菊花枸杞决明子功能性软糖的制备研究

试验以菊花、枸杞、决明子和蓝莓浓缩汁为原料制备软糖。以感官评分为评价指标,通过单因素试验和正交试验确定菊花枸杞决明子功能性软糖最佳配方。结果表明,菊花枸杞决明子功能性软糖的最佳配方为凝胶剂添加量9.2%(明胶与琼脂配比为45∶1),麦芽糖醇液添加量85%,浓缩液添加量12%(菊花枸杞决明子提取液和蓝莓浓缩汁5∶7),柠檬酸添加量0.15%。在最佳工艺配方条件下,得到的产品口感最佳、表面光滑、软硬适中、咀嚼性良好,拥有较广阔的市场前景。

不同种植年限宁夏枸杞根际微生物多样性变化

为了解长期人工种植枸杞根际土壤微生物的种群结构变化特征,利用Illumina Mi Seq测序平台分别对种植5 a、10 a和15 a宁夏枸杞根际土壤微生物基因组总DNA中16S和18S r DNA基因的部分区域进行测序,经UPARSE pipeline和RDP classifier软件进行聚类分析和物种注释。结果表明,长期种植宁夏枸杞不会改变其根际土壤p H,但会导致根际土壤全磷、有效磷、全盐含量和电导率升高。测序结果表明,不同种植年限枸杞根际土壤细菌群落α多样性无显著变化,但真菌群落多样性在种植10 a枸杞中较种植5 a时显著降低(p<0.05),表明根际细菌群落多样性受种植年限影响较小。从门的分类水平看,酸杆菌门、放线菌门、拟杆菌门、厚壁菌门、绿弯菌门、泉古菌门、蓝菌门、芽单胞菌门、变形菌门以及真菌子囊菌门、担子菌门、接合菌门的比例在不同种植年限的枸杞根际土壤中显著改变(p<0.05)。属水平的分析也表明,共有27个细菌属和16个真菌属的比例发生改变(p<0.05),这些结果表明枸杞根际土壤微生物群落组成受种植年限的影响更大。相关性分析结果表明,种植年限、土壤全磷及有效磷含量是影响枸杞根际微生物群落结构的主要因子。

枸杞基因组DNA提取及指纹图谱分析

目的建立一种适于RAPD分析的快速提取枸杞叶片基因组DNA的方法,并利用RAPD技术研究枸杞属植物基因组DNA指纹图谱。方法采用改进的CTAB法提取枸杞冷藏幼叶的基因组DNA,利用RAPD技术对其进行指纹图谱分析。结果改进的CTAB法提取的10份枸杞材料基因组DNA均适于RAPD分析;可提供清晰的RAPD指纹图谱,利用筛选出的2个随机引物对供试材料DNA进行随机扩增,共得到56条带,其中多态性条带44条,多态性百分率为78.6%。结论表明改进的CTAB法提取的枸杞基因组DNA不需经氯化铯梯度离心或柱层析纯化,可以直接用于RAPD分析;RAPD对枸杞属植物进行指纹图谱分析是可行的。

枸杞多糖对血管紧张素II诱导的血管内皮细胞衰老及P53和P16表达的影响

目的观察枸杞多糖对血管紧张素I(IAngII)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)衰老及对细胞衰老相关基因P53和P16表达的影响,以探讨其抗衰老作用及机制。方法体外培养HUVECs加入终浓度10-6mol/LAngII诱导细胞衰老,建立内皮细胞衰老模型。实验分为空白对照组、AngII模型组和枸杞多糖组;β-半乳糖苷酶染色法鉴定内皮细胞衰老状态;流式细胞技术分析细胞周期变化;CCK-8法检测细胞存活率情况;Westernblotting法检测P53、P16蛋白的表达。结果 AngII模型组与空白对照组比较,β-gal阳性染色率明显增多,细胞周期多停滞于G0/G1期,S期细胞逐渐减少,细胞存活率明显下降,P53、P16蛋白表达水平明显上调。给予枸杞多糖处理后改善了细胞衰老状态,β-gal阳性染色率减少,G0/G1期细胞减少,S期细胞逐渐增多,细胞存活率增多,P53、P16蛋白的表达较AngII组下调。结论枸杞多糖能够抑制AngII诱导HUVECs衰老,其作用机制可能是通过下调P53及P16的表达而实现的。

