鹿芪方对高血压合并心力衰竭大鼠血压、血管紧张素-醛固酮和心肌胶原纤维的影响

[目的]研究鹿芪方对高血压合并心力衰竭大鼠血压、血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)和心肌胶原纤维的影响。[方法]采用腹主动脉缩窄术致高血压合并心力衰竭大鼠模型,造模成功后,将大鼠随机分为模型组,对照组,假手术组,鹿芪方高、中、低剂量组。给药8周后测量大鼠血压。应用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定大鼠AngⅠ、AngⅡ、ALD水平。采用苦味酸天狼星红染色观察大鼠心肌胶原纤维改变。[结果]与模型组相比,鹿芪方各剂量组能有效降低心力衰竭大鼠的收缩压(P<0.05),其中高、中剂量组优于低剂量组(P<0.05)。与模型组比较,鹿芪方各剂量组能有效降低AngⅠ、AngⅡ及ALD(P<0.05),在降低ALD方面,鹿芪方高剂量组明显优于低剂量组(P<0.01)。通过对大鼠心肌天狼星红染色发现,鹿芪方各剂量组较模型组而言,能显著减少心肌胶原纤维含量,改善心肌间质形态,鹿芪方高剂量组要优于鹿芪方中、低剂量组。[结论]鹿芪方能降低心力衰竭大鼠的血压,调节神经内分泌的激活,减轻心肌纤维化,改善心室重构从而减轻心肌受损。

鹿芪方调控PAM信号通路抑制HIF-1α介导的心肌细胞自噬改善病理性心肌肥大的机制研究

目的:探究鹿芪方治疗压力超负荷诱导的病理性心肌肥大(CH)的作用机制。方法:将60只C57/BL6J小鼠随机分为空白组、模型组、鹿芪方组、抑制剂组[3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制剂]。除空白组外均采用主动脉弓缩窄术诱导构建CH模型,28 d取材。明场成像观察心脏整体形态,WGA和α-actinin染色观察心肌细胞表面积,免疫荧光明确自噬标志物LC3B表达水平,Western Blot检测磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶Bα(Akt1)、磷酸化蛋白激酶Bα(p-Akt1)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、缺氧诱导因子-1α亚基(HIF-1α)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、Beclin-1蛋白表达。RT-qPCR检测心房利钠肽前体A(Nppa)、心房利钠肽前体B(Nppb)mRNA的表达。结果:体内实验结果显示,鹿芪方可改善小鼠心肌肥大,缩小心肌细胞表面积;抑制自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1的表达(P<0.01,P<0.05);多组学测序结果和实验验证显示鹿芪方显著抑制PI3K/Akt/mTOR通路(PAM信号通路)和HIF-1α蛋白表达(P<0.05)。体外实验结果显示,与模型组比较,鹿芪方组心肌细胞表面积缩小;Nppa、Nppb mRNA表达水平降低(P<0.05);LC3B、Beclin-1蛋白表达水平降低(P<0.05)。与模型组比较,鹿芪方组PAM信号通路和HIF-1α蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05)。结论:鹿芪方通过抑制PAM信号通路介导的HIF-1α蛋白表达,抑制心肌细胞自噬,改善CH。