Effect of Lycopus lucidus Turcz.supplementation on gut microflora and short chain fatty acid composition in Crj:CD-1 mice

We investigated the diversity and composition of microflora in feces of Lycopus lucidus Turcz.-fed mice.In addition,we evaluated the production of major cytokines(Interleukin-6 and-10)which are related to inflammation and fatty acid composition of several tissues.16S ribosomal DNA sequencing-based microbiome taxonomic profiling analysis was performed utilizing the EzBioCloud data base.Male mice fed on L.lucidus showed a significantly reduced number of lactic acid bacteria and coliform in the feces compared with the control group(p<0.05).16S rDNA sequencing analysis of fecal samples showed that L.lucidus supplementation decreased the community of harmful microflora(Enterobacteriaceae including Escherichia coli and Bacteroides sp.)in feces compared with the control group(p<0.05).There were no significant differences in mRNA expression of cytokine IL-6 and IL-10 between the control and L.lucidus fed groups.The fecal fatty acid composition in the L.lucidus group had percentages of 4:0,6:0,8:0 and 10:0 in the intestine but those short chain fatty acids were not detected in the control group.Our results showed that L.lucidus supplementation influenced gut environment by decreasing harmful microflora and increased the percentages of several short fatty acids.

泽兰(Lycopus lucidus)营养成分分析

泽兰（Ｌｙｃｏｐｕｓｌｕｃｉｄｕｓ）是一种食用根茎野菜资源，其食用部分含有８种人体必需氨基酸和维生素Ｃ、Ｂ１和Ｂ２；其无机元素Ｆｅ、Ｚｎ和Ｍｎ的含量较高，含量分别为１７１９４，１１２９和２７９ｍｇ／１００ｇ，均高于桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｏｎｇｒａｎｄｉｆｌｏｒｕｍ）；其重金属Ｐｂ、Ｃｄ、Ｈｇ及有害离子Ａｓ等含量极微，均低于国家食品卫生标准，其分布广泛，具有良好的开发价值。

泽兰(Lycopus lucidus)的组织培养研究

研究了不同浓度配比的2种植物生长调节物质对泽兰组织培养的影响.结果表明,在初代培养中9种处理均能诱导泽兰茎段腋芽分化生长,以MS+6＿BA1 0mg·L-1+NAA0 4mg·L-1和MS+6＿BA1 5mg·L-1+NAA0 4mg·L-1两种处理效果较好,在继代培养中进一步比较这2种处理的效果,结果是两种处理差异不显著(r=0 05),均能促进泽兰茎尖和茎段的生长.

Effects of L.F04,the Active Fraction of Lycopus lucidus, on Erythrocytes Rheological Property

Objective: To study the effects of L.F04, the active fraction of Lycopus lucidus, on erythrocytes rheological property so as to investigate its mechanism in promoting blood circulation and removing blood stasis. Method: The effects of L.F04 (used for treatment for 10 days in different dosages) on deformability, aggregation and membrane liquidity of erythrocytes (MLE) as well as whole blood apparent viscosity (η_b) were examined on the basis of rat model of blood-stasis syndrome induced by venous injection of high molecular weight dextran. Result: As compared with the normal control group, the model group's RBC deformability and MLE were lower, and the aggregation of erythrocytes and η_b were higher. Compared with the model group, both L.F04 0.612g/kg and 0.306g/kg showed significant effect in improving deformability and inhibiting aggregation of red blood cells (RBC) and reducing blood viscosity. The trend of improving MLE was also shown. Conclusion: L.F04 could significantly improve the abnormal rheological property of erythrocytes.

Box-Behnken响应面法优化地参咀嚼片辅料配比工艺

为了更好地开发利用地参资源,以地参粉为原料,添加微晶纤维素、硬脂酸镁、羧甲基淀粉钠等辅料,采用直接压片法制备地参咀嚼片,通过单因素试验考察微晶纤维素、硬脂酸镁、羧甲基淀粉钠添加量对地参咀嚼片的片重差异、硬度和脆性的影响,采用Box-Behnken响应面试验结合多指标综合评分法对其辅料配比进行优化。结果表明,微晶纤维素添加量、硬脂酸镁添加量、羧甲基淀粉钠添加量、微晶纤维素和硬脂酸镁添加量交互作用及硬脂酸镁和羧甲基淀粉钠添加量交互作用对地参咀嚼片品质影响显著。地参咀嚼片的最优配比为微晶纤维素添加量17.3%、硬脂酸镁添加量0.7%、羧甲基淀粉钠添加量10.7%,按此配比制备地参咀嚼片的片重差异为1.19%,硬度为98.18 N,脆性为0.37%,多指标综合评分平均值为44.96分。按照优化后辅料配比制备的产品质地结实,表面光滑,色泽均匀,硬度适中,符合咀嚼片的相关要求。