枸杞多糖增强人树突状细胞抗肿瘤的机制

目的观察枸杞多糖对树突状细胞抗肿瘤的增强作用。方法分离人外周血单核细胞,体外培养其成为未成熟树突状细胞和成熟树突状细胞。用冻融法制备肝癌细胞的全抗原并致敏未成熟树突状细胞;通过混合淋巴细胞实验,获取成熟树突状细胞激活的特异性效应T细胞。用MTT法测定效应T细胞对肝癌细胞的杀伤率。观察枸杞多糖在树突状细胞的成熟及T细胞的激活、增殖和杀瘤过程中的作用。结果枸杞多糖能促进树突状细胞的成熟,转染了人肝癌细胞的全抗原的mDC可特异地激活T细胞为效应T细胞。效应T细胞可特异性地杀伤人肝癌细胞,而对不相关的MG-63细胞无特异性的杀伤作用。结论枸杞多糖能促进树突状细胞成熟和增强效应T细胞的增殖和杀伤肿瘤的活性。

枸杞多糖对人外周血巨噬细胞活性的影响

目的研究枸杞多糖（LBP）对正常人外周血巨噬细胞功能的影响。方法无菌分离人外周血单核细胞,加入植物血凝素（PHA）和不同质量浓度的LBP,用MTT法检测巨噬细胞对肝癌细胞株Bel-7402生长的影响,ELISA法检测LBP作用后巨噬细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。结果用LBP处理后的巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤功能增强,80、100μg/mLLBP刺激后巨噬细胞吞噬作用明显增强（P〈0.01）。80、100μg/mLLBP组肿瘤细胞与巨噬细胞培养上清液中TNF-α水平明显增高（P〈0.01）,证实该作用可能与LBP促进巨噬细胞分泌TNF-α增多有关。结论 LBP能增强人外周血巨噬细胞免疫功能,发挥抗肿瘤作用。

枸杞多糖对人外周血淋巴细胞免疫调节功能的影响

目的:研究枸杞多糖(lycium bararum polysaccharides,LBPs)对正常人外周血淋巴细胞免疫调节功能的影响。方法:无菌分离人外周血淋巴细胞,加入植物凝集素(PHA)和不同质量浓度的LBPs,MTT法检测其对淋巴细胞增殖的影响;RT-PCR法检测LBP对γ-干扰素(INF-γ)mRNA表达的影响;ELISA法检测LBPs作用后淋巴细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)分泌的变化。结果:50～100μg/mLLBPs能明显增强PHA活化的人外周血淋巴细胞的增殖(P<0.01);80、100μg/mL的LBPs能使淋巴细胞IFN-γmRNA的表达水平明显升高(P<0.01);LBPs能促进淋巴细胞产生IL-2和TNF-α,并呈现浓度依赖性(P<0.01)。结论:LBPs能增强人外周血淋巴细胞的免疫功能从而加强抗肿瘤作用。

枸杞多糖对诱导树突状细胞成熟和增强T细胞增殖的影响

目的观察枸杞多糖对诱导树突状细胞（DC）成熟和T细胞增殖的作用。方法通过密度梯度离心法分离人外周血单核细胞,采用细胞因子体外培养7d后分别加入枸杞多糖,观察细胞形态变化,用免疫细胞化学法检测DC分子的表达,通过混合淋巴细胞反应检测细胞提呈抗原的能力。结果经枸杞多糖诱导的DC分子表达有明显变化（MHCⅡ＋、CD86＋、CD83＋）,差异有统计学意义（P〈0.05）,而经RPMI1640培养的DC分子表达与培养前无明显变化。经枸杞多糖诱导的DC能促进T细胞增殖能力（P〈0.05）。结论枸杞多糖能促进DC成熟和增强T细胞增殖能力。

