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肾组织石蜡切片Ⅳ型胶原α链免疫组织化学染色在诊断Alport综合征中的应用
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作者 张能擘 赵杰 +4 位作者 王美芳 王慧萍 周芹 毕艳 陈江华 《现代医药卫生》 2024年第10期1660-1664,共5页
目的对Alport综合征(AS)患者肾脏穿刺组织进行石蜡切片Ⅳ型胶原α链免疫组织化学检测,探讨其临床应用价值。方法选取2018年11月至2022年7月浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心确诊的10例AS患者(AS病例组)、10例心脏死亡器官捐献者(D... 目的对Alport综合征(AS)患者肾脏穿刺组织进行石蜡切片Ⅳ型胶原α链免疫组织化学检测,探讨其临床应用价值。方法选取2018年11月至2022年7月浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心确诊的10例AS患者(AS病例组)、10例心脏死亡器官捐献者(DCD)供肾及10例确诊为免疫球蛋白A肾病患者(对照组)的肾组织进行石蜡切片Ⅳ型胶原α1、α3、α5链全自动免疫组织化学染色,将其与冰冻切片免疫荧光染色结果进行比较。将对照组肾组织石蜡切片分别采用多种方法进行抗原修复,比较修复效果。结果对照组肾组织2种染色方法Ⅳ型胶原α1、α3、α5链染色在肾小球基底膜(GBM)中均为连续线状阳性表达。AS病例组肾组织2种染色方法Ⅳ型胶原α1链染色在GBM均呈连续线状阳性表达,α3、α5链染色在GBM为阴性或节段弱阳性表达。2种染色方法染色结果具有较高的一致性(Kappa=0.615,P=0.035)。结论石蜡切片全自动免疫组织化学检测Ⅳ型胶原α1、α3和α5能较好地用于AS的诊断,为AS的诊断和研究提供了一种可靠的技术手段。 展开更多
关键词 ALPORT综合征 诊断 型胶原α链 免疫组织化学 间接荧光抗体技术
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铈(Ⅳ)-吐温40-对苯二酚化学发光体系测定氢醌乳膏中对苯二酚 被引量:3
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作者 谢成根 李淮芬 +1 位作者 王家骅 常文贵 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期694-696,共3页
讨论了表面活性剂对铈(Ⅳ)氧化对苯二酚化学反应的影响,发现了铈(Ⅳ) 吐温40 对苯二酚化学发光新体系,建立了测定对苯二酚化学发光分析方法,该法测定对苯二酚的线性范围为8.0×10-7~5.0×10-5mol·L-1,检出限为5.0×10... 讨论了表面活性剂对铈(Ⅳ)氧化对苯二酚化学反应的影响,发现了铈(Ⅳ) 吐温40 对苯二酚化学发光新体系,建立了测定对苯二酚化学发光分析方法,该法测定对苯二酚的线性范围为8.0×10-7~5.0×10-5mol·L-1,检出限为5.0×10-7mol·L-1,相对标准偏差为2.5%(5.0×10-6mol·L-1对苯二酚,n=11)。该法应用于测定氢醌乳膏中的对苯二酚,结果满意。 展开更多
关键词 化学发光 铈() 对苯二酚 吐温40 非离子表面活性剂 流动注射技术 氢醌乳膏
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产瘫A型Ⅳ度伤手术技巧 被引量:1
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作者 张咸中 周学军 《实用手外科杂志》 2014年第3期243-244,246,共3页
目的 总结应用显微外科技术治疗产瘫上干根性撕脱伤(A型Ⅳ度)42例手术技巧.方法 1980年2月-2010年2月,根据自行设计的手术方法对42例产瘫A型Ⅳ度伤进行手术治疗.解脱被撕脱神经根远端包块必须从锁骨后方团块的外后侧着手剥离,严禁从... 目的 总结应用显微外科技术治疗产瘫上干根性撕脱伤(A型Ⅳ度)42例手术技巧.方法 1980年2月-2010年2月,根据自行设计的手术方法对42例产瘫A型Ⅳ度伤进行手术治疗.解脱被撕脱神经根远端包块必须从锁骨后方团块的外后侧着手剥离,严禁从团块的内侧开始.用14 cm弯血管钳和手指把“挥鞭样”力导致的卷埋的神经根包块从锁骨后缘解脱出来,并松解中干.最后用丛内移位、丛外移位或患侧C7移位方法解决动力神经.结果 本组42例产瘫A型Ⅳ度伤术后取得75%优良率,并且无一例副损伤.结论 本文总结出产瘫A型Ⅳ度伤术中判断标准及安全探查解脱神经根远端团块的手术技巧,该手术技巧是切实可行、安全可循的手术实用方法. 展开更多