地参发酵酒的工艺优化及品质分析

目的:以新鲜的地参为原料,研究地参发酵酒的最佳工艺。方法:采用单因素实验和Box-Behnken响应面优化地参发酵酒的工艺条件,以酒精度及感官评分为响应值,考察发酵温度、酵母接种量和初始糖度对发酵酒的影响,采用UPLC法对地参发酵酒的酚酸类物质进行了分析。结果:地参发酵酒最佳工艺条件为:酵母接种量为5.1%,初始糖度为22.8%,发酵温度为26℃,发酵时间为9 d。在此条件地参发酵酒酒精度达到11.23%vol,感官评分为85.50分,多糖、总酚、总酸和总黄酮含量分别为6.54 g/L、384.31 mg/L、20.67 g/L和204.59 mg/L。地参发酵酒的ABTS+、DPPH和对羟基自由基的清除率分别为90.53%、81.51%和55.86%,说明其具有一定的抗氧化活性;地参发酵酒含有没食子酸、丹参素、原儿茶酸、对羟基苯甲酸和咖啡酸5种酚酸类物质,其中没食子酸含量最高(11.20 mg/L)。结论:优化工艺后的地参发酵酒色泽呈橘黄色,澄清透明,酒体醇厚丰满,不仅具有独特的地参酒风味,同时较好的保留了地参发酵酒多酚等活性成分。

不同采收期虫草参多酚对羟基自由基介导的DNA氧化损伤保护作用的研究

采用Folin-酚法测定两个采收地(S1和S2)三个采收期(T1、T2和T3)虫草参游离酚和结合酚提取物的多酚含量。采用HPLC法检测多酚提取物中没食子酸、绿原酸、咖啡酸和迷迭香酸的含量。同时,评价了虫草参多酚提取物对羟基自由基(·OH)介导的DNA氧化损伤的保护作用。结果显示,虫草参游离酚和结合酚提取物的多酚含量范围分别为86.53~181.40和89.70~193.58μg GAE/mg;咖啡酸在结合酚中含量较高,且S2采收地高于S1;而迷迭香酸在游离酚中含量较高,且在T1和T3采收期,S2采收地的高于S1,相反在T2采收期,S2采收地的低于S1;虫草参游离酚(25~300μg/mL)和结合酚(3.125~50μg/mL)提取物对DNA氧化损伤保护作用的双螺旋百分比范围分别为1.81%~55.04%和1.67%~70.83%。相较于游离酚,结合酚提取物表现出更好的保护效果。

响应面-Box-Behnken设计优化地参中总黄酮含量检测方法以及不确定度评定

为优化地参总黄酮含量测定方法,该研究比较了NaNO_(2)-Al(NO_(3))_(3)-NaOH、AlCl_(3)-KAc和三乙胺3种显色体系中6种对照品及供试品的吸收光谱曲线,对NaNO_(2)-Al(NO_(3))_(3)-NaOH体系显色剂加入量对总黄酮测量结果的影响进行了响应面-Box-Behnken设计优化,并对供试品溶液的制备,对照品溶液的制备,显色体系和标准曲线拟合进行了不确定度评估,计算合成不确定度并给出测量结果的扩展不确定度和置信水平。通过适应性分析,试验最终选择了NaNO_(2)-Al(NO_(3))_(3)-NaOH显色体系,最佳显色条件为50 g/L硝酸钠0.9 mL,100 g/L硝酸铝0.6 mL,1 moL/L氢氧化钠4.8 mL,显色温度42℃,以芦丁为标准品,在该条件下测得地参总黄酮含量为(91.052±2.75) mg。确定了地参总黄酮含量测定的最佳体系为NaNO_(2)-Al(NO_(3))_(3)-NaOH显色体系,及该体系下最佳测定条件,为地参总黄酮的测定提供了新的参考方法。

