心肌梗死患者Lp-PLA2基因Y160X位点多态性检测的意义

目的:检测Lp-PLA2基因Y160X位点突变与心肌梗死(MI)的关系。方法:检测病例组和对照组LpPLA2基因多态性,Logistic回归分析Lp-PLA2多态性与MI的关系,以及病例组和对照组血脂、血糖、LpPLA2、超敏C反应蛋白(Hs CRP)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)水平,分析这些指标与MI及Lp-PLA2基因突变的关系。结果:病例组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDLC)、Lp-PLA2、Hs CRP、IL-6水平及家族史阳性率高于对照组,HDLC、IL-10水平低于对照组(P<0.05);发病1周、1个月时Lp-PLA2、Hs CRP、IL-6水平下降,IL-10水平上升(P<0.05)。Lp-PLA2基因型是MI的独立危险因素。结论:Lp-PLA2基因Y160X位点突变可能是MI的原因。

不同类型冠心病患者Lp-PLA2基因N133K位点多态性的意义

目的检测人脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)基因N133K位点多态性与不同类型冠心病之间的相关性及临床意义。方法以心绞痛患者426例为心绞痛组、心肌梗死患者415例为心梗组,以同期体检健康者400例为对照组。应用聚合酶链反应(PCR)分析技术结合DNA直接测序技术,对入选者Lp-PLA2基因N133K(C/G)位点多态性进行分型。采用多因素logistic回归分析Lp-PLA2基因N133K多态位点与不同类型冠心病的相关性。同时检测入组者血脂及Lp-PLA2水平等指标。结果总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、Lp-PLA2水平在3组间差异有统计学意义(均P<0.05),其中心梗组TC、TG、LDL-C、Lp-PLA2高于心绞痛组和对照组,HDL-C低于心绞痛组和对照组,心绞痛组TC、TG、LDL-C、Lp-PLA2高于对照组,HDL-C低于对照组(均P<0.05)。心梗组和心绞痛组1个月后复查时,Lp-PLA2水平均明显降低(均P<0.05)。心梗组GG、GC基因型以及G等位基因的分布频率明显高于心绞痛组和对照组,心绞痛组GG、GC基因型以及G等位基因的分布频率明显高于对照组(均P<0.05)。Logistic回归分析发现,Lp-PLA2基因N133K(C/G)多态位点GG基因型与冠心病的发生有显著的相关性(P<0.01)。结论Lp-PLA2基因N133K(C/G)多态位点基因突变可能与冠心病病情有关。

阿尔茨海默病伴睡眠障碍患者ApoE基因多态性及血清Lp-PLA2水平研究

目的探讨载脂蛋白E(ApoE)基因多态性及血清脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)与阿尔茨海默病(AD)患者睡眠障碍的关系。方法选取62例AD患者及26例健康对照组,分别检测ApoE基因多态性和Lp-PLA2、IL-6等血清学指标,同时使用简易精神状态检查表(MMSE)、匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)分别评定入组者认知及睡眠状况。结果 (1)伴睡眠障碍的AD患者(AD-1组)ApoEε3/4及ε2/4基因型明显高于健康对照组(P<0.05),ApoEε3/4基因型明显高于无睡眠障碍的AD患者(AD-2组)(P<0.05)。(2)AD-1组ApoEε4等位基因频率显著高于健康对照组(P<0.05);(3)在携带ApoEε4等位基因的AD患者中,血清Lp-PLA2、IL-6水平显著高于非携带ApoEε4等位基因患者(P<0.05)。结论 ApoE基因多态性及血清Lp-PLA2及IL-6水平与AD患者睡眠障碍有一定关系,推测ApoE基因多态性对睡眠障碍的影响可能与炎症反应相关。

广西眼镜王蛇毒杂合性酸性磷脂酶A_2的基因克隆与序列分析

目的 研究广西眼镜王蛇毒杂合性酸性磷脂酶A2 (APLA2 )的基因克隆与序列分析 .方法 从广西眼镜王蛇毒腺中提取总RNA ,根据种属关系接近的台湾眼镜蛇毒APLA2 两端非翻译区的保守序列设计引物 ,利用RT -PCR进行体外扩增 ,获得磷脂酶A2 基因 ,克隆至pMD18-T载体 ,经测序筛选出APLA2 - 1,APLA2 - 2及一个新的酸性磷脂酶A2 (命名为APLA2 - 3 ) .根据测序结果确定了APLA2 - 3基因的全序列 ,并由此推导编码的氨基酸序列 .结果 利用Antheprot4 3c蛋白质序列分析软件包计算它的等电点为 4 885 ,相对分子质量为 16 5 43kD ,并预测了它的二级结构和部分理化性质 .同源性比较表明 ,APLA2 - 3的 1～ 3 9位氨基酸残基序列与APLA2 - 2相同 ,其同源性为 64 % ,而 40～ 10 8位氨基酸残基序列与APLA2 - 1相同 ,其同源性为 69% ,10 9位氨基酸残基序列皆不同于这两种APLA2 .结论揭示了APLA2 具有基因多样性 ,可能与物种进化和生物活性有关 ,并为进一步研究PLA2

