基于NELL2 Lumicrine信号通路探索引阳索胶囊对肾阳虚型精子损伤的保护作用及机制

目的研究引阳索胶囊对腺嘌呤诱导的肾阳虚大鼠精子损伤的保护作用,并从睾丸神经表皮样生长因子2(neural EGFL like 2,NELL2)Lumicrine信号通路探索其作用机制。方法雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、引阳索(432 mg/kg)组和左卡尼汀(100 mg/kg)组,每组10只。连续ig腺嘌呤(200 mg/kg)14 d建立大鼠肾阳虚模型,并通过观察大鼠肾阳虚证候表现、眼眶取血检测血清中睾酮水平判断造模是否成功;造模同时给予药物干预49 d后取材,计算睾丸、附睾脏脑系数;计算机辅助精子分析(computer assisted sperm analysis,CASA)检测附睾精子动力学参数;光镜下进行精子计数、精子畸形率检测;精子荧光检测精子活率;苏木素-伊红(HE)染色观察睾丸、附睾组织病理变化;ELISA法检测血清中睾酮水平;免疫荧光法观察睾丸NELL2分泌及附睾c-ros癌基因1(ROS proto-oncogene 1,ROS1)表达;Western blotting检测附睾蛋白酶卵磷脂酶2(ovochymase 2,OVCH2)和精子去整合素金属蛋白酶3(a disintegrin and metalloproteinase 3,ADAM3)表达。结果与模型组比较,引阳索胶囊可改善肾阳虚大鼠毛发粗糙脱落、精神不振、蜷缩拱背、尿量增多、体质量降低等肾阳虚证候表现,升高睾丸、附睾脏脑系数(P<0.01);显著提高精子数量、精子活率、各精子动力学参数(P<0.05、0.01、0.001),降低精子畸形率,降低曲细精管病变率(P<0.001),升高14、49 d血清中睾酮水平(P<0.01、0.001);显著升高睾丸NELL2及附睾ROS1、OVCH2、ADAM3蛋白表达水平(P<0.05、0.01、0.001)。结论引阳索胶囊对腺嘌呤诱导的肾阳虚大鼠精子损伤具有保护作用,其机制可能与其调节NELL2 Lumicrine信号通路参与精子发生成熟过程有关。