Box-Behnken设计—响应面法优化地参总三萜酸纯化工艺

【目的】建立响应面模型优化合适树脂下地参总三萜酸的纯化工艺,为研究地参总三萜酸活性提供技术参考。【方法】运用Box-Behnken设计方法,采用大孔树脂吸附纯化地参总三萜酸,以吸附率和解吸率为指标,测定5种大孔树脂(AB-8、D101、HPD600、DA201和S-8型)对地参总三萜酸的纯化效果。以上样浓度、上样流速、洗脱浓度和洗脱流速为自变量,回收率为因变量,运用响应面法优化地参总三萜酸纯化工艺参数。【结果】最佳显色条件:显色温度60℃,5%香草醛—冰乙酸0.2 mL,高氯酸0.4 mL,检测波长545 nm。AB-8型树脂对地参总三萜酸的吸附和解吸效果最佳,解吸率为88.61%,吸附率为70.54%。上样体积在40 mL,80%乙醇100 mL为最佳洗脱体积。建立的回归方程:Y=0.6887+0.0196A-0.0085B-0.0287C+0.0052D+0.0299AB-0.0107AC-0.0122AD+0.0128BC+0.0211BD+0.026A2-0.0765B2-0.0877C2-0.0932D2(A为上样浓度,B为上样流速,C为洗脱浓度,D为洗脱流速,Y为总三萜酸回收率)。由Box-Behnken方差分析结果可得,上样浓度和洗脱浓度2个因素,以及上样浓度与上样流速的交互作用、洗脱浓度与洗脱流速的交互作用对地参总三萜酸回收率影响极显著(P<0.01),上样流速与洗脱流速的交互作用对总三萜酸回收率影响显著(P<0.05),4个因素对地参总三萜酸回收率影响顺序为洗脱浓度>上样浓度>上样流速>洗脱流速。优化后的地参总三萜酸纯化工艺:上样浓度0.66 mg/mL、上样流速2 BV/h、洗脱浓度80%、洗脱流速2 BV/h,在此条件下,总三萜酸平均回收率为67.37%。【结论】建立的回归模型可用于地参总三萜酸纯化工艺的预测;AB-8型大孔树脂对地参总三萜酸的分离纯化效果较好,适用于总三萜酸物质的纯化。

地参结合酚提取物体外保肝作用

目的:通过体外CCl4损伤肝细胞模型,研究地参结合酚提取物的体外保肝作用。方法:采用MTT法测定细胞存活率,全自动生化分析仪测定ALT、AST和LDH的水平。采用试剂盒测定MDA、SOD、GSH、TNF-α、IL-6、IL-8的水平和Caspase-3活化程度,流式细胞仪检测细胞凋亡。同时,采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测线粒体膜电位的变化,并对各检测指标进行相关性分析。结果:地参结合酚在干预剂量(0.2~1.6 mg/mL)范围无细胞毒性,能抑制CCl4导致的细胞存活率、SOD和GSH的降低以及MDA、ALT、AST、LDH、TNF-α、IL-6、IL-8和Caspase-3活化程度的升高;同时,能显著抑制CCl4引起的细胞凋亡和线粒体膜电位的降低。相关性分析结果显示,ALT、Caspase-3、TNF-α、IL-6和IL-8之间具有显著的正相关,GSH和SOD与ALT、Caspase-3、TNF-α、IL-6、IL-8之间具有显著的负相关。结论:地参结合酚通过抗氧化、抑制炎症反应和细胞凋亡及保护线粒体,发挥对CCl4损伤肝细胞的保护作用。

乳酸菌发酵地参工艺研究

以地参为原料研究乳酸菌发酵制作泡菜工艺,以感官评分为评价指标,分析影响乳酸菌发酵地参的主要因素。通过试验得出乳酸菌发酵泡菜的最佳工艺条件:食盐添加量2%、乳酸菌添加量0.16%、白砂糖添加量2%、发酵温度30℃。

