枸杞糖缀合物和糖链对小鼠巨噬细胞功能的影响

目的确定巨噬细胞是枸杞糖缀合物和糖链免疫作用的靶细胞之一.方法应用中性红吞噬实验和鸡红细胞吞噬实验测定了枸杞糖缀合物LbGp4和糖链LbGp4-OL对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;用硝酸根还原法、酶联免疫吸附实验（ELISA）和生物活性测定法测定了巨噬细胞产生一氧化氮（NO）、IL-1β和TNF-α含量和生物活性的变化.结果 LbGp4和LbGp4-OL在（10～100）mg·L^-1剂量范围内均可剂量依赖性地促进静息巨噬细胞吞噬中性红的能力,增加活化的巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数;增加巨噬细胞培养上清NO、IL-1β和TNF-α的浓度,并增强对L929细胞的杀伤活性,促进胸腺细胞的增殖反应.结论 LbGp4和LbGp4-OL对静息和活化的腹腔巨噬细胞的吞噬功能具有明显的促进作用,对巨噬细胞产生NO、分泌IL-1β和TNF-α的含量和生物活性亦具有明显的促进作用,表明巨噬细胞是LbGp4和LbGp4-OL免疫作用的靶细胞之一.

枸杞多糖提取工艺的研究

以枸杞为原料,对其多糖成分提取工艺进行研究。采用单因素试验法对影响枸杞多糖提取率的主要因素进行分析研究,然后利用正交试验法优化提取枸杞多糖的最佳工艺条件。枸杞多糖提取的最佳条件为提取温度90℃,料水比1∶30(W∶V),提取时间2h。在最佳提取工艺条件下,枸杞多糖的一次提取率为10.76%。

枸杞多糖对衰老大鼠蛋白质氧化损伤影响的实验研究

目的探讨枸杞多糖(LBP)对衰老大鼠蛋白质氧化损伤的影响。方法Wistar大鼠40只,随机分为衰老模型组、枸杞多糖大剂量组(100 mg/kg)、中剂量组(50 mg/kg)、小剂量组(10 mg/kg),每组10只。测定各组大鼠肝组织谷胱甘肽(GSH)、羰基蛋白的含量和谷胱甘肽转移酶(GST)活性。结果LBP可明显降低羰基蛋白含量(P<0.01,P<0.05),增加GSH含量和增强GST活性(P<0.01)。结论LBP通过降低蛋白质氧化损伤而发挥抗衰老的作用。

多基因表达载体KCTB转化宁夏枸杞的研究

为研究多基因表达载体KCTB转化宁夏枸杞,获得转多基因枸杞植株,研究各基因的表达。利用农杆菌介导技术,利用叶盘转化法,将构建有4个功能基因GUS、BAR、KC1、CAF1的表达载体KCTB转化宁夏枸杞,并获得了23株抗性植株;GUS组织化学染色显示,在转基因植株的根、茎、叶中都有表达,PCR结果显示,分别检测到了BAR、KC1、CAF1基因,说明多基因表达载体KCTB已经完全整合到了宁夏枸杞的基因组中。

枸杞多糖对高脂饮食诱导的脂肪肝大鼠模型的影响

目的观察枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对高脂饮食大鼠非酒精性脂肪肝的影响及可能的机制。方法32只雄性Wistar大鼠随机分成4组:正常对照组、模型组和LBP高、低剂量组。采用喂高脂饲料复制大鼠非酒精性脂肪肝模型。观察不同处理组大鼠血清ALT、AST、血脂、肝脂质、肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量以及肝脏病理形态学的变化。结果与非酒精脂肪肝模型组相比,LBP干预组血清ALT下降,以高剂量组明显(P<0.05),血清总胆固醇(TCh)和LDL-Ch明显下降(P<0.05),血清HDL-ch呈升高趋势,但无显著性差异(P>0.05),肝内甘油三酯和TCh含量下降(P<0.05),肝内脂肪变性和炎症程度均明显减轻(P<0.05),肝内MDA含量均显著降低(P<0.05),肝内SOD活性和GSH含量升高,高剂量组明显(P<0.05)。结论LBP可明显减轻高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪肝,其机制可能与其抗氧化作用有关。

