Effects of Yiqi Yangyin Prescription combined with radiotherapy on the tumor load and anti-tumor immune response of patients with advanced lung cancer

Objective: To investigate the effects of Yiqi Yangyin Prescription combined with radiotherapy on the tumor load and anti-tumor immune response of patients with advanced lung cancer. Methods: A total of 78 patients with advanced non-small cell lung cancer who were diagnosed and treated in our hospital between August 2015 and January 2017 were reviewed and then divided into the routine group (n=41) who received chemoradiotherapy alone and the Yiqi Yangyin Prescription group (n=37) who received chemoradiotherapy combined with Yiqi Yangyin Prescription therapy. The differences in serum levels of tumor markers, Th1/Th2 cytokines and Th17/Treg cytokines were compared between the two groups before and after treatment. Results: After treatment, serum tumor markers CA15-3, Cyfra21-1, HSP90 and CEA levels of Yiqi Yangyin Prescription group were lower than those of routine group;serum Th1 cytokines IFN-γ and IL-2 levels were higher than those of routine group while Th2 cytokines IL-4 and IL-5 levels were lower than those of routine group;serum Th17 cytokines IL-17 and IL-23 as well as Treg cytokines IL-10 and TGF-β levels were lower than those of routine group. Conclusion: Routine chemoradiotherapy combined with Yiqi Yangyin Prescription therapy can effectively reduce the tumor load and optimize the anti-tumor immune function in patients with advanced non-small cell lung cancer.

肺胀2号方对慢性阻塞性肺疾病稳定期肺肾气阴两虚型患者中医证素的影响

目的:观察肺胀2号方治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期肺肾气阴两虚型患者证素变化的情况。方法:将70例符合纳入标准的COPD稳定期肺肾气阴两虚型患者随机分为2组各35例,治疗组在西医常规治疗的基础上予肺胀2号方,对照组在西医常规治疗的基础上予安慰剂治疗,疗程3月,比较2组治疗前后病位证素和病性证素的变化。结果:2组实际完成均为33例。治疗组治疗后病位肺、肾,病性气虚、阴虚、阳虚和痰证素积分均明显下降,前后比较,差异均有统计学意义(P <0.01);2组治疗后病位、病性证素积分比较,差异均有统计学意义(P <0.01)。治疗后,病位证素肾2组病理分级情况比较,差异有统计学意义(P <0.05)。治疗后,2组气虚、阴虚、痰病性证素病理分级情况分别比较,差异均有统计学意义(P <0.05,P <0.01)。结论:肺胀2号方可以降低COPD稳定期肺肾气阴两虚型患者病位、病性证素积分,一定程度改善其中医病理损害。

康肺扶正方对肺癌荷瘤鼠Caspase3、Caspase9、Smac及IL-2的影响

目的:观察康肺扶正方对肺癌荷瘤小鼠凋亡相关蛋白半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3、9(Caspase3、Caspase9)、线粒体蛋白(Smac)及对白介素2(IL-2)、白介素2受体(CD25)的影响。方法:以人肺癌细胞的荷瘤鼠模型作为研究对象,24只裸鼠荷瘤鼠随机分成4组,分别为模型组,环磷酰胺(CTX)对照组,康肺扶正方小、大剂量组。模型组给予生理盐水0.4ml/d灌胃;环磷酰胺组予环磷酰胺(CTX)(20mg·kg-1·d-1)腹腔注射,1次/d;康复扶正方小、大剂量组分别给予14g·kg-1·d-1、56g·kg-1·d-1灌胃,均1次/d,连续4周。检测各组裸鼠肿瘤体积、抑瘤率;且用免疫组织化学方法检测Caspase3、Caspase9、Smac表达;用酶联免疫吸附试验盒(ELISA)检测IL-2;流式方法检测CD25。结果:与生理盐水对照组相比,康肺扶正方小剂量组的瘤体积有所缩小,差异未达到统计学意义(P>0.05);康肺扶正方大剂量组的瘤体积缩小,且差异有统计学意义(P<0.05)。康复扶正方大剂量组Caspase3、Caspase9、Smac阳性表达率明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。康肺扶正方大剂量组小鼠血清中IL-2、CD25较对照组升高(P<0.05)。结论:康肺扶正方的体内抗癌机制可能通过增加肺癌凋亡及增强免疫功能而实现。