响应面法优化地参多糖大孔树酯脱色工艺及其抗氧化活性研究

目的:考察大孔树酯用量、脱色温度和脱色时间对地参多糖的脱色率和保留率的影响。方法:在单因素试验的基础上,以多糖脱色率和保留率2个指标的综合评分作为响应值,响应面法优化大孔树酯脱除地参多糖色素的工艺,并探究地参多糖的抗氧化活性。结果:地参多糖大孔树酯最佳脱色工艺为质量浓度6mg/mL的地参多糖溶液100mL,添加充分溶胀的大孔树酯3g,脱色温度45℃、脱色3h、脱色1次。在此条件下,多糖脱色率为82.64%,多糖保留率为72.06%,综合评分82.15,与理论综合评分(83.34)的相对误差为1.43%。当地参多糖质量浓度为0.5mg/mL时,对ABTS自由基的清除率达到44.28%。结论:响应面试验优化得到的地参多糖大孔树酯脱色工艺稳定可行,地参多糖具有较好的抗氧化活性,可作为天然抗氧化剂开发利用。

地参不同溶剂提取物的总多酚、总三萜含量及其与抗氧化活性的相关性

目的探讨地参不同溶剂提取物中总多酚、总三萜含量及其抗氧化活性差异。方法采用水、无水乙醇、甲醇、60%乙醇、60%甲醇、60%乙腈和60%异丙醇等7种溶剂对地参进行提取,测定提取物中总多酚和总三萜的含量,进一步测定提取物还原力、羟基自由基清除率、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl,DPPH)自由基清除率和2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS]阳离子自由基清除率,评价其抗氧化活性。结果60%乙醇提取物中总多酚含量最高,为22.26 mg/g,无水乙醇提取物中总三萜含量最高,为0.74 mg/g。抗氧化活性结果表明,除无水乙醇提取物抗氧化能力较弱外,其余溶剂提取物均有较强的抗氧化能力,其中60%乙醇提取物的还原力、羟基自由基清除能力和ABTS阳离子自由基清除能力最强,60%乙腈提取物清除DPPH自由基效果最好,且其抗氧化能力与总多酚含量之间存在较高的正相关,与总三萜含量有一定的负相关。结论60%乙醇提取物中总多酚含量最高,抗氧化活性最好,是良好的天然抗氧化剂来源。

野生地参多糖对四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖和血脂的影响

为了研究野生地参多糖对四氧嘧啶(ALX)致糖尿病小鼠血糖和血脂的影响,利用四氧嘧啶(ALX)建立糖尿病小鼠模型,分别灌胃低(100 mg/(kg.d))、中(200 mg/(kg.d))、高(400 mg/(kg.d))剂量地参多糖溶液及阳性对照药盐酸苯乙双胍,正常对照组及糖尿病模型对照组则给等体积生理盐水。结果表明:连续给药14 d后,地参多糖对正常小鼠血糖无明显影响,100、200和400 mg/(kg.d)地参多糖均能明显降低ALX所致糖尿病小鼠高血糖,与糖尿病模型对照组相比,P<0.01;同时,相同剂量的地参多糖还能极显著降低ALX致糖尿病小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)(P<0.01)。中、高剂量地参多糖使糖尿病小鼠血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著回升(P<0.05),但低剂量地参多糖对糖尿病小鼠血清HDL-C则无明显影响(P>0.05)。地参多糖能明显降低ALX致糖尿病小鼠高血糖及高血脂。

泽兰有效部分L.F04对红细胞流变学的影响

目的研究泽兰有效部分L .F0 4对红细胞流变学的影响 ,以探讨其活血化瘀作用机理。方法用高分子右旋糖酐静脉推注造成大鼠血瘀证动物模型 ,观察泽兰L .F0 4对红细胞变形性、聚集性和膜流动性的影响。结果高分子右旋糖酐造成了大鼠红细胞变形性降低 (P <0 .0 5 ) ,聚集性增高 (P <0 .0 1 ) ,膜流动性降低 (P <0 .0 5 )。与模型组相比 ,L .F0 4大 ( 0 .61 2 g/kg)、小 ( 0 .30 6g/kg)剂量明显改善了红细胞变形性(P <0 .0 5 ) ,抑制了红细胞聚集 (P <0 .0 5 ) ;对红细胞膜流动性有增加的趋势 ,但未呈现出量效关系。结论L .F0 4可显著改善血瘀动物异常的红细胞流变学指标。

泽兰化学成分的研究(II)

目的 对泽兰 (LycopuslucidusTurcz .)化学成分进行研究 ,分离并鉴定化合物。方法 采用现代层析分离技术进行化学成分的分离 ,根据理化性质和光谱方法确定所分离化合物的结构。结果 分离得到 6个化合物 ,分别为 2α -羟基熊果酸(VIII) ,胡萝卜苷 (IX) ,原儿茶醛 (X) ,原儿茶酸 (XI) ,咖啡酸 (XII) ,迷迭香酸 (XIII)。

