应用丝瓜(Luffa Cylindrica Roem)伤流液提高水稻花药培养效果

用15—20%(V/V)丝瓜伤流液加入培养基可以显著提高水稻花药培养力和花粉植株自然加倍的频率。诱导培养基中附加15—20%(V/V)丝瓜伤流液,形成愈伤组织百分率显著高于对照;粳稻的愈伤组织分化率高达95%,籼稻愈伤组织分化率可达70%,比对照提高1倍左右。花粉植株自然加倍的频率显著(p>0.01)高于对照。附加10%、15%、20%、25%(V/V)丝瓜伤流液诱导成的愈伤组织经继代培养后的重量除了25%(V/V)浓度外,其余都比对照增重5.7—18.09毫克/10块。绿苗的鲜重和干重分别增重20—89.0毫克/10株,13.0—30.0毫克/10株,在10—20(V/V)浓度的丝瓜伤流液范围内,对植物细胞分裂和生长有促进作用。其中以15—20%(V/V)浓度的丝瓜伤流液效果最好,经紫外光谱初步测定表明,丝瓜伤流液含有类似细胞激动素以及培养基中有机生长物质。

Analysis of Genetic Differences between Luffa acutangula(L.) Roxb. and Luffa cylindrica(L.)Roem. by ISSR Markers

The genetic differences among Luffa acutangula （L.） Roxb., Luffa cylindnca （L.） Roem. and their F1 hybrid and F2 population were analyzed by ISSR technolo- gy. The results showed that the genomic DNA of test materials showed a high diversity; the genetic similarity coefficient between both parents was only 0.395; the bands of F1 hybrid mainly consisted of both parents＇; neither FI nor F2 was inherit- ed singly from male or female parent; there was greater genetic variation among F2 population.

Lucyoside Q,a Triterpenoid Saponin from Leaves of Luffa cylindrica(L.)M.Roem.

A new pentacyclic triterpenoid saponin, named lucyoside Q, was isolated from the leaves of Luffa cylindrica. Its structure was established as 21 β hydroxyloleanolic acid 28 O β D glucopyranoside by means of the spectral evidence and chemical methods.

基于转录组和WGCNA筛选丝瓜果长和果径发育调控相关基因

【目的】鉴定丝瓜果长和果径发育基因共表达模块并筛选关键调控基因,为后续丝瓜果形控制的分子机制研究提供理论依据。【方法】以丝瓜9个发育阶段(开花前2 d以及花后0、2、4、6、8、10、15和20 d)果实为研究材料,测定各阶段的果长和果径,利用WGCNA方法联合分析转录组与果长和果径数据,鉴定与果长和果径发育相关的共表达基因模块,筛选关键调控基因。【结果】利用WGCNA鉴定出14个共表达模块,与果长和果径显著相关(相关系数的绝对值=0.9)的共表达模块有2个,显著正相关的模块为Turquoise模块,显著负相关的模块为Lightpink4模块。KEGG富集分析发现,Turquoise模块显著富集在内吞作用和苯丙烷生物合成通路,与果实膨大、伸长调控密切相关,可作为研究丝瓜果长和果径的关键基因模块。根据Turquoise模块内基因的连接度以及功能注释,筛选出10个关键调控基因,包括木葡聚糖内转葡糖基酶/水解酶基因XTH23、肌动蛋白解聚因子基因ADF2、伴侣蛋白基因DnaJ10、扩展蛋白基因(EXPA1、EXPA4和EXLA5)、驱动蛋白基因Kinesin-13A、生长素反应基因SAUR21和Aux/IAA11。RT-qPCR结果显示,10个调控基因的表达量均在果实进入快速生长期(花后8 d)后显著升高,增加倍数约为2—50倍。通过构建基因互作网络,发现部分调控基因与WRKY、bHLH和HSF转录因子家族存在互作关系。【结论】获得了丝瓜果长和果径基因共表达重要模块Turquoise模块,筛选到10个调控基因可作为丝瓜果形控制的潜在候选基因,并发现丝瓜果长和果径的发育调控主要涉及细胞壁的重构、细胞的发育与分化、生长素的调控等过程。

丝瓜根化学成分研究(Ⅰ)

