基于标准汤剂的海金沙草配方颗粒质量标准研究

目的基于标准汤剂建立海金沙草配方颗粒的质量标准。方法采用HPLC法测定饮片、标准汤剂和配方颗粒中咖啡酸的质量分数,计算转移率。建立标准汤剂和配方颗粒HPLC特征图谱分析方法及TLC鉴别方法。结果通过对18批海金沙草质量分数进行测定,标准汤剂咖啡酸的质量分数为0.22~1.11 mg/g,转移率为48.7%~92.8%,3批配方颗粒咖啡酸的质量分数分别为0.65、0.64、0.61 mg/g,转移率分别为86.5%、85.1%、81.1%;18批标准汤剂HPLC特征图谱中有11个共有峰,指认了原儿茶酸、咖啡酸、4-香豆酸、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、蒙花苷6种成分,特征图谱相似度大于0.90,聚为3类,3种主成分统计的累积方差贡献率达93.86%,3批配方颗粒HPLC特征图谱中有11个共有峰,相似度分别为0.974、0.988、0.989;TLC信息丰富,斑点清晰,分离度良好。结论所建立的方法合理可靠,可全面评价海金沙草配方颗粒质量,为其质量控制提供参考。

金沙藤石油醚部位化学成分的气相色谱-质谱联用分析

目的对金沙藤石油醚部位的低极性成分进行分析。方法采用石油醚萃取金沙藤药材总提液中的低极性成分,气相色谱-质谱法分析,面积归一化法测定各组分的相对含量。结果在最佳的分析条件下,经毛细管色谱柱分离,共得到了36个成分,经谱库检索确认了其中的25种成分,占总组分的96.09%。金沙藤石油醚部位中的低极性成分主要为植物甾醇、长链脂肪酸及其酯类。结论本方法具有快速、准确的特点,可有效用于金沙藤药材成分的分析鉴定。

海金沙孢子壁结构和发育的研究

利用光镜、扫描电镜和透射电镜对海金沙科(Lygodiaceae)海金沙[Lygodium japonicum(Thunb.)Sw.]孢壁的形成和发育进行了研究。结果表明:海金沙孢子壁由内壁、外壁和周壁3部分构成。外壁由2层构成,即薄的内层和厚的外层,其中外层是在四分体分离前通过孢粉素的逐层沉积并浓缩凝聚而形成的均质层,其表面具不明显的疣状突起。周壁由绒毡层残余物在外壁表面逐层沉积形成,可分为周壁内层、周壁中层和周壁外层3部分;周壁中层具辐射状排列的长条形成分,周壁外层形成瘤状纹饰的轮廓。本研究为孢粉学和蕨类植物系统演化分析提供基础资料。

海金沙根的化学成分

目的研究海金沙[Lygodium japonicum(Thunb.)Sw.]根的化学成分。方法海金沙的干燥根及根茎用体积分数为70%的乙醇回流提取,经过萃取后正丁醇层采用各种色谱技术进行分离,并结合理化性质,波谱学分析及文献对照鉴定化合物结构。结果从正丁醇层分离并鉴定5个化合物,分别鉴定为:苯甲酸(benzoic acid,1)、芹菜素(apigenin,2)、3,4-dihydroxybenzoic acid4-O-(4′-O-methyl)-β-D-glucopyranoside(3)、罗汉松甾酮C(makisterone C,4)、邻苯二甲酸二异辛酯[di(2-ethylhexyl)phthalate,5]。结论化合物1、2、5均为首次从该科植物中分离得到。

海金沙胚胎发育的研究

利用石蜡切片法研究了海金沙胚胎发育过程。合子的第一次分裂面垂直于颈卵器的长轴,产生两个相等的子细胞,靠近颈卵器颈部的营养器官原始细胞和远离颈部的基足原始细胞。前者发育成子代孢子体的营养器官,后者发育成基足。胚胎在32细胞阶段后,第一叶顶端细胞与第一根顶端细胞几乎同时发生。第一叶突出帽状体之后,由第一叶基部保留下来的茎干顶端细胞产生第二叶。据营养器官的形态结构判断,在海金沙胚胎发育中最早出现的营养器官是叶和根。

海金沙根的化学成分研究

目的研究海金沙根的化学成分。方法采用多种柱色谱技术进行分离纯化,利用理化性质和波谱学分析鉴定化学结构。结果分离鉴定了6个化合物,分别是:木栓酮(friedelin,1)、22-羟基何柏烷(hydroxy-hopane,2)、2α-羟基乌苏酸(2α-hydroxyursolic acid,3)、胡萝卜苷(daucostero1,4)、丁二酸(succinic acid,5)、山奈酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(kaempferol-3-O-α-L-rhamnopyranose-7-O-α-L-rhamnopyra-noside,6)。结论化合物1、2、3、5、6均为首次从海金沙属中分得的已知化合物。