泽兰有效部分对血小板聚集和血栓形成的影响

目的 研究泽兰有效部分 L .F0 4对血小板聚集和血栓形成的影响 ,探讨其活血化瘀作用机制。方法 用高分子右旋糖酐静脉推注造成大鼠血瘀证模型 ,观察泽兰 L.F0 4对二磷酸腺苷 ( ADP)诱导的大鼠体内血小板聚集以及体内动静脉旁路血栓、体外旋转环内血栓形成的影响。结果 L .F0 4 0 .4 0 8,0 .2 0 4 g/ kg对模型组大鼠 ADP诱导的体内血小板最大聚集率明显增加皆有显著的抑制 ,且呈剂量依赖关系 ;与对照组相比 ,血瘀模型大鼠体外血栓质量明显增加 ,长度仅有增加趋势 ,L.F0 4高、低剂量 ( 0 .4 0 8,0 .2 0 4 g/ kg)皆有抗血栓形成作用 ,L.F0 4高剂量对血栓干质量、湿质量的减轻尤为明显 ;L .F0 4高、低剂量对实验性动静脉旁路血栓形成均有明显的抑制作用 ,抑制率分别为 2 7.4 1% ,2 7.14 %。结论 泽兰 L.F0 4可显著抑制血小板聚集及体内。

响应面法优选泽兰多糖的大孔吸附树脂纯化工艺

目的:考察8种大孔吸附树脂D3520、H103、HPD-100、HPD-700、AB-8、HPD722、S-8、HPD-600对泽兰多糖的纯化效果,以Box-Behnken法优化最佳大孔吸附树脂的最优纯化工艺.方法:以多糖保留率、脱色率、脱蛋白率的加权综合评分为指标,考察大孔树脂、洗脱流速、上样浓度、洗脱剂用量对纯化结果的影响,通过Box-Behnken设计建立响应面模型来优选大孔树脂泽兰多糖的工艺参数.结果:优选的泽兰多糖的大孔树脂纯化工艺为:取HPD-100大孔吸附树脂,泽兰多糖的上样质量浓度为0.03 g/mL,洗脱流速为1.1 mL/min,洗脱体积为40 mL,以此优选工艺纯化后,多糖保留率69.21%,脱色率60.24%,蛋白脱除率75.67%.结论:泽兰多糖的纯化工艺稳定可靠,HPD-100大孔吸附树脂纯化工艺效果良好,适合工业化生产.

泽兰饮片及不同部位HPLC指纹图谱研究

目的:建立泽兰饮片的HPLC指纹图谱分析方法,并对泽兰茎、叶不同部位的指纹图谱进行比较。方法:采用Zorb-ax Esclipe XDB C18色谱柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸(梯度洗脱);检测波长为330 nm;柱温为40℃;流速为1.0 mL/min。结果:泽兰共标示出18个共有峰,12批泽兰的相似度在0.957～0.999之间。但茎、叶指纹特征峰相对含量有显著差异,叶所含特征峰组分含量基本高于茎。结论:方法准确可靠,重复性好,为双柏制剂及泽兰饮片质量控制提供了参考。

泽兰提取物对乙醇致小鼠胃溃疡保护作用

目的观察泽兰提取物对无水乙醇诱导小鼠胃溃疡的保护作用。方法60只雄性小鼠随机分为正常组,模型组,泽兰提取物高剂量组、中剂量组、低剂量组和阳性对照组。泽兰提取物高、中、低剂量组分别按1.0,0.5,0.2 g/kg灌胃泽兰提取物;阳性对照组按0.2 g/kg灌胃西咪替丁,共5 d。第5天,除正常组外,采用无水乙醇灌胃致小鼠胃黏膜损伤型急性胃溃疡,比较各组胃溃疡指数,计算溃疡抑制率;测定胃组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果高剂量组和中剂量组泽兰提取物能显著降低无水乙醇引起小鼠胃溃疡的溃疡指数(P<0.05),溃疡抑制率分别为72.0%和57.4%,并均能明显升高胃组织SOD的活性(P<0.05),降低MDA含量(P<0.05)。结论泽兰提取物通过抗氧化活性对无水乙醇致小鼠胃溃疡具有一定的保护作用。