调衡方对Lewis肺癌细胞凋亡标志物bax及bcl-2表达的影响

目的探讨调衡方含药血清诱导Lewis肺癌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法采用细胞培养技术,用不同浓度的含药血清(无特定病原体雌性SD大鼠32只随机分为4组,每组8只,灌服给药,制备调衡方大、中、小剂量含药血清,正常血清。又将细胞分为5组,调衡方大、中、小剂量含药血清组,中剂量含药血清+AG490干预组,正常血清组)处理Lewis肺癌细胞,用溴化四唑蓝(MTT)法检测药物对细胞增殖的影响;以流式细胞仪测定碘化丙啶染色细胞周期的变化;采用实时聚合酶链式反应(PCR)法检测bax和bcl-2的mRNA表达。结果调衡方含药血清处理Lewis肺癌细胞后,随着药物浓度增加,作用时间延长,细胞增殖速度减慢。流式细胞仪检测结果显示,调衡方含药血清使Lewis肺癌细胞阻滞于S期,随着药物浓度的增加,细胞凋亡逐渐增加,中、大剂与中剂量+AG490组尤为明显(P<0.01)。调衡方含药血清还能够促进细胞中bax mRNA表达,减少bcl-2 mRNA表达(P<0.05,P<0.01),并呈浓度依赖性。结论调衡方含药血清能降低Lewis肺癌细胞内bcl-2含量及提高bax的表达,使bax/bcl-2比值升高,这可能是调衡方抗肿瘤诱导Lewis肺癌细胞凋亡的机制。

柴胡龙牡汤对小鼠Lewis肺癌细胞凋亡的影响及其机制的实验研究

目的:柴胡龙牡汤由张仲景《伤寒论》中柴胡加龙骨牡蛎汤加减而成。临床用于治疗非小细胞肺癌安全有效,在改善症状、稳定病灶、提高生活质量及延长生存期等方面均显示了一定的作用。其体外实验研究也已证实该方具有诱导人肺腺癌细胞凋亡及下调VEGF表达的作用。本实验旨在探析柴胡龙牡汤的体内抗肿瘤作用机理。方法:通过透射电镜下观察超微结构的变化,判断柴胡龙牡汤是否可诱导细胞凋亡,通过检测与凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3表达的变化,以及瘤组织中肿瘤坏死因子(TNFα)的变化,探讨柴胡龙牡汤诱导Lewis肺癌细胞凋亡的分子作用机制。结果:1中药组镜下可见肿瘤细胞以凋亡变化为主;化疗组、综合组电镜下均可见到坏死细胞和典型凋亡细胞及凋亡小体。2模型组、化疗组TNFα表达呈阴性,染色结果均为(-);TNFα在中药组和综合组中均有表达,但二者相比较无显著性差异(P﹥0.05),阳性细胞数均在30%左右,TNFα染色结果为(++)。3中药组、化疗组和综合组,都可不同程度的降低Bcl-2蛋白的表达,并使Bax及Caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2/Bax的比值降低,与模型组相比有显著、极显著性差异(P﹤0.05,P﹤0.01)。结论:1柴胡龙牡汤可诱导Lewis肺癌细胞凋亡,对顺铂化疗具有协同增效作用;2柴胡龙牡汤可诱导TNFα产生,下调Bcl-2蛋白的表达,明显增加Bax及Caspase-3的表达,从而使Bcl-2/Bax的比值降低,最终导致细胞凋亡。

