基于Luminex技术对比分析激活后的脐血和成人富血小板血浆研究

目的 应用Luminex技术探讨脐血与成人富血小板血浆激活后释放的活性成分差异,探究反映其炎症调节能力的合理指标以指导制备。方法 选择健康成人63份(31男∶32女)外周血与61份脐血(30男∶31女)制备PRP,基于Luminex技术比较PRP激活后的20种活性因子的差异,对比超敏C反应蛋白(hs-CRP)、降钙素原(PCT)、金属蛋白酶(MMPs)/抑制剂(TIMPs)比值与10种炎症调节因子间的相关性。结果 脐血PRP诸因子、蛋白酶无性别差异,有10种利于组织修复的活性成分高于成人,10种细胞因子/蛋白酶低于成人;成人PRP除IGF-1和HGF无性别差异外,多数成分女多于男(P<0.05),MMPs/TIMPs与炎症相关的诸因子间密切关联,可反映PRP的炎症调节能力。结论 脐血不受年龄/性别影响,低免疫活性使脐血PRP释出多种以MMPs/TIMPs为靶点的活性因子,构成完善的降低MMPs/TIMPs配比的炎症调节网络。

禽脑脊髓炎病毒Luminex xTAG检测方法的建立

为了建立一种灵敏快速检测禽脑脊髓炎病毒(AEV)的Luminex xTAG技术方法,本试验针对AEV高度保守的VP 1基因设计了1对特异性引物,在上游引物的5′端通过Spacer18间隔添加Tag序列,下游引物的5′端标记生物素,进行反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增,构建质粒标准品,通过优化反应体系建立Luminex xTAG检测方法。用所建立的Luminex xTAG方法进行特异性、敏感性和重复性试验,并与SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR方法同时对45份脑组织临床样品进行检测。结果显示,所建立AEV Luminex xTAG检测方法与传染性法氏囊病毒、禽传染性贫血病病毒、新城疫病毒、禽流感病毒、传染性喉气管炎病毒、禽白血病病毒、马立克病毒和禽传染性支气管炎病毒无交叉反应;灵敏度可达1×10^(2)copies/μL;批内和批间重复性试验的变异系数均小于4.0%;对45份临床样品的Luminex xTAG检测结果与SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR检测结果一致。结果表明,所建立的AEV Luminex xTAG检测方法特异性好、灵敏度高、重复性和稳定性好,可用于AEV的快速检测。

粪便蛋白Luminex液相芯片检测系统构建及其对结直肠肿瘤早期诊断的价值

目的基于Luminex液相芯片检测系统构建粪便人源性蛋白诊断体系,并评估其对结直肠肿瘤的早期诊断价值。方法收集2021年1月~2023年1月蚌埠医学院第一附属医院收治的结直肠癌(CRC)患者70例为CRC组、结直肠腺瘤(CRA)患者42例为CRA组,以及同期健康对照(HC)受试者38例为HC组。收集各组受试者粪便,使用Tris-Hcl缓冲液提取粪便总蛋白,通过Luminex液相芯片检测技术分析3组受试者粪便中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、人源性视黄醇结合蛋白4(RBP4)、甲壳素酶-3样蛋白1(CHI3L1)和补体成分3a(C3a)的水平差异;收集受试者外周血,分离血清检测癌胚抗原(CEA)和糖类抗原19-9(CA19-9)的水平;使用受试者工作曲线(ROC)分析MMP-9、RBP4、CHI3L1和C3a联合以及CEA和CA19-9联合对CRC、CRA、CRC和CRA的诊断效能,并比较两种组合诊断效能的差异。结果CRC组患者粪便中MMP-9、RBP4、CHI3L1和C3a水平均显著高于HC组(P<0.05),CRC组粪便中MMP-9和CHI3L1水平显著高于CRA组(P<0.05),但是RBP4和C3a在CRC和CRA组间并无显著性差异(P>0.05);另外,CRC患者外周血中CEA和CA19-9水平均显著高于HC组和CRA组(P<0.05),但是CRA组和HC组之间无显著性差异(P>0.05)。ROC曲线分析显示,MMP-9、RBP4、CHI3L1和C3a联合诊断CRC的灵敏度为91.4%,特异度为100.0%,联合诊断CRA的灵敏度为81.0%,特异度为89.5%,联合诊断CRC和CRA的灵敏度为83.9%,特异度为97.4%。Z检验比较分析显示,粪便蛋白MMP-9、RBP4、CHI3L1和C3a联合诊断CRC,CRA以及CRA和CRC的效能显著优于外周血肿瘤标志物CEA和CA19-9(P<0.05)。结论Luminex液相芯片检测粪便人源性蛋白RBP4、MMP-9、CHI3L1、C3a对结直肠肿瘤早期诊断具有价值且优于外周血肿瘤标志物CEA和CA19-9,具有较高的临床应用推广意义。

