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题名聚乙二醇化重组人促红素不同位点修饰率的测定
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作者
陶磊
史新昌
李响
韩春梅
周勇
饶春明
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机构
中国食品药品检定研究院
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出处
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第9期1697-1701,共5页
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基金
国家药典委员会药品标准制修订研究课题(2019S04)。
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文摘
目的:测定聚乙二醇化重组人促红素(PEG-EPO)中不同修饰位点的修饰率。方法:将重组促红素(EPO)及PEG-EPO样品分别用Lys-C蛋白酶进行酶切,在含0.1%三氟乙酸的流动相体系下液质联用测定液质肽图;通过质谱鉴定各肽段,在215 nm波长采集的肽图中积分计算各肽段的峰面积百分比;根据EPO及PEG-EPO肽图中对应肽段峰面积百分比的变化,利用软件计算各位点的修饰率。结果:所建立的方法成功计算出PEG-EPO中9个位点的修饰率。该方法还用于3家企业的产品比较,结果显示:3家企业的产品在PEG修饰方面的总体趋势一致,但在个别位点存在修饰率的差异,比如N-末端和Lys45。结论:该方法可用于PEG-EPO制品的常规质量控制,以及不同企业产品的比对研究。
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关键词
聚乙二醇
重组人促红素
修饰率
液质肽图
lys-c蛋白酶
质量控制
液质联用
比对研究
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Keywords
polyethylene glycol
recombinant human erythropoietin
modification rate
peptide mass mapping
lys-c
quality control
UPLC-MS
comparative analysis
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分类号
R917
[医药卫生—药物分析学]
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题名赖氨酰内肽酶特性及其表达、应用的研究进展
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作者
曾杰
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机构
江苏恒瑞医药股份有限公司国家靶向药物工程技术研究中心
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出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第3期89-96,共8页
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文摘
赖氨酰内肽酶是一种重要的工具酶,广泛应用于科学研究及工业化生产。目前市场上的赖氨酰内肽酶大多是从天然微生物中提取获得,其高昂的价格限制了其广泛运用,重组表达能够解决产量的难题。首次对赖氨酰内肽酶进行了综述,包括赖氨酰内肽酶的来源、结构、功能性质及其主要应用,并重点总结了近年来的重组表达进展,同时对今后的研究方向进行了展望。
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关键词
赖氨酰内肽酶
lys-c
无色杆菌蛋白酶Ⅰ
铜绿假单胞菌蛋白酶Ⅳ
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Keywords
Lysyl endopeptidase lys-c Achrornobacter protease I Pseudomonas aeruginosa Protease IV
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分类号
Q814
[生物学—生物工程]
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