枸杞籽油对亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE通路和氧化损伤的影响

目的探索枸杞籽油对亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE通路和氧化损伤的影响。方法将60只8周龄♂SD大鼠中的50只(空白组10只)颈部皮下注射D-半乳糖125 mg·kg^(-1),持续8周建立亚急性衰老大鼠模型,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)观察衰老细胞,HE观察睾丸形态,ELISA检测血清中睾酮(testosterone,T)、促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)和黄体生成素(luteinizing hormone,LH)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平,免疫组化和Western blot检测衰老、氧化损伤和Nrf2/ARE通路相关因子表达。结果模型鉴定成功后,经枸杞籽油干预,改善了睾丸形态,下调β-gal和γH2AX表达;升高血清中SOD、GSH以及T、FSH水平及降低MDA和LH水平(P<0.05);上调睾丸组织Nrf2、GCLC、NQO1和SOD2蛋白表达水平(P<0.05)以及支持细胞中Nrf2核表达。结论枸杞籽油激活亚急性衰老大鼠睾丸Nrf2/ARE信号通路表达,降低其氧化损伤,改善其激素水平。

枸杞籽油对中波紫外线诱导人永生化角质形成细胞光损伤的防护作用

明确枸杞籽油对中波紫外线(ultraviolet B,UVB)诱导人永生化角质形成细胞(human immortalized keratinocytes,HaCaT)光损伤的防护作用,进一步提高枸杞籽油的利用率。采用GB 5009.168—2016、GB 5009.83—2016、DB64/T 1514—2017、《保健食品中功效成分检测方法》和GB 5009.82—2016(第一法)提供的方法分别测定枸杞籽油主要活性成分脂肪酸、β-胡萝卜素、玉米黄质、叶黄素、谷甾醇以及维生素E的含量,利用HaCaT细胞构建UVB光损伤模型,检测枸杞籽油对UVB诱导的光损伤HaCaT细胞存活率、凋亡率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、凋亡相关细胞因子和炎症因子的影响。结果表明,与模型组相比,枸杞籽油可明显提高UVB光损伤HaCaT细胞的存活率(P<0.05),促进抗凋亡因子B淋巴细胞瘤/白血病-2 mRNA的表达(P<0.01),抑制细胞内ROS的生成(P<0.05),降低细胞凋亡率(P<0.01),抑制细胞凋亡相关因子Bcl-2相关X蛋白、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9和p53 mRNA的表达(P<0.01),减少炎症因子肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β和白细胞介素-6的蛋白含量及mRNA表达(P<0.05)。结果表明枸杞籽油可通过调控细胞凋亡及减轻炎症反应来缓解UVB所致HaCaT细胞光损伤。

超临界CO_2萃取枸杞籽油工艺的研究

利用响应面法优化超临界CO2萃取枸杞籽油的工艺.在单因素试验的基础上,选取萃取压力、萃取温度和萃取时间作为影响因素,采用Box-Behnken中心设计模型,以枸杞籽油得率为响应值,进行响应面分析.结果表明,超临界CO2萃取枸杞籽油的最优工艺条件为：原料粒度40～60目、萃取压力37.8 MPa、萃取温度38.4℃、静态萃取时间5 min、动态萃取时间41 min,在此条件下,枸杞籽油得率为21.78％.

枸杞籽油对C57BL/6J小鼠2型糖尿病肾脏损伤干预作用的研究

目的研究枸杞籽油对C57BL/6小鼠2型糖尿病肾脏损伤的干预作用。方法采用以高脂饲料饲喂后的C57BL/6小鼠,单次腹腔注射链脲佐菌素70mg.10g-1,建立小鼠2型糖尿病模型。设正常对照组、糖尿病肾损伤模型组、二甲双胍(3.0mg.10g-1)治疗组、枸杞籽油(0.05、0.1 mL.10g-1)两个剂量治疗组。给药5周后检测各组小鼠给药后的血糖、尿糖2、4h尿量2、4h尿蛋白定量、肾质量指数、肾小球面积、肾脏白介素-8含量、肾脏病理变化。结果枸杞籽油各剂量组与糖尿病模型组比较,可降低2型糖尿病模型小鼠的血糖、尿糖、24h尿量和尿蛋白定量、肾质量指数、肾小球面积、肾脏白介素-8含量,肾脏病变得到明显改变(P<0.05或0.01)。结论枸杞籽油能降低C57BL/6小鼠2型糖尿病的血糖、尿糖、24h尿量和尿蛋白定量、肾质量指数、肾小球面积、肾组织白介素-8的含量,具有防治糖尿病肾损伤发生的作用。

枸杞籽油的生理功能及提取方法的研究进展

枸杞籽油是从枸杞汁、枸杞酒生产中的下脚料——枸杞籽中提取的功能性油脂,枸杞籽油中富含亚油酸、VE、β-胡萝卜素等多种功效成分,具有较高的食用和药用价值,是一种有待开发的营养保健油。本文就枸杞籽油的组成、生理功能以及提取工艺作一综述,并对其开发应用前景进行展望。