关键词 产瘫 A型 手术技巧
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Adhesive properties of hepatoma cells to collagen Ⅳ coated surfaces 被引量:3
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作者 Ting Zhao Zhi-Qiang Ling +2 位作者 Wei-Qun Yu Mian Long Shao-Xi Cai the Department of Surgery, Zhejiang Provincial Hospital, Hangzhou 310014, China Zhejiang Academy of Medical Sciences, Hangzhou 310013, China Bioengineering College, Chongqing University, Chongqing 400044, China 《Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International》 SCIE CAS 2002年第4期565-569,共5页
Objectives: To quantitatively study the adhesive pro- perties of hepatoma cells to collagen Ⅳ coated artifi- cial basement membrane and to investigate the rele- vance of cell adhesive forces to the concentration of c... Objectives: To quantitatively study the adhesive pro- perties of hepatoma cells to collagen Ⅳ coated artifi- cial basement membrane and to investigate the rele- vance of cell adhesive forces to the concentration of collagen Ⅳ. Methods: Synchronous G1 and S phase cells were a- chieved using thymine-2-desoxyriboside and cochicine sequential blockage method and double thymine-2- desoxyriboside blockage method respectively. The adhesive forces of hepatoma cells were investigated by micropipette aspiration technique. Results: The adhesive forces of hepatoma cells to ar- tificial basement membrane were (107.78±65.44) ×10^(-10)N, (182.60±107.88)×10^(-10)N, (298.91± 144.13)×10^(-10)N when the concentration of the membrane coated by 1, 2, 5μg/ml collagen Ⅳ re- spectively (P<0.001). The adhesive forces of G1 and S phases hepatoma cells to artificial basement membrane were (275.86±232.80)×10^(-10)N and (161.16±120.40)×10^(-10)N respectively when the concentration of the