超临界CO_2萃取与水蒸气蒸馏法研究泽兰中挥发性有机物

以超临界CO2萃取法(SFE)提取中药泽兰中的挥发性有机物,经气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析,人工解析质谱图及计算机谱库检索相结合进行化学成分结构鉴定,用面积归一化法计算各组分的相对含量。SFE法提取的产率为0.78%,共鉴定75种挥发性化合物,主要成分为植醇、石竹烯氧化物、十六酸、亚油酸、葎草烯等,比文献报道的该挥发油成分多且含量差异较大,其中松香芹醇、蒲勒烯、马鞭烯酮、香芹酮、十六酸、亚油酸、葎草烯、十六酸乙酯、亚麻酸等多种成分未见报道。与水蒸气蒸馏法(SD)提取的泽兰挥发油进行比较,后者提取的产率为0.12%,从中鉴定出50种化合物,主要成分为石竹烯氧化物、柠檬烯、α-蒎烯、葎草烯、月桂烯等。SFE与SD得到的成分仅有31种相同,其它各不相同。

泽兰提取物对慢性前列腺炎的治疗作用及调控炎性小体NLRP3信号通路的机制

目的:探讨泽兰提取物对慢性前列腺炎(CNP)的治疗作用,并基于炎性小体NOD样受体蛋白3(NLRP3)通路探讨其抗CNP的可能作用机制。方法:采用5 mg·L^(-1)脂多糖(LPS)诱导人正常前列腺基质细胞WPMY-1,通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测3.125、6.25、12.5、25、50、100 mg·L^(-1)泽兰提取物对LPS诱导WPMY-1细胞分泌IL-6含量的影响,并计算其半抑制浓度(IC_(50))值。WPMY-1细胞给药50、75、100 mg·L^(-1)泽兰提取物后,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NLRP3通路关键蛋白表达。应用角叉菜胶诱导法复制CNP大鼠模型。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠前列腺组织病理学变化;测定大鼠前列腺器官指数;ELISA检测大鼠血清5α-二氢睾酮(5α-DHT)及前列腺组织IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))、环氧合酶-2(COX-2)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量;Western blot检测大鼠前列腺组织中COX-2、TGF-β_(1)及NLRP3通路关键蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠前列腺组织COX-2、白细胞介素-1β(IL-1β)、TGF-β_(1)、TNF-αmRNA表达。结果:与正常组比较,模型组细胞分泌IL-6浓度显著升高(P<0.01);细胞NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,泽兰提取物对LPS诱导WPMY-1细胞分泌IL-6的IC_(50)为38.26 mg·L^(-1);泽兰提取物低、中、高剂量组NLRP3、ASC和IL-1β蛋白表达水平明显下调(P<0.05,P<0.01),泽兰提取物中、高剂量组细胞Caspase-1蛋白表达水平明显下调(P<0.05,P<0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠前列腺器官指数显著升高(P<0.01),前列腺组织大量炎细胞浸润,组织病理学评分明显升高(P<0.05),血清5α-DHT含量、前列腺组织TNF-α、PGE_(2)、IL-6、TGF-β_(1)、NOS2/iNOS、COX-2含量,COX-2、IL-1β、TGF-β_(1)mRNA表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),前列腺组织COX-2、TGF-β_(1)、NLRP3、Caspase-1、ASC及IL-1β蛋白表达水平明显上调(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,泽兰提取物低、高剂量均能有效减轻角叉菜胶所致的前列腺组织病理学改变,明显降低血清5α-DHT含量、前列腺组织TNF-α、PGE_(2)、TGF-β_(1)及iNOS含量(P<0.05,P<0.01)及COX-2、IL-1β、TGF-β_(1)mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01),明显下调前列腺组织COX-2、Caspase-1、ASC及NLRP3蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01)。泽兰提取物低剂量组前列腺器官指数显著降低(P<0.01)。泽兰提取物高剂量组前列腺组织COX-2含量明显降低,TGF-β_(1)及IL-1β蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论:泽兰提取物对CNP有明显的治疗作用并可能通过抑制炎性小体NLRP3信号通路的激活来减轻炎症反应。

泽兰及其精制提取物HPLC特征图谱的相关性研究

目的:建立泽兰及其S-8型大孔树脂精制提取物的HPLC特征图谱,研究饮片与提取物特征图谱的相关性。方法:采用Zorbax SB C18色谱柱;流动相为乙腈-体积分数为0.1%的磷酸溶液(梯度洗脱);流速为1.0mL·min-1;检测波长为330nm;柱温为40℃。结果:泽兰饮片及其提取物均标示出20个共有峰,峰2,6,7,13,17为五强峰,峰2为咖啡酸。10批泽兰饮片的相似度为0.961～0.998;10批泽兰提取物的相似度为0.963～0.998;同批次饮片与提取物之间的相似度为0.988～0.998。结论:方法准确可靠,重复性好,为泽兰及其提取物的质量控制提供了方法依据,同时为含泽兰复方制剂的质量控制提供了参考。