程不育系 Cre工程恢复系 番茄
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LOX与HIF-1α在非小细胞肺癌中表达增强 被引量:5
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作者 赵鹏 郑贸根 +3 位作者 程光 王国臣 侯静朴 李作生 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第6期776-780,共5页
目的研究赖氨酰氧化酶(LOX)与低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达情况及其临床意义。方法收集临床NSCLC组织标本41例,用免疫组织化学染色法(IHC)检测NSCLC组织中LOX和HIF-1α蛋白表达;蛋白印迹法(Western blot)检测N... 目的研究赖氨酰氧化酶(LOX)与低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达情况及其临床意义。方法收集临床NSCLC组织标本41例,用免疫组织化学染色法(IHC)检测NSCLC组织中LOX和HIF-1α蛋白表达;蛋白印迹法(Western blot)检测NSCLC组织及相应的癌旁组织、正常肺组织中LOX与HIF-1α蛋白表达。结果IHC结果显示LOX蛋白表达主要在细胞质,HIF-1α蛋白表达主要在细胞核。LOX与HIF-1α在NSCLC组织中阳性表达率均明显高于正常肺组织(P<0.05);LOX蛋白的高表达与肿瘤的病理类型、分化程度、淋巴转移和临床分期之间存在显著相关(P<0.05);HIF-1α蛋白的高表达与肿瘤的病理类型、大小、淋巴转移和临床分期之间存在显著相关(P<0.05);LOX与HIF-1α蛋白在NSCLC组织中表达呈正相关性(P<0.05)。Western blot结果显示NSCLC组织中LOX与HIF-1α蛋白的表达显著高于相应的癌旁组织及正常肺组织(P<0.05)。结论 LOX与HIF-1α的异常表达可能与NSCLC发生、发展有关,并且LOX与HIF-1α的高表达可能协同促进了NSCLC的侵袭转移。 展开更多
关键词 lox HIF-1Α 非小细胞肺癌
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鲜食糯玉米己醛和己醇的生成与LOX活性及其基因表达的相关性 被引量:3
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作者 牛丽影 沈凌雁 +3 位作者 刘春菊 李大婧 刘春泉 肖丽霞 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期1138-1143,共6页
为探讨生鲜糯玉米汁主要挥发性成分己醛与己醇的生成与脂氧合酶(LOX)的关系,对4个籽粒发育期的鲜食糯玉米京甜紫花糯2号和苏玉糯11号生鲜玉米汁中己醛与己醇含量、脂氧合酶活性以及Zm LOX1、ZmLOX2、Zm LOX3、Zm LOX10基因的相对表达量... 为探讨生鲜糯玉米汁主要挥发性成分己醛与己醇的生成与脂氧合酶(LOX)的关系,对4个籽粒发育期的鲜食糯玉米京甜紫花糯2号和苏玉糯11号生鲜玉米汁中己醛与己醇含量、脂氧合酶活性以及Zm LOX1、ZmLOX2、Zm LOX3、Zm LOX10基因的相对表达量进行了测定和比较。结果显示己醛与己醇含量显著正相关(P<0. 05),4种LOX基因的表达量之间显著正相关(P<0. 05),但LOX活性与其他指标之间未表现出显著的相关关系。主成分分析(PCA)结果显示所有指标聚为3类:4种LOX基因表达量、己醛与己醇含量、LOX活性,三者之间未表现出显著的相关性关系。 展开更多
关键词 鲜食糯玉米 己醛 脂氧合酶(lox) 基因表达量
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Osterix通过上调LOX的表达促进人乳腺癌细胞的迁移和侵袭 被引量:3
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作者 吴佳慧 姚兵 +2 位作者 水一方 金玉翠 马长艳 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第6期665-668,680,共5页