中药材海金沙的红外光谱鉴别

建立了一种新的中药材海金沙分析鉴定的方法。以甲醇、氯仿、石油醚为提取溶剂,提取中药材海金沙得到海金沙不同溶剂提取物,采用红外光谱(FT-IR)图谱鉴别法对提取物进行实验。分析、比较所得的图谱,获得了不同溶剂海金沙提取物的红外光谱相关峰,峰位独特而稳定,样品与标本的相似性好。结果表明,红外光谱法鉴别简单、准确,可用于中药材海金沙的分析鉴别。

海金沙配子体形态学特征的新观察

海金沙[Lygodium japonicum（Thunb）Sw.]是常见的药用蕨类之一。在人工培养条件下,利用光学显微镜详细观察其配子体发育的过程。在前人工作的基础上,补充了丝状体较短,2~3细胞长,片状体和幼原叶体发育多样,成熟原叶体心形,具单细胞或两细胞的毛状体,单细胞的假根,内含叶绿体或根尖膨大等,从海金沙配子体特征看说明其为系统进化的中间类群。孢子人工培养得到大量的海金沙幼孢子体,为保护性开发利用该资源奠定基础。

海金沙的化学成分和药理活性研究进展

海金沙是海金沙科海金沙属多年生蕨类植物,在我国广东、海南、江苏、浙江等地广泛分布。海金沙含有黄酮类化合物、酚酸及其糖苷类化合物及三萜类化合物等多种生物活性成分,具有利胆、防治结石、抗氧化、抗菌等多种药理活性。对海金沙的化学成分和药理活性做了综述,以便更好地对其进行开发利用。

海金沙内生真菌多样性的研究

试验从海金沙的根、茎、叶器官中分离获得了内生真菌17株,鉴定出16株,另外1株因不产孢子而未被鉴定出,分别属于3个纲4个目5个科8个属。在鉴定的8属内生真菌中,以青霉属为优势属,占总株数的23.5%,其次是顶枝孢属和链格孢属,各占总株数的17.6%。表明海金沙不同部位、不同季节内生真菌的数量、分布、种群及其组成存在差异,体现了内生真菌生态分布的多样性。

火焰原子吸收法测定中草药海金沙茎中五种金属元素的含量

目的运用火焰原子吸收光谱法测定中草药海金沙茎中的Fe、zn、Mg、Ca、Cu5种微量元素的含量。方法用浓HNO3-HCIO4消解样品，采用标准曲线法测定其5种金属元素含量。结果所测的样品中含有丰富的人体必需微量元素。方法回收率在98.68％～104.4％之间，样品相对偏差小于5％。结论该法快速简便、重复性好、准确度好，适用于同类生物样品中微量元素的测定，结果令人满意。

超声波提取-分光光度法测定海金沙草药中的总黄酮

[目的]优选海金沙草药中总黄酮的最佳提取工艺,并测定海金沙中总黄酮的含量。[方法]采用超声波提取海金沙中的总黄酮,以无水乙醇为提取剂,通过正交试验探讨溶剂浓度(乙醇浓度)、超声提取时间、温度和提取次数等条件对提取结果的影响,并采用分光光度法测定其含量。[结果]最佳提取条件为:乙醇浓度60%,温度25℃,超声时间10 min,提取次数为3次。将所得的结果与常规的水提取法和索氏提取法进行比较,其总黄酮的提取含量达到了4.12%。[结论]该方法与其他常规方法相比,具有简洁、方便、提取速度快和节能的优点,并提高了提取效率。

反相高效液相色谱法测定金沙藤中异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素和山奈素的含量

目的:建立金沙藤中异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素、山奈素的定量分析方法。方法:选择反相高效液相色谱(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)法,色谱柱为Agilent C_(18)柱,规格为150 mm×4.6 mm,5μm;甲醇(B)-0.3%甲酸(A)为流动相进行梯度洗脱;所用流速是1.0 mL·min^(-1),柱温30℃,检测波长是360 nm,进样量是10μL。结果:25 min内异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素、山奈素分离度好,线性关系良好,异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素、山奈素的线性范围分别是0~0.5290μg(n=6)、0~1.1728μg(n=6)、0~0.0810μg(n=6)、0~0.2568μg(n=6),异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素、山奈素的平均加样回收率分别为98.7%(RSD=0.80%)、97.7%(RSD=0.40%)、94.9%(RSD=2.14%)、98.1%(RSD=2.38%)。结论:本实验选用RP-HPLC法定量分析金沙藤中异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素、山奈素的含量,重复性好,比较稳定,操作方便,此法适用于测定金沙藤中异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素、山奈素的含量。

一测多评法测定金沙藤中异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素、山奈素的含量

目的:建立用一测多评法同步测定金沙藤中异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素和山奈素的含量。方法:采用一测多评法利用金沙藤中四种有效成分间存在的内在比例关系,计算金沙藤中代表性成分(异槲皮苷)和其它待测成分(紫云英苷、槲皮素和山奈素)的相对校正因子,根据相对校正因子,计算出待测成分的含量。最后用外标法对四种成分的含量进行检验对比。结果:一测多评法的计算结果与外标法的测定结果无显著差异。赣州、宜宾、长沙三个产地的金沙藤药材中四种成分含量各不相同,长沙产金沙藤药材中异槲皮苷和紫云英苷含量明显高于其它产地。金沙藤的四种成分中异槲皮苷平均含量为0.068%,紫云英苷平均含量为0.053%,槲皮素平均含量为0.002 5%,山奈素平均含量为0.001 7%。结论:本实验采用一测多评法测定了金沙藤中异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素和山奈素的含量,该方法效率高,成本低,易于操作,适用于金沙藤中四种成分含量的测定。

