黑果枸杞香气成分和多酚类物质的组成研究

随着人类对健康和养生重视程度的不断提高,具有良好功效的药食同源植物黑果枸杞受到越来越多的关注,研究黑果枸杞中具有药理活性物质的化学成分,对其深加工和进一步开发利用具有重要的意义。该文对甘肃酒泉产的黑果枸杞鲜果的香气成分及多酚类物质的化学组成进行分析,采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术定性定量分析黑果枸杞鲜果香气成分;采用超高效液相色谱-电喷雾四级杆串联飞行时间质谱技术定性分析黑果枸杞鲜果中多酚类物质的组成。从黑果枸杞香气成分中鉴定出醇类、醛酮类、酯类、烃类等挥发性化学成分63种,占香气成分总量的95.4%,其中25种化合物为我国国家标准GB 2760—2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》规定的食品用合成香料;香气成分中醇类化合物共计26种,总含量占比最高(44.98%)。黑果枸杞多酚经提取和HPD-500大孔吸附树脂纯化后进行液相色谱-质谱联用测试,定性鉴别出73种多酚化合物,其主要由黄酮类和酚酸类等化合物组成。该研究初步确定了黑果枸杞香气和多酚类物质的化学成分,为黑果枸杞药用及食用功效的深入研究奠定了基础。

黑果枸杞多酚类化合物研究进展

黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murray)具有较强的抗逆性,主要分布在中国青海、新疆、西藏、甘肃、宁夏、内蒙古等西北地区,其果实富含以酰化矮牵牛素花色苷为主的多酚类化合物。研究表明,黑果枸杞多酚类化合物具有抗氧化、神经保护、促进肠道健康、抗肿瘤等功效作用。该文对黑果枸杞多酚类化合物进行深入研究,对近年来黑果枸杞多酚类化合物提取制备、化学组成、活性评价的研究进展进行详细阐述,并对其今后的研究与应用方向进行展望,以期为黑果枸杞综合开发与深度利用提供参考和思路。

黑果枸杞‐酿酒葡萄混合果酒酿造过程中花色苷稳定性研究

针对黑果枸杞加工过程中存在的花色苷不稳定的关键瓶颈问题,以黑果枸杞鲜果为原料,辅以酿酒葡萄共发酵酿制果酒。分析不同酿造因子对果酒多酚、花色苷及色泽的影响;明确影响酒体中花色苷含量及稳定性的主要因子,通过正交优化试验得到最佳酒精发酵工艺。结果表明:黑果枸杞与酿酒葡萄质量比以及pH值对果酒花色苷含量和色泽影响程度较大,但对多酚含量影响作用较小,而酵母菌类型对黑果枸杞果酒多酚、花色苷和色泽影响均较小;复配酿酒葡萄可减少花色苷损失,提高黑果枸杞果酒中花色苷的稳定性。最佳酒精发酵工艺条件为黑果枸杞与酿酒葡萄质量比1∶4、果胶酶添加量0.70g/L、酿酒酵母添加量0.25g/L,发酵后酰化花色苷[矮牵牛素-3-O-芸香糖(反式-p-香豆酰基)-5-O-葡萄糖苷]含量可达(459.51±3.66)mg/L。

黑果枸杞多酚对丙烯酰胺诱导SH-SY5Y细胞氧化应激损伤的保护作用

该文研究黑枸杞多酚(Lycium ruthenicum Murr.polyphenols,LRP)对丙烯酰胺(acrylamide,ACR)诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤的保护机制。ACR诱导细胞建立氧化损伤模型,LRP预处理。分为对照组,ACR组(2.5 mmol/L)和LRP组(500、1000、1500μg/mL)。CCK-8法测定细胞活力,试剂盒检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平,Western blot测定核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(glutamate-cysteine ligase catalytic subunit,GCLC)、谷胺酸半胱氨酸连接酶(glutamate-cysteine ligase,GCLM)、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)、c-Jun N-末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38)、半胱氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspartate-specific proteinase-3,Caspase-3)蛋白表达水平。观察小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰Nrf2表达对以上蛋白影响。结果LRP组细胞活力提高,ROS和MDA水平降低、SOD和GSH含量增加,Nrf2、GCLC、GCLM和HO-1蛋白表达提高,JNK、p38和Caspase-3蛋白表达降低,1500μg/mL LRP组细胞活性和抗氧化能力最高。siRNA沉默Nrf2后各组Nrf2、GCLC、GCLM和HO-1蛋白表达降低,JNK、p38和Caspase-3蛋白表达增加,LRP组siRNA干扰前差异显著(P<0.05)。研究证明LRP有抗氧化、抗凋亡的生物活性,通过激活Nrf2通路和抑制JNK、p38和Caspase-3蛋白减弱ACR对SH-SY5Y细胞的毒性。

