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群体感应淬灭酶LsrK蛋白表达纯化
1
作者
杨国栋
李志超
+2 位作者
吴渊
王骏
赵晶
《轻工科技》
2019年第8期20-21,共2页
对群体感应淬灭酶LsrK蛋白进行重组表达及纯化。构建重组工程菌Escherichia coli BL21(DE3)-pET-28a-lsrK,利用乳糖自诱导的方法诱导表达重组蛋白LsrK,并利用亲和层析和凝胶过滤层析进行纯化。LsrK蛋白经凝胶过滤层析后,纯度较高,蛋白...
对群体感应淬灭酶LsrK蛋白进行重组表达及纯化。构建重组工程菌Escherichia coli BL21(DE3)-pET-28a-lsrK,利用乳糖自诱导的方法诱导表达重组蛋白LsrK,并利用亲和层析和凝胶过滤层析进行纯化。LsrK蛋白经凝胶过滤层析后,纯度较高,蛋白浓度达到28.6mg/L发酵液,为进一步进行LsrK蛋白的结构解析及功能研究奠定了基础。
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关键词
群体感应淬灭酶
lsrk
重组表达
蛋白纯化
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职称材料
LsrK激酶活力测定反应体系的优化及其稳定性研究
2
作者
杨国栋
李志超
+4 位作者
王骏
尹立雪
昂萨尔·江阿拜
张晓庆
赵晶
《轻工科技》
2019年第9期18-19,32,共3页
对群体感应淬灭酶LsrK的活力测定反应体系进行优化,测定LsrK的激酶活力和稳定性。以信号分子AI-2为底物,对反应体系中ATP浓度、发光波长和LsrK激酶浓度进行优化,利用Kinase-Glo发光试剂盒测定激酶活力,并在优化反应体系下测定LsrK激酶...
对群体感应淬灭酶LsrK的活力测定反应体系进行优化,测定LsrK的激酶活力和稳定性。以信号分子AI-2为底物,对反应体系中ATP浓度、发光波长和LsrK激酶浓度进行优化,利用Kinase-Glo发光试剂盒测定激酶活力,并在优化反应体系下测定LsrK激酶活力的稳定性。确定反应体系中ATP浓度为3μM,LsrK激酶浓度为15μM,发光波长为560nm;LsrK在30℃条件下,随时间延长,激酶活力逐渐降低,12h时酶活力基本完全消失。为进一步进行LsrK蛋白的功能研究及酶制剂的制备奠定了基础。
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关键词
群体感应淬灭酶
lsrk
激酶活力
稳定性
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职称材料
题名
群体感应淬灭酶LsrK蛋白表达纯化
1
作者
杨国栋
李志超
吴渊
王骏
赵晶
机构
大连民族大学生命科学学院/大连民族大学生物技术与资源利用教育部重点实验室
大连工业大学生物工程学院
出处
《轻工科技》
2019年第8期20-21,共2页
基金
大连民族大学2018年大学生创新创业训练计划项目(201812026013)
文摘
对群体感应淬灭酶LsrK蛋白进行重组表达及纯化。构建重组工程菌Escherichia coli BL21(DE3)-pET-28a-lsrK,利用乳糖自诱导的方法诱导表达重组蛋白LsrK,并利用亲和层析和凝胶过滤层析进行纯化。LsrK蛋白经凝胶过滤层析后,纯度较高,蛋白浓度达到28.6mg/L发酵液,为进一步进行LsrK蛋白的结构解析及功能研究奠定了基础。
关键词
群体感应淬灭酶
lsrk
重组表达
蛋白纯化
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
LsrK激酶活力测定反应体系的优化及其稳定性研究
2
作者
杨国栋
李志超
王骏
尹立雪
昂萨尔·江阿拜
张晓庆
赵晶
机构
大连民族大学生命科学学院
大连工业大学生物工程学院
出处
《轻工科技》
2019年第9期18-19,32,共3页
基金
大连民族大学2018年大学生创新创业训练计划项目(201812026013)
文摘
对群体感应淬灭酶LsrK的活力测定反应体系进行优化,测定LsrK的激酶活力和稳定性。以信号分子AI-2为底物,对反应体系中ATP浓度、发光波长和LsrK激酶浓度进行优化,利用Kinase-Glo发光试剂盒测定激酶活力,并在优化反应体系下测定LsrK激酶活力的稳定性。确定反应体系中ATP浓度为3μM,LsrK激酶浓度为15μM,发光波长为560nm;LsrK在30℃条件下,随时间延长,激酶活力逐渐降低,12h时酶活力基本完全消失。为进一步进行LsrK蛋白的功能研究及酶制剂的制备奠定了基础。
关键词
群体感应淬灭酶
lsrk
激酶活力
稳定性
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
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1
群体感应淬灭酶LsrK蛋白表达纯化
杨国栋
李志超
吴渊
王骏
赵晶
《轻工科技》
2019
0
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职称材料
2
LsrK激酶活力测定反应体系的优化及其稳定性研究
杨国栋
李志超
王骏
尹立雪
昂萨尔·江阿拜
张晓庆
赵晶
《轻工科技》
2019
0
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职称材料
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