Luminex液相芯片的发展及应用

液相芯片技术是20世纪90年代兴起的,集合流式细胞技术、激光技术、数字信号处理技术及传统化学技术为一体的新型生物分子检测技术。它的最大特点是通量大、灵活性好。Luminex公司利用液相芯片技术先后推出了Luminex 100、Luminex 200和Flexmap 3D液相芯片检测平台。现对Luminex液相芯片的发展、原理及应用作一简介。

Luminex液相芯片同时检测tPSA和fPSA方法的建立与评价

目的建立用Luminex液相芯片技术同时测定前列腺特异性抗原（total prostate specific antigen,tPSA）和游离前列腺特异性抗原（free prostate specific antigen,fPSA）的方法,并对该方法进行评价。方法制备抗体交联微球及藻红蛋白标记二抗,用双抗体夹心法对临床血清标本进行测定,并与ELISA方法进行比较。结果Luminex液相芯片技术同时测定tPSA、fPSA与ELISA测定结果高度相关。Luninex方法测定tPSA的灵敏度为0.03 ng/L,批内精密度为4.38%~5.86%,批间精密度为3.40%~6.73%;测定fPSA的灵敏度为0.013 ng/L,批内精密度为5.08%~7.94%,批间精密度为3.77%~5.74%。结论Luminex方法同时测定tPSA、fPSA具有灵敏度高、重复性好、系统误差小等优点,具有广泛的临床应用前景。

Luminex液态芯片技术在克罗恩病诊断与病情监测中的应用

目的探讨Luminex液态芯片技术检测血清中细胞因子的表达在克罗恩病患者中的临床意义。方法选取不同严重程度克罗恩病(CD)患者76例作为研究对象,选取同期健康人群50例作为对照组。按照MILLIPLEX MAP Kit试剂盒的要求,利用Luminex技术检测血清中细胞因子白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)以及白细胞介素17A(IL-17A)的表达水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中抗酿酒酵母抗体(ASCA),分析CD组与健康对照组之间的差异。结果细胞因子表达水平除IL-17A外,CD组IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);活动期CD患者血清IFN-γ、TNF-α、IL-6水平明显高于缓解期和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);中、重度活动期CD患者血清TNF-α、IL-6水平高于轻度活动期CD患者,差异有统计学意义(P<0.05);血清ASCA水平在CD组与健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),ASCA阳性患者TNF-α、IL-6水平显著高于ASCA阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TNF-α、IL-6在CD患者的炎症发生和病情发展中起着重要作用,测定血清TNF-α、IL-6的水平可反映克罗恩病的病情程度。细胞因子水平动态变化与CD病情进展相关,对CD疾病检测和病情监测具有重要意义。

如何应用Luminex技术做好抗HLA抗体的临床检测

抗人类白细胞抗原(HLA)抗体检测作为医学实验室服务临床的重要检测项目,可帮助临床医生做出正确决策、协助临床治疗。但应用Luminex技术检测抗HLA抗体受检测试剂、检测方法的局限性以及检测对象的疾病状态和治疗的干扰,给临床判断造成困扰。实验室如何规范地检测抗HLA抗体,保证批内、批间结果准确,是每一位技术人员长期摸索和学习的过程。该文根据美国组织相容性与免疫遗传学协会(ASHI)关于抗体检测的要求,结合该院十余年对抗HLA抗体检测的认识,提出用Luminex技术检测抗HLA抗体的规范化操作和结果解读的建议,供国内实验室参考。