三金片中五种中草药活性成分及其药理研究进展

三金片是一种针对泌尿系统感染有独特疗效的纯中药制剂，临床应用对泌尿系统感染所致的肾盂肾炎、尿道炎、前列腺炎、膀胱炎等具有良好的疗效。三金片中主要含积雪草、金刚藤、海金沙、金樱根、羊开口等5种中草药；在工艺上通过采用大孔树脂、超临界萃取、膜分离、真空多效浓缩等先进技术对其有效成分分离、富集而成。本文综述了三金片中五种主要中药的活性成分及其药理研究进展。

海金沙总黄酮对鸡胚血管生成的影响的研究

目的研究海金沙总黄酮(Flavones from Lygodium japonicum,FLJ)对血管新生的影响。方法应用鸡胚绒毛尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)模型,于鸡胚孵育的第8天,使用微量移液器对CAM加以FLJ及空白对照溶液处理,继续孵育48 h,收集数据进行评估;鸡胚卵黄囊膜(yolk sac membrane,YSM)血管生成模型,于鸡胚孵育2 d后,将药物加于鸡胚卵黄囊膜上,分别于加药0,12 h在体视显微镜下拍照,收集数据进行评估。结果与空白对照组相比,CAM模型高、中剂量药物组加药口处血管生成明显减少,YSM模型高、中剂量药物组新生血管密度增长率及数目均明显减少。结论海金沙总黄酮对血管生成有一定抑制作用,并呈现剂量依赖性。

海金沙卵发生的组织化学研究

采用组织化学方法对海金沙(Lygodium japonicum(Thunb.)Sw.)卵发生进行了研究。高碘酸-锡夫反应(PAS反应)结果显示:颈沟和腹沟细胞外产生的黏性物质为多糖类物质;在卵细胞发生早期颈卵器细胞内均含有质体,且淀粉粒含量丰富,随着颈卵器的发育,卵细胞以及颈沟和腹沟细胞内淀粉粒数量和体积均逐渐减少,最后退化消失。苏丹黑B反应结果显示:海金沙颈沟和腹沟细胞外产生的黏性物质也含有脂类物质,而卵细胞内并未有明显脂类物质产生;卵细胞质膜处也并没有糖类或脂类物质的积累。本研究从组织化学角度佐证了海金沙的特殊性,即既有原始蕨类的特征,又有进化蕨类的特征。

基于微性状法的海金沙掺假研究

目的:对市场上海金沙的真伪优劣进行研究。方法:采用中药微性状鉴定法和电脑识别技术对市场收集的18批次海金沙进行快速鉴别。结果:7个批次样品为正品,其余均为不合格品,不合格率占61%。结论:海金沙市场掺假严重,微性状法可以鉴别正品海金沙与掺假海金沙。

响应面法优化海金沙多糖提取工艺及其抗氧化活性

为了能更好地利用畲药海金沙多糖,文章在单因素的基础上,利用响应面法优化微波传统和微波辐射预处理两种提取工艺,结合邻苯三酚自氧化法对提取物进行抗氧化研究。结果显示:微波传统提取的最佳工艺条件为微波功率280 W、微波时间57 s、液料比24(m L/g),在此条件下海金沙多糖提取率为7.756%,其提取物对O清除率为61.017%;微波辐射预处理提取的最佳工艺为微波功率350 W、微波时间71 s、液料比28(m L/g)、汽化剂用量5 m L,在此条件下海金沙多糖提取率为13.509%,其提取物对O清除率为63.089%。实验表明:微波辐射预处理可以有效地提高海金沙多糖的提取率,同时,海金沙多糖抗氧化活性有必要深入挖掘。

海金沙地上部分的化学成分及对银屑病角质形成细胞的影响

目的:研究海金沙地上部分的化学成分及对银屑病角质形成细胞的影响。方法:海金沙地上部分90%乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构。采用MTT法测试化合物对银屑病角质形成细胞的影响。结果:从海金沙地上部分中分离得到13个化合物,分别鉴定为:japonica acid(1)、5,3′,4′-三羟基-7-甲氧基二氢黄酮(2)、burselignan(3)、acetylwikstresinol(4)、5,6,7-三甲氧基香豆素(5)、dihydrodehydrodiconiferyl alcohol(6)、甘草黄烷酮(7)、prismaconnatoside(8)、northalifoline(9)、2,3-二羟基-1-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-1-丙酮(10)、2,4,6-trichlorol-3-methyl-5-methoxy-phenol-1-O-β-D-glucopy-ranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside(11)、licorice-saponin G2(12)、对羟基苯乙酮(13)。化合物1、7、9、11、12对银屑病角质形成细胞增殖具有不同程度的抑制作用。结论:所有化合物均为首次从海金沙中分离得到,具有一定的抗银屑病角质形成细胞增殖的作用。