microRNA-185下调AKT1信号通路对淋巴母细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响及相关的分子机制的研究

目的探讨miR-185对淋巴母细胞淋巴瘤(T-LBL)细胞增殖和致肿瘤性的影响及相关的分子机制。方法 q PCR检测人T-LBL组织和正常的胸腺组织中miR-185表达水平。miR-185模拟物及NC-miRNA转染Jurkat细胞,MTT法测定细胞增殖情况,q PCR和MTT法分别检测miR-185表达水平和细胞增殖情况,细胞流失术检测细胞凋亡。生物信息学软件Target Scan预测miR-185的靶作用位点,并通过q PCR、Western blot和荧光素酶活性实验证实miR-185的靶作用位点。慢病毒介导的miR-185过表达Jurkat细胞分别通过皮下注射的方式注射入裸鼠左右侧,皮下注射后4 d、8 d、12 d、16 d、20 d、24 d、28 d、32 d分别测量肿瘤体积,以探讨miR-185对体内肿瘤生长的影响。结果与人正常胸腺组织相比,T-LBL组织中miR-185表达显著下调(P<0.05);MTT检测细胞增殖结果表明,与NCmiRNA转染组相比,miR-185转染组Jurkat细胞增殖速率显著下降(P<0.05),且转染miR-185后,Jurkat细胞凋亡比例显著升高(P<0.05);Target Scan生物学软件预测表明AKT1为miR-185潜在的靶基因,实验结果进一步证实AKT1的3'非翻译序列(3'UTR)是miR-185的直接靶点;裸鼠移植瘤试验结果表明,miR-185能抑制体内肿瘤生长。结论miR-185通过靶向作用于AKT1基因抑制Jurkat细胞增殖,其可能为T-LBL的临床治疗提供新的靶标。