枸杞多糖酶法脱蛋白工艺研究

以pH值、温度、酶解时间、酶用量为影响因素,以脱蛋白率为考察指标,优选枸杞多糖酶法脱蛋白工艺。结果表明,枸杞多糖酶法脱蛋白的最佳工艺条件为:pH 6,温度45℃,酶解时间0.5 h,酶用量3.5%。该法与Sevag法比较,多糖损失率最低,为10.53%,脱蛋白率为78.56%,优于Sevag法。

枸杞多糖抗过氧化作用的实验研究

通过对爪蟾卵母细胞电学功能的测试,观察到自由基可使膜电学参数受损害,枸杞多糖能有效地对抗自由基过氧化,使受损膜电学功能发生逆转。

超高压处理对枸杞鲜果中微生物致死效应的研究

研究了鲜枸杞经超高压处理前后微生物的变化。观察了菌落总数、霉菌、酵母菌数和大肠菌群数的变化。试验结果表明:室温下,鲜枸杞中的大肠菌群对压力比较敏感,压力为300MPa,保压15min即可全部杀灭;霉菌和酵母菌较大肠菌耐压,压力为450MPa,保压10min可全部杀灭;当压力达到450Mpa、保压时间在5min、10min和15min处理时,菌落总数分别在72 cfu/ml、45 cfu/m l、23 cfu/ml,都可达到国家食品卫生标准要求。

枸杞多糖与丹参酮延缓小鼠皮肤衰老的实验研究

目的比较枸杞多糖与丹参酮对衰老小鼠皮肤的抗衰老作用。方法60只雌性昆明种小鼠,随机分为4组(n=15):正常对照组皮下注射生理盐水;其余3组每日颈背部皮下注射D-半乳糖[1000mg/(kg·d)]造成小鼠衰老模型,同时各组分别灌胃生理盐水(衰老模型组)、枸杞多糖[200mg/(kg·d)]、丹参酮[1500mg/(kg·d)]。42d后,测定小鼠背部皮肤组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活力、过氧化脂质代谢产物丙二醛(MDA)含量和皮肤羟脯氨酸(Hyp)含量。结果枸杞多糖可使衰老模型小鼠皮肤中MDA含量显著降低,较丹参酮组明显;但SOD活力显著升高,不及丹参酮组改变显著;枸杞多糖和丹参酮均可使羟脯氨酸含量升高,且效果相当。结论枸杞多糖与丹参酮都有显著的抗小鼠皮肤衰老作用,枸杞多糖清除皮肤中脂质过氧化代谢产物方面较丹参酮明显,而提高皮肤抗氧化酶活力则不及丹参酮显著,在增强成纤维细胞活性方面两者效果相当。

富硒枸杞对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用

目的探讨富硒枸杞对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用。方法采用琼脂平板扩散法测定富硒枸杞的抗菌活性,以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为实验菌种,设置1 g.mL-1、0.75 g.mL-1、0.5 g.mL-1、0.25 g.mL-1和空白组(0 g.mL-1)共5个浓度处理组。固体培养基采用肉汤培养基,每个直径7.5 cm培养皿加入12 mL培养基,制成平板备用。取培养至对数期细菌配成6×108个.mL-1菌液,涂于平板上,加不同浓度的样品溶液7μL于直径6 mm的灭菌滤纸圆片上,将已点样的滤纸圆片贴于已涂供试菌悬液的琼脂培养基上,放置20 min,再放入培养箱中37℃无光照培养24 h后测量记录抑菌环直径。结果0 g.mL-1、0.25 g.mL-1、0.5 g.mL-1、0.75 g.mL-1及1 g.mL-1富硒枸杞水煎液对金黄色葡萄球菌的抑菌环直径分别为0 mm、(21.5±0.3)mm、(22.6±0.3)mm、(24.3±0.4)mm及(27.5±0.4)mm,对大肠杆菌的抑菌环直径分别是0 mm、(20.3±0.2)mm、(22.4±0.4)mm及(26.5±0.4)mm、(31.4±0.4)mm。0.5 g.mL-1水煎液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌环直径均较0.25 g.mL-1水煎液增大,但仅对大肠杆菌的抑菌环直径有统计学意义(P<0.05);0.75 g.mL-1水煎液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌环直径均较0.25 g.mL-1和0.5 g.mL-1水煎液明显增大(P<0.05);1 g.mL-1水煎液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌环直径均较0.25 g.mL-1、0.5 g.mL-1、0.75 g.mL-1水煎液明显增大(P<0.05)。结论富硒枸杞能明显抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌活性,而且随着浓度的增加,抑菌效果逐渐增强。