调衡方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能调节的实验研究

目的:研究调衡方对小鼠Lewis肺癌自发性肺转移的作用并探讨其作用机制.方法:将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL小鼠右腋皮下建立Lewis肺癌模型;灌胃给药12 d后观察瘤组织中淋巴细胞与瘤细胞形态学的变化;常规石蜡切片HE染色.观察瘤组织癌细胞形态的变化;免疫组化法检测瘤组织中CD4+,CD8+的表达水平及其血清IL-2的活性.结果:调衡中、大剂量组可见瘤组织Lewis肺癌细胞大量坏死和凋亡,荷瘤对照组对肿瘤细胞形态无明显影响;调衡中剂量组和调衡大剂量组瘤组织中CD4+与CD8+表达均增多,而阳性组、调衡小剂组、热休克组则主要是CD8+表达升高.调衡方在25 g/kg剂量下,对Lewis肺癌荷瘤小鼠外周血IL-2活性水平有显著地增强作用.结论:调衡方对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用机制可能与增强小鼠外周血IL-2的活性有关及增强CD4+,CD8+的表达水平,从而阻止了肿瘤细胞的侵袭转移.

敦煌方大青龙汤对高原低氧大鼠肺损伤的影响

目的观察敦煌古医方大青龙汤(麻黄、细辛、桂枝,等)对高原低氧大鼠的肺功能、形态及血清白细胞介素-2(IL-2)、缺氧诱导因子-α(HIF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响作用。方法大鼠常规饲养3 d,随机分为空白组,模型组,红景天组,大青龙汤高、中、低剂量组,每组12只。各组连续灌胃7 d,从第8天开始除对照组外均进行减压低氧暴露连续14 d。末次低氧暴露后测定各组动物的肺功能。眼球取血检测血清中IL-2、HIF-α、TGF-β的含有量。取肺称重进行病理形态观察。结果与空白组比较,模型组吸气时间、呼气时间、持续时间均降低。潮气量、每分通气量、频率均升高;与模型组比较,各干预组每分通气量均降低,大青龙汤组潮气量降低,大青龙汤高剂量组、红景天组频率均降低。与空白组比较,模型组血清IL-2含有量降低,HIF-1α、TGF-β含有量均升高;与模型组比较,大青龙汤中、高剂量组,红景天组IL-2、HIF-1α含有量均升高,TGF-β含有量均降低。各组肺组织结构观察,模型组肺泡间隔显著增厚,肺毛细血管扩张,炎症细胞浸润,肺泡断裂、融合出现明显肺气肿,局部有肺大泡及肺萎陷。大青龙汤中、高剂量组,红景天组肺泡间隔增厚减轻,炎症细胞浸润减少。结论大青龙汤减轻肺损伤的防护作用可能与增强IL-2、HIF-1α表达而降低TGF-β表达有关。

肺胀阳虚水泛证水通道蛋白关联性研究

目的寻找肺胀阳虚水泛证的关联性因素,探讨肺胀阳虚水泛证的病理机制。方法对符合诊断标准的临床收治肺胀阳虚水泛证、肺肾气虚证、痰热郁肺证患者分别采用双抗体夹心酶联免疫法检测尿水通道蛋白-2(aquaporin-2,AQP2)、放射免疫法检测血浆精氨酸加压素(arginine vasopressin,AVP)、酶联免疫吸附法检测血浆脑钠素(brain natriuretic peptide,BNP)、钠钾三磷酸腺苷酶(Na+-K+-ATPase)水平,对阳虚水泛证、肺肾气虚证、痰热郁肺证三证之间相同项目指标分别采用秩和检验法比较相互之间的差异性,用相关分析法比较证型内指标之间的相关性。结果肺胀阳虚水泛证与痰热郁肺证的BNP水平有差异性(P<0.05),阳虚水泛证、肺肾气虚证、痰热郁肺证患者尿AQP2以及血浆钠钾ATP酶、AVP之间无统计学差异(P>0.05),三组钠钾ATP酶与BNP之间有正相关性(P<0.05),阳虚水泛证组及肺肾气虚证组的钠钾ATP酶与AVP之间有显著正相关性(P<0.01);BNP与AVP之间有显著正相关性(P<0.01),阳虚水泛证AQP2与AVP之间有显著正相关性(P<0.01)。结论 BNP可能是肺胀阳虚水泛证的关键因素之一,需住院的肺胀阳虚水泛证、肺肾气虚证、痰热郁肺证患者均有阳虚因素的存在,尿AQP2以及血浆钠钾ATP酶、AVP可能是肺胀阳虚水泛证的内在因素之一。