宁夏枸杞主产区土壤和果实中稀土元素含量及其相关性

【目的】探讨宁夏枸杞6主产区(宁夏、内蒙古、新疆、河北、甘肃、青海)土壤和枸杞果实中稀土元素含量之间的关系,为指导宁夏枸杞产业持续发展提供参考。【方法】采用电感耦合等离子光谱—质谱(ICP-MS)检测法对宁夏枸杞6主产区土壤和枸杞果实中13种稀土元素(Ce、Dy、Er、Eu、Gd、Ho、Lu、Pr、Sc、Sm、Tb、Tm、Yb)含量进行测定。【结果】宁夏枸杞6主产区土壤中稀土元素总体含量符合我国土壤稀土元素背景值范围,宁夏产区土壤中Ce、Eu、Gd、Ho、Pr、Sm、Tb和新疆产区土壤中Lu、Er、Dy、Sc、Tm、Yb含量较高。土壤稀土元素含量呈宁夏>河北>内蒙古>新疆>甘肃>青海的变化趋势势。果实中未检出Eu、Ho、Sm、Tm等元素,且枸杞果实中稀土元素总含量均未超标(GB 2762-2005)。青海产区Ce、Dy、Er、Yb、Pr和甘肃产区Gd以及河北和内蒙古产区的Sc在果实中含量较高。果实稀土元素含量呈青海>甘肃>河北>内蒙古>新疆>宁夏的变化趋势。果实中稀土元素间有很好的协同作用,枸杞果实对Ce和Sc具有很好的富集作用。各产区土壤和枸杞果实中轻稀土元素(Ce、Eu、Pr和Sm)总含量高于重稀土元素(Dy、Er、Gd、Ho、Lu、Sc、Tb、Tm和Yb)总含量。【结论】宁夏枸杞各主产区土壤和果实中稀土元素含量之间具有较好协同作用,果实中稀土元素含量均未超标。

乳酸菌发酵型枸杞泡菜最佳工艺条件研究

以包心芥菜和白萝卜为原料,在两者比为3:2下,添加枸杞制得泡菜。采用正交试验,得出最佳工艺条件为:枸杞量6%,盐浓度4%,糖浓度1%,接种量3%,发酵温度30℃,发酵时间4d。用此工艺制作的泡菜具有很好的色、香、味。文中最后还简要讨论了枸杞泡菜的发展前景。

枸杞多糖对淋巴细胞功能的影响

目的研究枸杞多糖（LBP）对正常人外周血淋巴细胞免疫调节功能的影响。方法无菌分离人外周血淋巴细胞，加入植物凝集素（PHA）和不同质量浓度的LBP。MTT法检测其对淋巴细胞增殖的影响；ELISA法检测LBP作用后淋巴细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF—α）的表达情况。结果50～100mg／LLBP能明显增强PHA活化的人外周血淋巴细胞的增殖；LBP能促进淋巴细胞产生TNF—α，并呈现浓度依赖性。结论LBP能增强人外周血淋巴细胞的免疫功能，发挥抗肿瘤作用。

不同厚度保鲜膜对枸杞果实品质的影响

[目的]筛选出适宜鲜果保鲜的保鲜膜厚度。[方法]采后枸杞果实用0.03、0.05、0.07 mm 3种厚度的保鲜膜在4℃下进行保鲜试验。[结果]枸杞鲜果呼吸类型为呼吸跃变型。枸杞鲜果在0.05 mm保鲜膜下贮藏,Vc含量下降率为28.19%,而0.03和0.07 mm保鲜膜贮藏的含量下降率分别为45.52%和29.31%,均高于0.05 mm保鲜膜的下降率;0.05 mm保鲜膜MA冷藏整个过程中可溶性糖含量的变化较其他缓慢,而可溶性固形物含量和含酸量也较其他缓慢。[结论]0.05 mm厚度保鲜膜低温4℃贮藏枸杞鲜果的效果最好。