Luminex RVP与qPCR的对比及Luminex平台PCR产物污染的处理

目的:与qPCR对比,评估Luminex RVP试剂盒的检测效能。探讨Luminex平台的PCR产物污染的处理。方法:使用RVP检测了100例咽拭子,并对三种病毒用qPCR检测其中20例标本。采用实验排查了Luminex平台的PCR产物污染源,并针对会出现污染的各环节制定了预防措施。结果:RVP与qPCR结果一致。该研究的Luminex PCR产物污染是由于PCR扩增部分的一个组份被污染,换成新试剂后得以解决。结论:RVP和qPCR结果一致。总结了PCR产物污染的防治策略,再次出现污染时可采用上述方法进行排查。

Luminex液相芯片技术测定人早孕滋养层细胞及蜕膜细胞中基质金属蛋白酶的表达

目的研究人正常早孕滋养层细胞与蜕膜细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)的表达特点,探讨子宫内膜蜕膜化进程中MMPs的变化及对胚胎着床的影响。方法收集正常妇女分泌期子宫内膜及人正常早孕绒毛和相应蜕膜标本各5例,分别进行离体培养,鉴定其纯度在98%以上后,收集培养上清液,利用Luminex(LumAvidinBeads)测定培养上清液中MMPs(MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-8、MMP-9、MMP-12、MMP-13)蛋白表达的变化,分析MMPs在不同培养条件下的表达差异及表达之间的相关性。结果①在不同培养条件下,MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-8、MMP-9均有表达,MMP-12及MMP-13分别在ESC及DSC中无表达,且MMP-8、MMP-12、MMP-13表达均低。②与子宫内膜细胞相比,MMP-1、MMP-3、MMP-7在DSC,EVCT中表达均降低,降低有显著性差异(P<0.05),而MMP-2、MMP-8、MMP-9在DSC,EVCT中则显著升高,升高有显著性差异(P<0.05)。且在蜕膜细胞中,MMP-1、MMP-3、MMP-2、MMP-7高表达尤为显著。③与蜕膜细胞相比,MMP-1、MMP-3、MMP-7在EVCT中表达显著降低(P<0.05)。MMP-2、MMP-9、MMP-13在EVCT中升高有显著性(P<0.05)。且在滋养层细胞中,MMP-2、-9高表达尤为显著。④MMPs之间的相关性:MMP-2与MMP-9相关关系显著(P<0.05),且关系较密切(r=0.6645)。MMP-1,MMP-3,MMP-7两两间相关关系显著(P<0.05),且关系密切(r>0.7340)。其他MMP之间相关关系不显著。结论首次利用LuminexxMAP方法多通量的检测到子宫内膜间质细胞、早孕蜕膜细胞与滋养层细胞的多种MMPs的表达,它们均可分泌多种MMP,但是不同种类组织细胞的表达量不同;MMPs可能通过调控子宫内膜蜕膜化及母胎界面间MMPs的变化而影响胚胎着床,为成功妊娠创造条件。

抗cH5/3抗体Luminex检测系统的构建及其在HA杆部抗体应答研究中的初步应用

目的构建抗嵌合血凝素cH5/3抗体Luminex检测系统,并初步应用于流感病毒诱导HA杆部抗体研究中对低水平抗HA杆部抗体的检测。方法根据GeneBank中A/VietNam/1203/04(H5N1)流感病毒H5头部和A/Perth/16/2009(H3N2)病毒H3杆部基因序列,人工合成嵌合血凝素cH5/3基因;构建重组Bacmid-cH5/3质粒;重组质粒在sf9细胞中包装成重组cH5/3杆状病毒,并进行PCR及测序鉴定。利用杆状病毒表达系统表达cH5/3蛋白,将纯化蛋白与活化后的微球偶联,构建抗cH5/3抗体Luminex检测系统。分离流感疫苗接种前后健康人外周血B细胞,灭活H7N9病毒刺激6d后,Luminex检测系统分析血清和经H7N9刺激的B细胞培养上清中的抗cH5/3抗体。结果PCR扩增出大小约1700 bp的目的条带,测序鉴定结果证明目的基因序列完全正确。纯化蛋白经Western blot鉴定特异性好;偶联验证实验证实cH5/3蛋白与磁珠偶联成功。Luminx检测系统检测到所有志愿者外周血及灭活H7N9病毒刺激的B细胞培养上清液中均存在抗cH5/3抗体。疫苗接种后的B细胞经灭活H7N9刺激后培养上清中的抗cH5/3抗体水平较疫苗接种前增高4.24(0.8,26.8)倍。结论成功构建抗cH5/3抗体Luminex检测系统,该检测系统检测到H7N9病毒可刺激记忆B细胞产生抗H3杆部抗体,为广谱流感疫苗的研究提供了实验依据。