《古今录验》续命汤治肺胀解

围绕《古今录验》续命汤的药物组成、配伍规律,探讨续命汤治疗肺胀类疾病的方证、药证,分析归纳出续命汤所治之肺胀之病机属于疾病发作期因虚寒客,痰饮内伏,饮热互结证,并结合自身临床实践,指出其使用要点及加减规律,从而为临床治疗肺胀类疾病提供一定的理论依据,丰富治疗思路。

三小汤配合呼吸康复干预治疗老年慢性阻塞性肺疾病急性加重期临床观察

目的探讨三小汤配合呼吸康复干预治疗老年慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者的疗效。方法老年AECOPD患者72例随机分为对照组、研究组各36例。对照组给予常规西医治疗及常规康复护理,研究组在对照组基础上给予三小汤治疗配合呼吸康复护理干预。8周后,比较2组运动耐力测定量表(6MWT)、圣乔治呼吸问卷调查(SGRQ)、呼吸困难评分量表(Borg)、慢性阻塞性肺疾病评估问卷(CAT)及1 s用力呼气量(FEV1)、1 s用力呼气量/用力肺活量(FEV1/FVC)。结果干预后研究组6MWT明显高于本组干预前,SGRQ、Borg评分明显低于本组干预前,且6MWT明显高于对照组,SGRQ、Borg评分明显低于对照组(P<0.05)。干预后研究组FEV1、FEV1/FVC明显高于本组干预前,CAT评分明显低于本组干预前,且FEV1、FEV1/FVC明显高于对照组,CAT评分明显低于对照组(P<0.05)。结论三小汤配合呼吸康复干预有效改善了老年AECOPD患者的运动耐力、肺功能。