membrane coated by 5μg/ml collagen Ⅳ (P<0.001). Conclusions: The adhesive forces of hepatoma cells to artifical basement membrane in direct proportion to the concentration of collagen Ⅳ suggests that the in- crease of basement membrane might be conducive to the chemotactic motion and adhesiveness of tumor cells. G1 phase cells are more capable of adhering to basement membrane than S phase cells. Hepatoma cells, especially G1 phase cells, may survive in blood circulation, and sequest and adhere in microcircula- tion, and get through basement membrane for re- mote metastasis. 展开更多
关键词 hepatocellular carcinoma collagen ADHESION cell cycle SYNCHRONOUS micropipette aspiration technique
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中药复方成分提取动力学数学模型的初步研究 被引量:29
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作者 贺福元 邓凯文 +3 位作者 罗杰英 刘伟 刘文龙 邓常青 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期490-495,共6页
目的:建立中药复方成分提取动力学数学模型,并对补阳还五汤中黄芪甲苷的提取动力学参数进行研究和分析。方法:根据Fick定律、Noyes-whitney溶出理论和药材提取过程的实际情况,考虑到溶出成分的分解消除,建立包括代数式的微积分方程组的... 目的:建立中药复方成分提取动力学数学模型,并对补阳还五汤中黄芪甲苷的提取动力学参数进行研究和分析。方法:根据Fick定律、Noyes-whitney溶出理论和药材提取过程的实际情况,考虑到溶出成分的分解消除,建立包括代数式的微积分方程组的中药复方溶出动力学数学模型,求解得函数表达式,并对动力学参数求算进行分析。运用该模型研究了补阳还五汤中黄芪甲苷的动力学参数。结果:建立了包含3项e的指数形式的成分溶出浓度解析解及各参数分析方法。黄芪甲苷的动力学参数M,α,N,,βL,π,K,k1,′k2,′1ρ,2ρ,tmax,cmax,AUC,w0,P,D分别为0.061 27%,0.280 2min-1,-1.027%,0.008 965min-1,1.077%,0.002 665min-1,3.451×10-3min-1,3.188×10-3min-1,0.375 9min-1,1.420min,0.754 7min,184.9min,0.057 21 mg.mL-1,289.9min,0.070 11%,46.24%,22.35%。结论:封闭可溶中药复方扩散体系的成分溶出符合线性动力学数学模型,各参数可根据溶出浓度表达式关系计算得到。 展开更多
关键词 提取动力学 数学模型 补阳还五汤 黄芪甲苷 参数分析
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罗湖术式在阴道闭锁治疗中的应用及热点问题探讨 被引量:8
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作者 罗光楠 潘宏信 《国际妇产科学杂志》 CAS 2017年第3期245-247,共3页