Luminex 3D平台在骨髓库供者HLA分型中的应用探讨

目的探讨3D平台在中国造血干细胞捐献者资料库(简称中华骨髓库)入库分型中的应用。方法基于3D仪器平台,使用试剂A对2014年中华骨髓库四川分库1 757份标本进行分型检测,使用Fusion3.4软件进行结果分析,依据中华骨髓库的入库标准指定结果,统计高分辨数据比例、中分辨模棱两可数据类型,并与四川分库2013年986份试剂B的分型结果和PCR-SBT方法的分型结果进行比较。结果 1 757例标本经试剂A分型后有3例为新等位基因,其余1 754例标本显示A、B、DR位点的高分数据百分比分别是98.5%(n=1 728)、96.5%(n=1 695)、99.2%(n=1 741),总的高分辨数据百分比95.1%(n=1 668),模棱两可结果 A、B、DR位点分别有5种、18种、8种;986例经试剂B分型显示A、B、DR位点的高分数据百分比分别是99.1%(n=977)、74.9%(n=739)、99.0%(n=976),总的高分辨数据百分比73.5%(n=725),模棱两可结果 A、B、DR位点分别有2种、83种、3种;1 177例PCRSBT试剂结果显示A、B、DR位点的高分数据百分比分别是92.9%(n=1 094)、95.9%(n=1 129)、96.6%(n=1 137),总的高分辨数据百分比86.8%(n=1 022),模棱两可结果 A、B、DR位点分别有10种、16种、6种。结论 3D平台支持的SSOP技术操作和数据分析简便可行,其高分辨分型结果能够满足目前中华骨髓库供者HLA入库分型的要求。

Luminex液相芯片技术检测与胰岛素抵抗相关的脂肪细胞因子水平在妊娠期糖耐量受损孕妇中的相关性研究

目的研究汉族妇女血清中的与胰岛素抵抗相关脂肪细胞因子水平,并且比较在妊娠期正常血糖水平组和糖耐量受损组中的水平差异。方法采用Luminex液相芯片技术对IL-6、TNF-α、瘦素、MCP-1等脂肪细胞因子在共80例孕妇血清中的表达水平进行检测,并进行差异性检测。结果瘦素水平在2组中具有显著性差异(P<0.01),其他各细胞因子则无明显区别(P>0.05)。结论血清瘦素水平与妊娠期糖耐量受损(GIGT)密切相关,如果改善血清瘦素水平,提高胰岛素敏感性,将对GIGT的防治有重要的临床意义。而IL-6、TNF-α、MCP-1等细胞因子水平与GIGT则无关,其与GIGT的关系需要进一步的研究。

Luminex技术监测抗HLA抗体对肾移植受者预后的影响

目的探讨Luminex技术检测受者体内抗人类白细胞抗原(HLA)抗体水平在预测肾移植受者预后的价值。方法选取2013年6月至2015年11月在解放军第181医院拟行肾移植患者1 105例(其中354例成功接受肾移植手术),收集肾移植术前、术后血清标本共1 923例次。采用Luminex技术检测术前和术后的抗HLA抗体的阳性率和抗体荧光强度,同时并对移植受者进行移植肾功能检测。结果术前抗HLA抗体阳性血清样本占总数的51.0%(546/1 071),其中抗HLAⅠ类抗体阳性占26.0%(279/1 071),抗HLAⅡ类抗体阳性占24.9%(267/1 071),其中抗HLA抗体Ⅰ、Ⅱ类均为阳性占11.4%(122/1 071)。354例肾移植患者中,术后出现抗HLA抗体者占17%(59/354),其中单独抗HLAⅠ类抗体阳性者25例(术后新发阳性4例),单独抗HLAⅡ类抗体阳性者占15例(术后新发阳性1例),两者皆阳性者19例(术后新发阳性4例)。随访期间,术后抗HLAⅠ类、Ⅱ类及两种抗体均阳性者出现移植肾功能异常者分别为13例、5例和11例,其中术后抗体新发阳性者均出现移植肾功能异常。结论 Luminex技术可动态监测肾移植术后受者抗HLA抗体水平,而抗HLA抗体阳性对预测肾移植受者预后有重要的价值。