枸杞多糖对正常小鼠及四氧嘧啶致高血糖小鼠血糖的影响

本文研究枸杞多糖(LBP)对正常小鼠的血糖和糖耐量的影响,及对四氧嘧啶致高血糖小鼠的保护作用。分别给正常小鼠ig LBP50·kg^(-1)及100mg·kg^(-1),可使血糖明显降低(P<0.05;P<0.01);给四氧嘧啶(72mg·kg^(-1))中毒小鼠LBP100mp·kg^(-1),ig9d,高血糖水平亦明显降低(P<0.05);预防给药LBP(100mg·kg^(-1)及50mg·kg^(-1)),可使四氧嘧啶中毒小鼠的血糖接近正常或维持在较低水平(P<0.01);糖耐量实验表明,LBP100mg·kg^(-1)可明显对抗正常小鼠给5g·kg^(-1)葡萄糖ig引起的血糖升高(P<0.01)。结果提示,LBP对正常及糖尿病模型动物均有降血糖作用。

枸杞多糖对糖尿病大鼠血糖、血脂及血-视网膜屏障通透性的影响

背景糖尿病视网膜病变（DR）的特征是毛细血管闭锁、微循环障碍和局部缺血性视网膜新生血管形成，其确切的发病机制尚不十分清楚。目的观察枸杞多糖（LBP）对糖尿病（DM）大鼠血糖、血脂、血一视网膜屏障通透性的影响，探讨LBP对DR的保护作用及机制。方法SD大鼠54只，按随机数字表法随机分为3组，每组18只。其中36只大鼠尾静脉注射45mg／kg链脲佐菌素（STZ）建立DM模型，72h后血糖〉16．7mol／L、尿糖阳性者为造模成功。成模后第2天LBP治疗组给予200mg／（kg·d）LBP灌胃，DM组给予等量生理盐水灌胃，其他18只正常鼠为正常对照组。各组大鼠造模后4、8、12周抽取心脏血检测血糖、甘油三酯和总胆固醇水平，获取视网膜组织，用伊文思蓝渗漏实验检测视网膜血管的渗透性。结果各时间点DM组和LBP治疗组大鼠的血糖水平均高于正常对照组。4、8、12周时LBP治疗组大鼠的血糖水平明显较同时间点DM组明显下降，下降幅度分别为57％、40％、36％，差异均有统计学意义（P〈0．01）。DM组大鼠各时间点甘油三酯浓度明显高于正常对照组，差异均有统计学意义（P〈0．01），LBP治疗组在4周、8周时甘油三酯的浓度与正常对照组比较差异均无统计学意义，而12周时高于正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。DM组大鼠在8周、12周时血液中的总胆固醇浓度明显高于正常对照组，差异均有统计学意义（P〈0．01），而LBP治疗组在各时间点与正常对照组比较差异均无统计学意义（P〉O．05）。造模后4、8、12周大鼠视网膜血管渗透性增加，DM组伊文思蓝的渗透量分别为（26．23±2．00）、（29．78±1．78）、（34．08±3．03）μg／g，明显高于正常对照组的（12．34±4．30）、（12．76±2．11）和（12．45±4．40）μg／g，差异均有统计学意义（P〈0．01），各时间点LBP治疗组伊文思蓝的渗透量明显低于DM组，差异均有统计学意义（P〈0．01）。伊文思蓝的渗透量与血糖、甘油三酯的浓度变化均呈高度正相关（r=0．896、0．859，P=0．000），与总胆固醇的浓度变化呈显著正相关（r=0．770，P=0．000）。结论LBP可降低DM大鼠血糖及血脂水平，抑制DM大鼠血一视网膜屏障通透性的增加。