肺胀炎性因子变化规律随机平行对照研究

[目的]观察肺胀炎性因子变化规律。[方法]使用随机平行对照方法,将95例住院患者随机分为三组。辨证分型:肺肾气虚、痰热郁肺、阳虚水泛,并以健康志愿者21名作为正常对照组。采用酶联免疫吸附测定法检测血清TNF-α、IL-8、AQP_2、AVP、BNP、Na^+-K^+-ATPase,SPSS17.0统计软件分析检测结果。计量资料用均数±标准差(x±s)表示,正态分布用Kolmogorov-Smirnov和Shapiro-Wilk检验;多组均数正态分布采用多因素方差分析,非正态分布用两个独立样本秩和检验,相关分析比较变量相关性。[结果]肺肾气虚与痰热郁肺及痰热郁肺与阳虚水泛TNF-α有显著性差异(P<0.05)。肺肾气虚与痰热郁肺IL-8有显著性差异(P<0.05)。肺肾气虚与阳虚水泛AVP有显著性差异(P<0.05)。痰热郁肺与阳虚水泛Na^+-K^+-ATPase有显著性差异(P<0.05)。肺肾气虚AQP2与IL-8呈显著性负相关(P<0.05);AQP_2与BNP呈显著性正相关(P<0.01);AQP_2与AVP呈显著性正相关(P<0.05);IL-8与BNP呈显著性负相关(P<0.05);IL-8与TNF-α呈显著性正相关(P<0.05);BNP与TNF-α呈显著性负相关(P<0.05);AQP_2与TNF-α呈显著性负相关。痰热郁肺AQP_2与BNP呈显著性正相关(P<0.01);IL-8与TNF-α呈显著性正相关(P<0.01);Na^+-K^+-ATPase与AVP呈显著性正相关(P<0.01)。阳虚水泛AQP_2与IL-8呈显著性正相关(P<0.05);AQP_2与BNP呈显著性正相关(P<0.01);AQP_2与Na^+-K^+-ATPase呈显著性正相关(P<0.05);IL-8与Na^+-K^+-ATPase呈显著性正相关(P<0.01)。[结论]⑴TNF-α是肺胀急性发作期的关键指标,也是肺胀实证与虚证的鉴别点。⑵IL-8是肺胀肺肾气虚与痰热郁肺之间的区别点,是肺肾气虚的关键指标。⑶AVP是肺肾气虚与阳虚水泛之间的鉴别点。⑷Na^+-K^+-ATPase在肺胀阳虚水泛出现抑制或耗竭现象,在肺肾气虚、痰热郁肺还可被动激活。⑸肺肾气虚AQP_2随着BNP、AVP同向增高,AQP_2、BNP随着IL-8、TNF-α的激活而被抑制或耗竭。水转运及心衰因子随着炎症因子的升高而降低,炎症因子之间互相激活,同步增高。⑹痰热郁肺水转运因子随着心衰因子的增高而增高,炎症因子之间也同步增高。⑺阳虚水泛水转运因子随着心衰因子、炎症因子的增高而增高。

新冠肺脾气虚方对体外新冠病毒增殖及炎症因子表达的影响

目的研究新冠肺脾气虚方(简称4-1)对新冠病毒(SARS-CoV-2)及普通冠状病毒(HCoV-OC43,229E和NL-63)的体外抗病毒作用,探讨其抗病毒抗炎机理。方法通过LC-MS分析4-1化学药效物质,MTT法检测药物毒性,CPE法确定该处方体外抗病毒活性,qRT-PCR法检测病毒载量和炎症因子表达水平。结果4-1含黄酮、甾体、倍半萜等94种化合物,对新冠及3种普通冠状病毒的选择指数范围为(8.44±0.49)~(52.26±2.3)。该处方在10、5、2.5 g·L^(-1)剂量下可抑制新冠病毒增殖,影响ACE2及S蛋白mRNA表达,下调IL^(-1)α及CCL-5/RANTES过表达;在20、10、5 g·L^(-1)等剂量下可抑制3种普通冠状病毒增殖,且抑制OC43、229E引起的IL-6、CXCL-8/IL-8、CXCL^(-1)0/IP-10、TNF-α、IFN-α、CCL-2/MCP-1、CXCL-9/MIG和CCL-5/RANTES表达上调,且抑制作用均呈剂量依赖性。结论肺脾气虚方具有抗多种冠状病毒增殖的活性,可抑制冠状病毒诱导的炎症因子表达上调。该研究为常见呼吸道病毒感染和新冠病毒等新发传染病的中药治疗提供了研究依据。

基于仲景病证结合模式应用经方治疗慢性阻塞性肺疾病探析

慢性阻塞性肺疾病(COPD)相当于中医学中咳嗽、喘证等多种肺系疾病发展成的肺胀病。中医学认为,肺胀的发生多因久病肺虚,痰瘀潴留,肺不敛降,气还肺间,肺气胀满,复感外邪诱使病情发作或加剧。肺病日久,肺、脾、肾气化功能失调则致痰浊水湿内停,渐而成瘀,终致痰浊、血瘀、水饮错杂为患。该病病程较长,缠绵难愈,虚实夹杂。笔者临床中以仲景病证结合模式为指导,结合临床实践,运用古代经典名方分期治疗慢阻肺,疗效满意。