枸杞多糖对大鼠腰椎间盘退变影响的形态学观察

目的探讨枸杞多糖(LBP)对大鼠退变腰椎间盘的形态学的影响。方法将健康雄性SD大鼠42只,随机分为假手术组、椎间盘退变组、LBP干预组,每组14只。采用手术方法制作大鼠腰椎间盘退变模型,LBP干预组在造模后4周,每天上午8:00灌胃给药,80mg.mL-1,容量为1mL.kg-1,连续4周。假手术组及椎间盘退变组分别给予等容量生理盐水灌胃,连续4周。在造模后8周三组所有大鼠再次麻醉,取出椎间盘组织,分别在光镜及电镜下观察椎间盘形态学的变化。结果 HE染色光镜观察假手术组髓核细胞丰富,形态不规则,集中成簇;椎间盘退变组髓核细胞稀少,细胞基质见大量的空泡;LBP干预组髓核细胞有变性、坏死,但较椎间盘退变组退变程度减轻。电镜下假手术组的髓核细胞多见,核膜完整,细胞器丰富;椎间盘退变组髓核细胞减少,细胞器缺失,见大量的空泡;LBP干预组髓核细胞减少,有变性、坏死,退变较椎间盘退变组减轻。结论 LBP可能对大鼠腰椎间盘髓核组织退变有延缓作用。

分子修饰后枸杞多糖对睾丸生精功能保护作用

目的观察硒化枸杞多糖对邻苯二甲酸二丁酯(DBP)所致的雄性大鼠睾丸组织氧化损伤的保护作用,并确定枸杞硒多糖的最佳反应条件.方法在醋酸催化作用下,利用亚硒酸钠对枸杞多糖进行分子修饰.将48只健康雄性SD大鼠随机分成对照组、DBP+硒化枸杞多糖组、DBP+硒组、DBP+枸杞多糖组、DBP染毒组,连续灌胃30 d,检测睾丸组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)的含量.结果硒化枸杞多糖的最佳条件是室温(20℃),亚硒酸钠与枸杞多糖用量为1 1,反应时间为48 h.硒化枸杞多糖组与除对照组的其他组比较脂质过氧化指标均有统计学意义(P<0.05);同时硒化枸杞多糖可显著提高体内SOD,T-AOC以及GSH-Px含量,降低MDA水平.结论硒化修饰枸杞多糖后的抗氧化作用要强于普通枸杞多糖和无机硒.