糖尿病视网膜病变患者疾病进展与房水细胞因子的相关性研究

目的探讨糖尿病性视网膜病变(DR)患者行抗血管内皮生长因子(VEGF)治疗疗效与房水中细胞因子的相关性。方法纳入2023年7月至2023年12月在新乡医学院第三附属医院眼科行抗VEGF药物治疗的50例56眼DR患者,将患者分为糖尿病性黄斑水肿(DME)组(30例36眼)和增生型DR(PDR)组(20例20眼)。DME组患者每月玻璃体内注射阿柏西普眼内注射溶液1次,连续3次,每次注射前抽取房水;PDR组在行玻璃体切割术前1周玻璃体内注射阿柏西普眼内注射溶液1次,在注射前抽取房水,并在行玻璃体切割术时再次抽取房水。采用Luminex液相芯片检测每次抽取的房水内VEGF-A、胎盘生长因子(PLGF)、白细胞介素(IL)-1β、IL-23、IL-17A及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度。注射治疗前,所有患者均行最佳矫正视力(BCVA)和黄斑中心凹厚度(CMT)检测,分析注射治疗前各细胞因子浓度与DR患者BCVA及CMT的相关性。结果DME组患者注射治疗前后比较,房水中VEGF-A、PLGF及IL-23浓度均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05),此外,患者CMT值降低,BCVA提高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。PDR患者注射治疗后,房水中VEGF、PLGF、IL-1β、IL-23、IL-17A和TNF-α浓度均较注射治疗前降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。注射治疗前,DME组患者房水中VEGF-A、PLGF及IL-23水平均高于PDR组患者,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。相关分析结果显示,注射治疗前,DME组患者中,VEGF与BCVA呈负相关(r=-0.767,P=0.004);VEGF与CMT呈正相关(r=0.662,P=0.019);VEGF与IL-23呈正相关(r=0.765,P=0.004)。PDR组患者注射治疗前各房水细胞因子之间均无相关性(均为P>0.05)。结论VEGF-A、PLGF、IL-23的浓度变化与DR的发生发展密切相关,抗VEGF治疗可使DME患者BCVA得到改善,CMT下降。房水中IL-23的表达水平可作为DR患者抗VEGF疗效的预测因子,为DR的早诊断、早治疗提供新的靶点。

用体外表达的血小板膜蛋白GPⅢa偶联Luminex微球检测HPA-1a抗体

目的拟利用体外克隆表达的GPⅢa蛋白作为HPA—1a抗原与LuminexxMAP微球相连，建立和评估用Luminex微球技术检测血清中抗HPA—1a的效果。方法扩增并克隆GPⅢa蛋白的编码基因ITGB3至真核表达载体，转染中国仓鼠卵巢癌细胞株。利用G418筛选稳定表达细胞株，体外获取并鉴定相应的特异性膜糖蛋白GPⅢa。将重组蛋白通过表面游离氨基和Luminex xMAP微球表面激活的羧基相偶联，再利用偶联后的微球与待测血清反应。利用PE-抗人IgG进行显色，在Luminex-100仪上读取数据并判断结果。结果ITGB3基因测序为HPA-1aa，将克隆后的GPⅢa重组蛋白偶联Luminex xMAP微球，Luminex微球法检测HPA-1a抗体的灵敏度为滴度1／32（抗体浓度3．125U／mL）。微球技术能特异性鉴别出待测样本的HPA—1a抗体，与MAIPA结果一致，而且与HLA抗体、ABO抗体以及其他HPA血小板系统抗体（HPA-3a、HPA_5b）均不发生交叉反应，说明建用立的Luminex微球技术来检测血小板抗体是可行的。结论成功获取了重组表达的血小板膜蛋白GPⅢ3，并初步建立了Luminex微球检测HPA-1a抗体方法。