枸杞多糖的研究与应用

枸杞多糖是枸杞中主要的生物活性成分之一,因具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤等多种功能作用而成为近年来研究的热点。详细介绍了枸杞多糖的制备、生物活性作用及其开发利用现状。枸杞多糖的制备过程包括提取、分离与纯化。提取方法有水提醇沉法、碱液提取法、超声波提取法、微波辅助法等;分离与纯化方法主要有Sevage法、三氯乙酸法、蛋白酶法、活性炭脱色、聚合物-盐双水相系统等,主要是去除多糖中游离蛋白质、色素等杂质,再通过分级沉淀、纤维素离子交换柱层析和凝胶柱层析方法进一步纯化得到单一多糖。此外,还对近年来枸杞多糖在医药、食品、畜牧与饲料等领域的开发利用进行了较详细介绍,并对今后的研究方向进行了展望,旨在为枸杞多糖的进一步研究与开发提供参考。

枸杞多糖对小鼠链脲佐菌素性胰岛损伤及血糖的影响

目的研究枸杞多糖(LBP)对链脲佐菌素(STZ)性糖尿病小鼠血糖及胰岛损伤的影响。方法给小鼠ig STZ150mg·kg^(-1),制成糖尿病动物模型,然后灌胃(ig)LBP50和100mg·kg^(-1),分别于给药后1、5h测血糖观察药物的治疗作用。先ig LBP 3d,再ip STZ105mg·kg^(-1),并连续治疗3d。末次给药后5h摘眼球采血、取胰腺,用于胰岛素的测定及观察药物对胰岛损伤的保护作用。用快速血糖仪测血糖。用放免法测定血清胰岛素。在光镜下观察胰岛组织学变化。结果 LBP50和100mg·kg^(-1)治疗给药可明显降低STZ糖尿病小鼠的血糖,给药后5h对照组血糖为15.0±3.5mmol·L^(-1);治疗组为11.0±4.1mmol·L^(-1)(P<0.05)和8.3±2.3mmol·L^(-1)(P<0.01)。但LBP对血清胰岛素水平无影响。预防给药可明显对抗STZ诱发的血糖升高(P<0.05;P<0.01)。胰岛病理学显示:中毒对照组胰岛缩小,细胞数减少;LBP防治组胰岛未出现损伤性改变,胰岛大小及细胞数量与正常对照组基本相同。结论 LBP能明显降低链脲佐菌素高血糖小鼠血糖,并对链脲佐菌素引起的胰岛损伤具有保护作用。LBP降血糖作用主要不是通过促进胰岛B细胞释放胰岛素所产生。

枸杞多糖对高压诱导凋亡的视网膜神经节细胞延迟整流钾电流的影响

目的观察枸杞多糖(lycium bararum polysaccharides,LBP)对体外高压诱导调亡的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)钾电流的影响。方法生后2~3 d的SD乳大鼠RGCs原代培养,分为对照组、加压组和LBP组,对照组为常规培养6 d;加压组为常规培养6 d后用自行设计的加压装置加压1 h 80 mm Hg(1 k Pa=7.5 mm Hg);LBP组为常规培养5 d后,加入LBP共培养24 h后,再加压80 mm Hg 1 h。通过全细胞膜片钳技术观察各组钾电流、半数最大激活电压(V1/2)、斜率(K)、最大电导(Gmax)的变化。结果加压能使电流幅度显著增加,LBP能抑制加压引起的电流增加。在刺激电位为-10~60 m V时,加压组的电流密度明显大于对照组,差异有统计学意义(均为P<0.01,n=5/6);LBP组电流密度明显小于加压组,差异有统计学意义(均为P<0.01,n=6/8)。三组钾电流V1/2总体差异有统计学意义(F=55.60,P<0.01),加压组V1/2(11.65±1.30)m V与对照组(21.42±1.33)m V、LBP组(19.33±13.75)m V比较,差异均有统计学意义(均为P<0.01);LBP组V1/2与对照组V1/2比较,差异无统计学意义(P>0.05)。三组K值分别是17.09±1.24、16.58±1.18、18.13±1.29,总体差异无统计学意义(F=1.39,P>0.05)。三组Gmax总体差异有统计学意义(F=3.77,P<0.05),加压组Gmax(0.59±0.13)与对照组Gmax(0.46±0.06)、LBP组Gmax(0.46±0.07)比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05);LBP组Gmax与对照组Gmax比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 LBP能抑制加压引起的RGCs钾电流增加,对RGCs具有保护作用。