枸杞对运动大鼠肾脏Bcl-2、Bax表达和运动性蛋白尿的影响

目的探讨枸杞与细胞凋亡以及枸杞、自由基和细胞凋亡以及运动能力和运动性蛋白尿之间的关系,旨在为运动训练提供一个有效的辅助手段,为中药在运动训练和健身中的广泛而深入的应用提供依据。方法选用50只Wistar大鼠随机等分为对照组(安静,安静力竭,训练,训练力竭)和药物组(安静,安静力竭),采用递增负荷游泳运动。测凋亡蛋白用免疫组织化学方法,显示肾脏组织中凋亡蛋白Bcl-2和Bax的分布和表达特点,用计算机图像采集与分析技术,显示各组大鼠肾脏Bcl-2和Bax表达的变化,检测β2-微球蛋白和尿白蛋白浓度。结果(1)力竭时间:实验前后训练组和药物组的力竭时间均延长,且训练组和对照组比有显著性差异(P<0.05)。(2)计算机图像观察:M1组Bcl-2免疫阳性反应明显增强,棕黄色颗粒染色密度增加,C2组Bcl-2免疫阳性反应最弱,棕黄色颗粒几乎没有;C2组Bax免疫阳性反应明显增强,棕黄色颗粒染色密度增加,M1组Bax免疫阳性反应最弱,棕黄色颗粒减少。(3)免疫组化结果:Bcl-2:与C1比较,C2、T1组Bcl-2明显降低,P<0.05,M1略有上升,但P>0.05;与C2比较,T2明显上升,P<0.05。M2稍有上升,但P>0.05;与T1比较,T2下降明显,P<0.05;与M1比较,M2下降,P<0.05。Bax:与C1比较,C2组Bax明显升高,P<0.01;与T1比较,T2升高特别显著,P<0.01;与M1比较,M2上升幅度很大,P<0.01;与C2比较,T2稍有降低,P<0.05;M2降低但不明显,P>0.05,与C1比较,T1、M1组都降低,P<0.05。(4)Alb:与C1比,T1、M1组大鼠尿液Alb含量差异不显著。与C2组比,T2组降低,且P<0.01;M2组降低,且P<0.05。(5)β2-MG:与C1比,T1、M1组大鼠尿液β2-MG含量差异不显著,无统计学意义。与C2组比,T2组大鼠尿液β2-MG浓度低,且P<0.01,M2组大鼠尿液β2-MG浓度降低,且P<0.05。结论枸杞、运动使肾脏的抗氧化、抗自由基能力明显增强,枸杞主要通过降低Bax蛋白表达的机制来解除其对抗Bcl-2蛋白抑制凋亡的作用,运动训练和枸杞可以通过调节Bcl-2/Bax比值来抑制细胞凋亡,均能降低大鼠力竭即刻状态下尿液Alb及β2-MG浓度,提高运动能力。

枸杞多糖抗大鼠口腔溃疡活性部位的筛选研究

目的筛选枸杞多糖抗口腔溃疡的活性部位。方法采用DEAE-纤维素柱层析法将枸杞多糖分为4个组分,即LBP1,LBP2,LBP3,LBP4,并采用50%冰醋酸诱导大鼠口腔溃疡模型对枸杞多糖抗口腔溃疡有效部位进行筛选。结果与结论 LBP1为枸杞多糖抗溃疡的活性部位,能显著抑制冰醋酸造成的大鼠口腔溃疡。

HPLC法测定枸杞中的东莨菪内酯含量

目的:建立测定枸杞中东莨菪内酯的HPLC方法,并进行方法学考察。利用所建立的方法对多个产地的枸杞东莨菪内酯进行含量测定。方法:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇为流动相A,以0.5%冰醋酸为流动相B,流速为0.8mL/min,以26%的流动相A和74%的流动相B进行等度洗脱,柱温30℃,检测波长为345nm,理论板数按东莨菪内酯峰计算,不低于5000。结果:东莨菪内酯的线性范围分别为0.486～11.664μg/mL,方法的稳定性、重现性以及加样回收率均符合要求。结论:HPLC方法准确可靠,具备相关系统适用性,可用于测定枸杞药材中东莨菪内酯的含量。

枸杞和骨碎补对人牙龈成纤维细胞体外寿命的影响

以人二倍体牙龈成纤维细胞为体外寿命实验模型,观察枸杞和骨碎补的抗衰老作用。实验发现,1.25mg/m1的枸杞和骨碎补溶液,能使细胞附着率增加,铺展过程加快,群体倍增时间缩短,生长饱和密度增大,分裂代数增加18.8％和20.0％;寿命延长41.2％和38.1％。表明枸杞和骨碎补对体外培养的牙龈成纤维细胞有较明显的延寿作用。