脂蛋白相关磷脂酶A2基因多态性与子痫前期和妊娠期高血压的相关性

目的探讨脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)基因多态性位点在子痫前期、妊高症人群的分布及其与子痫前期、妊高症的关系。方法292例住院待产的孕妇分为轻度子痫前期组(mPE组,n=68)、重度子痫前期组(sPE组,n=60)、妊娠期高血压组(HDCP组,n=32)及对照组(n=132),均于入院时测量血压、并收集24 h尿液进行24 h尿蛋白定量检测,采集外周血检测血清空腹血糖(FPG)、胰岛素(INS)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDLC)、低密度脂蛋白(LDLC)水平及血细胞Lp-PLA2水平;提取全血DNA检测Lp-PLA 2基因rs1051931、rs1421378、rs1805017位点的多态性,分析Lp-PLA 2基因型在各组间的分布差异。结果mPE组、sPE组、对照组孕妇入院时的收缩压及舒张压低于HDCP组(P<0.05),mPE组、sPE组、HDCP组孕妇TC、TG、LDLC高于对照组、HDLC低于对照组(P<0.05),mPE组、sPE组、HDLC组血细胞Lp-PLA2水平和24 h蛋白尿含量高于对照组(P<0.05),mPE组血细胞Lp-PLA2水平和24 h尿蛋白含量低于sPE组(P<0.05);Lp-PLA 2基因rs 1051931、rs 1421378、rs 1805017位点基因型AA、AG、GG频率分布在4组孕妇间比较差异无统计学意义(χ2=0.790、2.058、4.701,P=0.914、0.992、0.583),Lp-PLA 2基因rs 16874954位点基因型CC、AC在mPE组和对照组比较差异有统计学意义(χ^(2)=4.86,P=0.03),携带CC型基因孕妇发生妊娠期子痫和高血压疾病风险高于AC型(OR=2.139,95%CI为1.024~4.458),rs 1805017位点AG+AA基因型患者HDLC水平明显低于GG基因型患者,TG水平高于GG基因型患者(P<0.05);rs 16874954位点CC基因型患者TG、Lp-PLA2水平高于AC型患者(P<0.05);HDLC水平低于AC型,其余血脂水平在不同基因型孕妇间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Lp-PLA 2基因rs 16874954位点多态性位点与子痫前期、妊高症的发生有关。

血清Lp-PLA2在心房颤动并心力衰竭患者体内的表达及其临床价值

目的分析血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)在心房颤动(简称房颤)并心力衰竭(简称心衰)患者体内的表达及其临床价值。方法选取2017年1-12月在该院住院的房颤并心衰患者100例为研究对象,同时选择房颤无心衰、无房颤和心衰的住院患者各50例为对照。对所有患者的血清中氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)水平进行检测,并行超声心动图及心电图检查。结果 A组患者血清中Lp-PLA2、NT-proBNP水平最高,B组最低,3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。A组患者LVEF水平最低,B组最高,3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。房颤并心衰患者Lp-PLA2与NTproBNP呈正相关(P<0.05),与左心室射血分数(LVEF)呈负相关(P<0.05),Lp-PLA2水平越高,心脏功能越差。结论在房颤并心衰患者中Lp-PLA2水平可较好地反映心功能。

脂蛋白相关磷脂酶A2的原核表达及多克隆抗体的制备

目的构建人脂蛋白相关磷脂酶A2(Lipoprotein-associated phospholipase A2,LP-PLA2)基因重组原核表达质粒,表达重组蛋白,制备人LP-PLA2多克隆抗体。方法从分化的THP-1细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增LP-PLA2全长编码基因,插入原核表达载体pCold TF中,构建重组原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG低温(15℃)诱导表达,表达的重组蛋白经Ni-Sepharose 6FF亲和层析及DEAE-Sephadex离子交换层析后,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,采用间接ELISA法测定抗血清效价,Western blot法检测多抗的反应原性。结果重组表达质粒pCold TF-LP-PLA2经双酶切及测序证实构建正确;TF-LP-PLA2获得可溶性表达,相对分子质量约为93 000;纯化的重组蛋白纯度可达90%,可与市售兔抗人LP-PLA2抗体反应;制备的抗血清效价达1∶5.12×106以上,反应原性良好。结论已成功原核表达了重组LP-PLA2蛋白,并制备了高效价的多克隆抗体,为下一步制备单克隆抗体及建立LP-PLA2免疫检测方法奠定了基础。