健脾益肾方对非小细胞肺癌细胞体外增殖凋亡作用的实验研究

目的:探讨健脾益肾方对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞体外增殖凋亡的作用。方法:人NSCLC细胞系A549分为四组:空白对照组(仅加入细胞培养液)、阴性对照组(加入细胞,不进行中药处理)、实验组(加细胞加中药处理)。荧光定量PCR和Western blot分别检测Survivin、Bcl-2和Caspase-3的mRNA和蛋白表达。MTT检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡。结果:与空白对照组相比,阴性对照组细胞在24、48、72 h的吸光度值明显升高,细胞凋亡率下降,Survivin和Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量上调,Caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量下调,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);而健脾益肾方处理的实验组24、48、72 h的吸光度值均显著降低,细胞凋亡率显著上升,Survivin和Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量下调,Caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量上调,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:健脾益肾方可通过下调Survivin和Bcl-2、上调Caspase-3表达诱导NSCLC细胞凋亡,并抑制肿瘤细胞的增殖,进而抑制NSCLC的发展。

米烈汉教授经方治疗肺胀经验总结

肺胀在临床较为多见,现在临床治疗多以时方为主,米烈汉教授临床治疗多以经方治疗,分为发作期、缓解期和恢复期,发作期多以小青龙汤治疗,缓解期多以苓桂术甘汤合理中汤治疗,恢复期多以麦味地黄丸合苓桂术甘汤治疗。应用此方法,临床效果显著,不仅缓解患者的病痛,而且能减轻患者的经济负担。

基于张仲景水饮方论谈慢性阻塞性肺疾病从肺饮论治

水饮伏肺是慢性阻塞性肺疾病(COPD)的核心病机,肺饮病能够反映COPD的病机实质特征,概括COPD的中医全貌。COPD从肺饮论治常见证型有外寒内饮证、寒饮挟热证、痰饮内停证、水瘀互结证及水气上泛证。COPD从肺饮论治能够执简驭繁,直中病机肯綮,切合气道炎性反应及气道高分泌状态所致的痰饮及咳喘诸症,因而疗效颇佳。

基于网络药理学和分子对接法探讨扶正救肺方治疗新冠肺炎的可能机制

目的通过网络药理学和分子对接法探讨扶正救肺方治疗新冠肺炎的作用机制。方法基于TCMSP筛选扶正救肺方的有效成分及搜集靶点基因,通过GeneCards、OMIM、Drugbank数据库获得新冠肺炎靶点,利用R语言匹配成分靶点和疾病靶点,视为扶正救肺方治疗新冠肺炎的潜在靶点。利用Cytosacpe3.6.0软件构建成分-靶点网络,基于STRING建立蛋白相互作用(Protein-Protein interaction,PPI)网络,对网络进行拓扑结构分析,筛选出排名靠前的有效成分和靶点基因。利用R语言的ClusterProfile对潜在靶点做基因本体(GO)分析和KEGG富集分析。利用分子对接法分析有效成分和新冠病毒M蛋白的相互作用关系。结果网络拓扑结构分析显示,共有165个节点(116个化学成分和49个靶点)、603条边,其中包括槲皮素、木犀草素、漆黄素等活性成分47个,主要作用靶点IL6、MAPK1、MAPK8、CASP3、IL1B等。GO分析显示潜在靶点与氧化应激、细胞凋亡、细胞因子活性等多个生物学过程相关。KEGG富集分析得到20条信号通路(P<0.05),主要有晚期糖基化终产物信号通路、卡波氏肉瘤相关疱疹病毒感染通路、人类巨细胞病毒感染通路、肿瘤坏死因子通路等。甘草查尔酮A(-6.01 kcal/mol)、木犀草素(-5.54 kcal/mol)、漆黄素(-5.51 kcal/mol)与新冠病毒M蛋白的结合能最低。结论推测扶正救肺方通过抗病毒、抗炎、调节免疫等机制治疗新冠肺炎,调节新冠病毒M蛋白是其发挥作用的途径之一。