枸杞花药培养体系优化

[目的]提高枸杞花药培养的诱导率。[方法]以宁杞1号、大麻叶、0207、蒙杞1号为材料,以B5为基本培养基对其花药进行离体培养,考察不同激素组合、活性炭、甘露醇预处理对愈伤组织形成的影响。[结果]宁杞1号是比较容易诱导的基因型,0207是较难诱导的基因型;2,4-D对愈伤组织诱导具有明显促进作用;培养基中NAA为0.1 mg/L、6-BA为1.0 mg/L时,胚状体诱导率达3.5%;添加活性炭可明显提高胚状体的诱导率,培养基中活性炭为0.1 mg/L、NAA为0.1 mg/L、6-BA为1.0 mg/L时,胚状体诱导率可提高6倍;一定浓度的甘露醇预处理可提高花药愈伤组织的诱导率。[结论]材料基因型和培养基激素配比是影响枸杞花药培养的重要因素。

枸杞多糖增强效应T细胞增殖和杀瘤活性机制的研究

目的观察枸杞多糖对效应T细胞增殖和杀瘤活性机制的作用。方法通过密度梯度离心法分离人外周血单核细胞并培养其为树突状细胞,用冻融法制备肝癌细胞的全抗原并致敏树突状细胞;通过混合淋巴细胞实验,获取树突状细胞激活的特异性效应T细胞。用MTT法测定效应T细胞对肝癌细胞的杀伤率。观察枸杞多糖在树突状细胞的成熟及T细胞的激活、增殖和杀瘤过程中的作用。结果枸杞多糖单独对T细胞无明显的增殖能力,但能促进树突状细胞的成熟并且能增强效应T细胞的增殖能力和杀瘤活性。结论枸杞多糖能促进树突状细胞成熟和增强效应T细胞的增殖和杀伤肿瘤的活性。

枸杞多糖对加压诱导凋亡视网膜神经节细胞电生理特性的影响

目的观察枸杞多糖(LBP)对加压诱导凋亡的视网膜神经节细胞(RGCs)钾K^+电流的影响,以探讨枸杞多糖对RGCs的保护作用。方法取SD乳鼠视网膜神经节细胞原代培养,分为对照组,加压组,LBP各剂量组(100,250,500,1 000μg·mL^(-1)),对照组常规培养6 d;加压组常规培养6 d后用自行设计的加压装置加压80 mm Hg,1 h;LBP各组常规培养5 d后,加入不同浓度的LBP共培养24 h后,再加压80 mm Hg,1 h。通过连续波长多功能微孔板检测仪检测各组RGCs线粒体的平均荧光强度值;通过全细胞膜片钳技术观察各组细胞膜电容(membrane capacitance,C_m)和钾(K^+)电流的变化。结果加压组C_m和RGCs线粒体荧光强度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),LBP 250,LBP 500,LBP 1 000组RGCs线粒体荧光强度和C_m高于加压组(P<0.05,P<0.01)。电流记录显示,与对照组比较加压组外向K^+电流增加,用不同浓度的LBP预处理后,K^+电流增加都有抑制,且呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。结论枸杞多糖可抑制加压诱导的视网膜神经节细胞凋亡,其作用可能与抑制K^+电流有关。