枸杞籽油对小鼠耐缺氧抗疲劳作用的实验研究

目的 :为研究枸杞籽油的生物学作用和使宁夏枸杞资源得到充分利用 ,作者对枸杞籽油进行了抗疲劳和耐缺氧作用的研究。方法 :分别测定小鼠在缺氧条件下存活时间 ,负重 ( 5%体重 )条件下游泳时间及小鼠血中超氧化物歧化酶(SOD)活性和血红蛋白 (Hb)的含量 ,用于评价枸杞籽油的生物功效。结果 :枸杞籽油能明显延长实验组小鼠游泳时间、缺氧条件下的存活时间 ,SOD活性增强 ,Hb的含量增加。结论 :枸杞籽油具有抗疲劳。

气相色谱-质谱联用对枸杞籽油中塑化剂迁移量的研究

为抑制枸杞籽油中邻苯二甲酸酯类塑化剂污染,通过气相色谱-质谱联用的方法,对枸杞籽油中邻苯二甲酸酯类物质的迁移规律进行研究。结果表明,利用气相色谱-质谱测定枸杞籽油中17种邻苯二甲酸酯,该方法在线性范围内具有良好的线性关系,相关系数均大于0.999,检测限0.05 mg/kg,平均回收率在84.3%~95.1%。该方法可快速、有效地检测枸杞籽油中多种邻苯二甲酸酯类塑化剂的迁移,对保障枸杞籽油的食品安全具有重要意义。

宁夏枸杞籽油的化学成分分析

以宁夏3个不同区域生产的枸杞籽油为原料,对其中的脂肪酸组成、类胡萝卜素、维生素E总量进行了分析比较。结果表明:不同区域的枸杞籽油成分差异显著,其中脂肪酸中亚油酸含量为66.41%～68.35%,玉米黄质含量为7.42～508.54μg/100 g,叶黄素的含量为13.49～187.62μg/100 g,β-胡萝卜素含量为12.49～79.00μg/100 g,维生素E总量含量为3.55～5.60 mg/100 g,表明宁夏枸杞籽油是一种健康的有开发潜力的油脂。

枸杞籽油对小鼠睾丸支持细胞衰老模型的抗炎作用

目的探讨枸杞籽油对小鼠睾丸支持细胞(TM4)衰老模型的抗炎作用及机制。方法以不同浓度(50、100、150、200 mmol/L)的D-半乳糖(D-Gal)以不同时间(24、36、48 h)体外作用TM4细胞,通过CCK-8法和β-半乳糖苷酶染色筛选最佳时间浓度的D-Gal建立TM4衰老模型,Western blotting检测衰老因子P16^INK4A、P21^Waf1/Cip1、γH2A.X以及半乳糖苷酶蛋白的表达。以不同浓度(1%、3%、5%、10%)枸杞籽油含药血清提前干预TM4细胞衰老模型,并用CCK-8筛选枸杞籽油含药血清最佳浓度。Western blotting检测细胞炎症因子白细胞介素-1(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)与血红素加氧酶(HO-1)的表达以及p-P65/P65的相对表达量;细胞免疫荧光(IF)定位NF-κB表达。结果D-Gal建立TM4衰老模型结果显示,与正常细胞比较,200 mmol/L浓度的D-Gal干预48 h对细胞增殖有抑制作用,其抑制率为(14.890±0.892)%,差异有统计学意义(F=12.820,P=0.004;t=17.230,P<0.001),同时β-半乳糖苷酶染色结果显示,与正常细胞比较,细胞蓝染阳性率上升(t=5.243,P<0.001)。P16^INK4A(t=2.364,P=0.033)、P21^Waf1/Cip1(t=2.908,P=0.011)、γH2A.X(t=2.511,P=0.025)蛋白表达以及半乳糖苷酶(t=2.299,P=0.037)表达在衰老模型组升高。枸杞籽油抗TM4衰老的结果显示,3%浓度的枸杞籽油含药血清干预衰老TM4细胞后活性上升(t=5.399,P<0.001)。与正常细胞比较,TM4细胞衰老相关蛋白P16^INK4A(t=7.211,P<0.001)、P21^Waf1/Cip1(t=8.248,P<0.001)、γH2A.X(t=4.145,P<0.001)以及半乳糖苷酶(t=7.288,P<0.001)表达下调;与模型组相比,3%浓度的枸杞籽油含药血清干预后炎症因子TNF-α(t=4.992,P<0.001)、IL-1β(t=2.921,P=0.011)、IL-6(t=4.985,P<0.001)的表达下调,HO-1(t=6.047,P<0.001)与IL-10(t=2.315,P=0.036)表达上调;衰老TM4细胞p-P65/P65相对表达量在3%浓度的枸杞籽油含药血清干预后下调(t=24.630,P<0.001)。结论3%枸杞籽油含药血清干预,对衰老TM4细胞有明显的抗炎作用,其机制可能是下调核因子κB进而抑制下游炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6表达,并启动抑炎因子HO-1、IL-10的表达。