黑果枸杞多酚吸附分离特性及抗氧化性研究

采用静态吸附法对9种大孔树脂进行了初步筛选,研究了HPD500大孔树脂对黑果枸杞多酚的静态吸附动力学、热力学特性,深入探讨了HPD500大孔树脂对黑果枸杞多酚的吸附机理、动态纯化工艺,评价了其抗氧化活性。HPD500树脂纯化黑果枸杞多酚较为理想,吸附过程符合准二级吸附动力学方程,主要受化学反应模型控制。Langmuir方程在考察温度范围内能很好地描述HPD500大孔树脂对黑果枸杞多酚的吸附热力学行为,ΔH<0、ΔG<0、ΔS<0说明吸附过程自发放热且熵减。HPD500大孔树脂动态纯化黑果枸杞多酚较佳的工艺条件为:将0.8 mg/mL的黑果枸杞粗提液以2.4 BV/h流速上样8 BV量,60%(体积分数)的乙醇溶液以2.4 BV/h流速洗脱,用量6 BV,总多酚纯度较纯化前提高2.36倍。抗氧化活性实验表明,黑果枸杞多酚有较强的羟自由基和超氧阴离子自由基清除能力,IC 50分别为1.3090、0.0708 mg/mL。该研究为黑果枸杞进一步开发利用、拉长其产业链提供依据。

溶剂法与超声辅助法提取黑果枸杞多酚的工艺比较

探讨了黑果枸杞多酚适宜的提取工艺。通过单因素实验和Box-Behnken(BB)试验设计法对黑果枸杞多酚的提取参数进行优化,对溶剂提取法与超声辅助法进行了比较。结果表明,响应面优化后溶剂法提取黑果枸杞多酚的最佳参数为:乙醇体积分数70%,提取温度58℃,提取时间37 min,液料比50∶1 mL/g,多酚得率为35.9021 mg/g,与理论预测值的相对标准偏差为0.95%;超声辅助法提取黑果枸杞多酚的最佳参数为:乙醇体积分数60%,液料比50∶1 mL/g,提取温度36℃,提取时间31 min,超声功率240 W,黑果枸杞多酚的得率为39.6845 mg/g,与理论预测值的相对标准偏差为0.29%。比较发现,溶剂法乙醇用量为超声辅助法的1.16倍,提取温度较超声辅助法高22℃且提取时长延长16.22%,因此,超声辅助法工艺简单、经济、省时、能耗低、提取率高,为黑果枸杞多酚的深入研究、应用开发提供了参考依据。

黑果枸杞功能性成分抗氧化活性及对线粒体的保护作用研究

目的:研究黑果枸杞功能性成分(多糖、黄酮和多酚)的抗氧化活性及对线粒体的保护作用。方法:对黑果枸杞多糖、黄酮和多酚功能性成分分别进行提取,测定这三种成分对二苯代苦味酰基(DPPH)、羟自由基(·OH)以及超氧阴离子自由基(O2-·)的清除能力,以及对小鼠肝脏线粒体肿胀度和丙二醛(MDA)含量,评价黑果枸杞功能性成分抗氧化活性及对线粒体的保护作用。结果:黑果枸杞中多糖、黄酮和多酚类物质的含量分别为30.6、21.3、和49.5mg/g(以干基计,md)。黑果枸杞黄酮和多酚清除DPPH自由基、·OH和O2-·的能力强于多糖。黑果枸杞多糖,黄酮及多酚提取物对DPPH自由基的清除率分别为52.5%,72.4%,82.3%;对·OH的清除率分别为48.2%,56.6%,75.8%;对O2-·的清除率分别16.1%,40.7%,53.3%。黑果枸杞黄酮(p<0.01)和多酚(p<0.01)能显著抑制Fe SO4-VC引起的线粒体肿胀,黑果枸杞黄酮和多酚能显著降低线粒体MDA的含量(p<0.05)。结论:黑果枸杞多糖、黄酮和多酚具有抗氧化活性,黄酮和多酚对线粒体的保护作用强于多糖。

黑果枸杞多酚体外抗氧化活性研究

采用FRAP值、·OH清除力、DPPH自由基清除力、还原力和总抗氧化能力(TEAC)5个体外抗氧化指标对26个不同产地的黑果枸杞多酚进行抗氧化活性评价。结果表明,产地间样本抗氧化活性差异较大;抗氧化模型不同,其抗氧化活性存在差异;综合分析,样本来自宁夏回族自治区贺兰县12-01、宁夏回族自治区银川市掌政、青海省格尔木市乌图美仁乡、新疆维吾尔自治区阜康市甘河子镇、新疆维吾尔自治区喀什市、甘肃省民勤县中渠可作为较好的开发功能性食品的资源。