先天性阴道闭锁临床表现复杂,北京协和医院把阴道闭锁分为阴道下段闭锁(Ⅰ型)和阴道完全闭锁(Ⅱ型),准确的分型有利于选择恰当的治疗方案。对于阴道闭锁Ⅱ型,"罗湖三式"通过闭锁宫颈切除+腹腔镜腹膜阴道成形(罗湖二式)+子宫... 先天性阴道闭锁临床表现复杂,北京协和医院把阴道闭锁分为阴道下段闭锁(Ⅰ型)和阴道完全闭锁(Ⅱ型),准确的分型有利于选择恰当的治疗方案。对于阴道闭锁Ⅱ型,"罗湖三式"通过闭锁宫颈切除+腹腔镜腹膜阴道成形(罗湖二式)+子宫人工阴道吻合术的组合,成功解决了阴道闭锁Ⅱ型保留生育功能的难题。对于阴道闭锁Ⅰ型中闭锁位置较高的病例,"罗湖四式"通过腹腔镜下闭锁阴道切开+腹膜阴道成形术(罗湖二式)的结合,也成功保留了患者的子宫。充分的术前影像学检查有助于对阴道闭锁的类型进行正确诊断,协助制定合理的治疗方案,而且应该选择合适的手术时机以避免患者延误治疗。术后利用阴道模具进行短时间定期扩张以保持人工阴道的通畅,合并严重子宫内膜异位症者可加用药物治疗。阴道闭锁保留子宫术后的远期妊娠结局有待观察。 展开更多
关键词 阴道闭锁 阴道 生育力 妇科外科手术 罗湖术式
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从黄芪生药中提取黄芪甲苷的工艺研究 被引量:6
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作者 杨晓雷 曹云 《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2008年第S2期373-374,376,共3页
研究了从黄芪生药中提取黄芪甲苷的新工艺。工艺条件是:用黄芪生药和提取液比为1∶12的5%NaOH溶液加热回流提取3次,用HCl溶液调提取液pH至7,上与黄芪生药比为1∶1的HPD300大孔树脂柱,后用纯化水冲柱至α-萘酚反应呈阴性,用70%EtOH溶液... 研究了从黄芪生药中提取黄芪甲苷的新工艺。工艺条件是:用黄芪生药和提取液比为1∶12的5%NaOH溶液加热回流提取3次,用HCl溶液调提取液pH至7,上与黄芪生药比为1∶1的HPD300大孔树脂柱,后用纯化水冲柱至α-萘酚反应呈阴性,用70%EtOH溶液洗脱后浓缩至无醇味,用正丁醇萃取浓缩液,后蒸干正丁醇溶液得黄芪甲苷。此工艺经正交实验法验证较稳定,黄芪甲苷得率可达1.0%~1.3%,纯度达到95%~98%。 展开更多
关键词 黄芪 黄芪甲苷 提取 工艺
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抗肿瘤侵袭与转移单链抗体scFv-M97基因克隆及分泌性表达 被引量:8
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作者 周春水 江敏 +1 位作者 徐琳娜 甄永苏 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期81-88,共8页
目的研制抗肿瘤侵袭和转移的单链抗体。方法应用重组噬菌体抗体技术,从小鼠抗Ⅳ型胶原酶杂交瘤C2H5细胞中提取mRNA,构建单链抗体基因并克隆到噬粒pCANTAB5E中,转化大肠杆菌TG1,经M13KO7援救后,得到滴度为5×10~9pfu/ml单链抗体库。... 目的研制抗肿瘤侵袭和转移的单链抗体。方法应用重组噬菌体抗体技术,从小鼠抗Ⅳ型胶原酶杂交瘤C2H5细胞中提取mRNA,构建单链抗体基因并克隆到噬粒pCANTAB5E中,转化大肠杆菌TG1,经M13KO7援救后,得到滴度为5×10~9pfu/ml单链抗体库。对抗体库进行一轮抗原固相化亲和富集与ELISA筛选鉴定,得到30株阳性噬菌体。结果 DNA序列分析表明,抗Ⅳ型胶原酶单链抗体scFv-M97基因全长732bp。其中V_H351bp,编码117个氨基酸;V_L336bp,编码112个氨基酸,两者以连接肽(Gl_(y_4)Ser)_3相连。阳性噬菌体转染HB2151细胞,经1 mmol/L IPTG诱导培养20h,培养液上清中有2μg/ml可溶性单链抗体。免疫印迹证实所表达产物保留了原亲本抗体的特异性和亲合力。结论单链抗体scFv-M97可分泌性表达,为以Ⅳ型胶原酶为靶点的抗肿瘤侵袭与转移的治疗及新型导向药物的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 单链Fv抗体 基因克隆 表达 肿瘤侵袭 肿瘤转移
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整合素α_2β_1对肝癌细胞粘附与趋化行为的影响 被引量:2
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作者 傅遍红 张述林 吴泽志 《重庆大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期89-93,共5页
