应用基因芯片技术筛选人肺腺癌SPC-A1多西他赛耐药差异表达基因

背景与目的多西他赛是近年来应用于临床的一种有效的化疗药物,其独特的作用机制使其具有良好的应用前景,然而耐药性影响其更广泛的应用。本研究的目的是应用基因芯片比较人肺腺癌多西他赛耐药细胞系SPC-A1/Docetaxel与其亲本株基因表达的差异,筛选与耐药相关的基因。方法分别提取SPC-A1/Docetaxel与其亲本株SPC-A1的总RNA并纯化mRNA,将等量 mRNA逆转录合成cDNA,在Affy-metrix HG-U133A2.0基因芯片上杂交,扫描荧光信号图像,用Affymetrix Gene Chip Operating Software Ver-sion1.0软件进行数字化处理和分析,进一步采用RT-PCR验证部分差异表达基因。结果SPC-A1/Do-cetaxel与SPC-A1差异表达基因一共有934条,其中上调428条,下调506条。差异表达的基因涉及ABC运载体、凋亡、微管蛋白、信号传导、酶等多方面。RT-RCR验证显示,SPC-A1/Docetaxel细胞ABCB1、ABCC4、ABCG2、BCL-2、TUBB2A、TUBB2C、TUBB3的表达明显高于SPC-A1,而SPC-A1/Docetaxel细胞BAX的表达明显低于SPC-A1。结论这些差异表达的基因可能与人肺腺癌细胞的多西他赛耐药性相关。