柴达木黑果枸杞抗氧化物组分分析

为探究柴达木盆地黑果枸杞抗氧化物质含量与特性,利用福林酚法、分光光度法和反相高效液相色谱—二极管阵列检测法等方法对柴达木盆地成熟黑果枸杞干果进行检测。结果表明:柴达木盆地黑果枸杞中总多酚、总黄酮和维生素E的质量分数分别为17.92 mg·g^-1、2.39%和0.51 mg·g^-1;共检测到12种花青素类化合物,矮牵牛素(m/z317)、飞燕草素(m/z303)、锦葵素(m/z331)和矢车菊素(m/z287)是其主要的母核物质,并通过进一步分析花青素结构,对其中10种花青素类化合物命名;不同地区黑果枸杞多酚和花青素的质量分数及各组分占比均不同。研究结果为柴达木盆地黑果枸杞的人工选育栽培和开发利用提供了数据支撑和理论基础。

黑果枸杞微卫星DNA与花青素、多酚和黄酮的关联分析

【目的】筛选试验所用的23个微卫星位点中与花青素、多酚、黄酮有关联效应的位点,加快黑果枸杞良种选育进程.【方法】对选取的23个微卫星标记,应用PCR扩增和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测群体的遗传多样性,并对各位点不同基因型与经济性状进行关联分析.【结果】该群体遗传参数中平均多态信息含量为0.5851,期望杂合度在0.49~0.75之间.关联分析发现:位点c88061;1;1与花青素和黄酮相关;c60533;1;1、KY284857与多酚相关;c58466;1;1与花青素相关;位点KY284852与花青素和多酚相关.【结论】该群体遗传多样性处于较高水平,并且有较强的遗传潜力.在23个微卫星标记中有5个与黑果枸杞中花青素、多酚和黄酮有关联.选出的分子标记可为黑果枸杞良种选育奠定基础.

超高压对黑果枸杞汁中多酚氧化酶活性及构象的影响

利用分光光度计法、傅立叶红外光谱法、差示扫描量热法、内源荧光光谱法、扫描电子显微镜观察和荧光探针法研究超高压处理对黑果枸杞汁中多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)活性、二级结构、三级结构及表面微观结构的影响。结果表明,400 MPa以上压力能使黑果枸杞汁中多酚氧化酶活性降低到0.5 U/mL以下;随着压力的增强,酶蛋白表面疏水性增强,但高压对PPO二级结构影响较小,热变性温度和热变性焓的变化显示400 MPa以上压力能使PPO构象发生变化,内源荧光光谱分析显示色氨酸残基所处微环境极性增强,酶蛋白三级结构发生改变,同时发现高压对PPO表观形态改变有影响。综上,超高压作用可能是通过改变PPO的空间结构来改变酶活性。

响应面法优化黑果枸杞多酚超声波辅助提取工艺

本文采用响应面法优化超声波辅助提取黑果枸杞多酚的工艺条件,考察了乙醇浓度、固液比、超声时间、超声温度对黑果枸杞多酚得率的影响,并对其进行了优化。通过试验得出,最佳提取条件为乙醇浓度54%,固液比1∶63(g/mL),超声时间15 min,超声温度55℃。此条件下黑果枸杞多酚得率为244.86 mg/g,与理论值246.238 mg/g相近。相比于传统的溶剂浸提法,超声波辅助提取黑果枸杞多酚得率提高了14.51%,显著缩短了提取时间,提高了提取效率。

微波辅助提取黑枸杞多酚及抗氧化活性研究

以多酚提取得率(EP)、黄酮提取得率(EF)以及2,2-二苯代苦味酰基(DPPH)自由基清除率为评价指标,通过单因素及正交设计确定黑枸杞多酚最佳提取工艺并对其抗氧化活性进行了研究。结果表明:50%乙醇作为提取溶剂,微波辅助提取效果较好;优化得到黑枸杞多酚微波辅助提取工艺为:乙醇浓度60%,微波时间6 s,料液比1:25 g/mL,提取4次;在此条件下,多酚提取得率为(3.58±0.07)%,黄酮提取得率为(3.85±0.06)%;DPPH自由基清除率可达(85.76±1.40)%,IC50为0.37 μg/mL,黑枸杞多酚提取物具有较强抗氧化能力。

黑果枸杞的功用考证及研究进展

以近期研究报道和古今有关文献为基础,对黑果枸杞的药理活性和化学成分的研究进展进行综述,并对黑果枸杞的功用进行考证。