目的 研究丝瓜根的化学成分。方法 丝瓜根的水煮液经大孔树脂柱层析 ,6 0 %乙醇洗脱得到粗提物 ,用硅胶柱层析 ,以氯仿 ;氯仿 -丙酮 ;氯仿 -甲醇不同比例洗脱 ,分别得到 11种成分。结果 经理化、TL C、光谱分析及标准品比较 ,确定为三萜皂苷 ,其中鉴定了 4种成分的结构 ,它们分别是 :齐墩果酸 (L- cy- 1) ;2 1β-羟基齐墩果酸 (L-cy- 2 ) ;3- O- β- D-葡萄吡喃糖 - 2 1β-羟基常春藤皂苷 (L- cy- 3) ;2 α-羟基常春藤皂苷元 - 3- O- β- D-葡萄吡喃糖苷 (L- cy-6 )。结论 以上 4个化合物均为首次从该植物根中分得。

丝瓜叶化学成分的研究

从丝瓜（ＬｕｆｆａｃｙｌｉｎｄｒｉｃａＲｏｅｍ．）叶中分得一种新的五环三萜皂甙和芹菜素，用光谱和化学方法确定该皂甙的结构为２１β－羟基齐墩果酸－２８－Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖贰，命名为丝瓜皂甙Ｑ．

普通丝瓜叶片成分和物理结构对黄足黑守瓜取食和定位的影响

黄足黑守瓜是普通丝瓜生长过程中危害叶片的主要害虫。本文对普通丝瓜不同部位叶片挥发性成分、营养成分和物理结构对黄足黑守瓜取食和定位的影响进行了系统研究。本实验采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法分析了普通丝瓜不同部位叶片挥发性成分,研究结果表明,嫩叶主要挥发性成分有(Z)-3-己烯-1-醇(27.65%)和植醇(45.77%),成熟叶挥发性成分主要有(Z)-3-己烯-1-醇(49.34%),老叶挥发性成分主要有植醇(63.25%),且挥发性成分对黄足黑守瓜远距离定位起到了引导作用。同时,本研究还采用5点取样法、3,5-二硝基水杨酸法和考马斯亮蓝法分别研究了普通丝瓜不同部位叶片营养成分含量与黄足黑守瓜取食之间的关系,实验结果表明,黄足黑守瓜喜食植物叶片嫩叶部位,喜食部位叶片的总糖与还原糖含量、蛋白质含量都最高,且总糖含量与蛋白质含量比值最高。叶片物理结构调查采用石蜡切片法,发现叶片的物理结构对于黄足黑守瓜取食很少造成影响。通过研究,使我们充分地了解影响黄足黑守瓜取食不同部位叶片的因素,便于今后的育种和栽培过程中加强不利于黄足黑守瓜取食的因素,以达到安全、环保地进行农业生产的目的。

丝瓜种质资源亲缘关系的ISSR分析

利用ISSR标记,对来源于不同地区的丝瓜种质资源的亲缘关系进行了分析。从80个ISSR引物中筛选出多态性强、重复性好的9个引物,对43份丝瓜种质基因组DNA进行扩增,共扩增出60条谱带,平均每个引物扩增出6.67条带,其中多态性带47个,多态性位点百分率为78.3%。丝瓜种质间遗传相似系数变化范围在0.37~0.98之间,暗示了丝瓜栽培种内的遗传基础相对狭窄。利用UPGMA聚类分析,43份丝瓜种质被划分为6个类群,类群的划分与形态学性状较吻合,而且与地理来源也有较高的相关性。

丝瓜过氧化物酶的特性和抑制作用研究

研究丝瓜过氧化物酶最适温度、最适pH值、Km、Vmax及最适底物,同时通过正交试验探讨不同抑制剂组合对丝瓜过氧化物酶的抑制作用。结果表明,丝瓜过氧化物酶最适温度为45℃,最适pH值为5.0,以邻苯三酚为最适底物,Km=0.001516mol/L,Vmax=440.7U(/min.g)。正交试验结果表明,最佳抑制剂组合为6mmol/L柠檬酸+6mmol/L EDTA+6mmol/L半胱氨酸+6mmol/L VC。在此条件下抑制率为58.89%。

嫁接对苦瓜品质的影响

采用劈接法,以3个不同品种丝瓜作为砧木对蓝山苦瓜进行嫁接处理,以蓝山苦瓜实生植株作为对照,研究不同品种丝瓜砧木嫁接对蓝山苦瓜商品瓜内外品质的影响。结果表明,嫁接处理提高了蓝山苦瓜商品瓜的维生素C含量,分别比对照提高了25.2%～115.5%;但降低了可溶性糖和皂苷的含量,增加了蓝山苦瓜苦味,提高了外观品质,尤其是单瓜重和果实直径显著增加,同时显著降低了畸形瓜比例;而对蓝山苦瓜商品瓜的蛋白质含量和水分含量及果实长度没有显著的影响。其中以营口肉丝瓜做砧木嫁接的蓝山苦瓜植株表现最佳,说明通过不同的砧木嫁接能够改变苦瓜的果实内外品质,可以为生产上苦瓜嫁接砧木的选育提供参考。