枸杞多糖对氯化甲基汞诱导海马神经干细胞损伤的保护作用

目的观察分析枸杞多糖对氯化甲基汞所诱导神经干细胞(NSCs)损伤的影响。方法取孕16 dSD大鼠胚胎的海马组织,分离纯化得到海马NSCs。将纯化后的海马NSCs增殖、生长10 d后,按随机分组方法将其分为空白对照组(DMEM/F12培养基);枸杞多糖组(DMEM/F12培养基+枸杞多糖);氯化甲基汞组(DMEM/F12培养基+氯化甲基汞);氯化甲基汞+枸杞多糖组(DMEM/F12培养基+氯化甲基汞+枸杞多糖)。分别测定各组生长环境中的海马NSCs分化、生长的情况,观察分析氯化甲基汞对海马NSCs的损伤作用,以及枸杞多糖干预后对海马NSCs的影响。结果氯化甲基汞组和空白对照组比较,加入氯化甲基汞后的海马NSCs分化后的神经元比例(3.63%±0.62%)和神经元的周长(63.36μm±5.57μm)都较空白对照低;枸杞多糖组和其他各组比较,海马NSCs分化后的神经元比例(7.75%±0.59%)和神经元的周长(253.3μm±11.21μm)都较其他各组高;氯化甲基汞+枸杞多糖组和氯化甲基汞组比较,前者生长环境下的海马NSCs分化后的神经元比例(5.92%±0.98%)和神经元的周长(111.9μm±6.07μm)较氯化甲基汞组高。结论氯化甲基汞对海马NSCs的分化、生长具有损伤作用;枸杞多糖可以减轻氯化甲基汞对海马NSCs的损伤作用,并能促进海马NSCs向神经元的分化及神经元的生长。

枸杞多糖对雏鸡肿瘤坏死因子α和γ干扰素水平的影响

考察枸杞多糖对雏鸡肿瘤坏死因子α和γ干扰素水平的影响。先给1日龄雏鸡腹腔注射马立克强毒株(0.2 m L/只),后注射不同浓度枸杞多糖悬液,最后一次给药后48 h,采集雏鸡脾组织,分离淋巴细胞,分别以生物法和ELISA方法测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)与γ干扰素(IFN-γ)水平。结果表明,一定浓度的枸杞多糖能提高雏鸡脾淋巴细胞中TNF-α和IFN-γ含量,且在一定范围内呈剂量依赖关系。

基于抗疲劳及耐缺氧活性的人参枸杞提取物补肾壮阳作用研究

目的:基于抗疲劳及耐缺氧的活性研究和生化指标测定,探讨人参枸杞提取物的补肾壮阳作用。方法:将100只ICR雄性小鼠随机分为人参枸杞提取物高、中、低剂量组、阳性对照组以及空白对照组,ig给药30天后,分别进行负重游泳和耐缺氧实验,并测定生化指标睾酮(T)和NO含量。结果:与空白对照组比较,人参枸杞提取物各剂量组小鼠负重游泳和常压耐缺氧时间延长,体内睾酮含量增加,差异具有统计学意义(P<0.05);高、中剂量人参枸杞提取物可显著降低小鼠体内NO含量。与阳性对照组(肉苁蓉提取物)比较,中剂量组小鼠各项数据与阳性对照组相近,指标可达阳性对照组水平。中、高剂量人参枸杞提取物均可延长小鼠常压耐缺氧时间和负重游泳时间,增加体内睾酮含量。结论:人参枸杞提取物可延缓疲劳和提高耐缺氧能力,具有一定的补肾壮阳作用。

枸杞多糖的免疫增强作用与单胺递质及肾上腺皮质激素的相互关系

本文以神经内分泌免疫调节网络学说及祖国医学的整体理论为指导思想,观察了补益药枸把子的活性成分枸杞多糖对正常大鼠下丘脑、脾脏单胺递质及血浆皮质酮的影响。结果表明:枸杞多糖在增强大鼠脾细胞增殖反应的同时,使脾脏去甲肾上腺素的含量明显下降;下丘脑去甲肾上腺素、多巴胺及5-羟色胺的含量下降,5-羟吲哚乙酸升高;此外,血浆皮质酮水平降低。提示枸杞多糖增强免疫功能的机理可能部分是通过调节中枢下丘脑与外周免疫器官脾脏交感神经释放去甲肾上腺素等单胺递质,以及肾上腺皮质释放皮质激素等环节相互协调而实现的。