基于Luminex液相芯片技术的NNK和AαC体外免疫毒性研究

目的了解4-(甲基亚硝胺基)-1-(3-吡啶)-1-丁酮(NNK)和2-氨基-9H-吡啶并[2,3-b]吲哚(AαC)的体外免疫毒性特征。方法分别以0、12.5、25、50、100、150和200μg/ml NNK染毒小鼠淋巴瘤细胞(EL-4细胞)24 h,以0、2.5、5、7.5、10、12.5和15μg/ml AαC染毒小鼠巨噬细胞(Ana-1细胞)24 h。采用CCK-8法检测细胞存活率,以Luminex液相芯片技术检测细胞上清液中与免疫相关的20种细胞因子分泌量,以BCA蛋白检测方法校正细胞因子的结果。结果 NNK染毒EL-4细胞后,白介素(IL)-10、IL-17、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量随染毒剂量的增加而升高,粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)含量随染毒剂量的增加而降低,且均存在剂量-效应关系;碱性成纤维细胞生长因子(FGF-basic)、γ-干扰素(IFN-γ)、IL-1α、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-12、IL-13、干扰素诱导蛋白-10(IP-10)、角质细胞诱导因子(KC)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、γ-干扰素诱导性单核因子趋化因子(MIG)、巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)含量无明显变化。AαC染毒Ana-1细胞后,IL-5、MCP-1、MIP-1α、TNF-α和VEGF含量随染毒剂量的增加而降低,其余15种细胞因子无明显变化。结论 NNK和AαC可以产生体外免疫毒性。

Luminex技术筛选胃癌复发外周血微小RNA指纹图谱

目的应用Luminex技术筛选胃癌复发外周血微小RNA（miRNA，miR）指纹图谱。方法选取胃癌复发和未复发患者各100例及对照健康人100例，应用Luminex技术筛选外周血中5种miRNAs表达，另外选择50例胃癌患者动态观察血清miRNAs表达变化，筛选胃癌复发外周血microRNAs分子组合。结果miR-10b、miR-21、miR-183、miR-371-5p、miR-378 5种miRNAs在胃癌患者术前血清中的表达显著高于健康对照组，其在胃癌组和健康对照组表达中位数分别为：miR-10b（8.25比3.25）、miR-21（11.18比3.25）、miR-183（22.86比4.13）、miR-371-5p（13.57比3.37）、miR-378（18.19比3.99），均P＝0.000。术后血清miR-10b在早期胃癌复发组与未复发组比较上调不明显（7.41比7.33，P＝0.336）。50例动态观察的患者中，复发组术后血清miR-21、miR-371-5p、miR-378、miR-183均显著下调，复发后，血清miR-21、miR-371-5p、miR-378显著上调，但miR-183上调不显著（复发组比未复发组中位数分别为1.99、1.14），提示miR-183可以从组合中剔除。结论筛选出miR-21、miR-371-5p、miR-378 3种miRNAs分子组合作为胃癌复发外周血microRNAs指纹图谱，能够早期预测胃癌复发。

Luminex x-TAG技术在金黄色葡萄球菌肠毒素快速分型中的应用

目的基于Luminex悬浮芯片系统,建立多种金黄色葡萄球菌肠毒素快速筛查体系。方法菌株来源为本中心2012年-2018年食品污染物检测中分离的158株金黄色葡萄球菌。分别设计金黄色葡萄球菌的通用引物及SEA、SEB、SEC、SED、SEE 5种特异性肠毒素分型引物构建成多重引物体系。并通过Luminex200平台进行分析。结果本体系能特异性鉴别金黄色葡萄球菌并对5种肠毒素进行分型,检出限达到103cfu/ml。实际菌株样品5种肠毒素基因总检出率为43.8%(70/160),sea阳性菌株最多(17.5%,28/160)。共发现16种肠毒素基因组合,sea(15株)、sec(9株)、sea+sec(8株)3种基因组合居于前三位。结论本液相芯片方法快速分型了本地区2012年-2018年食品污染物检测中分离的158株金黄色葡萄球菌,发现SEA型仍然是地区优势的毒力因子,为食品风险的监测和食物中毒的诊断提供有效保障。