采用微吸管技术,研究整合素α2β1对肝细胞癌(HCC)细胞SMMC-7721与IV型胶原衬表面粘附力特性和该细胞对IV型胶原趋化行为的影响.观察Anti-α2、Anti-β1对SMMC-7721细胞与IV型胶原裱衬表面的粘附力的影响;采用双微吸管实验法,观察SMMC-7... 采用微吸管技术,研究整合素α2β1对肝细胞癌(HCC)细胞SMMC-7721与IV型胶原衬表面粘附力特性和该细胞对IV型胶原趋化行为的影响.观察Anti-α2、Anti-β1对SMMC-7721细胞与IV型胶原裱衬表面的粘附力的影响;采用双微吸管实验法,观察SMMC-7721细胞伪足形成过程以及Anti-α2、Anti-β1对SMMC-7721细胞伪足形成的影响.利用流式细胞仪对SMMC-7721细胞表面整合素α2、β1亚单位的表达进行分析.结果表明,SMMC-7721细胞与5μg/mL IV型胶原裱衬表面之间的粘附力为952±134(×10-10N,n=60),加入5μg/mL Anti-α2粘附力减小到605±128(×10-10N,n=60);加入10μg/mL Anti-α2时粘附力减小到579±57(×10-10N,n=50).加入5μg/mL Anti-β1粘附力减小到449±119(×10-10N,n=60);加入10μg/mL Anti-β1时粘附力减小到220±78(×10-10N,n=55).双微吸管趋化实验表明:两侧微吸管加入相同浓度IV型胶原,细胞向两侧微吸管均有伪足形成;在此基础上,微吸管分别加入Anti-α2、Anti-β1的一侧,SMMC-7721细胞伪足生长曲线呈现明显的抑制,而未加入抗体的微吸管一侧与加入的对侧相比,该侧细胞的伪足明显增加.流式细胞仪分析表明,所研究细胞整合素α2、β1亚单位表达率达分别为23.17%和95.78%.上述结果表明,整合素α2β1是联系SMMC-7721肝癌细胞与IV型胶原裱衬表面粘附以及SMMC-7721细胞对IV型胶原趋化性伪足形成的重要受体基础. 展开更多
关键词 整合素α2β1 肝细胞癌细胞 型胶原 粘附 趋化作用 微吸管技术
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FI-化学发光法测定吡哌酸 被引量:1
10
作者 梁耀东 徐茂田 +1 位作者 瞿鹏 丁秀云 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期195-197,共3页
基于吡哌酸对Ce(Ⅳ) SO2-3化学发光体系有较强的增敏作用,结合流动注射分析技术,提出了吡哌酸的化学发光测定法。方法选择性好、灵敏度高。吡哌酸在1.0×10-7~1.0×10-5g·ml-1浓度范围内与化学发光分析信号呈线性关系,其... 基于吡哌酸对Ce(Ⅳ) SO2-3化学发光体系有较强的增敏作用,结合流动注射分析技术,提出了吡哌酸的化学发光测定法。方法选择性好、灵敏度高。吡哌酸在1.0×10-7~1.0×10-5g·ml-1浓度范围内与化学发光分析信号呈线性关系,其检出限为4×10-8g·ml-1。对5.0×10-6g·ml-1的吡哌酸进行11次连续测定,相对标准偏差为2.5%。方法已成功地应用于片剂中吡哌酸含量的测定。 展开更多
关键词 吡哌酸 抗菌药 片剂 含量测定 流动注射技术 铈-亚硫酸根反应体系 化学发光法
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活血散结合剂的提取工艺研究
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作者 李毅 王颖 +1 位作者 张钟俐 张廷模 《湖南中医药大学学报》 CAS 2011年第2期17-19,共3页
目的考察活血散结合剂的提取工艺。方法采用正交试验,以黄芪甲苷含量、总黄酮含量、干膏收率为指标,考察加水量、煎煮时间、煎煮次数等因素对活血散结合剂有效成分提取的影响。结果优选出了活血散结合剂的合理提取工艺为:每次加8倍量水... 目的考察活血散结合剂的提取工艺。方法采用正交试验,以黄芪甲苷含量、总黄酮含量、干膏收率为指标,考察加水量、煎煮时间、煎煮次数等因素对活血散结合剂有效成分提取的影响。结果优选出了活血散结合剂的合理提取工艺为:每次加8倍量水、煎煮3次、每次煎煮60 min。结论优选出的提取工艺科学、经济,可用于指导生产,具有可操作性。 展开更多