不同影响因素下普通丝瓜果肉褐变度、多酚氧化酶活性及多酚质量比变化研究

以普通丝瓜为试材,探讨了果实发育程度、不同品种、生长季节对丝瓜果肉褐变度、多酚氧化酶活性及多酚质量比的影响.结果表明:开花当天果肉的褐变度、多酚氧化酶活性及多酚质量比最高,此后逐渐降低,花后9d果肉的褐变度相对较低,可以作为采摘的最佳时期;不同品种丝瓜的褐变度和多酚质量比差异具有统计学意义,其中白皮丝瓜的褐变度和多酚质量比相对较低;秋季丝瓜果肉的褐变度、多酚氧化酶活性及多酚质量比显著高于夏季.

不同光周期对丝瓜幼苗生长生理及其内源激素含量和性别分化的影响

以该课题组自主选育的普通丝瓜(BG-1-1-3-1)为材料,采用人工遮光的方式,研究不同光周期[6、8、10和14 h/d(自然光周期,CK)]处理对丝瓜幼苗生长生理及其内源激素含量和性别分化的影响,为丝瓜设施栽培中的光照管理提供理论基础。结果表明:(1)随着光周期的缩短,丝瓜幼苗生物量的积累呈显著减少的趋势;幼苗叶片叶绿素含量,SOD、POD和CAT活性,以及可溶性糖、可溶性蛋白和游离氨基酸含量均呈先升高后降低的趋势,并均以光周期为10 h/d时最高。(2)丝瓜幼苗叶片GA3、IAA和ZT含量在光周期为8和10 h/d时较低,而在光周期为6和14 h/d时较高,但ABA含量变化趋势却相反。(3)当光周期为10 h/d时,丝瓜的第一雌花节位、第一雄花节位均最低,雌花总数和果实产量最高。研究发现,适当的短日处理可以促进丝瓜雌花的分化和果实产量提高,并以光周期10 h/d处理的效果最佳。

丝瓜叶成分对脑缺血大鼠学习记忆障碍及皮层体感诱发电位的影响

目的：研究丝瓜叶成分Ｌ６ａ 和Ｌ１０ 对脑缺血大鼠学习记忆障碍及皮层体感诱发电位（ＳＥＰ） 的影响。方法：用脑缺血大鼠模型，侧脑室注射（ｉｃｖ）给药，以穿梭箱主动回避反应（ＡＡＲ） 测定学习记忆行为；用ＳＹＤ４２２８ 型生理实验系统测定皮层体感诱发电位。结果：Ｌ６ａ ０－５ ｍｇ·ｋｇ－ １ 显著促进脑缺血大鼠ＡＡＲ的获得；０－２５ ｍｇ·ｋｇ－ １ 时，无明显影响；Ｌ６ａ ０－５ 及０－２５ ｍｇ·ｋｇ－１ 均显著延缓ＡＡＲ的消退；脑缺血后，Ｌ６ａ（０－５ ｍｇ·ｋｇ－ １） 也减缓ＳＥＰ波幅下降及其潜伏期延长；脑缺血再通后，Ｌ６ａ 和Ｌ１０（０－５ ｍｇ·ｋｇ－ １）均加大ＳＥＰ振幅增高，缩短其潜伏期。结论：Ｌ６ａ

普通丝瓜果肉褐变的变异及低褐变品种的筛选

普通丝瓜果肉在烹饪等加工过程中容易发生褐变,降低了丝瓜的营养价值和食用价值。试验通过对普通丝瓜品种资源果肉的褐变度进行测定,研究普通丝瓜品种果肉褐变度的变异,筛选出低褐变度的普通丝瓜品种材料,并对福建省种植的普通丝瓜品种进行评价和筛选。结果表明,普通丝瓜品种褐变度（OD值）测定结果在0.115-0.647之间,变异系数为36.1%,变异范围广,表明普通丝瓜果肉褐变度遗传改良具有很大的潜力;筛选出低褐变度的普通丝瓜品种材料26份;福建省栽培的8个普通丝瓜品种的褐变度差异较大,其中‘农福丝瓜801’和‘金美2号’2个品种褐变度低,品质较好,可以大面积栽培。