目的:探讨Osterix(Osx)对乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移和侵袭能力的影响及其潜在机制。方法:采用荧光实时定量PCR(Real-time PCR)及Western blot技术检测Osx过表达及敲低稳转细胞(231-OE6、231-OEC、231-KD2、231-KDC)中赖氨酰氧化酶(lysyl... 目的:探讨Osterix(Osx)对乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移和侵袭能力的影响及其潜在机制。方法:采用荧光实时定量PCR(Real-time PCR)及Western blot技术检测Osx过表达及敲低稳转细胞(231-OE6、231-OEC、231-KD2、231-KDC)中赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)的表达水平;转染LOX si RNA及其对照至Osx过表达稳转细胞(231-OE6)中,Transwell检测细胞的迁移及侵袭能力;同时转染LOX过表达质粒及其对照至Osx敲低稳转细胞(231-KD2)中,Transwell检测细胞的迁移及侵袭能力。结果:与各自对照相比,LOX在231-OE6中表达显著升高,在231-KD2中表达显著降低(P<0.05);降低LOX的表达能够显著削弱231-OE6细胞的迁移和侵袭能力,增加LOX的表达能够显著提高231-KD2细胞的迁移和侵袭能力,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在乳腺癌细胞中Osx能够上调LOX的表达,且Osx通过上调LOX的表达而促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 OSX lox 乳腺癌 迁移 侵袭
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cre/lox P系统介导的基因重组研究进展 被引量:3
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作者 屈彦纯 邓昌彦 +1 位作者 刘建忠 刘桂兰 《生物技术通报》 CAS CSCD 2001年第5期8-12,共5页
由于具有时间、组织和位点特异性 ,cre重组酶介导的DNA重组已成为基因靶位操作的一个重要工具。概述了cre/loxP系统的作用特点 ,cre重组酶的结构和重组机制 ,表达载体构建及重组个体检测等方面的问题 ,重点介绍了cre/loxP系统在基因重... 由于具有时间、组织和位点特异性 ,cre重组酶介导的DNA重组已成为基因靶位操作的一个重要工具。概述了cre/loxP系统的作用特点 ,cre重组酶的结构和重组机制 ,表达载体构建及重组个体检测等方面的问题 ,重点介绍了cre/loxP系统在基因重组研究中的应用及近来的发展与成就。 展开更多
关键词 CRE/lox P系统 基因重组 基因靶位操作 介导
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桃蚜取食和机械损伤对番茄和辣椒PAL、LOX和PPO活性的诱导作用 被引量:8
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作者 吕敏 苏建坤 +1 位作者 白和盛 刘怀阿 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第6期1273-1279,共7页
为了明确昆虫取食诱导的受害寄主植物与邻近异种健康植物间的化学通讯作用,以番茄和辣椒2种寄主植物为对象,通过测定虫害及机械损伤处理植株及邻近对照异种健康植株的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、脂氧合酶(LOX)和多酚氧化酶(PPO)的活性,研究... 为了明确昆虫取食诱导的受害寄主植物与邻近异种健康植物间的化学通讯作用,以番茄和辣椒2种寄主植物为对象,通过测定虫害及机械损伤处理植株及邻近对照异种健康植株的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、脂氧合酶(LOX)和多酚氧化酶(PPO)的活性,研究了桃蚜取食和机械损伤诱导的2种寄主植物间与防御相关的化学通讯作用。结果表明,桃蚜取食和机械损伤不仅能诱导番茄和辣椒PAL活性增加,还能诱导邻近异种健康植株PAL活性增加;桃蚜取食和机械损伤能诱导受害植株的LOX和PPO的活性增加,但邻近异种健康植株的LOX和PPO活性没有变化。因此,PAL、LOX和PPO在桃蚜取食和机械损伤诱导的辣椒和番茄的防御反应中起作用,而PAL在桃蚜取食和机械损伤诱导的番茄-辣椒间的通讯中起作用。 展开更多
关键词 番茄 辣椒 苯丙氨酸解氨酶 脂氧合酶 多酚氧化酶
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