关键词 活血散结合剂 正交试验 提取工艺 黄芪甲苷
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罗湖术式在女性先天性生殖道畸形手术治疗中的应用及相关问题探讨 被引量:1
12
作者 罗光楠 潘宏信 《妇产与遗传(电子版)》 2016年第4期23-25,共3页
女性先天性生殖道畸形种类多样,临床表现亦不相同。罗湖系列术式可用于不同类型的先天性生殖道畸形的手术治疗。罗湖一式和罗湖二式是针对Ⅰ类子宫畸形(先天性无子宫、始基子宫)简单有效的手术方式;罗湖三式解决了阴道闭锁Ⅱ型拟保留子... 女性先天性生殖道畸形种类多样,临床表现亦不相同。罗湖系列术式可用于不同类型的先天性生殖道畸形的手术治疗。罗湖一式和罗湖二式是针对Ⅰ类子宫畸形(先天性无子宫、始基子宫)简单有效的手术方式;罗湖三式解决了阴道闭锁Ⅱ型拟保留子宫的难题,罗湖四式能够顺利完成阴道闭锁Ⅰ型高位闭锁的阴道成形。值得重视的是,充分的术前检查有助于正确诊断女性生殖道畸形的类型,并协助制定合理的治疗方案,选择合适的手术时机可以避免患者延误治疗。 展开更多
关键词 罗湖术式 生殖道畸形 治疗
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西他列汀关键中间体2,4,5-三氟苯乙酸的合成研究 被引量:1
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作者 侯茜茜 冯双双 张明云 《安徽医药》 CAS 2019年第8期1513-1515,共3页
目的探讨西他列汀的关键中间体2,4,5-三氟苯乙酸的设计和合成。方法以2,3,5-三氟苯胺为原料,先经过重氮化还原得到1,2,4-三氟苯,再经液溴和三氯化铝的作用下发生亲电取代,得到2,4,5-三氟溴苯,最后经丙二酸二乙酯缩合,再经氢氧化钠水解... 目的探讨西他列汀的关键中间体2,4,5-三氟苯乙酸的设计和合成。方法以2,3,5-三氟苯胺为原料,先经过重氮化还原得到1,2,4-三氟苯,再经液溴和三氯化铝的作用下发生亲电取代,得到2,4,5-三氟溴苯,最后经丙二酸二乙酯缩合,再经氢氧化钠水解、盐酸酸化、加热脱羧得到纯品2,4,5-三氟苯乙酸。结果产品经过核磁氢谱和核磁碳谱表征,纯品2,4,5-三氟苯乙酸总收率达到54%。结论该路线能有效减少副产物,适合工业化生产。 展开更多
关键词 二肽基肽酶抑制剂 糖尿病 2型 化学技术 合成 2 4 5-三氟苯乙酸 2 3 5-三氟苯胺 西他列汀 工业化生产
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双抗夹心化学发光免疫分析定量检测Ⅳ型胶原方法的建立
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作者 徐军 侯俊 +8 位作者 赵静 刘佳 王卫东 卞成蓉 戴亮 陈霖 刘爱霞 郭晓东 李伯安 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2014年第3期230-232,共3页
目的 建立基于双抗夹心微孔板化学发光酶免疫分析的人血清Ⅳ型胶原定量检测方法.方法 应用Ⅳ型胶原多抗进行包被,辣根过氧化物酶标记Ⅳ型胶原单抗,以鲁米诺化学发光体系检测,调整优化各种反应液的工作浓度和各类反应条件后建立双抗体夹... 目的 建立基于双抗夹心微孔板化学发光酶免疫分析的人血清Ⅳ型胶原定量检测方法.方法 应用Ⅳ型胶原多抗进行包被,辣根过氧化物酶标记Ⅳ型胶原单抗,以鲁米诺化学发光体系检测,调整优化各种反应液的工作浓度和各类反应条件后建立双抗体夹心的检测方法;评价所建立方法的线性范围、特异性、灵敏度、稳定性等性能指标;应用肝纤维化患者血清与进口试剂进行比对实验.结果 所建立方法的灵敏度为15.5 ng/ml,线性范围25 ~ 850 ng/ml,批内、批间变异均小于8%.检测Ⅳ型胶原的临床高、中、低值血清回收率分别为98.5%、94.3%和102.6%;在4℃和37℃条件下分别进行了3、5、7d的稳定性考察,线性相关系数均>0.99,标准偏差<7%;比对实验分析显示与进口试剂相关性具有统计学意义.结论 成功建立了定量Ⅳ型胶原化学发光酶免疫分析方法,该方法有较好的准确性、灵敏度、重复性,与进口试剂检测结果等效. 展开更多
关键词 化学发光 酶多种免疫测定技术 胶原 肝硬化
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