普通丝瓜始雌花节位遗传分析

选用始雌花节位有差异的普通丝瓜品种配制‘五叶香丝瓜’ב短圆筒丝瓜’(L1×L2)和‘短圆筒丝瓜’ב蛇形丝瓜’(L2×L3)2套组合,通过调查P1、P2、F1、B1、B2和F2植株的始雌花节位,利用主基因+多基因混合遗传模型联合分离分析了始雌花节位遗传规律。结果显示:L1×L2始雌花节位遗传符合2对加性-显性-上位性主基因+加性-显性多基因遗传模型,L2×L3的遗传符合1对加性主基因+加性-显性多基因遗传模型;L1×L2组合的B1、B2和F2群体遗传率(主基因+多基因)分别为66.13%、51.29%和68.27%,L2×L3组合的B1、B2和F2群体遗传率(主基因+多基因)分别为82.02%、64.87%和65.62%;L1×L2组合B1、B2和F2群体的环境方差占总表型方差的比例分别是23.43%、48.69%和31.73%,L2×L3组合B1、B2和F2群体的环境方差占总表型方差的比例分别是34.27%、55.40%和34.38%。结果表明:普通丝瓜始雌花节位是由主基因和多基因控制的数量性状,早熟性(较低的始雌花节位)不太可能通过杂种优势来实现;始雌花节位遗传不稳定,易受环境因素的影响,但定向选择会有较好的效果。

普通丝瓜果肉褐变性状的数量遗传分析

本研究采用植物数量性状主基因＋多基因混合遗传模型多世代联合分析方法，对耐褐变丝瓜（ P1）与易褐变丝瓜（ P2）构建的P1、P2、F1、B1、B2和F26个群体果肉褐变特性进行分析。结果显示，普通丝瓜果肉耐褐变遗传符合2对加性-显性-上位性主基因＋加性-显性-上位性多基因混合遗传模型（E 0）。其中B1、B2和F2的主基因遗传率分别为50.00%、50.00%和62.27%，多基因遗传率分别为40.07%、42.04%和31.63%，环境方差占总表型方差的6.10%~9.93%。

重金属镉对丝瓜种子萌发及根系活力的影响

采用水培法,研究了不同浓度的Cd2+对丝瓜种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数变化及根系活力的影响。结果表明:当Cd2+浓度为10mg/L时,发芽率和活力指数均高于对照;当Cd2+浓度为5mg/L时,根系活力高于对照;之后随着Cd2+溶液浓度的升高,发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、根系活力均显著降低,抑制效应逐渐增强;说明低浓度的Cd2+对丝瓜种子萌发具有促进作用,高浓度的Cd2+则具有抑制作用。

丝瓜种子破除休眠的研究

迄今，尚未见破除丝瓜种子休眠的报道。本论文采用30％双氧水浸种、0．1M硝酸浸种、超声波振荡和种子单侧缘破皮处理3个丝瓜品系种子，探讨破除种子休眠的方法。结果表明，种子单侧缘破皮处理效果最佳，种子发芽率分别从7.8％～30．7％提高到88．2％-100％。其余3种处理破除休眠均有效果，但三者间无显著差异。

丝瓜ISSR-PCR反应体系的建立

以丝瓜为试材,研究了ISSR-PCR反应体系的主要成分及退火温度、循环次数对丝瓜ISSR扩增结果的影响。结果表明:在20μl的反应体系中,Mg2+的用量为2 mmol/L,dNTPs浓度为0.2 mmol/L,引物的浓度为0.6μmol/L,TaqDNA聚合酶的用量为1 U,模板DNA的用量为30 ng,在适当的退火温度下,35个循环能得到清晰、多态性高的ISSR带谱。

丝瓜根化学成分研究(Ⅱ)

目的研究丝瓜根的化学成分。方法丝瓜根水煮液经大孔树脂柱层析,60%乙醇洗脱得粗提物,用硅胶柱层析,以氯仿、氯仿-丙酮、氯仿-甲醇不同比例洗脱,分别得到11种成分。结果TLC、光谱分析及标准品比较,确定为五环三萜皂苷。前文已报道化合物L-cy-1、L-cy-2、L-cy-3、L-cy-6的结构鉴定。本文报道化合物L-cy-7、L-cy-8的结构鉴定。结论L-cy-7z和L-cy-8化合物均首次从该植物根中分得。